УСТРОЙСТВО ДЛЯ АВТОМАТИЧЕСКОГО ВЫДЕЛЕНИЯ, ОЧИСТКИ И АМПЛИФИКАЦИИ УЧАСТКОВ ДНК Mycobacterium tuberculosis С РЕГИСТРАЦИЕЙ РЕЗУЛЬТАТОВ В РЕЖИМЕ РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ Российский патент 2025 года по МПК G01N21/64 

Область техники

Изобретение относится к измерительной технике, а именно к устройству для идентификации возбудителя туберкулеза Mycobacterium tuberculosis и нетуберкулезных микобактерий для использования в медицине, молекулярной биологии и биотехнологии с целью дифференциальной диагностики туберкулеза и определения устойчивости микобактерий к антибактериальным препаратам.

Уровень техники

Важной задачей фтизиатрии и общественного здравоохранения в целом является улучшение качества жизни пациентов с туберкулезом, снижение заболеваемости и смертности от туберкулеза. Несмотря на улучшающиеся год от года показатели по числу вновь выявленных случаев туберкулеза, это серьезное инфекционное заболевание остается одной из причин инвалидизации и смертности по всему миру. Весомый вклад в распространение заболеваемости и высокой смертности вносит появление и распространение штаммов микобактерий, устойчивых к действию антибиотиков. По информации ВОЗ глобальным приоритетом борьбы с туберкулезом являются как можно более ранняя диагностика и возможность быстрого определения профиля антибиотикорезистентности выявленных штаммов M. tuberculosis или нетуберкулезных микобактерий. Традиционные лабораторные методы слишком медленные и требуют хорошего оснащения микробиологической или молекулярно-биологической лабораторий, а также высокой квалификации сотрудников, выполняющих анализ. В этой связи новые технологии для быстрого выявления находятся в центре внимания научно-исследовательской работы и разработок, посвященных диагностике туберкулеза.

Из уровня техники известны аппаратные комплексы и приборы для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК M. tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени, состоящие из одноразовых картриджей или пробирок для амплификации ДНК микобактерий и систем пробоподготовки (Jia Mei Hong et al. Point-of-care diagnostic tests for tuberculosis disease. Sci. Transl. Med.14, eabj4124 (2022). DOI:10.1126/scitranslmed.abj4124).

В настоящее время существуют несколько различных технологий амплификации нуклеиновых кислот (НК) в одноразовых картриджах. Эти устройства обычно используются для диагностики инфекций, определения генетических мутаций и других приложений в биологии и медицине.

Использование одноразовых картриджей обеспечивает удобство, безопасность работы с инфицированным биоматериалом и минимизирует риск контаминации образцов, что особенно важно при работе с генетическим материалом. Каждый картридж содержит все необходимые реагенты и матрицы для проведения амплификации НК, что делает процесс быстрым и автоматизированным (Chakravorty S., Simmons A.M., Rowneki M., Parmar H., Cao Y., Ryan J., Banada P.P., Deshpande S., Shenai S., Gall A., Glass J., Krieswirth B., Schumacher S.G., Nabeta P., Tukvadze N., Rodrigues C., Skrahina A., Tagliani E., Cirillo D.M., Davidow A., Denkinger C.M., Persing D., Kwiatkowski R., Jones M., Alland D. The New Xpert MTB/RIF Ultra: Improving Detection of Mycobacterium tuberculosis and Resistance to Rifampin in an Assay Suitable for Point-of-Care Testing. mBio. 2017 Aug 29; 8 (4): e00812-17).

Принцип работы таких устройств может варьироваться в зависимости от технологии, но обычно включает в себя следующие шаги.

1. Подготовка образца. Для проведения анализа в картридже образец собирается и подготавливается. Это может быть ткань, кровь, мокрота, слюна или другие источники генетического материала.

2. Экстракция НК. Для изоляции нуклеиновых кислот из образца в картридже применяются методы экстракции. Это позволяет получить чистую НК для дальнейших реакций.

3. Амплификация (ПЦР). В картридже обычно применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет увеличить количество конкретных участков ДНК, чтобы их можно было обнаружить и проанализировать.

4. Детекция. Картридж или отдельный блок амплификатора может быть оборудован датчиками или специальными метками, которые позволяют обнаружить наличие амплифицированных участков НК. Это может быть оптическая, электрическая или другая технология детекции.

