Способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки на основе анализа содержания ИЛ-6 в стекловидном теле Российский патент 2025 года по МПК G01N33/68 A61F9/07 G01N33/483 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, а именно к способу прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки.

Одним из осложнений витрэктомии в хирургии отслойки сетчатки является макулярный отек, частота возникновения которого составляет от 6 до 34%. Не вызывает сомнения, что развитие макулярного отека после успешной хирургии регматогенной отслойки сетчатки, как и при любой другой патологии, является негативным фактором для функционального результата. Метод удаления внутренней пограничной мембраны доказал свою эффективность в профилактике послеоперационного макулярного отека в эндовитреальной хирургии, которой отдают предпочтение большинство хирургов при отслоившейся сетчатки, особенно в случаях, осложненных пролиферативной витреоретинопатией.

Однако данные литературы демонстрируют часто негативные последствия для функциональных показателей центральной зоны сетчатки. В настоящее время вопрос целесообразности удаления внутренней пограничной мембраны с целью профилактики развития макулярного отека остаётся дискуссионным. В связи с этим, на сегодняшний день представляет значительный научно-практический интерес изучение более широкого спектра предоперационных показателей для прогнозирования риска макулярного отека, изучение особенностей морфометрических показателей центральной зоны сетчатки, а также разработка показаний к пилингу ВПМ при первичном хирургическом вмешательстве при регматогенной отслойки.

В настоящее время известны различные способы прогнозирования макулярного отека (Способ прогнозирования возникновения макулярного отека после факоэмульсификации катаракты: патент RU2448652, Российская Федерация, заявка RU2010148897, заявл. 01.12.2010, опубл. 27.04.2012; Способ прогнозирования прогрессирования диабетической ретинопатии и диабетического макулярного отека: патент RU2500826, Российская Федерация, заявка RU2013106360, заявл. 14.02.2013, опубл. 27.06.2014). При этом известен и способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека после хирургического лечения отслойки сетчкатки (Способ прогнозирования развития макулярного отека после микроинвазивной витрэктомии по поводу отслойки сетчатки: патент RU2724009, Российская Федерация, заявка RU2019136968, заявл. 19.11.2019, опубл. 18.06.2020), основанный на проведении дооперационного исследования, включающего проведение кинетической периметрии и вычисление суммарного значения восьми меридианов поля зрения, а также включающего определение количестве отслоенных квадрантов сетчатки и расчет вероятности развития макулярного отека по формуле.

В рамках научной работы, лежащей в основе заявляемого изобретения, были изучены различные факторы, способные быть предикторами макулярного отека при хирургическом лечении отслойки сетчатки. В рамках проведенных исследований наиболее перспективным фактором показалось содержание ИЛ-6 в стекловидном теле.

Роль факторов воспаления (цитокинов) в патофизиологии возникновения макулярного отека не вызывает сомнения. Связь с ИЛ-6 с процессами, характерными для макулярного отека, а также использование такого фактора в качестве предиктора макулярного отека известны из разных источников (Улучшенные антитела против il-6: Евразийский патент EA035199, заявка EA201791005, заявл. 29.09.2017, опубл. 14.05.2020; Shimizu E, Funatsu H, Yamashita H, Yamashita T, Hori S. Plasma level of interleukin-6 is an indicator for predicting diabetic macular edema. Jpn J Ophthalmol. 2002 Jan-Feb;46(1):78-83. doi: 10.1016/s0021-5155(01)00452-x. PMID: 11853719; Funatsu H, Yamashita H, Noma H, Shimizu E, Mimura T, Hori S. Prediction of macular edema exacerbation after phacoemulsification in patients with nonproliferative diabetic retinopathy. J Cataract Refract Surg. 2002 Aug;28(8):1355. doi: 10.1016/s0886-3350(02)01243-9. PMID: 12160804). Также известно применение антитела, которое специфически связывается с рецептором IL-6, для лечения макулярного отека (Композиции, содержащие антитела к IL6R, для лечения увеита и макулярного отека, и способы их применения: патент RU2747193, Российская Федерация, заявка RU2018120106, заявл. 03.11.2016, опубл. 29.04.2021).

