Способ прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis Российский патент 2025 года по МПК G01N33/50 A61B5/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии и дерматовенерологии, и может быть использовано в условиях женских консультаций и поликлиник для прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis. Метод основан на использовании данных об общем количестве лактобацилл в цервико-вагинальной жидкости, доли среди лактобацилл Lactobacillus iners и значении кислотности среды цервико-вагинальной жидкости.

Хламидии являются широко распространенной группой внутриклеточных облигатных паразитов, вызывающих заболевания человека, особо важное значение для медицины представляет Chlamydia trachomatis, вызывающая различные инфекционные заболевания, в том числе инфекции урогенитального тракта.

Актуальность разработанного способа определяется высокой частотой встречаемости хламидийной инфекции гениталий у женщин (Rowley J, Vander Hoorn S, Korenromp E, Low N, Unemo M, Abu-Raddad LJ, Chico RM, Smolak A, Newman L, Gottlieb S, Thwin SS, Broutet N, Taylor MM. Chlamydia, gonorrhoea, trichomoniasis and syphilis: global prevalence and incidence estimates, 2016. Bull World Health Organ. 2019 Aug 1;97(8):548-562P.), что с учетом высокого патогенного потенциала хламидий приводит к увеличению частоты многочисленных осложнений, связанных с дисфункцией репродуктивной системы, увеличению рисков инфицирования новорожденных. Особую опасность представляет способность Chlamydia trachomatis вызывать хронические и рецидивирующие инфекции.

В связи с этим повышение точности прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, будет способствовать индивидуализации тактики наблюдения за пациенткой, позволит оценивать эффективность проводимой терапии, что будет способствовать профилактике осложнений, связанных с этой инфекцией.

Известен способ прогнозирования рецидивирующей инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis, основанный на использовании многовариантного логистического регрессионного анализа (Xu X, Chow EPF, Fairley СК, Chen М, Aguirre I, Goller J, Hocking J, Carvalho N, Zhang L, Ong JJ. Determinants and prediction of Chlamydia trachomatis re-testing and re-infection within 1 year among heterosexuals with chlamydia attending a sexual health clinic. Front Public Health. 2023 Jan 13; 10:1031372.) Недостатком этого способа является необходимость многократного повторения сбора данных для достижения заявленного в способе результата. Другим недостатком является использование для прогнозирования неспецифических демографических показателей, не позволяющих учитывать индивидуальное состояние пациентки и состояние нормальной микрофлоры влагалища - лактобацилл, в результате чего способ имеет низкую прогностическую ценность.

Также известен способ прогнозирования рецидива урогенитального хламидиоза, основанный на анализе клинической картины заболевания и учитывающий признаки вовлечения в патологический процесс внутренних половых органов, в частности наличие сальпингитов, сальпингоофоритов, эндометритов, спаечного процесса в полости таза, фиброматозных узлов, миоматоза матки, кист яичников (С. В. Батыршина. Принципы и методы терапии женщин с хламидиозом и нарушениями функции репродукции. Тактика ведения больных: В сб. науч. тр. Уральского НИИ дерматовенерологии: Актуальные вопросы венерологии и дерматологии. Изд. УрНИИДВиИ, Екатеринбург, 1995. - С. 55-61). Недостатком данного способа является ограничение области применения способа наличием патологического процесса внутренних половых органов, который встречается у небольшого количества пациенток. Другим недостатком способа является использование в нем клинических показателей, которые возникают вследствие длительно протекающей инфекции. Дополнительно к этому следует учитывать, что прогнозирование рецидивирующей инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis, с использованием клинических критериев является субъективным.