5. Анализ результатов. Полученные данные обрабатываются встроенным программным обеспечением или передаются на компьютер для дальнейшей интерпретации и анализа.

Известен комплект молекулярно-биологических тест-систем, реактивов и аналитических приборов для выявления, идентификации и генетического типирования возбудителей особо опасных инфекционных заболеваний, состоящий из комплекса для выделения нуклеиновых кислот (КВНК), прибора АНК-32 для полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) и прибор Нанофор 05 для генетического типирования возбудителей инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной природы (Курочкин В.Е., Алексеев Я.И., Петров Д.Г., Евстрапов А.А. Отечественные приборы для молекулярно-генетического анализа: разработки ИАП РАН и ООО «Синтол» // Известия Российской Военно-медицинской академии. 2021. Т. 40. No 3. С. 69-74. DOI: https://doi.org/10.17816/rmmar76918). Комплекс КВНК с помощью одноразовых картриджей проводит выделение и очистку нуклеиновой кислоты из различных образцов в одноразовом полимерном картридже. Однако комплекс выделения нуклеиновых кислот не может проводить ПЦР анализ в том же картридже, в котором проводилось выделение и очистка нуклеиновых кислот. Это устройство требует перенести образец выделенной НК в пробирку и провести ПЦР в стороннем устройстве - амплификаторе.

Известен автоматический комплекс американской компании Cepheid под названием "GenXpert", состоящий из одноразового картриджа и анализатора. Этот комплекс позволяет проводить выделение и очистку нуклеиновой кислоты и дальнейшую ПЦР с регистрацией результатов в режиме реального времени в одном и том же картридже (US 6374684 B1). Однако в одноразовом картридже данного устройства содержится только одна ячейка для проведения ПЦР, что ограничивает количество одновременно определяемых мишеней и возможности использования отдельного физического канала детекции.

Кроме того, известно устройство южнокорейской компании "SD Biosensor Inc.", которое позволяет провести выделение и очистку нуклеиновой кислоты и ПЦР одновременно в нескольких ячейках (US 20210283595 A1).

Кроме того, известно устройство - амплификатор ДНК с регистрацией результатов в режиме реального времени, содержащий термоциклер, включающий теплопроводящий элемент со средствами размещения реакционных смесей, средства автоматического управления температурным режимом, оптическую систему, включающую источник излучения и приемник излучения, микропроцессорный блок обработки сигналов и управления (RU 209636 U1). Амплификатор "Индикатор-био" позволяет проводить амплификацию нуклеиновых кислот с высокой скоростью в одноразовом плоском полимерном чипе и использует мультиспектральный датчик для детекции флуоресцентного сигнала. Однако прибор "Индикатор-био" не содержит модуля для выделения нуклеиновой кислоты. Это не позволяет использовать данный амплификатор в полностью автоматическом режиме, что является существенным недостатком, который ограничивает использование "Индикатор-Био" в медицинской практике. Кроме того, наличие в одноразовом полимерном чипе, в котором проводится реакция ПЦР, только одной физической ячейки не позволяет использовать отрицательный контрольный образец, что делает затруднительным использование данного амплификатора для клинической лабораторной диагностики. Отсутствие отрицательного контрольного образца не позволит идентифицировать контаминацию образца.

Как правило, материал, потенциально содержащий Mycobacterium tuberculosis, не может использоваться в качестве матрицы для постановки ПЦР, так как содержит большое количество ингибирующих примесей, имеет высокую вязкость и низкую концентрацию ДНК микобактерий. Сами микобактерии обладают чрезвычайно устойчивой к внешним воздействиям двойной мембраной и слоем миколовых кислот, что не позволяет использовать традиционные методы выделения ДНК.

В этой связи с момента начала использования ПЦР в качестве молекулярно-генетического метода выявления микобактерий, для пробоподготовки биообразца и последующего выделения НК используется ультразвуковое облучение пробы (Buck G.E., O'Hara L.C., Summersgill J.T. Rapid, simple method for treating clinical specimens containing Mycobacterium tuberculosis to remove DNA for polymerase chain reaction. J Clin Microbiol. 1992 May; 30 (5): 1331-4).

