Способ профилактики эндометрита и мастита у коров в послеродовой период Российский патент 2023 года по МПК A61M5/00 A61K38/21 A61P37/02 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для профилактики эндометрита и мастита у коров в послеродовый период.

Послеродовые воспалительные заболевания органов системы репродукции (матки - эндометрит и молочной железы - мастит) регистрируются у 40-50% и более лактирующих коров и представляют собой важнейшую ветеринарную, технологическую, экологическую и социальную проблему современного молочного скотоводства, так как является одной из основных причин снижения плодовитости и молочной продуктивности животных, а также санитарно-гигиенических и технологических качеств молока.

Развитие и характер течения патологических процессов в органах воспроизводства коров после родов определяется состоянием их гормонально-метаболического, антиоксидантного и иммунного гомеостаза, а также вирулентностью инфекционных агентов, проникающих в родовые пути и молочную железу. В настоящее время для профилактики мастита у лактирующих коров применяются вакцины в основном зарубежного производства (Мастивак, Стартвак, Ваколин). Но они не всегда дают желаемый эффект, так как специфичны только к 2-4 штаммам микроорганизмов, имеющих этиологическое значение. В случае если возбудитель, выделенный в конкретном хозяйстве не идентичен вакцинному штамму, то эффективность вакцины резко снижается. Поэтому основой профилактики послеродовых заболеваний у коров должно быть применение фармакологических средств, нормализующих гормонально-метаболический статус и функциональную деятельность системы иммунной защиты. В связи с этим необходим дальнейший научный поиск и разработка новых лекарственных средств, стимулирующих общую неспецифическую резистентность организма, факторы локальной защиты молочной железы и репродуктивных органов коров и, позволяющих, тем самым, ликвидировать воспалительный процесс в матке и молочной железе или профилактировать его возникновение у клинически здоровых животных.

Известны способы профилактики родовых и послеродовых воспалительных заболеваний у коров, предусматривающие применение тканевых препаратов [RU 2178705 С2, А61К 35/50, 27.01.2002; RU 2201758 С2, А61К 35/48, А61Р 15/00, 10.04.2003] и лигфола [RU 2252030 C1, А61К 35/78, А61Р 15/00, 20.05.2005 Бюл. №14]. Их биологическое общестимулирующее действие направленно на коррекцию метаболических процессов и на повышение иммунологической реактивности. Однако степень этого воздействия на систему иммунной защиты и, соответственно, профилактический эффект этих препаратов недостаточен.

Известен способ профилактики гестоза и его осложнений у коров и нетелей, включающий внутримышечное введение селемага, инъекции которого осуществляют в дозе 5 мл на 100 кг массы тела дважды: за 55-60 и 25-30 дней до предполагаемого отела [RU 2467722 C1, A61D 7/00, 27.11.2012 Бюл. №33].

Профилактическое действие препарата селена связано с воздействием на общий гомеостаз и систему антиоксидантной защиты как одного из звеньев патогенеза заболеваний. Действие подобных препаратов лишь опосредованно затрагивает иммунную систему и механизмы ответной реакции организма на воздействие инфекционного агента, вызывающего развитие воспалительного процесса.

Наиболее близким аналогом - прототипом является способ профилактики послеродовых воспалительных заболеваний матки и молочной железы у коров, предусматривающий двукратное внутримышечное введение лекарственного препарата имунофан в дозе 4-5 мл на животное: первое введение осуществляют за 50-60 дней, а второе - за 15-20 дней до предполагаемого отела [RU 2548761 C1, А61К 38/03, А61Р 15/00, 20.04.2015 Бюл. №11]. Недостатком данного способа являются растянутые сроки введения препарата и недостаточно высокая профилактическая эффективность.

Технический результат изобретения - расширение арсенала способов профилактики послеродового эндометрита и мастита у коров и повышение их эффективности.

Технический результат достигается тем, что в способе профилактики эндометрита и мастита у коров в послеродовый период, включающем применение иммуномодулятора, согласно изобретению, в качестве последнего используют препарат Проаутовак, в состав которого входит смесь бычьих рекомбинантных α- и γ-интерферонов и ГМ-КСФ, и вводят его сухостойным коровам за 30 дней до предполагаемого отела трехкратно с 10-дневным интервалом в дозе 10 мл на животное.