Известен способ оценки эффективности терапии урогенитального хламидиоза, основанный на морфометрическом анализе функциональной активности лейкоцитов периферической крови с использованием электронного микроскопирования ультратонких срезов лейкоцитов (Мешков А.М. Комплексный метод лечения больных с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта хламидийной и уреаплазменной этиологии (клинико-лабораторное и электронно-микроскопическое исследование); Автореф. дисс.канд. мед. наук (14.00.11). - М., 1987. - 12 с). Недостатком данного способа является то, что для его реализации необходимо наличие сложного дорогостоящего оборудования и высококвалифицированного персонала.

В качестве прототипа был избран способ прогнозирования эффективности терапии больных урогенитальным хламидиозом (RU 2134881 С1), основанный на определении фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови по фагоцитарному индексу до начала лечения и после курса терапии хламидиоза. Недостатком данного способа является необходимость выделения фракции нейтрофилов из проб периферической крови, что требует наличия специального оборудования и реактивов для разделения клеток крови на фракции. Другим недостатком этого способа является то, что изменение фагоцитарной активности вызывает широкий ряд факторов, что не позволяет с высокой специфичностью прогнозировать эффективность терапии больных урогенитальным хламидиозом. Еще одним недостатком способа по RU 2134881 С1 является то, что способ направлен только на прогноз эффективности терапии, но не на прогнозирование риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis.

Целью изобретения является создание способов, позволяющих прогнозировать наиболее точный исход инфекции и рисков рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, что будет способствовать индивидуализации выбора тактики ведения таких пациенток.

Для достижения поставленной цели было обследовано 117 пациенток с подтвержденным методами полимеразно-цепной реакции и прямой иммунофлуоресценции диагнозом инфекции гениталий, вызванной Chlamydia trachomatis. До начала терапии у всех пациенток в цервико-вагинальном содержимом бактериологическим и молекулярно-биологическим методами определяли общее количество лактобацилл, их видовую принадлежность, количество условно-патогенных микроорганизмов, методом иммуноферментного анализа определяли концентрацию про- и противовоспалительных цитокинов (IL-1β, га IL-1, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, TGFβ, INFγ) и секреторного иммуноглобулина А, физико-химическим методом определяли уровень кислотности цервико-вагинальной жидкости. Через 21 день после терапии у этих же пациенток методами полимеразно-цепной реакции и прямой иммунофлуоресценции определяли наличие Chlamydia trachomatis в цервико-вагинальном содержимом. По результатам этих исследований все пациентки были разделены на 2 группы: 1 группа - пациентки, у которых не были обнаружены Chlamydia trachomatis (п=86); 2 группа - пациентки, у которых были обнаружены Chlamydia trachomatis (п=31).

Затем для всех изучаемых параметров было проведено вычисление показателя информативности и прогностических коэффициентов с использованием последовательного анализа Вальда.

Прогностический коэффициент (ПК) вычисляли по формуле:

ПК=10×1gP1/Р2, где

Р1 - относительная частота признака в первой группе, выраженная в долях единицы.

Р2 - относительная частота признака во второй группе, выраженная в долях единицы.

Показатель информативности (Ik) определяли с использованием критерия Кульбака по следующей формуле: 1к=ПК×0,5×(Р1-Р2).

Проведенный анализ позволил выделить наиболее информативные показатели для прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, которые представлены на Фиг. 1.

Информативными показателями для прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, явились: общее количество лактобацилл, доля Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл и значение кислотности среды цервиковагинальной жидкости. Для каждого показателя были определены диапазоны признаков с разными прогностическими коэффициентами. Для общего количества лактобацилл менее 10⁴ КОЕ/мл ПК=+8, от 10⁴ КОЕ/мл до 10⁵ КОЕ/мл ПК=+3, 10⁵ КОЕ/мл и более - ПК=-7; для доли Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл более 70% ПК=+11, от 30% до 70% ПК=+6, менее 30% - ПК=-9; для значения кислотности цервико-вагинальной жидкости более 4,3 ПК=+7, от 3,8 до 4,3 ПК=+2, менее 3,8 ПК=-8.