Таким образом, приборы, специализированные для работы с M. tuberculosis, должны обладать некоторыми отличительными особенностями. Они должны иметь отдельный или встроенный модуль пробоподготовки, который позволит выделить нуклеиновую кислоту из микобактерий с высокой эффективностью, а также элементы конструкции, которые позволят защитить оператора от заражения при работе с потенциально биологически опасным биоматериалом.

Известно устройство для экстракции ДНК, состоящее из планшета с множеством лунок, держателя планшета, стержней для перемешивания пробы и магнитного удержания микрочастиц, а также ультразвукового излучателя, которое позволяет только выделить нуклеиновую кислоту из биологического образца, но не может провести анализ ДНК с помощью амплификации и определить наличие целевых последовательностей (KR 102528711 B1).

Похожие устройства описаны в 1) патенте CN 109576151 A, которое позволяет выделять нуклеиновую кислоту из различных образцов с помощью магнитных микрочастиц, или в 2) в патенте CN 114752466 A с использованием парафинизированных образцов и ультразвука.

Известно устройство для выделения ДНК и последующей амплификации целевой последовательности с регистрацией результата в режиме реального времени, состоящее из вращающегося компонента контейнера для образцов, узла подъема вала, расположенного в верхней части узла вращения картриджа для проб и имеющего поршень, способный перемещать образцы в картридже для проб между различными камерами; ультразвукового блока, расположенного в нижней части узла вращения картриджа и имеющего ультразвуковой преобразователь амплитуды для ультразвуковой обработки образца в картридже для экстракции нуклеиновой кислоты образца; узел повышения и понижения температуры; узел, обеспечивающий возможность выделения нуклеиновой кислоты с помощью магнитных микрочастиц и использованием ультразвука с возможностью проведения ПЦР с детекцией результатов амплификации в режиме реального (CN 215162719 U). Однако реакция происходит в одной пробирке и не изолировано от окружающей среды. Это требует особых условий при работе с контагиозными образцами, например, с возбудителем туберкулеза.

Наиболее близким аналогом заявляемого устройства является система для выделения нуклеиновых кислот и их последующей амплификации, которая состоит из по меньшей мере одного анализатора, управляющей консоли или компьютера, на которых установлено программное обеспечение и одноразовым картриджем с анализируемой пробой (RU 2813921 C1).

Однако данная система не является специализированным устройством, адаптированным для работы с микобактериями. Однако в данном устройстве не предусмотрено ограничение контакта содержимого одноразового картриджа с окружающей средой, а также обеззараживание приемного устройства после проведения анализа.

Таким образом, техническая проблема, решаемая посредством заявляемого изобретения, заключается в необходимости преодоления недостатков, присущих аналогам и прототипу за счет создания специализированного устройства для автоматического выделения ДНК M. tuberculosis и проведения мультиплексного ПЦР анализа в режиме реального времени для быстрой и безопасной диагностики туберкулеза.

Раскрытие изобретения

Техническим результатом, на достижение которого направлено изобретение, является создание специализированого устройства, которое способно обнаруживать наличие Mycobacterium tuberculosis в биологических образцах, определять устойчивость возбудителя туберкулеза к антимикробным препаратам за счет одновременной амплификации нескольких специфических участков ДНК в режиме реального времени в автоматическом режиме в течение не более трех часов с момента загрузки анализируемой пробы. Ключевыми преимуществами прибора является снижение рисков контаминации анализатора и помещения анализируемой пробой, портативность, возможность использования в неоснащенных лабораториях, простота использования, высокая безопасность для оператора, низкие требования к квалификации оператора, высокая мультиплексность анализа.

Технический результат достигается за счет того, что устройство для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени состоит из одноразового картриджа с системой фильтров для пробоподготовки биологического образца, содержащего микобактерии, выделения и очистки нуклеиновых кислот микобактерий и ПЦР в режиме реального времени, ультразвукового генератора и излучателя, а также анализатора с системой дезинфекции приемного лотка картриджа.

Одноразовый картридж (фиг. 1) имеет в составе основание с емкостями-резервуарами (1), крышку с капиллярами для движения жидкости (2) и отверстиями для движения воздуха - вентиляционными колодцами (3), которые в сборе образуют емкости-резервуары, в которую загружается анализируемая проба или находятся химические агенты для проведения процессов выделения нуклеиновых кислот и проведения ПЦР.

