СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ИММУННОГО СТАТУСА ОСЕТРОВЫХ РЫБ Российский патент 2025 года по МПК A23K50/80 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству, и может быть использовано для кормления рыб.

Известен способ повышения продуктивности и резистентности к бактериальным и вирусным инфекциям у сельскохозяйственных животных, птиц, рыб, получающих биологически активную добавку к пище (RU №2651835, A61D 99/00, A23K 10/10, A23K 50/00, 2018 г.). Данный способ характеризуется тем, что в пищевой рацион вводят препарат на основе бактериального лизата культуры Micrococcus Lysodecticus, способствующего формированию устойчивости организмов к различным инфекциям.

Однако указанный способ используется для повышения резистентности у рыб на ранних стадиях онтогенеза (икры, предличинок, личинок) и не предполагается к использованию для молоди и старших возрастных групп рыб.

Наиболее близким по сути является способ коррекции микробиоценоза кишечника для повышения продуктивности и резистентности организма рыб (Патент RU №2809115, 2023 г.). Данное изобретение заключается в опрыскивании тонкого слоя корма ультрадисперсными частицами цинка, предварительно обработанными ультразвуком в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц. Однако наличие в рационе рыб высоких концентраций цинка может быть вреден, поскольку он снижает активность протеиназ пищеварительного тракта рыб, что ухудшает усвоение кормовых объектов и влияет на пищевое поведение рыб.

Технический результат - повышение иммунного статуса осетровых рыб.

Он достигается тем, что известный способ, включающий покрытие корма защитным веществом и его скармливание, при этом корм предварительно смешивают с про биотическим препаратом «Флорин форте» в количестве 6 гр/кг корма в течение 15 минут, затем тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 1,5-2 г желатина на 50 мл воды при постоянном перемешивании, и затем высушивают корм при температуре 20-25°С в течение 5-6 часов.

Для проведения исследований использовали пробиотический препарат «Флорин форте», представляющий собой комплекс бифидобактерий штамма Bifidobacterium bifidum 1, сорбированный на активированном угле, и лактобактерий штамма Lactobacillus plantarum 8Р-А3. В 4 граммах препарата содержатся: живые бифидобактерии - не менее 50 млн колониеобразующих единиц (5×10⁷ КОЕ), живые лактобациллы - не менее 50 млн колониеобразующих единиц (5×10⁷ КОЕ), лактоза моногидрат - до средней массы 0,85 г/0,2 г. (Целипанова Е.Е. ФЛОРИН® ФОРТЕ - отечественный поликомпонентный сорбированный препарат-пробиотик / Е.Е. Целипанова // Главный врач Юга России. - Ростов-на-Дону, 2020. - №2 (72). - С. 31-32).

С целью определения влияния про биотического препарата на иммунологические показатели осетровых рыб были проведены исследования на гибриде русского и ленского осетра (Acipenser gueldenstadtii Brandt et Ratzeburg, 1833 × Acipenser baerii Brandt, 1869) (Бедняков Д.A. Сравнительный анализ воздействия температуры инкубации на активность комплекса пищеварительных ферментов русского осетра, ленского осетра и их гибрида методом многомерного шкалирования / Д.А. Бедняков, А.С.Мартьянов. - Вестник АГТУ Сер.: Рыбное хозяйство, 2013. - С. 118-123).

Суточная норма кормления определялась еженедельно с учетом массы рыбы, температуры воды и концентрации растворенного в воде кислорода (Пономарев С.В. Индустриальное рыбоводство: учебник / С.В. Пономарев, Ю.Н. Грозеску, А.А. Бахарева. - Санкт-Петербург: Лань, 2013. - 448 с.).

Достоверность различий сравниваемых показателей определяли по t-критерию Стьюдента. Уровень значимой разницы был установлен на Р≤0,05.

Для оценки влияния про биотического препарата «Флорин форте» на эффективность выращивания осетровых рыб было проведено экспериментальное кормление гибрида русского и ленского осетра. Для этого выращиваемые рыбы были разделены на контрольную и опытную группы. Контрольная группа рыб получала полнорационный комбикорм, опытная группа - комбикорм с дозировкой препарата «Флорин форте» 6 г/кг корма.

Способ осуществляют следующим образом. Комбикорм для осетровых рыб в сухом состоянии смешивают с пробиотическим препаратом «Флорин форте» в количестве 6 г/кг корма. После тщательного перемешивания в течение 15 минут смесь гранул корма и препарата покрывают защитным веществом, а именно смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 1,5-2 г желатина на 50 мл воды при постоянном перемешивании. Далее корм отправляют сушиться при температуре 20-25°С на 5-6 часов. Благодаря данному способу на гранулах корма образуется плотный желатиновый слой, который удерживает про биотический препарат на грануле при ее попадании в воду.

Примеры осуществления способа

Пример 1

Комбикорм для осетровых рыб ОТ-7 в сухом гранулированном состоянии смешивали с пробиотическим препаратом «Флорин форте» в дозировке 6 г/кг корма. После перемешивания в течение 10 минут смесь гранул корма и препарата покрывали защитным веществом, а именно смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 2 г желатина на 50 мл воды и тщательно перемешивали. Далее корм высушивали при температуре 20°С в течение 5,5 часов.

Выращивание рыб осуществляли в стеклопластиковых бассейнах типа ИЦА-1 размером 1000×1000×700 мм согласно опубликованным нормативным документам. Все исследуемые особи гибрида русского и ленского осетра были разделены на две группы: контрольная группа рыб получала комбикорм ОТ-7, опытная группа - комбикорм ОТ-7 с дозировкой препарата «Флорин форте» 6 г/кг.

