СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ИММУНИТЕТА ОСЕТРОВЫХ РЫБ Российский патент 2025 года по МПК A23K50/80 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству и может быть использовано для кормления рыб.

Известен способ повышения продуктивности и резистентности к бактериальным и вирусным инфекциям у сельскохозяйственных животных, птиц, рыб, получающих биологически активную добавку к пище (RU No2651835, A61D 99/00, A23K 10/10, A23K 50/00, 2018 г.). Данный способ характеризуется тем, что в пищевой рацион вводят препарат на основе бактериального лизата культуры Micrococcus Lysodecticus, способствующего формированию устойчивости организмов к различным инфекциям.

Однако указанный способ используется для повышения резистентности у рыб на ранних стадиях онтогенеза (икры, предличинок, личинок) и не предполагается к использованию для молоди и старших возрастных групп рыб.

Наиболее близким по сути является способ коррекции микробиоценоза кишечника для повышения продуктивности и резистентности организма рыб (RU 2809115 C1, A23K 50/80, 2023 г.). Данное изобретение заключается в опрыскивании тонкого слоя корма ультрадисперсными частицами цинка, предварительно обработанными ультразвуком в дистиллированной воде в течение 30 мин с частотой 35 кГц. Однако наличие в рационе рыб высоких концентраций цинка может быть вреден. Поскольку он снижает активность протеиназ пищеварительного тракта рыб, что ухудшает усвоение кормовых объектов и влияет на пищевое поведение рыб.

Технический результат - повышение иммунитета осетровых рыб, путем введения в рацион корма с добавлением про биотического препарата «Экофлор».

Он достигается тем, что известный способ, включающий покрытие корма защитным веществом и его скармливание, при этом корм предварительно смешивают с про биотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма в течение 5 минут, затем тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 3-4 г желатина на 70 мл воды при постоянном перемешивании, и затем высушивают корм при температуре не более 28°С в течение 3-4 часов.

Про биотический препарат-консорциум «Экофлор» иммобилизован на углеродоминеральном сорбенте СУМС-1 концентратом природных штаммов бифидобактерий: Bifidobacterium bifidum 8-3, Bifidobacterium longum ДВА-13 и Bifidobacterium adolescentis ГО-13 и лактобактерий: Lactobacillus acidophilus 57S, Lactobacillus plantarum П-75, Lactobacillus casei C6. Нормативное содержание бифидобактерий в препарате составляет 10⁸ КОЕ/г, лактобактерий - 10⁷ КОЕ/г. Пробиотический препарат «Экофлор» способен выводить из организма выращиваемых рыб патогенные и условно-патогенные микроорганизмы, токсины и продукты метаболизма, а также способствовать нормализации функционирования кишечной микрофлоры. Препарат снижает уровень стресса у рыб при смене комбикормов и технологических воздействиях. Он активирует реакцию организма на вирусы и бактерии, увеличивает усвояемость комбикорма (Сергина Ю.А. Применение кормов с сорбирующими свойствами при выращивании объектов аквакультуры / Ю.А. Сергина, А.Д. Жандалгарова, А.А. Бахарева, Ю.Н. Грозеску, Ю.В. Сергеева. Национальной научно-практической конференции с международным участием в рамках Международного научного форума «Каспий 2021: пути устойчивого развития». - 2021).

Экспериментальные работы по определению влияния иммобилизованной формы пробиотического препарата на эффективность выращивания и физиолого-иммунологическое состояние гибридных форм осетровых рыб проводили в лабораторных условиях в течение 30 суток. В качестве объектов исследований был использован гибрид белуги и стерляди (бестер) (Huso huso Linnaeus, 1758 × Acipenser ruthenus Linnaeus, 1758) (Бурцев И.А. Комплекс пород бестера (Acipenser nikoljukinii) / И.А. Бурцев, В.Д. Крылова, А.И. Николаев, А.С. Сафронов, О.П. Филиппова. - В кн.: Породы и одомашненные формы осетровых рыб (Acipenseridae). - М: Столичная типография, 2008. - С. 4-22).

Суточная норма кормления определялась еженедельно с учетом массы рыбы, температуры воды и концентрации растворенного в воде кислорода (Пономарев С.В. Индустриальное рыбоводство: учебник / С.В. Пономарев, Ю.Н. Грозеску, А.А. Бахарева. - Санкт-Петербург: Лань, 2013. - 448 с.).

Для оценки влияния пробиотического препарата «Экофлор» на иммунный гомеостаз осетровых рыб было проведено экспериментальное кормление бестера. Для этого выращиваемые рыбы были разделены на контрольную и опытную группы. Контрольная группа рыб получала полнорационный комбикорм, опытная группа - комбикорм с дозировкой препарата «Экофлор» 7 г/кг корма.

Способ осуществляют следующим образом. Комбикорм для осетровых рыб в сухом состоянии предварительно смешивают с пробиотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма. После тщательного перемешивания в течение 5 минут смесь гранул корма и препарата покрывают защитным веществом - смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 3-4 г желатина на 70 мл воды при постоянном перемешивании. Затем корм отправляют сушиться при температуре не более 28°С на 3-4 часа. Благодаря данному способу на гранулах корма образуется плотный желатиновый слой, который удерживает про биотический препарат на грануле при ее попадании в воду.