Вентиляционные колодцы (3) напрямую связаны с атмосферой и служат для выравнивания атмосферного давления внутри ячейки при ее наполнении или опустошении, при этом при опустошении ячейки атмосферный воздух через вентиляционный колодец (3) заходит в ячейку, а при ее наполнении - наоборот вытесняется из ячейки в атмосферу. В этом случае, если в ячейке присутствует неинактивированный патоген Mycobacterium tuberculosis, возникает возможность переноса патогена за пределы ячейки и возникновения контаминации прибора и помещения. Для предотвращения данного явления, в вентиляционный колодец ячейки, в которую загружается проба, помещается фильтрующий элемент с диаметром пор 0,05 - 0,5 мкм (4), который задерживает патоген, не закупоривая вентиляционный канал и не препятствуя прохождению воздуха по вентиляционному каналу. То есть при использовании фильтрующего элемента (4) одноразовый картридж получает защиту внутренней полости между крышкой и окружающей средой от контаминации анализатора и окружающего пространства патогенным агентом, сохраняя при этом работоспособность платформы в целом. В качестве фильтрующих элементов могут быть использованы любые доступные на рынке варианты, например фирмы Biocomma Limited Артикул BF025-40-50 (Китай).

Ультразвуковой гомогенизатор и излучатель подведен к стенке емкости (реактора) -в картридже, где происходит подготовка биологической пробы, потенциально содержащей микобактерии, при этом ультразвуковой излучатель вплотную прилегает к стенке реактора, выполненной в виде выпуклой линзы.

Ячейки (1) одноразового картриджа содержат в себе реагенты для выделения и очистки ДНК из анализируемой пробы с последующим проведением ПЦР внутри замкнутого объема картриджа в специальной ячейке или ячейках (5), с возможностью внесения в картридж анализируемой пробы в ячейку с герметичной крышкой (6).

Анализатор (фиг. 2) представляет собой устройство, способное взаимодействовать с одноразовым картриджем и управлять процессами выделения ДНК и последующей ПЦР с детекцией в режиме реального времени внутри замкнутого объема картриджа.

Загрузку одноразового картриджа (8) в анализатор (9) производит оператор вручную. Для этого оператор помещает картридж (8) в ложемент (10), затем вручную закрывает крышку (11) в направлении от себя до упора. При этом картридж (8) в ложементе (10) перемещается внутрь анализатора и фиксируется в замкнутом объеме аналитического прибора, после чего запускается протокол работы Анализатора с картриджем, включающий в себя перемещение жидкостей между ячейками картриджа и, в том числе работу УЗ-модуля. При этом, в вентиляционных колодцах картриджа (3) размещены фильтрующие элементы (4). В случае, если патогенный агент выйдет за пределы объема картриджа и контаминирует анализатор в случае разгерметизации картриджа, для проведения дезинфекции анализатор оснащают по меньшей мере одним светодиодным источником УФ-излучения (12) 260-370 нм, мощностью не менее 2 мВт.

Данные источники будут запускаться автоматически после проведения каждого анализа, а также перед каждым включением анализатора и осуществлять дезинфекцию внутренних полостей анализатора.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 представлен общий вид картриджа устройства для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени, где позиция:

1 - основание с емкостями-резервуарами;

2 - крышка с капиллярами для движения жидкости;

3 - вентиляционные колодцы;

4 - фильтрующий элемент;

5 - ячейки для проведения ПЦР;

6 - крышка и отверстие под ней (порт) для введения пробы;

7 - поворотный клапан.

На фиг. 2 представлена часть анализатора с установленными источниками УФ-излучения, где:

8 - одноразовый картридж;

9 - анализатор;

10 - ложемент;

11 - крышка;

12 - источники УФ-излучения;

13 - приводной вал;

14 - постоянный магнит.

Осуществление изобретения

Устройство для автоматического выделения, очистки и амплифкации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени состоит из одноразового картриджа (8) и анализатора (9), с возможностью подключения к внешнему персональному компьютеру.

Картридж состоит из многофункциональных ячеек (ячейка для внесения пробы; ячейки, содержащие реагенты: лизис, промывочные растворы, элюирующий раствор, ПЦР-реагенты; ячейка-реактор) (1); в вентиляционных колодцах картриджа (3) размещены фильтрующие элементы (4) Biocomma Limited Артикул BF025-40-50 (Китай) с диаметром пор 50 мкм. ПЦР-чип с тремя независимыми ячейками (емкостями) (5, фиг. 1) и поворотный клапан (7, фиг. 1), который объединяет все эти узлы.

