Способ коррекции иммунного статуса поросят-гипотрофиков при иммунодефиците в ранний постнатальный период Российский патент 2024 года по МПК A61K38/19 A61K31/00 A61K33/00 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к ветеринарной фармакологии, и может использоваться для повышения иммунного статуса у поросят-сосунов с синдромом гипотрофии.

Опираясь на современные статистические данные по рентабельности хозяйств, свиноводство можно причислить к наиболее перспективным отраслям сельскохозяйственного кластера экономики. Определяющим фактором в постоянном поддержании высоких темпов производства является получение здорового жизнеспособного потомства, обеспечивающего ремонт репродуктивного поголовья, сохранение и преумножение генетически заложенного продуктивного потенциала свиноматок [Шестакова, М.И. Применение добавки «Сангровит» при постнатальной гипотрофии поросят / М.И. Шестакова, А.О. Сидоренко // Ученые записки учреждения образования Витебская государственная академия ветеринарной медицины. - 2011. - Т. 47, Вып. 1.-C. 316-319].

Однако при интенсивном типе разведения свиней, а также при воздействии различных стресс-факторов (технологического, кормового, транспортного и т.д.) наблюдается не только снижение репродуктивной функции свиноматок, но и рождение слабых, нежизнеспособных поросят - гипотрофиков, погибающих на ранних сроках молозивного периода. У таких поросят наблюдается замедление метаболизма, подавление роста и развития всех внутренних органов и систем, недостаток мышечной массы, депрессия иммунокомпетентных тканей, снижение реактивности иммунной системы, нарушение гомеостаза. Понижение общей резистентности организма у поросят приводит к острому течению всех воспалительных процессов в респираторной системе и желудочно-кишечном тракте, вследствие чего наблюдается падеж в течение первого месяца жизни, а в первые трое суток гибель составляет около 60% [Михайлов, Е.В. Архитектоника селезенки новорожденных поросят-гипотрофиков / Е.В. Михайлов, И.С. Толкачев, Б.В. Шабунин и др. //Ученые записки учреждения образования Витебская государственная академия ветеринарной медицины. - 2020. - Т. 56, Вып. 4. -С. 45-49; Жаров, А.В. Функциональная морфология органов иммунной и эндокринной систем поросят при гипотрофии / А.В. Жаров // Ветеринарная патология. - 2003. - № 2. - С. 58-59].

В связи с этим, разработка и внедрение в производство иммуннокоррегирующих препаратов для восстановления органов и систем поросят-гипотрофиков остается актуальной задачей, над которой работают специалисты во всем мире.

Известен способ профилактики акушерско-гинекологических заболеваний у свиноматок и повышения жизнеспособности поросят [RU 2260426 C1, А61К 31/415, А61Р 15/00, A61D 7/00, 20.09.2005 Бюл. № 26], согласно которому, для нормализации процессов анаболизма и катаболизма свиноматкам на 80-е и 90-е сутки супоросности вводят селеносодержащий препарат Селекор в дозировке 20 мг/кг массы тела двукратно с интервалом 10-15 суток, увеличивая тем самым жизнеспособность, стимулируя рост и повышая качество потомства.

Недостатком данного способа служит опосредованное влияние препарата на организм поросят, отсутствие воздействия компонентов лекарственного средства на их иммунную систему в постнатальном периоде, что снижает его эффективность.

Известен способ повышения резистентности новорожденных поросят, включающий пероральное введение концентрированной сыворотки крови 2 раза в сутки по 5 мл на голову в течение первых двух дней жизни животных [RU 2142805 C1, А61К 35/14, 20.12.1999].

Недостатком данного способа является продолжительный многоступенчатый процесс приготовления средства путем поэтапного замораживания сыворотки крови и трудоемкость его введения поросятам.

Известен способ коррекции иммуно-биохимического гомеостаза поросят-сосунов, который подразумевает парентеральные инъекции металлосукцината на 2-е, 12-е и 25-е сутки после рождения в дозах 1,5 мл, 2,0 мл и 3,0 мл соответственно [RU 2393848 C1, А61К 31/00, А61К 31/194, А61К 31/295, A61K 33/24, А61К 31/26, А61К 31/30, А61К 31/34, А61К 35/12, А61Р 3/02,10.07.2010 Бюл. № 19].

