Способ подготовки зимозана для иммунологических исследований Советский патент 1986 года по МПК G01N1/30 A61B10/00 

Изобретение относится к окрашиванию биологических образцов, используемых в кли шческой и экспериментальной иммунологии.

Целью изобретения является повьше ние контрастности частиц зимозана в розеткообразугащих структурах за счет окраски их генцианвиолетом при температуре кипения в течение 1-2 с

Способ осуществляют следующим образом.

К осадку зимозана, полученного

центрифугированием 5 мл 0,1%-ной взвеси зимозана в течение 5 мин при 200 g, добавляют 0,5 мл 10%-ного спиртового раствора красителя (ген- цианвиолет), окраску проводят при температуре кипения в течение 1-2 с, затем промывают 2-3 раза дистиллированной водой центрифугированием в течение 3 мин при 200 g, Полученный осадок заливают 1 мл раствора Люголя ресуспендируют и доводят до -кипения, кипятят 1-2 с, промывают 96-градусным этанолом 2-3 раза до полного просветления надосадочной жидкости центрифугированием в течение 3 мин при 200 g и снова в том же режиме промывают 2-3 раза дистиллированной водой. Полученный осадок докрашивают I мл карболового фуксина Циля в течение 2 мин при 70-80°С, вновь промывают в прежнем режиме 2-3 раза физиологическим раствором хлорида натрия и готовят в нем же 0,1%-ную суспензию окрашенного в фиолетовый цвет зимозана. Процесс окрашивания занимает 30 мин.

Редактор Н. Швьщкая

Техред В.Кадар

Корр Подп

3281/43Тираж 778

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

379432

Пример 1. У больного аллер- годерматозом в стадии ремиссии при определении рецепторов иммуноглобули- новой природы по известному способу 5 было выявлено 38,5% несущих эти рецепторы лимфоцитов, а при использовании предварительно окрашенного зимозана по предлагаемому способу - 40%.

П р и м е р 2, При исследовании o {функционального состояния основных популяций иммунокомпетентных клеток у здорового человека по известному способу было выявлено 9% В-лимфоци- тов, а при использовании окрашенного 5 зимозана по предлагаемому способу - 9,5%.

Частицы зимозана в процессе окрашивания приобретают интенсивный фиолетовый цвет. Полученная окраска 20 прочная и не смьтается спиртами, альдегидами, ксилолом и ацетоном. Процесс окрашивания не токсичен.

Формула изобретения

Способ подготовки зимозана для иммунологических исследований путем его окраски красителем и промывки в воде, отличающийся тем, что, с целью повьш1ения контрастности частиц зимозана в розеткообразующих структурах, окраску проводят генцианвиолетом при температуре кипения в течение 1-2 с, далее обрабатывают раствором Люголя при той же температуре в течение 1-2 с, затем последовательно промывают в 96-градусном спирте и воде.

Корректор Г. Решетник Подписное

Изобретение относится к области окрашивания биологических образцов. Цель изобретения - повышение контрастности частиц зимозана в розеткообра- зующих структурах за счет окраски их генцианвиолетом при температуре кипения. К осадку зимозана добавляют 10%- - ный спиртовый раствор генцианвиолета. Окраску проводят при температуре кипения в течение 1-2 с. Затем во время центрифугирования промьшают 2-3 раза дистиллированной водой. Ползгчен- ный осадок заливают раствором Люголя, ресуспендируют, кипятят 1-2 с, промывают 96-градусным этанолом 2-3 раза. Затем промывают дистиллированной .водой. Осадок докрашивают карболовым фуксином Циля, промывают физиологическим раствором и готовят 0,1%-ную суспензию зимозана, окрашенную в фиолетовый цвет. с (О ел I ю DO vj CD 4 СО