При этом следует отметить, что наиболее актуальный способ хирургии отслойки сетчатки подразумевает удаление стекловидного тела и замещение его силиконовым маслом для тампонады витреальной полости (Hiroki Kaneko et. al. Cytokine profiling in the subsilicone oil fluid after vitrectomy surgeries for refractory retinal diseases. Publ. 25.05.2017, Scientific Reports | 7: 2640 | DOI:10.1038/s41598-017-03124-x). Известно, что повышение ИЛ-6 в стекловидном теле может свидетельствовать о наличии заболевания глаза (Антагонисты ИЛ-6 и их применение: патент RU2670943, Российская Федерация, заявка RU2015121755, заявл. 08.11.2013, опубл. 25.10.2018). Специалисты отмечают большую перспективу анализа уровня ИЛ-6 в диагностике и прогнозировании заболеваний органа зрения (Трунов А.Н. и др. Цитокины и факторы роста в патогенезе пролиферативной диабетической ретинопатии. Офтальмохирургия № 1 2017).

На сегодняшний день не известны возможные для применения в клинической практике способы прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, основанные на анализе содержания ИЛ-6 в стекловидном теле.

Технический результат состоит в обеспечении возможности точного прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки на основе содержания ИЛ-6 в стекловидном теле.

Технический результат достигается тем, что в способе прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, включающий её цитокинового профиля стекловидного тела, причем, если содержание ИЛ-6 в стекловидном теле превышает 149,65 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как высокий, а если содержание ИЛ-6 в стекловидном теле равно или меньше 149,65 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как низкий.

Предложенная методика позволяет точно прогнозировать риск возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки.

Заявляемый способ осуществляют следующим образом.

Хирургическое вмешательство в объеме микроинвазивной задней витреоэктомии с использованием одноразовых наборов инструментов 25Gа производият с помощью прибора EVA Cataract and Vitrectomy system (Dorc, Нидерланды) на микроскопе OPMI Lumera 700 с бесконтактной системой визуализации глазного дна фирмы «Carl Zeiss». Под местной или внутривенной анестезией производят установку трёх портов в 4 мм от лимба в проекции плоской части цилиарного тела. В один из портов устанавливают подачу стерильного воздуха вместо БСС с целью забора неразведенного стекловидного тела. Два других использовуют для манипуляций осветителем, витреотомом, пинцетом и экструзионной канюли. Удаление стекловидного тела начинают в центральных отделах слоев стекловидного тела в направлении диска зрительного нерва (ДЗН) замещая его на воздух в объеме 1 мл. Далее осуществляется подача БСС. Окрашивание ЗГМ или ее остатков осуществляют с помощью триамцинолона ацетонида, при ее наличии производят отделение. Далее проводят заполнение витреальной полости ПФОС до нижней границы разрыва сетчатки и заменяют БСС на воздух. В воздушной среде производят удаление базиса стекловидного тела. Затем производят последовательную замену ПФОС на воздух и эндолазеркоагуляцию периферических разрывов и зон дистрофии. Операцию заканчивают тампонадой витреальной силиконовым маслом вязкостью 1300 сСТ. Выполняют удаление портов и ушиванием склеротомий (полигликолид, 8-0). Пациенту рекомендуют положение лицом вниз на трое суток.

Извлеченное в ходе операции стекловидное тело исследуют иммуноферментным анализом с целью определения количественного содержания в отобранной жидкости Интерлейкина-6. Если содержание ИЛ-6 в стекловидном теле превышает 149,65 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют, как высокий, а если содержание ИЛ-6 стекловидном теле равно или меньше 149,65 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как низкий.

Результаты данного исследования позволяют скорректировать послеоперационную противоспалительную или антиангиогенную терапию. Также в перспективе, полученные данные позволят изменить тактику подготовки пациентов перед лечением отслойки сетчатки или изменить хирургические подходы с целью получения лучшего анатомического и функционального результата.

Заявляемое изобретение поясняется примерами.

