СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ТРАНСПЛАНТАТОВ ДЛЯ ИРИДОПЛАСТИКИ Российский патент 2025 года по МПК A61L27/38 A61F9/07 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмохирургии, и может быть использовано для пластической и реконструктивной хирургии радужки глаза.

Известен способ косметического протезирования переднего отрезка глаза (авт. св. СССР №1337086 A61F 9/00, 1987), в котором с целью увеличения стойкости косметического эффекта и уменьшения послеоперационных осложнений внутрироговично имплантируют предварительно окрашенную под цвет парной радужки, аллогенную заднюю капсулу хрусталика.

Недостатками данного способа являются: сложность и трудоемкость при заборе материала, ограниченное количество трансплантационного материала, травматизм при внутрироговичном введении, что приводит к формированию бельма, сложность манипуляций при операции, отсутствие восстановления анатомической целостности и функций радужки глаза, невозможность применения при полной или почти полной аниридии.

Известен способ получения трансплантата из донорской радужки, размещённой на укрепляющей основе из биологического материала (патент РФ №2254842C1, МПК A61F 9/007, опубл. 27.06.2005), который заключается в том, что для создания укрепляющей основы донорскую радужку погружают в 1-3% раствор коллагена, модифицированного 0,1-0,5% глутаровым альдегидом, на 1-2 часа, далее высушивают полученный трансплантат в расправленном виде при комнатной температуре до образования эластичной пленки, затем выравнивают край трансплантата и формируют зрачок, после этого помещают трансплантат в область дефекта и фиксируют его к краям колобомы и к склеральной губе.

Недостатками способа являются: ограниченное количество трансплантационного материала, сложность и трудоемкость при заборе материала и его подготовке, заключающейся в использовании раствора коллагена, модифицированного глутаровым альдегидом; сложность манипуляций при операции; невозможность применения при полной или почти полной аниридии.

Наиболее близким к заявляемому изобретению по совокупности существенных признаков является «Способ подготовки трансплантатов» (патент РФ №94037478, МПК A 61 F 9/00, опубл. 20.09.1996), который заключается в том, что трансплантат из биологических тканей помещают в раствор витального красителя Эванса Голубого с концентрацией 0,005-0,1% и выдерживают в течение 24-48 ч при температуре 18-24°C, затем окрашенные трансплантаты помещают в раствор уксусной кислоты с концентрацией 0,2-0,5% на 15-60 мин, после чего хранят в консерванте - 70% растворе этилового спирта.

Недостатками способа являются: окрашивание трансплантата одним цветом, невозможность получить двойное окрашивание.

Задача изобретения - получение окрашенных трансплантационных материалов для пластической и реконструктивной хирургии радужки глаза с использованием красителей, не оказывающих вредного или токсического действия на клетки и ткани глаза, и получение двойного окрашивания.

Технический результат изобретения заключается в повышении стойкости косметического эффекта, снижении послеоперационных осложнений.

Технический результат достигается способом подготовки трансплантатов для иридопластики, включающим помещение трансплантата биологических тканей для иридопластики в раствор красителя, выдержку в растворе при комнатной температуре, последующее помещение в раствор уксусной кислоты и хранение в растворе этилового спирта, отличающийся тем, что трансплантат из биологических тканей для иридопластики предварительно помещают в 90% раствор этилового спирта два раза по 5 мин, далее его окрашивают в растворе резорцин-фуксина, содержащем 0,35 г фуксина и 0,75 г резорцина в 60 мл дистиллированной воды, на 15 мин, затем раствор доводят до кипения и добавляют раствор хлористого железа, содержащий 1,65 г хлористого железа и 12,5 мл дистиллированной воды, далее смесь кипятят 3-5 мин, затем охлаждают, осадок собирают на фильтр и заливают его 100 мл 96% раствора этилового спирта, затем раствор снова доводят до кипения, остужают, добавляют 0,55-0,85 мл концентрированной HCl, после выдержки в растворе в течение 5-25 мин трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и помещают в 0,65-1,15% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин, высушивают на фильтровальной бумаге и переносят в раствор прочного зелёного FCF, содержащий 0,03-0,12 г прочного зеленого FCF, 0,9-1,35 мл ледяной уксусной кислоты, 400-700 мл дистиллированной воды, затем через 1,5-5 мин трансплантат для иридопластики промывают 0,75-1,25% раствором уксусной кислоты и помещают его в 0,75-1,25% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин, далее окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта 2 раза на 25-35 мин, затем в 76% раствор этилового спирта на 15-35 мин, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта.