Препарат Проаутовак содержит в 1 мл: бычьи рекомбинантные α- и γ-интерфероны с суммарной активностью не менее 1000 ME, бычий рекомбинантный ГМ-КСФ 0,005 мг, витамин А 25000 ME, витамин Е 25 мг, витамин С 50 мг, бензоат натрия 0,5 мг, полиэтиленгликоль 0,1 мл и воду для инъекций до 1 мл.

Проаутовак - это иммуномодулятор, обладающий антиоксидантным и иммунокоррегирующим действием. Смесь α- и γ-интерферонов бычьих рекомбинантных выступает в качестве индуктора бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, оказывает противовоспалительное действие, повышает резистентность организма животных к воздействию ДНК- и РНК-содержащих вирусов и патогенных микроорганизмов, проявляет антистрессовый эффект, усиливает напряженность иммунитета и снимает поствакцинальный синдром при вакцинациях. Присутствие в препарате интерферонов I-го (α-) и II-го (γ-) типа обусловливает синергизм действия на организм. Эффект определяется суммарным действием экзогенных белков непосредственно на пораженные вирусом клетки, быстрой индукцией системы эндогенных цитокинов, клеточного и гуморального иммунитета.

ГМ-КСФ (гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор) - участвует в регуляции физиолого-биохимических функций различных систем организма на генном уровне путем подачи сигналов на «включение» или «выключение» экспрессии ряда генов, входящих в пул этой белковой сигнальной молекулы. В норме ГМ-КСФ продуцируется клетками гранулезы зрелых и овулирующих фолликулов в процессе полового цикла. ГМ-КСФ стимулирует рост и дифференцировку гемопоэтических клеток, играет в эмбриональном развитии роль эмбриокина - регуляторных молекул, вырабатываемых яйцеводом и эндометрием в репродуктивном тракте, которые модулируют рост и развитие эмбриона [Block J., Hansen P.J., Loureiro В., Bonilla L. Improving post-transfer survival of bovine embryos produced in vitro: actions of insulin-like growth factor-1, colony stimulating factor-2 and hyaluronan // Theriogenology. - 2011. - Vol. 76 (9). - P. 1602-1609].

Витамин А участвует в окислительно-восстановительных процессах, регуляции синтеза белков, половых гормонов, интерферона, иммуноглобулина А и лизоцима; способствует нормальному обмену веществ, функции клеточных и субклеточных мембран, играет важную роль в формировании костей и зубов, а также жировых отложений; необходим для роста новых клеток, замедляет процесс старения.

Витамин Е, являясь одним из самых мощных природных антиоксидантов, тормозит развитие свободнорадикальных реакций, предупреждает образование перекисей, повреждающих клеточные и субклеточные мембраны, что имеет важное значение для развития организма, нормальной функции нервной и мышечной систем. Мембраностабилизирующее действие витамина проявляется и в его свойстве предохранять от окисления SH-группы мембранных белков. Его антиоксидантное действие заключается также в способности защищать от окисления двойные связи в молекулах каротина и витамина А. Токоферол является антигипоксантом, что объясняется его способностью стабилизировать митохондриальную мембрану и экономить потребление кислорода клетками.

Витамин С выполняет биологические функции восстановителя и кофермента некоторых метаболических процессов. Витамин С нейтрализует супероксидный радикал до перекиси водорода, участвует в образовании коллагена, серотонина, катехоламинов, синтезе кортикостероидов, в превращении холестерина в желчные кислоты, восстанавливает убихинон и витамин Е, стимулирует синтез интерферона. Аскорбиновая кислота улучшает всасывание железа из пищи, тормозит гликозилирование гемоглобина и превращение глюкозы в сорбит.

Бензоат натрия используется в качестве консерванта в лекарствах и косметике, обладает бактериостатическим и фунгистатическим действием.