Недостатком данного способа является трудоемкость исполнения, а также трехкратное введение с большими интервалами в течение 25 дней.

Известен способ лечения и профилактики инфекционных болезней поросят в условиях промышленного свиноводства посредством сочетанного применения антибактериальных препаратов и иммуномодулятора, в качестве которого выступает комплекс натриевых солей одно- и двуспиральных РНК киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae в дозе 0,3-0,4 мг/кг. Иммуномодулятор вводят поросятам внутримышечно в преддверии критического периода выращивания - на 15-20 день жизни [RU 2272632 С2, А61К 31/7105, А61К 31/345, А61Р 31/04, А61Р 37/02, A61D 7/00, 27.03.2006 Бюл. № 9].

Недостатком данного способа является неудовлетворительная клеточная и гуморальная защита в ранний постнатальный период, а также отсутствие информации о возможности применения препарата поросятам-гипотрофикам.

Наиболее близким аналогом, принятым за прототип, является способ повышения резистентности организма поросят, который включает внутримышечное введение в первые сутки жизни тривита в дозе 2 мл и подкожной инъекции в течение первых трех суток жизни Т-активина в дозе 3 мл [Липатова О.А. Пути повышения резистентности организма поросят с использованием биологически активных препаратов / О.А. Липатова // Известия ОГАУ. - 2013. - № 6 (44). - С. 83-84].

Недостатком данного способа является парентеральное введение двух лекарственных препаратов разными путями, что увеличивает стресс у новорожденных поросят, а также невысокий уровень клеточной и гуморальной защиты.

Изобретение решает задачу иммунокоррекции у поросят-гипотрофиков в ранний постнатальный период при иммунодефиците с достижением следующего технического результата: нормализация показателей клеточной защиты и повышение активности процессов дифференциации клеток до физиологических значений поросят-нормотрофиков.

Технический результат достигается тем, что в способе коррекции иммунного статуса поросят-гипотрофиков при иммунодефиците в ранний постнатальный период, включающем применение иммуномодулятора, согласно изобретению, в качестве иммуномодулятора используют препарат Простимул, содержащий в 1 мл рекомбинантный цитокин I типа с активностью не менее 10000 ME, витамин С - 50 мг, витамин А - 25000 ME, витамин Е - 25 мг, бензоат натрия - 0,25-0,5 мг, натрий сернокислый - 1-2 мг, ЭДТА - 0,05-0,1 мг, неионогенный растворитель - 50-100 мг, глицерин - 50-100 мг и воду для инъекций - до 1 мл, причем вводят Простимул двукратно, в первый и третий дни жизни, внутримышечно в дозе 0,1 мл/кг массы тела.

Простимул изготовлен ООО «Научно-Производственным центром «ПроБиоТех» (Республика Беларусь) и представляет собой прозрачный стерильный раствор. Рекомбинантный белок, являющийся действующим веществом препарата, обладает полифункциональностью и осуществляет координацию физиологических процессов на геномном уровне, регулируя анаболические и катаболические реакции за счет стимуляции циклов АДФАТФ, активизирует гемопоэз, модулирует иммунный и воспалительный ответы, напрямую участвует в регуляции пролиферации и дифференцировке клеточного звена иммунитета, что критически важно в раннем постнатальном периоде развития молодняка.

Ретинол (витамин А), входящий в состав препарата, обладает выраженными антиоксидантными свойствами, принимает непосредственное участие в окислительно-восстановительных процессах, регуляции синтеза белков и развитии костно-хрящевых тканей организма, стимулирует функцию сетчатки глазного дна, входит в состав ферментных молекул.

Токоферол (витамин Е), являясь одним из самых мощных природных антиоксидантов, тормозит развитие свободнорадикальных реакций, предупреждает образование перекисей, повреждающих клеточные и субклеточные мембраны, что имеет важное значение для развития организма, нормального функционирования нервной и мышечной систем. Мембраностабилизирующее действие витамина проявляется и в его свойстве предохранять от окисления SH-группы мембранных белков. Его антиоксидантное действие заключается также в способности защищать от окисления двойные связи в молекулах каротина и витамина А. Токоферол является антигипоксантом, что объясняется его способностью стабилизировать митохондриальную мембрану и экономить потребление кислорода клетками.