В результате проведенных исследований установлено, что наиболее эффективным оказался корм с дозировкой пробиотика «Флорин форте» 6 г/кг. На таблице 1 представлена динамика живой массы гибрида русского и ленского осетра.

Из таблицы 1 видно, что величина абсолютного прироста в данной группе составила 31 г, что на 8,7 г выше, чем в контроле. Показатель среднесуточной скорости роста был также выше во второй опытной группе и составил 0,37%. Коэффициент упитанности по Фультону не претерпевал значительных изменений и колебался в пределах 0,40-0,43%.

Для оценки физиологического состояния осетровых рыб также были проведены исследования гематологических показателей. Полученные результаты показали, что содержание гемоглобина в крови рыб опытной группы, в рационе которых содержался пробиотический препарат, превышало таковой показатель у рыб из контрольной группы. В контрольном варианте концентрация гемоглобина не превышала 57,9 г/л, что также соответствует биологической норме данного вида. Уровень общего белка в сыворотке крови рыб, выращенного с использованием пробиотического препарата «Флорин форте», увеличился от начала эксперимента к его окончанию. Так, максимальное его значение наблюдалось в опытной группе и составило 23,6 г/л, в то время как в контроле данный показатель снизился на 0,8 г/л, что может быть связано с обменом веществ и определено интенсивностью питания. Следует отметить, что уровень холестерина у рыб контрольной группы был выше, чем у рыб из опытной группы, и составил 4,92 ммоль/л. Кроме того, установлено, что у рыб, выращенных с использованием сорбированного пробиотического препарата, наблюдалось снижение данного показателя к концу эксперимента до 2,74 ммоль/л.

Таким образом, применение пробиотического препарата «Флорин форте» оказало положительное влияние на показатели крови осетровых рыб, выраженное в повышении уровня гемоглобина, общего белка, снижении концентрации холестерина и глюкозы.

Полученная лейкоцитарная формула крови подтвердила положительное влияние пробиотического препарата «Флорин форте» на клеточный иммунитет исследуемых рыб. Обнаружено, что белая кровь носила ярко выраженный лимфоидный характер. Так, количество лимфоцитов варьировало в пределах 70,68-76,73%, количество моноцитов было незначительным и не превышало 4,31%). Кроме того, в лейкоцитарном профиле крови рыб отмечено, что значительную часть лейкоцитов составляли палочкоядерные (4,07-20,79%) и сегментоядерные (12,15-3,15%) нейтрофилы.

Из проведенных исследований следует, что на введение пробиотического препарата, выращиваемый русско-ленский осетр реагировал изменением соотношения между отдельными типами лейкоцитов. Однако полученные результаты находились в пределах референсных значений, что указывает на повышение клеточного иммунитета и отсутствие патологических и воспалительных процессов в организме русско-ленского осетра.

В ходе исследования гуморального иммунитета выращиваемых особей русско-ленского осетра было установлено, что применение пробиотического препарата «Флорин форте» способствовало изменению уровня бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК) в период выращивания. Так, перед началом экспериментальных работ уровень БАСК русско-ленского осетра составлял 48%. В середине исследования было замечено повышение данного показателя во всех исследуемых группах. Однако к завершению экспериментального выращивания было отмечено снижение БАСК как в опытной группе (до 42%), так и в контрольной (до 30,2%).

На протяжении всего исследования отмечалось количественное изменение иммунного комплекса (ИК), а именно его снижение к середине исследования и повышение показателя к завершению экспериментального кормления. В конце исследования уровень ИК не превышал 6,00±1,41, что может быть связано с тем, что механизм действия пробиотического препарата заключался в колонизации кишечника рыб полезными грамположительными и грамотрицательными бактериями, которые за счет комплексного положительного влияния, повышали напряженность иммунного статуса рыб.

В период исследований повышение концентрации лизоцима обнаружено именно в опытной группе, получавшей пробиотический препарат «Флорин форте» до 19,06±9,05 мкг/мл. Однако стоит отметить, что изменения в концентрации лизоцима имели постепенный характер и находились в пределах «физиологической нормы», что свидетельствует об отсутствии отрицательных сдвигов в работе иммунной системы и отсутствии истощения ресурсов гуморальной защиты.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что введения в рацион рыб комбикорма с добавлением пробиотического препарата «Флорин форте» оказывает влияние на клеточный и гуморальный иммунитет, а также физиологическое состояние осетровых рыб, что может иметь важные последствия для повышения иммунного статуса рыб.

Положительный эффект - предлагаемый способ позволяет улучшить уровень клеточного и гуморального иммунитета, за счет повышения бактерицидной активности сыворотки крови, иммунных комплексов и лизоцима осетровых рыб, способствует увеличения скорости роста и развития осетровых рыб без отрицательных сдвигов в работе иммунной системы.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству, и может быть использовано для кормления рыб. Способ включает покрытие корма защитным веществом и его скармливание. Корм предварительно смешивают с пробиотическим препаратом «Флорин форте» в количестве 6 г/кг корма в течение 15 минут. Тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 1,5-2 г желатина на 50 мл воды при постоянном перемешивании. Корм высушивают при температуре 20-25°С в течение 5-6 часов. Изобретение обеспечивает повышение иммунного статуса осетровых рыб. 1 табл., 1 пр.

Способ повышения иммунного статуса осетровых рыб, включающий покрытие корма защитным веществом и его скармливание, отличающийся тем, что корм предварительно смешивают с пробиотическим препаратом «Флорин форте» в количестве 6 г/кг корма в течение 15 минут, затем тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 1,5-2 г желатина на 50 мл воды при постоянном перемешивании и затем высушивают корм при температуре 20-25°С в течение 5-6 часов.