Полиэтиленгликоль применяется в качестве растворителя, стабилизатора, регулятора влажности и вязкости, наполнителя, связующего ингредиента. Полиэтиленгликоли входят в состав слабительных средств, идут в качестве наполнителя и связующего ингредиента для свечей, таблеток, мазей и пен.

Вода для инъекций используется в качестве растворителя при приготовлении лекарственных форм.

Сущность способа поясняется примерами.

Для опыта было сформировано три группы коров за месяц до предполагаемого отела. Животным первой опытной группы (n=12) внутримышечно инъецировали препарат Проаутовак трехкратно с 10-дневным интервалом в дозе 10 мл. Коровам второй группы (n=12) в качестве положительного контроля за месяц до предполагаемого отела внутримышечно двукратно вводили Биферон-Б в дозе 10 мл с интервалом 24 часа. Животные третьей группы (n=10) служили отрицательным контролем, им внутримышечно вводили 0,9% раствор хлорида натрия в дозе 10 мл трехкратно с 10-дневным интервалом.

От коров из каждой группы в первый день после отела и через 14 дней после отела отбирали пробы крови для проведения биохимических, морфологических и иммунологических исследований.

Результаты опыта по изучению влияния препарата Проаутовак на иммунологический статус организма коров в первый и через 14 дней после отела представлены в таблице 1.

После введения Биферона-Б в крови коров после отела отмечено снижение содержания эозинофилов на 15,2% (Р<0,05), повышение фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ) и фагоцитарного числа (ФЧ) на 14,8% (Р<0,001) и 27,6% (Р<0,005) соответственно, а также лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК) - на 19,8% (Р<0,005). Через 14 дней после отела в крови животных группы положительного контроля фиксировали уменьшение количества циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) на 17,9% (Р0,001), лейкоцитов - на 14,1% (Р<0,05), эозинофилов - на 21,4% (Р<0,002), палочкоядерных нейтрофилов - на 30,5% (Р<0,0005), моноцитов - на 15,4% (Р<0,05), при увеличении фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ) в 1,5 (Р<0,0005) и 1,4 раза (Р<0,0001) соответственно.

В то же время после применения Проаутовака в крови коров уже в первый день после отела отмечено снижение содержания циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) на 20,8% (Р<0,05), эозинофилов - на 21,7% (Р<0,0005), палочкоядерных нейтрофилов - на 22,2% (Р<0,01), моноцитов - на 27,0% (Р<0,02), при повышении фагоцитарной активности лейкоцитов (ФАЛ), фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ) на 21,6% (Р<0,001), 44,8% (Р<0,001) и 19,5% (Р<0,02) соответственно, а также лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК) - на 22,5% (Р<0,002).

Через 14 дней после отела в крови коров опытной группы регистрировали уменьшение количества циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) на 25,6% (Р<0,0001), лейкоцитов - на 20,6% (Р<0,005), эозинофилов - на 41,1% (Р<0,0001), палочкоядерных нейтрофилов - на 42,4% (Р<0,0005), моноцитов - на 25,6% (Р<0,002), при увеличении уровня сегментоядерных нейтрофилов на 24,5% (Р<0,05), фагоцитарного числа (ФЧ) и фагоцитарного индекса (ФИ) в 1,8 (Р<0,0001) и 1,6 раза (Р<0,0005) соответственно, а также лизоцимной активности сыворотки крови (ЛАСК) - на 36,8% (Р<0,005).

Следовательно, применение Проаутовака сухостойным коровам оказало более выраженное влияние на иммунологический статус коров, чем применение Биферона-Б, о чем свидетельствует снижение интенсивности воспалительного процесса и одновременное повышение показателей неспецифической резистентности.

Результаты опыта по изучению влияния препарата Проаутовак на биохимический статус организма коров в первый день и через 14 дней после отела представлены в таблице 2.

В крови животных, которым применяли Биферон-Б, в первый день после родов фиксировали снижение содержания малонового диальдегида (МДА) на 18,0% (Р<0,01), молекул средней массы (МСМ) - на 26,7% (Р<0,0001), индекса эндогенной интоксикации (ИЭИ) - на 19,1% (Р<0,02), при повышении концентрации витамина А на 25,0% (Р<0,02), активности каталазы и глутатионпероксидазы (ГПО) - на 19,4% (Р<0,05) и 27,0% (Р<0,05) соответственно.