Пример 1. Исследование влияния количественного содержания интерлейкина 6 в стекловидном теле.

В соответствии с задачей исследования проводилось определение концентрации содержания цитокинов методом ИФА в стекловидном теле на этапе первичного вмешательства.

Результаты количественного содержания цитокинов в стекловидном теле представлены в таблице 1.

Таблица 1. Количественное содержание исследуемых цитокинов в стекловидном теле пациентов с регматогенной отслойкой сетчатки

М±σ Min Max ГИФ1 α, пг/мл 20,50±12,30 0,00 37,32 ИЛ-4, пг/мл 2,37±1,04 0,29 4,67 ИЛ-6, пг/мл 151,19±182,92 6,92 684,25 ИЛ-17α, пг/мл 0,00±0,00 0,00 0,00 ТФР-β1, пг/мл 54,22±48,61 0,00 16,94 VEGF, пг/мл 44,84±82,79 0,20 312,41 ФНО-α, пг/мл 1,50±1,01 0,00 3,60

В результате проведенного анализа содержания цитокинов в стекловидном теле получены их количественные значения для всех факторов, за исключением ИЛ-17α. Полученные в исследовании данные соответствуют результатам Justus G. Garweg с соавторами (2019) при исследовании стекловидного тела пациентов с отслойкой сетчатки. Так, содержание тестируемых биомаркеров составило (М±σ): ИЛ-6 -121,9±343,5 пг/мл, ИЛ-4 - 3,0±4.8 пг/мл, ТФР-β1- 100,4±220,7 пг/мл, а ФНО-α – 13,7±18,9 пг/мл, при продолжительности отслойки сетчатки 7,0±6,5 дней, в то время как в данной работе средняя продолжительность отслойки сетчатки у пациентов составила 14,1±7,2 дней, что не может не сказаться на динамике количественных показателей.

Учитывая основную цель исследования, на следующем этапе работы был проведен сравнительный анализ содержания цитокинов в группах пациентов с макулярным отеком и без него после проведенного лечения. Данные представлены в таблице 2.

Таблица 2. Сравнительный анализ количественного содержания цитокинов в стекловидном теле в исследуемых группах с наличием макулярного отека и без него

Цитокин Группа без отека, (n=8)
М±σ Группа с отеком, (n=20)
М±σ Достоверность, р ГИФ-1α, пг/мл 22,07±11,64 16,60±14,14 0,61 ИЛ-4, пг/мл 2,26±1,17 2,63±0,60 0,47 ИЛ-6, пг/мл 75,04±58,82 341,57±251,51 0,03* ТФР-β1, пг/мл 23,36±47,25 45,46±52,17 0,41 VEGF, пг/мл 39,28±78,09 42,07±59,50 0,41 ФНО-α, пг/мл 1,39±0,84 1,76±1,39 0,76

* - статистически значимая разница при p<0,05

Установлено статистически значимое увеличение уровня ИЛ-6 в группе пациентов с наличием макулярного отека (р=0,03), относительно других показателей статистически значимых связей не выявлено.

На фиг. 1 представлена диаграмма рассеяния показателя IL-6 в группе без и с отеком.

Полученные данные позволяют констатировать, что количественное содержание ИЛ-6, который является провоспалительным цитокином, в стекловидном теле может являться предиктором развития макулярного отека в послеоперационном периоде.

Для оценки прогностического качества этого показателя, был проведен ROC-анализ, результаты которого представлены на фиг. 2. Площадь под ROC кривой для показателя IL-6 составила 0,896(0,744;1,0), что говорит об «очень хорошем» прогностическом качестве показателя.

По ROC-кривой был определен оптимальный порог отсечения как значение IL-6, при котором достигается максимум суммы чувствительности и специфичности при определении отека. Оптимальное пороговое значение составило IL-6=149,65 пг/мл. При данном пороге отсечения достигается максимально возможные чувствительность = 100%, специфичность = 81,3% и высокая точность = 84,2%.

Пример 2.