При суммировании прогностических коэффициентов у пациенток 1 группы, у которых через 21 или 42 дня не были обнаружены Chlamydia trachomatis, сумма прогностических коэффициентов была отрицательна. При суммировании прогностических коэффициентов у пациенток 2 группы, у которых через 21 или 42 дня были обнаружены Chlamydia trachomatis, сумма прогностических коэффициентов была положительна.

Сущность изобретения заключается в том, что для прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis определяют общее количество лактобацилл, долю Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл и значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости. Оценку исследуемых показателей проводят с помощью прогностических коэффициентов (ПК), где при 10⁴ КОЕ/мл ПК=+8, от 10⁴ КОЕ/мл до 10⁵ КОЕ/мл ПК=+3, 10⁵ КОЕ/мл и более - ПК=-7; для доли Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл более 70% ПК=+11, от 30% до 70% ПК=+6, менее 30% - ПК=-9; для значения кислотности цервико-вагинальной жидкости более 4,3 ПК=+7, от 3,8 до 4,3 ПК=+2, менее 3,8 ПК=-8, затем прогностические коэффициенты суммируют. Если сумма прогностических коэффициентов положительна, прогнозируют риск рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis; если отрицательна - отсутствие риска, то есть благоприятный исход заболевания.

Способ осуществляется следующим образом:

У пациентки, инфицированной Chlamydia trachomatis, бактериологическим или молекулярно-биологическим методом в цервико-вагинальной жидкости определяют общее количество лактобацилл, долю Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл и измеряют значение кислотности среды цервиковагинальной жидкости физико-химическими методами. Для выделения лактобацилл и учета их численности пробы влагалищной жидкости получали тампоном из латерального свода влагалища и доставляли в лабораторию в течение 30 минут. Количество бактерий рода Lactobacillus в образцах вагинального секрета определяли путем посева на MRS среду с последующим культивированием в атмосфере с 5% содержанием СО₂, с температурой 37°С, в течение 48 ч.

Кислотность среды отделяемого влагалища изучали с помощью тест-полосок с ограниченным диапазоном значений рН.

Затем по таблице (Фиг. 1) информативных показателей для прогноза риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, определяют и суммируют прогностические коэффициенты конкретной пациентки. Если сумма прогностических коэффициентов положительна, выносят решение о риске рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis; если отрицательна - об отсутствии риска, то есть благоприятном исходе заболевания.

Оценку исследуемых показателей проводят с помощью прогностических коэффициентов (ПК), где при 10⁴ КОЕ/мл ПК=+8, от 10⁴ КОЕ/мл до 10⁵ КОЕ/мл ПК=+3, 10⁵ КОЕ/мл и более - ПК=-7; для доли Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл более 70% ПК=+11, от 30% до 70% ПК=+6, менее 30% - ПК=-9; для значения кислотности цервико-вагинальной жидкости более 4,3 ПК=+7, от 3,8 до 4,3 ПК=+2, менее 3,8 ПК=-8, затем прогностические коэффициенты суммируют. Если сумма прогностических коэффициентов положительна, прогнозируют риск рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis; если отрицательна - отсутствие риска, то есть благоприятный исход заболевания.

Примеры конкретного выполнения

Пример №1. Пациентка А., 29 лет, находилась на обследовании с диагнозом инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, подтвержденным методом ПЦР. При анализе общее количество лактобацилл составило менее 10⁴ КОЕ/мл (ПК=+8); доля Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл 59% (ПК=+6); значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости - 4,0 (ПК=+2). Сумма прогностических коэффициентов составила (+8)+(+6)+(+2)=+16, на основании чего был сделан прогноз о риске рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, то есть о неблагоприятном исходе заболевания, который был подтвержден через 21 день с использованием метода ПЦР, согласно которому в цервико-вагинальной жидкости пациентки были обнаружены Chlamydia trachomatis.