Через 14 дней после родов в крови коров группы положительного контроля отмечено уменьшение уровня малонового диальдегида (МДА) на 23,7% (Р<0,01), молекул средней массы (МСМ) - на 21,1% (Р<0,02), оксида азота (NO_x) - на 21,7% (Р<0,02), при повышении концентрации витамина А -на 27,3% (Р<0,01) и витамина С - на 26,3% (Р<0,05), активности каталазы и глутатионпероксидазы (ГПО) - на 29,6% (Р<0,02) и 44,0% (Р<0,02) соответственно.

Установлено, что у животных, которым применяли Проаутовак, в первый день после родов отмечено снижение содержания малонового диальдегида (МДА) на 23,7% (Р<0,002), молекул средней массы (МСМ) - на 34,7% (Р<0,0001), индекса эндогенной интоксикации (ИЭИ) - на 34,8% (Р<0,002), оксида азота (NO_x) - на 21,6% (Р<0,02), при повышении концентрации витамина А на 33,3% (Р<0,01), витамина E - на 18,3% (Р<0,01), активности каталазы и глутатионпероксидазы (ГПО) - на 28,5% (Р<0,05) и 46,8% (Р<0,05) соответственно.

Через 14 дней после родов у коров опытной группы регистрировали понижение уровня малонового диальдегида (МДА) на 31,2% (Р<0,001), молекул средней массы (МСМ) - на 29,4% (Р<0,005), оксида азота (NO_x) - на 32,1% (Р<0,002), при увеличении содержания витамина А в 1,6 раза (Р<0,002), витамина С - на 34,6% (Р<0,02), витамина E - на 34,0% (Р<0,02), активности каталазы и глутатионпероксидазы (ГПО) - на 36,4% (Р<0,02) и в 1,6 раза (Р<0,002) соответственно.

Следовательно, применение Проаутовака сухостойным коровам оказало более выраженное влияние на показатели ферментативного и неферментативного звена системы антиоксидантной защиты, чем применение Биферона-Б, что обусловило снижение заболеваемости коров маститом и эндометритом в послеродовой период.

Результаты эффективности применения Проаутовака для профилактики послеродового эндометрита и мастита у коров представлены в таблице 3.

Установлено, что при применении с целью профилактики Проаутовака по сравнению с Бифероном-Б мастит регистрировали в 2,0 раза реже, а по сравнению с контрольной группой - в 6,0 раз.

Применение коровам Проаутовака обеспечило снижение случаев послеродового эндометрита на 8,3% по сравнению с Бифероном-Б, а по сравнению с группой контроля - в 2,4 раза.

Таким образом, трехкратное введение коровам препарата Проаутовак за 30 дней до предполагаемого отела с 10-дневным интервалом в дозе 10 мл на животное обеспечивает профилактическую эффективность при мастите 91,7%, при эндометрите - 75,0% за счет активизации факторов клеточного и гуморального звена неспецифической резистентности, а также ферментативного и неферментативного звена системы антиоксидантной защиты.

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к ветеринарному акушерству, и может быть использовано для профилактики эндометрита и мастита у коров в послеродовой период. Для этого препарат Проаутовак, в состав которого входит смесь бычьих рекомбинантных α- и γ-интерферонов и ГМ-КСФ, вводят сухостойным коровам за 30 дней до предполагаемого отела трехкратно с 10-дневным интервалом в дозе 10 мл на животное. Изобретение обеспечивает расширение арсенала способов профилактики послеродового эндометрита и мастита у коров и повышение их эффективности. 3 табл., 1 пр.

Способ профилактики эндометрита и мастита у коров в послеродовой период, включающий применение иммуномодулятора, отличающийся тем, что в качестве иммуномодулятора используют препарат Проаутовак, в состав которого входит смесь бычьих рекомбинантных α- и γ-интерферонов и ГМ-КСФ, и вводят его сухостойным коровам за 30 дней до предполагаемого отела трехкратно с 10-дневным интервалом в дозе 10 мл на животное.