Способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки на основе анализа содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости Российский патент 2025 года по МПК G01N33/68 A61F9/07 G01N33/487 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, а именно к способу прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки на основе анализа содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости.

Одним из осложнений витрэктомии в хирургии отслойки сетчатки является макулярный отек, частота возникновения которого составляет от 6 до 34%. Не вызывает сомнения, что развитие макулярного отека после успешной хирургии регматогенной отслойки сетчатки, как и при любой другой патологии, является негативным фактором для функционального результата. Метод удаления внутренней пограничной мембраны доказал свою эффективность в профилактике послеоперационного макулярного отека в эндовитреальной хирургии, которой отдают предпочтение большинство хирургов при отслоившейся сетчатки, особенно в случаях, осложненных пролиферативной витреоретинопатией.

Однако данные литературы демонстрируют часто негативные последствия для функциональных показателей центральной зоны сетчатки. В настоящее время вопрос целесообразности удаления внутренней пограничной мембраны с целью профилактики развития макулярного отека остаётся дискуссионным. В связи с этим, на сегодняшний день представляет значительный научно-практический интерес изучение более широкого спектра предоперационных показателей для прогнозирования риска макулярного отека, изучение особенностей морфометрических показателей центральной зоны сетчатки, а также разработка показаний к пилингу ВПМ при первичном хирургическом вмешательстве при регматогенной отслойки.

В настоящее время известны различные способы прогнозирования макулярного отека (Способ прогнозирования возникновения макулярного отека после факоэмульсификации катаракты: патент RU2448652, Российская Федерация, заявка RU2010148897, заявл. 01.12.2010, опубл. 27.04.2012; Способ прогнозирования прогрессирования диабетической ретинопатии и диабетического макулярного отека: патент RU2500826, Российская Федерация, заявка RU2013106360, заявл. 14.02.2013, опубл. 27.06.2014). При этом известен и способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека после хирургического лечения отслойки сетчкатки (Способ прогнозирования развития макулярного отека после микроинвазивной витрэктомии по поводу отслойки сетчатки: патент RU2724009, Российская Федерация, заявка RU2019136968, заявл. 19.11.2019, опубл. 18.06.2020), основанный на проведении дооперационного исследования, включающего проведение кинетической периметрии и вычисление суммарного значения восьми меридианов поля зрения, а также включающего определение количестве отслоенных квадрантов сетчатки и расчет вероятности развития макулярного отека по формуле.

В рамках научной работы, лежащей в основе заявляемого изобретения, были изучены различные факторы, способные быть предикторами макулярного отека при хирургическом лечении отслойки сетчатки. В рамках проведенных исследований наиболее перспективным фактором показалось содержание ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости.

Роль факторов воспаления (цитокинов) в патофизиологии возникновения макулярного отека не вызывает сомнения. Связь с ИЛ-6 с процессами, характерными для макулярного отека, а также использование такого фактора в качестве предиктора макулярного отека известны из разных источников (Улучшенные антитела против il-6: Евразийский патент EA035199, заявка EA201791005, заявл. 29.09.2017, опубл. 14.05.2020; Shimizu E, Funatsu H, Yamashita H, Yamashita T, Hori S. Plasma level of interleukin-6 is an indicator for predicting diabetic macular edema. Jpn J Ophthalmol. 2002 Jan-Feb;46(1):78-83. doi: 10.1016/s0021-5155(01)00452-x. PMID: 11853719; Funatsu H, Yamashita H, Noma H, Shimizu E, Mimura T, Hori S. Prediction of macular edema exacerbation after phacoemulsification in patients with nonproliferative diabetic retinopathy. J Cataract Refract Surg. 2002 Aug;28(8):1355. doi: 10.1016/s0886-3350(02)01243-9. PMID: 12160804). Также известно применение антитела, которое специфически связывается с рецептором IL-6, для лечения макулярного отека (Композиции, содержащие антитела к IL6R, для лечения увеита и макулярного отека, и способы их применения: патент RU2747193, Российская Федерация, заявка RU2018120106, заявл. 03.11.2016, опубл. 29.04.2021).