Аскорбиновая кислота (витамин С) участвует в образовании коллагеновых волокон, серотонина из триптофана, синтезе катехоламинов, кортикостероидов, а также участвует в превращении холестерина в желчные кислоты.

Бензоат натрия - натриевая соль бензойной кислоты. Представляет собой белый порошок без запаха или с незначительным запахом бензальдегида. Химическая формула - C₆H₅COONa. Оказывает сильное угнетающее действие на дрожжи и плесневые грибы, включая афлатоксинообразующие, подавляет активность ферментов, ответственных за окислительно-восстановительные реакции. Является пищевой добавкой, относящейся к группе консервантов с номером Е211.

Сульфит натрия (сернистокислый натрий) - неорганическое соединение, соль натрия и сернистой кислоты с химической формулой Na₂SO₃. Представляет собой белый порошок или кристаллы с соленым вкусом. Используется как консервант, антиоксидант, отбеливатель и стабилизатор цвета. Входит в свод международных пищевых стандартов Кодекс Алиментариус под номером Е221.

Этилендиаминтетрауксусная кислота, ЭДТА, комплексон II - органическое соединение, четырехосновная карбоновая кислота с химической формулой белый мелкокристаллический порошок, малорастворим в воде, нерастворим в большинстве органических растворителей, растворим в щелочах, с катионами металлов образует соли этилендиаминтетраацетаты. ЭДТА добавляется в рецептуры в качестве слабого антисептика, эмульгатора и стабилизатора.

Полиэтиленгликоль (ПЭГ) - это полимер, известный своими уникальными свойствами и широким спектром применения. Структурная формула имеет следующий вид ,ПЭГ обладает высокой растворимостью в воде и способностью образовывать комплексы с различными лекарственными веществами. При добавлении ПЭГ в формулу препарата, его растворимость может значительно увеличиться, что способствует улучшению фармакокинетических свойств и стабильности препаратов. ПЭГ также широко применяется в ветеринарной медицине для заживления ран и ухода за травмированной кожей, способствуя образованию защитного слоя на поверхности раны и предотвращению инфекции.

Глицерин (Glycerinum) - органическое соединение, простейший представитель трехатомных спиртов с формулой С₃Н₅(ОН)₃. Синонимы: глицерол, пропантриол-1,2,3, Е422. Представляет собой вязкую прозрачную гигроскопическую жидкость со сладким вкусом. Применяют в растворах для инъекций в концентрации до 30%, в больших концентрациях обладает раздражающим действием вследствие нарушения осмотических процессов в клетках. Глицерин применяется как влагоудерживающий, смягчающий и увлажняющий компонент. Также он может выступать в роли растворителя, регулятора вязкости и эмульгатора.

Вода для инъекций применяется для изготовления парентеральных лекарственных средств, стерильных инфузионных (инъекционных) растворов из порошков, лиофилизатов и концентратов. Ее получают из воды очищенной методом дистилляции, ионного обмена, обратного осмоса, комбинацией этих методов или другим способом.

Простимул - это иммуномодулятор, обладающий также антиоксидантным и антистрессовым действием. Применение Простомула активирует иммунный ответ и способствует повышению неспецифической резистенности животных, что обеспечивает защиту от инфекций и стимулирует рост поросят-гипотрофиков.

Способ осуществляют следующим образом.

Поросятам-гипотрофикам внутримышечно вводят рекомбинантный видоспецифичный цитокин Простимул двукратно в первый и третий дни жизни в дозе 0,1 мл/кг массы тела.

Оценку эффективности терапии иммунодефицита у поросят-сосунов в ранний постнатальный период с помощью видоспецифичного рекомбинантного цитокина проводили в 2023 году на территории крупного промышленного свиноводческого хозяйства Воронежской области, на поросятах раннего неонатального периода, полученных от свиноматок 3-4 опороса. Диагноз на гипотрофию новорожденных поросят ставили после клинического осмотра и взвешивания. Не достигшие 800 г животные были учтены как поросята-гипотрофики, животные свыше 800 г - нормотрофики.