Пример №2. Пациентка В., 36 лет, находилась на обследовании с диагнозом инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, подтвержденным методом ПЦР. При анализе общее количество лактобацилл составило более 10⁶ КОЕ/мл (ПК=-7); доля Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл 22% (ПК=-9); значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости - 3,9 (ПК=+2). Сумма прогностических коэффициентов составила (-7)+(-9)+(+2)=-14, на основании чего был сделан прогноз об отсутствии риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, то есть о благоприятном исходе заболевания, который был подтвержден через 21 день с использованием метода ПЦР, согласно которому в цервико-вагинальной жидкости пациентки не были обнаружены Chlamydia trachomatis.

Пример №3. Пациентка К., 21 года, находилась на обследовании с диагнозом инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, подтвержденным методом ПИФ. При анализе общее количество лактобацилл составило 10³ КОЕ/мл, то есть менее 10⁴ КОЕ/мл (ПК=+8); доля Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл - 87%, то есть более 70% (ПК=+11); значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости - 3,7 (ПК=-8). Сумма прогностических коэффициентов составила (+8)+(+11)+(-8)=+11, на основании чего был сделан прогноз о риске рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, то есть о неблагоприятном исходе заболевания, который был подтвержден через 21 день с использованием двух методов ПЦР и ПИФ, согласно которым в цервико-вагинальной жидкости пациентки были обнаружены Chlamydia trachomatis.

Пример №4. Пациентка М., 27 лет, находилась на обследовании с диагнозом инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, подтвержденным методом ПЦР. При анализе общее количество лактобацилл составило 10⁷ КОЕ/мл, то есть более 10⁶ КОЕ/мл (ПК=-7); доля Lactobacillus iners от общего количества лактобацилл 7%, то есть менее 30% (ПК=-9); значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости - 4,37, то есть более 4,3 (ПК=+7). Сумма прогностических коэффициентов составила (-7)+(-9)+(+7)=-9, на основании чего был сделан прогноз об отсутствии риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, то есть о благоприятном исходе заболевания, который был подтвержден через 21 день с использованием метода ПЦР, согласно которому в цервико-вагинальной жидкости пациентки не были обнаружены Chlamydia trachomatis.

Таким образом, заявленный способ позволяет с высокой степенью достоверности прогнозировать риск рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии и дерматовенерологии, и может быть использовано для прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis. В цервико-вагинальной жидкости определяют: общее количество лактобацилл, среди лактобацилл определяют долю Lactobacillus iners и измеряют значение кислотности среды цервико-вагинальной жидкости. Оценку исследуемых показателей проводят с помощью прогностических коэффициентов (ПК). Прогностические коэффициенты суммируют. Если сумма прогностических коэффициентов положительна, прогнозируют риск рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis; если отрицательна - прогнозируют отсутствие риска. Изобретение обеспечивает возможность достоверного прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis. 4 пр., 1 ил.

Способ прогнозирования риска рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis, характеризующийся тем, что в цервико-вагинальной жидкости определяют общее количество лактобацилл, определяют среди лактобацилл долю Lactobacillus iners, измеряют значение кислотности среды, оценку исследуемых показателей проводят с помощью прогностических коэффициентов (ПК), где при общем количестве лактобацилл менее 10⁴ КОЕ/мл ПК=+8, от 10⁴ КОЕ/мл до 10⁵ КОЕ/мл ПК=+3, 10⁵ КОЕ/мл и более - ПК=-7; при доле среди лактобацилл Lactobacillus iners более 70% ПК=+11, от 30% до 70% ПК=+6, менее 30% - ПК=-9; при значении кислотности цервико-вагинальной жидкости более 4,3 ПК=+7, от 3,8 до 4,3 ПК=+2, менее 3,8 ПК=-8, суммируют прогностические коэффициенты и, если сумма прогностических коэффициентов положительна, прогнозируют риск рецидивирующей инфекции женского репродуктивного тракта, вызванной Chlamydia trachomatis; если отрицательна - прогнозируют отсутствие риска.