Суть подготовки трансплантатов для иридопластики состоит в следующем: трансплантат из биологических тканей (твёрдая мозговая оболочка, верхние и нижние полые вены, фрагмент стенки аорты, Глиссонова капсула (фиброзная оболочка печени), капсула почек, плевра) помещают в 90% раствор этилового спирта два раза по 5 мин, затем переносят в раствор резорцин-фуксина на 15 мин. Раствор резорцин-фуксина готовят заранее, для чего сначала смешивают 0,35 г фуксина и 0,75 г резорцина с 60 мл дистиллированной воды (раствор А). Затем смешивают 1,65 г хлористого железа с 12,5 мл дистиллированной воды (раствор Б). Раствор А доводят до кипения и прибавляют к нему раствор Б, кипятят 3-5 мин, после охлаждения раствора осадок собирают на фильтр, заливают его 100 мл 96% раствора этилового спирта, доводят до кипения, остужают, добавляют 0,55-0,85 мл концентрированной HCl. После выдержки в растворе в течение 5-25 мин трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и переносят в 0,65-1,15% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин. Материал помещают на фильтровальную бумагу для высушивания, затем переносят в раствор прочного зеленого FCF. Состав раствора: 0,03-0,12 г прочного зеленого FCF смешивают с 0,9-1,35 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 400-700 мл дистиллированной воды. Через 1,5-5 мин трансплантат для иридопластики споласкивают 0,75-1,25% раствором уксусной кислоты и помещают его в 0,75-1,25% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин. Окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта 2 раза в течение 25-35 мин, затем в 76% раствор этилового спирта на 15-35 мин, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта. Трансплантат для иридопластики окрашивается в различные оттенки зелёного цвета с фрагментами фиолетового цвета. Подготовленный трансплантат для иридопластики имеет двойное окрашивание в виде участков фиолетового и зелёного цвета. Далее проводят анализ и подбирают окрашенный трансплантат для иридопластики под цвет радужек глаза.

Пример 1. Для получения аллогенного трансплантата, окрашенного в фиолетово-зелёный цвет, его помещают в 90% раствор этилового спирта два раза по 5 мин, затем переносят в раствор резорцин-фуксина на 15 мин. Раствор резорцин-фуксина готовят заранее, для чего сначала смешивают 0,35 г фуксина и 0,75 г резорцина с 60 мл дистиллированной воды (раствор А). Затем смешивают 1,65 г хлористого железа с 12,5 мл дистиллированной воды (раствор Б). Раствор А доводят до кипения и прибавляют к нему раствор Б, кипятят 3 мин, после охлаждения раствора осадок собирают на фильтр, заливают его 100 мл 96% раствора этилового спирта, доводят до кипения, остужают, добавляют 0,55 мл концентрированной HCl. После выдержки в растворе в течение 5 мин трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и переносят в 0,65% раствор уксусной кислоты на 3,5 мин. Материал помещают на фильтровальную бумагу для высушивания, затем переносят в раствор прочного зеленого FCF. Состав раствора: 0,03 г прочного зеленого FCF смешивают с 0,9 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 400 мл дистиллированной воды. Через 1,5 мин трансплантат для иридопластики споласкивают 0,75% раствором уксусной кислоты и помещают их в 0,75% раствор уксусной кислоты на 3,5 мин. Окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта 2 раза на 25 мин, затем в 76% раствор этилового спирта на 15 мин, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта. Трансплантат для иридопластики окрашивается в различные оттенки зелёного цвета с фрагментами фиолетового цвета. Подготовленный трансплантат для иридопластики имеет двойное окрашивание в виде участков фиолетового и зелёного цвета. Далее проводят анализ и подбирают окрашенный трансплантат для иридопластики под цвет радужек глаза.

Пример 2. Для получения трансплантата для иридопластики аллогенного происхождения, окрашенного в фиолетово-зелёный цвет, его помещают в 90% раствор этилового спирта 2 раза по 5 мин, затем переносят в раствор резорцин-фуксина на 15 мин. Раствор резорцин-фуксина готовят заранее, для чего сначала смешивают 0,35 г фуксина и 0,75 г резорцина с 60 мл дистиллированной воды (раствор А). Затем смешивают 1,65 г хлористого железа с 12,5 мл дистиллированной воды (раствор Б). Раствор А доводят до кипения и прибавляют к нему раствор Б, кипятят 5 мин, после охлаждения раствора осадок собирают на фильтр, заливают его 100 мл 96% раствора этилового спирта, доводят до кипения, остужают, добавляют 0,85 мл концентрированной HCl. После выдержки в растворе в течение 25 мин трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и переносят в 1,15% раствор уксусной кислоты на 7,5 мин. Материал помещают на фильтровальную бумагу для высушивания, затем переносят в раствор прочного зеленого FCF. Состав раствора: 0,12 г прочного зеленого FCF смешивают с 1,35 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 700 мл дистиллированной воды. Через 5 мин трансплантат для иридопластики споласкивают 1,25% раствором уксусной кислоты и помещают его в 1,25% раствор уксусной кислоты на 7,5 мин. Окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта 2 раза на 35 мин, затем в 76% раствор этилового спирта на 35 мин, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта. Трансплантат для иридопластики окрашивается в различные оттенки зелёного цвета с фрагментами фиолетового цвета. Подготовленный нами трансплантат для иридопластики имеет двойное окрашивание в виде участков фиолетового и зелёного цвета. Далее проводят анализ и подбирают окрашенный трансплантат для иридопластики под цвет радужек глаза.