Для изучения влияния препарата Простимул были сформированы 3 группы поросят-сосунов. Первая группа - поросята нормотрофики (n=10) - служила контролем. Вторая группа - поросята-гипотрофики (n=10) - дополнительно к основному рациону получали коровье молозиво в дозе 2,5 мл на голову в течение 3 дней (принятая в хозяйстве схема для повышения иммунного статуса). Третья группа - поросята-гипотрофики (n=10) внутримышечно вводили рекомбинантный видоспецифичный цитокин Простимул двукратно в первый и третий дни жизни в дозе 0,1 мл/кг массы тела. До введения препарата и в возрасте 7, 14 и 28 суток у животных брали кровь для проведения исследований. Оценка эффективности способа осуществлялась путем анализа показателей морфологического состава крови, влияния на гуморальное и клеточное звено иммунитета.

Сущность технического решения поясняется примерами.

Пример 1. При оценке гематологических показателей до начала эксперимента отмечали, что количество эритроцитов и гемоглобина у поросят-нормотрофиков и гипотрофиков не имело достоверных различий (таблица 1). Уровень лейкоцитов в крови физиологически зрелых животных был на 22,6% выше, однако в лейкоформуле различий между группами не зарегистрировано.

Содержание эритроцитов недельных у поросят 3 группы был ниже нормотрофиков на 8,4%, однако к концу опыта был выше на 6,8%. Аналогичная динамика наблюдалась в отношении гемоглобина: через 7 дней опыта концентрация в крови поросят 3 группы была ниже на 14,1%, чем в группе нормотрофиков, а через 28 дней - выше на 41,9% (р<0,02).

На 7 день эксперимента количество лейкоцитов у поросят 2 и 3 групп возросло на 29,3% (р<0,005) и 21,7%, по сравнению с животными 1 группы, а через 28 дней у гипотрофиков, которым применили Простимул, содержание лейкоцитов снизилось на 13,0%.

Относительное содержание нейтрофилов и моноцитов в крови поросят не имело достоверных различий. Однако в конце опыта количество лимфоцитов у животных 3 группы было выше на 24,5% по сравнению с контролем, что свидетельствует о положительном влиянии Простимула на морфологические показатели крови гипотрофиков.

Пример 2. При исследовании иммунологических показателей крови (таблица 2) до начала исследований было показано, что у поросят-гипотрофиков уровень лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК) и общего количества иммуноглобулинов (Ig) был ниже на 23,6% и 31,3% (р<0,05) соответственно, а показатели комплементарной активности сыворотки крови (КАСК) и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) не отличались от нормотрофиков.

ЛАСК через 14 дней у поросят опытных групп была ниже, чем у нормотрофиков на 28,1%. В конце опыта данный показатель у животных 2 группы был также ниже на 20,0% (р<0,05), а у поросят 3 группы достиг значений физиологически зрелых животных.

КАСК через 14 дней у поросят 3 группы была выше нормотрофиков на 11,2%, а через 28 дней - на 27,4% (р<0,05).

Содержание общих иммуноглобулинов через 14 дней у поросят 3 группы было ниже на 8,4%, а в конце опыта выше на 12,5% по сравнению с нормотрофиками.

Количество ЦИК через 7 дней у поросят 3 группы выше нормотрофиков на 10,3%, через 14 дней и 28 дней - ниже на 46,7% (р<0,05) и 12,0% (р<0,05) соответственно, что свидетельствует о снижении антигенной нагрузки на их организм.

Таким образом, применение Простимула способствует активизации гуморального звена неспецифической резистентности у поросят-гипотрофиков.

Пример 3. При исследовании показателей клеточного звена неспецифической резистентности у поросят (таблица 3) до начала опыта было выявлено, что у гипотрофиков по сравнению с нормотрофиками был выше спонтанный НСТ-тест (НСТсп) на 47,1% (р<0,05) и стимулированный НСТ-тест (НСТст) на 5,6%, а показатели резерва фагоцитарных нейтрофилов (ПР), фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ), фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ) - ниже на 33,4% (р<0,002), 5,5% (р<0,05), 9,2% и 11,3% соответственно.