При этом следует отметить, что наиболее актуальный способ хирургии отслойки сетчатки подразумевает удаление стекловидного тела и замещение его силиконовым маслом для тампонады витреальной полости. Как правило, срок нахождения силиконового масла в витреальной полости составляет от нескольких недель до шести и более месяцев, затем его удаляют. При этом между силиконовым маслом и сетчаткой в нижних отделах за вышеуказанное время успевает образоваться субсиликоновая жидкость, которая представляет интерес для исследования воспалительных цитокинов и последующей возможной корректировки тактики лечения (Hiroki Kaneko et. al. Cytokine profiling in the subsilicone oil fluid after vitrectomy surgeries for refractory retinal diseases. Publ. 25.05.2017, Scientific Reports | 7: 2640 | DOI:10.1038/s41598-017-03124-x).

При этом известен способ, в ходе которого проводят исследования субсиликоновой жидкости с целью определения содержания цитокинов, в том числе ИЛ-6 (Shimizu H, Kaneko H, Suzumura A, Takayama K, Namba R, Funahashi Y, Kataoka K, Iwase T, Hwang SJ, Ito S, Yamada K, Ueno S, Ito Y, Terasaki H. Biological Characteristics of Subsilicone Oil Fluid and Differences With Other Ocular Humors. Transl Vis Sci Technol. 2019 Feb 28;8(1):28. doi: 10.1167/tvst.8.1.28. PMID: 30842889; PMCID: PMC6398349). В ходе осуществления данного способа для обзора используют хирургический микроскоп с широкоугольной системой Resight (Германия), а для извлечения субсиликоновой жидкости используют шприц с медицинской трубкой, иглой 25G и дополнительных соединительных элементов. Для извлечения хирург вводит кончик иглы в витреальную полость над зрительным нервом и ассистент оттягивает поршень шприца для забора субсиликоновой жидкости. Затем проводят исследование субсиликоновой жидкости на предмет содержания цитокинов, в том числе ИЛ-6. Авторы исследования говорят о возможности использования такого метода в диагностике различных патологий, например, макулярного разрыва. Аналогичные способы были раскрыты и в других исследованиях (Hideyuki Shimizu et al. Biological Characteristics of Subsilicone Oil Fluid and Differences With Other Ocular Humors. Transl Vis Sci Technol. 2019 Jan; 8(1): 28. Published online 2019 Feb 28. doi: 10.1167/tvst.8.1.28).

На сегодняшний день не известны возможные для применения в клинической практике способы прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, основанные на анализе содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости.

Технический результат состоит в обеспечении возможности точного прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки на основе содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости.

Технический результат достигается тем, что в способе прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, включающий выделения субсиликоновой жидкости из витреальной полости и анализ её цитокинового профиля, после чего если содержание ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости превышает 199 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как высокий, а если содержание ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости (Sub-silicone oil) равно или меньше 199 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как низкий.

Предложенная методика позволяет точно прогнозировать риск возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки.

Заявляемое изобретение поясняется дополнительными материалами, где на фиг. 1 представлено фото набора, используемого в заявляемом способе для отбора субсиликоновой жидкости.

Заявляемый способ осуществляют следующим образом.

Перед началом операции пациент находится 15-20 минут на операционном столе. Анестезия: местная капельная, субтеноново вводятся смесь 2% лидокаина и хирокаина. Устанавливают порты 25G по стандартной технологии. Подачу сбалансированного солевого раствора (БСС) не производят. Систему для забора субсиликоновой жидкости формируют из компонентов линии подачи БСС (как показано на фиг. 1). Для этого к экструзионной канюле 25G подсоединяют шприц с двумя обхватываемыми/обхватывающими коннекторами. В один из портов устанавливают световод, в другой – экструзионная канюля 25G с силиконовым кончиком. Канюлю подводят к поверхности субсиликоновой жидкости. Затем по просьбе хирурга ассистент создаёт отрицательной давление в шприце. Таким образом, происходит отбор субсиликоновой жидкости.

Далее полученную жидкость исследуют иммуноферментным анализом с целью определения количественного содержания в отобранной жидкости Интерлейкина-6. Если содержание ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости превышает 199 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как высокий, а если содержание ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости равно или меньше 199 пг/мл, риск возникновения макулярного отека определяют как низкий.