Перенос жидкостей осуществляют с помощью поворотного клапана картриджа, который входит в контакт с приводным валом анализатора (13, фиг. 2) при установке картриджа. Поворотный клапан также содержит цилиндр с подвижным поршнем, который входит в зацепление с подвижным штоком Анализатора при установке картриджа и совершает вместе с ним возвратно-поступательные движения. Перенос жидкостей между ячейками Картриджа осуществляют следующим образом: Анализатор поворачивает поворотный клапан и ориентирует его строго над нужной ячейкой Картриджа. Подвижный шток начинает движение вниз и тянет за собой поршень, создавая пониженное давление в поворотном клапане, после чего жидкость, находящаяся в ячейке, начинает поступать в цилиндр поворотного клапана. Расстояние, которое проходит шток, определяет объем жидкости, который необходимо забрать как в медицинском шприце. Сброс жидкости из поворотного клапана проходит в обратной последовательности: поворотный клапан поворотом ориентируется у нужной ячейки, поршень двигается вверх и вытесняет жидкость из цилиндра в ячейку.

Ультразвуковой излучатель подведен к внешней стенке емкости в картридже, в которой происходит подготовка биологической пробы (1, фиг 1), при этом ультразвуковой излучатель плотно прилегает к стенке реактора. Длительность импульса ультразвука 1 секунда, пауза между импульсами - 1 секунда, общее число импульсов от 40 до 60.

Экстракцию ДНК осуществляют с помощью магнитных частиц, функционализированных поверхностными молекулами, которые специфически связываются с ДНК и сорбируют их на своей поверхности. Анализатор имеет подвижный постоянный магнит (14, фиг. 2), который, приближаясь вплотную к ячейке картриджа, инициирует сбор магнитных частиц из раствора к стенке ячейки и их иммобилизацию при отборе жидкости из ячейки, что позволяет проводить очистку сорбированных молекул ДНК от примесей путем последовательной промывки ячейки с иммобилизированными магнитными частицами с последующей элюцией и десорбцией ДНК в элюат.

Полученный элюат посредством поворотного клапана переносят в ячейку с реагентами для проведения ПЦР, после чего полученная реакционная смесь, посредством поворотного клапана, переносится в ячейку (емкость) микрофлюидного чипа картриджа, в которой проходит ПЦР. Далее работа амплификатора ДНК осуществляется известным образом, например, как описано в источнике Bartlett, J.M.S., & Stirling, D. (2003). PCR Protocols. Methods in Molecular Biology (Vol. 226). Humana Press. ISBN 978-1-59259-384-2.

Результаты амплификации собирают и анализируют с помощью программного обеспечения анализатора.

После проведения каждого анализа, а также перед каждым включением анализатора 2 источника УФ излучения светодиоды UVC 275 нм (12), расположенные в полости, куда устанавливается картридж, запускаются автоматически и осуществляют дезинфекцию внутренних полостей анализатора. Просьба указать какие УФ-излучатели были использованы.

Пример 1. Выделение ДНК M. tuberculosis Rif+ из биологического образца с последующей амплификацией одновременно двух участков генома

В ячейку для внесения пробы вносили пробу с использованием стандартных средств (дозатор). В ячейках с реагентами хранились все реагенты, необходимые для проведения пробоподготовки и проведения ПЦР-амплификации. Поворотный клапан обеспечивал перемещение реагентов внутри картриджа в процессе подготовки пробы к амплификации. ПЦР-чип предназначен для проведения ПЦР внутри замкнутого объема в автоматическом режиме.

В качестве реагентов при проведении испытаний использовали ПЦР-набор Амплитуб-РВ. Набор реагентов для выделения с использованием магнитной силики.

Использовали клинический образец мокроты, содержащей M. tuberculosis Rif+, с подтвержденной устойчивостью к рифампицину. Картридж устройства содержал лизирующий р-р L 500 мкл, 10 мкл суспензии магнитных частиц, 100 мкл исследуемой пробы, промывочный р-р W1, 600 мкл, промывочный р-р W2, 400 мкл, ТЕ буфер W3 400 мкл, промывочный р-р, 600 мкл и элюирующий р-р (ТЕ-буфер), 400 мкл.