НСТсп через 7 дней у поросят 3 группы был выше нормотрофиков на 51,3% (р<0,02), через 14 дней - ниже на 15,0%, а через 28 дней достиг значений физиологически зрелых животных, в то время как у поросят 2 группы показатель был ниже 26,7% (р<0,05).

НСТст через 7 дней у поросят 3 группы был выше на 11,0%, однако к концу опыта практически не отличался от нормотрофиков.

ПР через 7 дней у поросят 3 группы был ниже нормотрофиков на 25,1% (р<0,05), через 14 дней - выше на 12,6%, а через 28 дней достиг контрольных значений.

Показатель ФАЛ у поросят 3 группы в течение опыта не отличался от значений физиологически зрелых животных.

ФЧ и ФИ через 28 дней у поросят 3 группы были ниже нормотрофиков на 10,4% (р<0,001) и 11,6% (р<0,01), но выше животных 2 группы на 23,6% (р<0,001) и 24,4% (р<0,001).

Таким образом, применение Простимула способствует нормализации показателей клеточной защиты у поросят-гипотрофиков до значений физиологически зрелых животных.

Пример 4. При оценке содержания лимфоцитов в крови поросят до начала эксперимента отмечали, что у гипотрофиков количество Т- и В-лимфоцитов было ниже на 11,0% (р<0,05) и 22,3% (р<0,02), чем у поросят-нормотрофиков (таблица 4).

Количество Т-лимфоцитов на 7 день эксперимента у поросят 1, 2 и 3 групп не имело достоверных различий, на 14 день фиксировали повышение Т-лимфоцитов у животных 2 группы на 6,2% (р<0,05), а на 28 день - у поросят 3 группы на 10,1% (р<0,05).

Содержание В-лимфоцитов на 7 день у поросят 3 группы было выше на 10,4% (р<0,05), на 14 день у животных 2 группы - на 15,7% (р<0,05), а на 28 день у поросят 2 и 3 группы количество В-лимфоцитов было выше на 8,8% и 10,6% соответственно.

Таким образом, на фоне применения препарата Простимул у животных повышается активность процессов дифференциации клеток, что важно в первый месяц жизни поросят-гипотрофиков с иммунной недостаточностью.

Изобретение относится к ветеринарной медицине. Способ коррекции иммунного статуса поросят-гипотрофиков при иммунодефиците в ранний постнатальный период включает применение иммуномодулятора, причем в качестве иммуномодулятора используют препарат Простимул, содержащий в 1 мл рекомбинантный цитокин I типа с активностью не менее 10000 ME, витамин С - 50 мг, витамин А - 25000 ME, витамин Е - 25 мг, бензоат натрия - 0,25-0,5 мг, натрий сернокислый - 1-2 мг, ЭДТА - 0,05-0,1 мг, неионогенный растворитель - 50-100 мг, глицерин - 50-100 мг и воду для инъекций - до 1 мл, причем вводят Простимул двукратно, в первый и третий дни жизни, внутримышечно в дозе 0,1 мл/кг массы тела. Изобретение позволяет нормализовать показатели клеточной защиты и повысить активность процессов дифференциации клеток до физиологических значений поросят-нормотрофиков. 4 табл., 4 пр.

Способ коррекции иммунного статуса поросят-гипотрофиков при иммунодефиците в ранний постнатальный период, включающий применение иммуномодулятора, отличающийся тем, что в качестве иммуномодулятора используют препарат Простимул, содержащий в 1 мл рекомбинантный цитокин I типа с активностью не менее 10000 ME, витамин С - 50 мг, витамин А - 25000 ME, витамин Е - 25 мг, бензоат натрия - 0,25-0,5 мг, натрий сернокислый - 1-2 мг, ЭДТА - 0,05-0,1 мг, неионогенный растворитель - 50-100 мг, глицерин - 50-100 мг и воду для инъекций - до 1 мл, причем вводят Простимул двукратно, в первый и третий дни жизни, внутримышечно в дозе 0,1 мл/кг массы тела.