Пациентка Т. в возрасте 71 год поступила с диагнозом «Регматогенная отслойка сетчатки. Начальная возрастная катаракта» и исходной МКОЗ= 0,005 на левом глазу. На правом глазу диагноз «Начальная возрастная катаракта», МКОЗ= 0,8.

По результатам диагностического обследования выявлена высокая субтотальная отслойка сетчатки (захватывающая более 3-х квадратов) в нижней и наружной половине, клапанный разрыв на 4 ч., макула отслоена.

Пациентке было проведено хирургическое лечение - задняя 25- гейджевая витрэктомия, круговое вдавление склеры, эндолазеркоагуляция с тампонадой силиконовым маслом, с полным прилегание сетчатки в послеоперационном периоде.

После операции провели иммуноферментный анализ стекловидного тела.

Цитокиновый профиль стекловидного тела при завершении силиконовой тампонады представлен в таблице 3.

Таблица 3. Цитокиновый профиль стекловидного тела пациентки Т.

ГИФ1α
пг/мл ИЛ-4
пг/мл ИЛ-6
пг/мл ИЛ-17
пг/мл ТФР-β1
пг/мл VEGF
пг/мл ФНО-α
пг/мл 5.46 45.40 189.50 0.0 297.45 570.36 19.28

У данной пациентки количественное содержание ИЛ-6 превышает пороговое прогностическое значение (>149,65 пг/мл). Риск возникновения макулярного отека определили как высокий.

При выполнении ОКТ через 2 месяца после хирургического лечения отслойки сетчатки, перед удалением силикона, было выявлено утолщение сетчатки в макулярной области с кистозными изменениями. Прогноз согласно заявляемому способу оказался верным.

Пример 3.

Пациент А. в возрасте 65 лет поступил с диагнозом «Регматогенная отслойка сетчатки. Начальная возрастная катаракта» и исходной МКОЗ= 0,004 на левом глазу. На правом глазу диагноз «Начальная возрастная катаракта», МКОЗ= 0,7.

По результатам диагностического обследования выявлена высокая субтотальная отслойка сетчатки (захватывающая более 3-х квадратов) в нижней и наружной половине, клапанный разрыв на 4 ч., макула отслоена.

Пациентке было проведено хирургическое лечение - задняя 25- гейджевая витрэктомия, круговое вдавление склеры, эндолазеркоагуляция с тампонадой силиконовым маслом, с полным прилеганием сетчатки в послеоперационном периоде.

После операции провели иммуноферментный анализ стекловидного тела.

Цитокиновый профиль стекловидного тела при завершении силиконовой тампонады представлен в таблице 4.

Таблица 4. Цитокиновый профиль стекловидного тела пациента А.

ГИФ1α
пг/мл ИЛ-4
пг/мл ИЛ-6
пг/мл ИЛ-17
пг/мл ТФР-β1
пг/мл VEGF
пг/мл ФНО-α
пг/мл 6.01 139.59 0.0 277.01 521.12 17.76

У данного пациента количественное содержание ИЛ-6 ниже порогового прогностического значения (<149,65 пг/мл). Риск возникновения макулярного отека определили как низкий.

При выполнении ОКТ через 2 месяца после хирургического лечения отслойки сетчатки, перед удалением силикона, было выявлено отсутствие признаков макулярного отека. Прогноз согласно заявляемому способу оказался верным.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки. Проводят определение содержания ИЛ-6 в стекловидном теле. При содержании ИЛ-6 в стекловидном теле выше 149,65 пг/мл прогнозируют высокий риск возникновения макулярного отека. При содержании ИЛ-6 в стекловидном теле, равном или меньше 149,65 пг/мл, прогнозируют низкий риск возникновения макулярного отека. Способ обеспечивает возможность точного прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки за счет определения содержания ИЛ-6 в стекловидном теле. 2 ил., 4 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, включающий определение содержания ИЛ-6 в стекловидном теле, причем при содержании ИЛ-6 в стекловидном теле выше 149,65 пг/мл прогнозируют высокий риск возникновения макулярного отека, а при содержании ИЛ-6 в стекловидном теле, равном или меньше 149,65 пг/мл, прогнозируют низкий риск возникновения макулярного отека.