Было проведено выделение ДНК из клинического образца ручным методом теми же реактивами и в тех же объемах, что и в Устройстве, для получения референсных значений интенсивности флуоресценции по трем канала для флуорофоров FAM, HEX, ROX (Таблица 1).

Таблица 1 - Результат ПЦР-амплификации ДНК клинического образца, полученной ручным методом

Титр FAM
(threshold ≈ 100), Ct HEX
(threshold ≈ 50), Ct 10⁸ КОЕ/мл 22,4 33,3

При проведении ПЦР-амплификации на макете рост флюоресценции начинался с 21 цикла по каналам FAM и HEX, что соответствует референсным значениям. Время проведения анализа в устройстве составило 2 часа 15 минут.

Таким образом, использование анализатора со встроенными светодиодными источниками УФ излучения и ультразвуковым излучателем, плотно прилегающим к стенке картриджа, который имеет в своем составе фильтры, изолирующие ячейки с биоматериалом позволяет получить заявленный технический результат - идентифицировать M.tuberculosis безопасно для оператора в автоматическим режиме.

Изобретение относится к измерительной технике, а именно к устройству для идентификации возбудителя туберкулеза Mycobacterium tuberculosis и нетуберкулезных микобактерий для использования в медицине, молекулярной биологии и биотехнологии с целью дифференциальной диагностики туберкулеза и определения устойчивости микобактерий к антибактериальным препаратам. Устройство для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени состоит из одноразового картриджа, ультразвукового генератора, источника УФ-излучения, анализатора, ложемента, крышки, приводного вала, постоянного магнита, поворотного клапана, который содержит цилиндр с подвижным поршнем и входит в зацепление с подвижным штоком анализатора при установке картриджа, представляющего собой устройство, способное взаимодействовать с одноразовым картриджем и управлять процессами выделения ДНК и последующей ПЦР с детекцией флуоресцентного сигнала в режиме реального времени внутри замкнутого объема картриджа. Анализатор включает по меньше мере один источник УФ-излучения, расположенный внутри анализатора, обеспечивающий дезинфекцию внутренних полостей анализатора. Источник ультразвукового излучения вплотную прилегает к стенке емкости в картридже, выполненной в виде выпуклой линзы. Техническим результатом является создание устройства, которое способно обнаруживать наличие Mycobacterium tuberculosis в биологических образцах, определять устойчивость возбудителя туберкулеза к антимикробным препаратам за счет одновременной амплификации нескольких специфических участков ДНК в режиме реального времени в автоматическом режиме в течение не более трех часов. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

1. Устройство для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени, состоящее из одноразового картриджа, ультразвукового генератора, источника УФ-излучения, анализатора, ложемента, крышки, приводного вала, постоянного магнита, поворотного клапана, который содержит цилиндр с подвижным поршнем и входит в зацепление с подвижным штоком анализатора при установке картриджа, представляющего собой устройство, способное взаимодействовать с одноразовым картриджем и управлять процессами выделения ДНК и последующей ПЦР с детекцией флуоресцентного сигнала в режиме реального времени внутри замкнутого объема картриджа, отличающееся тем, что анализатор включает по меньше мере один источник УФ-излучения, расположенный внутри анализатора, обеспечивающий дезинфекцию внутренних полостей анализатора, при этом источник ультразвукового излучения вплотную прилегает к стенке емкости в картридже, выполненной в виде выпуклой линзы.

2. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что в качестве источников УФ-излучения используют светодиодные лампы с длиной волны 260-370 нм и мощностью не менее 2 мВт.

3. Устройство по п. 1, отличающееся тем, что одноразовый картридж устройства для автоматического выделения, очистки и амплификации участков ДНК Mycobacterium tuberculosis с регистрацией результатов в режиме реального времени, содержащий основание с емкостями-резервуарами, крышку с капиллярами для движения жидкости, вентиляционные колодцы, ячейки для проведения ПЦР, крышку и отверстие для введения пробы, поворотный клапан, отличающийся тем, что каждый вентиляционный колодец ячейки, куда загружается анализируемая проба, содержит фильтрующий элемент с диаметром пор 0,05-0,5 мкм для задержки патогена.