Результаты данного исследования позволяют скорректировать послеоперационную противоспалительную или антиангиогенную терапию. Также в перспективе, полученные данные позволят изменить тактику подготовки пациентов перед лечением отслойки сетчатки или изменить хирургические подходы с целью получения лучшего анатомического и функционального результата.

Заявляемое изобретение поясняется примерами.

Пример 1. Исследование влияния количественного содержания интерлейкина 6 в субсиликоновой жидкости.

Анализ количественных показателей цитокинов проводили у 28 пациентов (28 глаз), прооперированных по поводу регматогенной отслойки сетчатки в Санкт-Петербургском филиале ФГАУ НМИЦ МНТК «Микрохирургия глаза» с 2019 по 2022 год. Все пациенты входили в группу риска по развитию макулярного отека согласно ранее установленным предикторам, глава 3.1 и 3.2. Однако макулярный отек развился у 20 пациентов (71,4%), что послужило поводом для более детального анализа ранее предложенных предикторов на основе клинико-инструментальных исследований.

В соответствии с задачей исследования изучалось количественное содержание цитокинов в стекловидном теле на этапе первичного вмешательства.

Результаты количественного содержания цитокинов в стекловидном теле представлены в таблице 1.

Таблица 1 – количественное содержание цитокинов в стекловидном теле

М±σ Min Max ГИФ1 α, пг/мл 20,50±12,30 0,00 37,32 ИЛ-4, пг/мл 2,37±1,04 0,29 4,67 ИЛ-6, пг/мл 151,19±182,92 6,92 684,25 ИЛ-17α, пг/мл 0,00±0,00 0,00 0,00 ТФР-β1, пг/мл 54,22±48,61 0,00 16,94 VEGF, пг/мл 44,84±82,79 0,20 312,41 ФНО-α, пг/мл 1,50±1,01 0,00 3,60

В результате проведенного анализа содержания цитокинов в стекловидном теле получены количественные значения, за исключением ИЛ-17α. Полученные данные соответствуют данным полученным Justus G. Garweg с соавторами (2019) при исследовании стекловидного тела пациентов с отслойкой сетчатки. Так, содержание следующих цитокинов составило (М±σ): ИЛ-6 -121,9±343,5 пг/мл, ИЛ-4 - 3,0±4.8 пг/мл, ТФР-β1- 100,4±220,7 пг/мл, а ФНО-α – 13,7±18,9 пг/мл, при продолжительности отслойки сетчатки 7,0±6,5 дней, тогда как в данной работе средняя продолжительность отслойки сетчатки у пациентов составила 14,1±7,2 дней, что не может не сказаться на динамике количественных показателей.

Учитывая основную цель исследования, на следующем этапе работы был проведен сравнительный анализ содержания цитокинов в группах пациентов с макулярным отеком и без него после проведенного лечения. Данные представлены в таблице 2.

Таблица 2. Сравнительный анализ количественного содержания цитокинов в стекловидном теле в исследуемых группах с наличием макулярного отека и без него

Цитокин Группа без отека, (n=8)
М±σ Группа с отеком, (n=20)
М±σ р -достоверность ГИФ-1α, пг/мл 22,07±11,64 16,60±14,14 0,61 ИЛ-4, пг/мл 2,26±1,17 2,63±0,60 0,47 ИЛ-6, пг/мл 75,04±58,82 341,57±251,51 0,01* ТФР-β1, пг/мл 23,36±47,25 45,46±52,17 0,41 VEGF, пг/мл 39,28±78,09 42,07±59,50 0,41 ФНО-α, пг/мл 1,39±0,84 1,76±1,39 0,76

* - статистически значимая разница при p<0,05

Установлено статистически достоверное увеличение уровня ИЛ-6 в группе пациентов с наличием макулярного отека (р=0,01), относительно других показателей статистически значимых корреляционных связей не выявлено, что возможно связано с малой численностью групп.

Полученные данные позволяют констатировать, что количественное содержание ИЛ-6 в стекловидном теле может являться предиктором развития макулярного отека в послеоперационном периоде.

Пример 2. Клинический случай.

Пациентка Т. в возрасте 71 года поступила с диагнозом «Регматогенная отслойка сетчатки. Начальная возрастная катаракта» и исходной МКОЗ= 0,005 на левом глазу. На правом глазу диагноз «Начальная возрастная катаракта», МКОЗ= 0,8.