В эксперименте на лабораторных животных была исследована токсичность окрашенных трансплантатов для иридопластики предлагаемыми красителями в виде раствора резорцин-фуксина и раствора прочного зелёного FCF. Было получено значение ЛД₅₀>5 г/кг при введении в желудок крысам, что позволяет отнести эти трансплантаты к IV классу опасности веществ "мало токсичные и мало опасные".

Краситель прочного зелёного FCF в условиях однократного подкожного введения 0,5 мл раствора животным не вызывает их гибели, что позволяет отнести его по степени воздействия на организм к IY классу опасности веществ "мало токсичные и мало опасные".

При ежедневных инстилляциях на роговицу кроликам и крысам в течение 14 суток раствора прочного зелёного FCF не выявлено признаков интоксикации, изменения внешнего вида, отклонений в поведении, двигательной активности и динамики увеличения массы тела животных. Также оставались в норме содержание в сыворотке крови общего белка, глюкозы, холестерина, не отличалось от контрольного количества содержания эритроцитов и лейкоцитов в крови.

Полученные трансплантаты из биологических тканей для иридопластики позволяют полноценно восстановить анатомическую целостность радужки глаза, достигнуть функционального эффекта, правильно сформировать зрачок и повысить остроту зрения за счет уменьшения светорассеивания, исчезновения светобоязни, создают надежную преграду между стекловидным телом и передней камерой, благодаря чему уменьшается опасность послеоперационной отслойки сетчатки.

Преимуществом предлагаемого способа подготовки трансплантатов для иридопластики является то, что он не требует дорогостоящего оборудования и реактивов, работы высококвалифицированного специалиста, технологичен, нетрудоемок, позволяет сделать большой запас пластического материала, обладает по сравнению с прототипом следующими преимуществами: ареактивностью в послеоперационном периоде, отсутствием аллергических, иммунологических и воспалительных реакций, простотой получения окрашенных трансплантатов для иридопластики, большим выходом конечного продукта, большим сроком годности, меньшей себестоимостью, длительным и стойким сохранением косметического эффекта в послеоперационный период.

Изобретение относится к медицине. Раскрыт способ подготовки трансплантатов для иридопластики, заключающийся в том, что трансплантат из биологических тканей для иридопластики помещают в 90% раствор этилового спирта, далее окрашивают в растворе резорцин-фуксина, затем раствор доводят до кипения и добавляют раствор хлористого железа, затем охлаждают, осадок собирают на фильтр и заливают его 96% раствором этилового спирта, затем раствор снова доводят до кипения, остужают, добавляют концентрированную HCl, после выдержки в растворе трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и помещают в 0,65-1,15% раствор уксусной кислоты, высушивают на фильтровальной бумаге и переносят в раствор прочного зелёного FCF, затем трансплантат для иридопластики промывают 0,75-1,25% раствором уксусной кислоты и помещают его в 0,75-1,25% раствор уксусной кислоты, далее окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта, затем в 76% раствор этилового спирта, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта. Изобретение обеспечивает повышение стойкости косметического эффекта, снижение послеоперационных осложнений. 2 пр.

Способ подготовки трансплантатов для иридопластики, включающий помещение трансплантата биологических тканей для иридопластики в раствор красителя, выдержку в растворе при комнатной температуре, последующее помещение в раствор уксусной кислоты и хранение в растворе этилового спирта, отличающийся тем, что трансплантат из биологических тканей для иридопластики предварительно помещают в 90% раствор этилового спирта два раза по 5 мин, далее его окрашивают в растворе резорцин-фуксина, содержащем 0,35 г фуксина и 0,75 г резорцина в 60 мл дистиллированной воды, в течение 15 мин, затем раствор доводят до кипения и добавляют раствор хлористого железа, содержащий 1,65 г хлористого железа и 12,5 мл дистиллированной воды, далее смесь кипятят 3-5 мин, затем охлаждают, осадок собирают на фильтр и заливают его 100 мл 96% раствора этилового спирта, затем раствор снова доводят до кипения, остужают, добавляют 0,55-0,85 мл концентрированной HCl, после выдержки в растворе в течение 5-25 мин трансплантат для иридопластики промывают сначала в водопроводной воде, затем в дистиллированной воде и помещают в 0,65-1,15% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин, высушивают на фильтровальной бумаге и переносят в раствор прочного зелёного FCF, содержащий 0,03-0,12 г прочного зеленого FCF, 0,9-1,35 мл ледяной уксусной кислоты, 400-700 мл дистиллированной воды, затем через 1,5-5 мин трансплантат для иридопластики промывают 0,75-1,25% раствором уксусной кислоты и помещают его в 0,75-1,25% раствор уксусной кислоты на 3,5-7,5 мин, далее окрашенный трансплантат для иридопластики помещают в 80% раствор этилового спирта 2 раза на 25-35 мин, затем в 76% раствор этилового спирта на 15-35 мин, далее хранят в консерванте - 76% растворе этилового спирта.