По результатам диагностического обследования выявлена высокая субтотальная отслойка сетчатки (захватывающая более 3-х квадратов) в нижней и наружной половине, клапанный разрыв на 4 ч., макула отслоена. Ультразвуковая картина отслойки сетчатки левого глаза представлена на фиг. 2. Данные кинетической периметрии перед витрэктомией приведены на фиг. 3.

Пациентке было проведено хирургическое лечение - задняя 25- гейджевая витрэктомия, круговое вдавление склеры, эндолазеркоагуляция с тампонадой силиконовым маслом, с полным прилегание сетчатки в послеоперационном периоде.

Через 2 месяца, перед завершением силиконовой тампонады, МКОЗ левого глаза = 0.25 Данные кинетической периметрии перед удалением силиконового масла приведены на фиг. 4.

Цитокиновый профиль субсиликоновой жидкости при завершении силиконовой тампонады представлен в таблице 3.

Таблица 3. Цитокиновый профиль субсиликоновой жидкости пациентки Т.

ГИФ1α
пг/мл ИЛ-4
пг/мл ИЛ-6
пг/мл ИЛ-17
пг/мл ТФР-β1
пг/мл VEGF
пг/мл ФНО-α
пг/мл 5.46 45.40 744.40 0.0 297.45 570.36 19.28

У данной пациентки количественное содержание ИЛ-6 превышает пороговое прогностическое значение (>199 пг/мл). Риск возникновения макулярного отека определили как высокий.

При выполнении ОКТ через 2 месяца после хирургического лечения отслойки сетчатки, перед удалением силикона, было выявлено утолщение сетчатки в макулярной области с кистозными изменениями. ОКТ снимок пациентки Т. через 2 месяца после операции представлен на фиг. 5. Таким образом, прогноз с помощью заявляемого способа оказался верным.

Пример 3. Клинический случай.

Пациент А. в возрасте 65 года поступил с диагнозом «Регматогенная отслойка сетчатки. Начальная возрастная катаракта» и исходной МКОЗ= 0,004 на левом глазу. На правом глазу диагноз «Начальная возрастная катаракта», МКОЗ= 0,7.

По результатам диагностического обследования выявлена высокая субтотальная отслойка сетчатки (захватывающая более 3-х квадратов) в нижней и наружной половине, клапанный разрыв на 4 ч., макула отслоена.

Пациентке было проведено хирургическое лечение - задняя 25- гейджевая витрэктомия, круговое вдавление склеры, эндолазеркоагуляция с тампонадой силиконовым маслом, с полным прилеганием сетчатки в послеоперационном периоде.

Через 2 месяца, перед завершением силиконовой тампонады, МКОЗ левого глаза = 0,24.

Цитокиновый профиль субсиликоновой жидкости при завершении силиконовой тампонады представлен в таблице 4.

Таблица 4. Цитокиновый профиль субсиликоновой жидкости пациента А.

ГИФ1α
пг/мл ИЛ-4
пг/мл ИЛ-6
пг/мл ИЛ-17
пг/мл ТФР-β1
пг/мл VEGF
пг/мл ФНО-α
пг/мл 6.01 43.61 187.53 0.0 277.01 521.12 17.76

У данного пациента количественное содержание ИЛ-6 ниже порогового прогностического значения (<199 пг/мл).

При выполнении ОКТ через 2 месяца после хирургического лечения отслойки сетчатки, перед удалением силикона, было выявлено отсутствие признаков макулярного отека.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки. Осуществляют выделение субсиликоновой жидкости из витреальной полости и определение содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости. При содержании ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости выше 199 пг/мл прогнозируют высокий риск возникновения макулярного отека. При содержании ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости, равном или меньше 199 пг/мл, прогнозируют низкий риск возникновения макулярного отека. Способ обеспечивает возможность точного прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки за счет определения содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости. 5 ил., 4 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования риска возникновения макулярного отека в послеоперационном периоде при хирургическом лечении отслойки сетчатки, включающий выделение субсиликоновой жидкости из витреальной полости и определение содержания ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости, и при содержании ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости выше 199 пг/мл прогнозируют высокий риск возникновения макулярного отека, а при содержании ИЛ-6 в субсиликоновой жидкости, равном или меньше 199 пг/мл, прогнозируют низкий риск возникновения макулярного отека.