Примеры осуществления способа

Пример 1

Комбикорм для осетровых рыб ОТ-7 в сухом гранулированном состоянии смешивали с про биотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма. После перемешивания в течение 4 минут смесь гранул корма и препарата покрывали защитным веществом - смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 3,5 г желатина на 65 мл воды и тщательно перемешивали. Затем корм высушивали при температуре 24-26°С в течение 3,5 часов.

Выращивание рыб осуществляли в стекло пластиковых бассейнах типа ИЦА-1 согласно опубликованным нормативным документам. Все исследуемые особи бестера были разделены на две группы: контрольная группа рыб получала комбикорм ОТ-7, опытная группа - комбикорм ОТ-7 с пробиотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма.

В результате проведенных исследований установлено, что наиболее эффективным оказался корм с дозировкой пробиотического препарата «Экофлор» 7 г/кг корма.

На таблице 1 представлена динамика живой массы бестера.

Из таблицы 1 видно, что наиболее интенсивный рост был характерен для опытной группы, получавшей пробиотический препарат в дозировке 7 г/кг корма. В данной группе наблюдалось максимальное значение абсолютного прироста - 23,7 г, среднесуточного прироста - 0,79 г и среднесуточной скорости роста - 0,36%. Коэффициент упитанности по Фультону не претерпевал значительных изменений и колебался в пределах от 0,40 до 0,42%.

Также было установлено, что применение про биотического препарата «Экофлор» способствует улучшению крови бестера. Так, у рыб опытной группы наблюдалась тенденция к повышению концентрации гемоглобина (63,3 г/л) и общего белка (24,2 г/л) от начала эксперимента к его окончанию. Кроме того, использование пробиотика способствовало снижению концентрации холестерина и глюкозы в крови исследуемых рыб.

В лейкоцитарной формуле исследуемых рыб наблюдалось перераспределение различных групп лейкоцитов. Так, у бестера отмечался сдвиг в сторону увеличения лимфоцитов за счет снижения нейтрофилов и эозинофилов. Доля лимфоцитов в опытной группе колебалась в пределах от 72,94 до 76,58%). Разница между содержанием лимфоцитов в варианте опыта и контролем составляла от 2,8 до 5,87%) и была статистически достоверной.

В изучаемом лейкоцитарном профиле крови бестера обнаружено, что для рыб опытной группы характерно снижение уровня нейтрофилов до 16,64-20,13%. В контрольном варианте данный показатель незначительно повысился и составил 23,9%, что, вероятно, связано с активацией гранулопоэза в организме рыб. Количество моноцитов в контроле и опытной группах находилось на одном уровне и не превышало 5,21% от общего объема просчитанных клеток. Низкий процент моноцитов в лейкоцитарной формуле свидетельствует о хорошем физиолого-иммунологическом состоянии выращиваемых рыб.

Таким образом, проведенные экспериментальные исследования позволили сделать вывод о том, что применение препарата «Экофлор» оказывает положительное влияние на морфобиохимические показатели крови выращиваемых рыб. Наиболее эффективной дозировкой явилась 7 г/кг корма. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют о хорошем физиолого-иммунологическом состоянии исследуемых рыб и благоприятных условиях их выращивания.

В ходе исследования гуморального иммунитета выращиваемых особей бестера было установлено, что до начала экспериментальных исследований уровень бактерицидной активности сыворотки крови бестера составил 47%, однако к середине исследования под влиянием пробиотического препарата-консорциума «Экофлор» он повысился в опытной группе. К завершению исследования данный показатель значительно снизился в контрольной группе и составил 29,4%, а в опытной группе иначе наблюдалось повышение показателя, что, вероятно, обусловлено восстановлением синтеза неспецифических факторов иммунитета и подтверждает наличие благоприятных условий формирования иммунного гомеостаза бестера. Кроме того, необходимо отметить отсутствие иммунодефицитных особей в течение всего периода проведения экспериментальных работ.

Установлено, что уровень С-реактивного белка во все сроки исследования в контрольной и опытной группах имел отрицательное значение (<6 мг/л), что указывает на отсутствие воспалительных процессов и патогенных антигенов в организме рыб. Исследуемый пробиотический препарат-консорциум не вызывал воспалительную реакцию в организме бестера, что также подтверждают проведенные исследования на наличие антител и низкие показатели уровня иммунных комплексов в сыворотке крови рыб.

В период проведенных исследований обнаружено, что содержание иммунных комплексов (ИК) в сыворотке крови бестера варьировалось в широких пределах. До начала экспериментальных работ их количество не превышало 5,56±0,94. Введение в рацион пробиотического препарата способствовало снижению данного показателя к середине исследований. Так, в опытной группе содержание ИК составило 3,20±0,40. Однако в конце исследований наблюдалось резкое понижение уровня данного показателя (4,20±0,54) в опытной группе, что свидетельствовало о положительном влиянии дозировки пробиотического препарата «Экофлор» 7 г/кг корма на снижение антигенной нагрузки на организм осетровых рыб.

Оценка уровня лизоцима в сыворотке крови бестера показала, что до начала экспериментальных работ данный показатель не превышал 0,30±0,12 мкг/мл, однако на 14-е сутки приема пробиотического препарата «Экофлор» наблюдалось усиление иммунологических реакций за счет повышения уровня лизоцима в опытной группе.

Оценку влияния пробиотика «Экофлор» на клеточные факторы иммунитета осуществляли по составу и относительному содержанию лейкоцитов в периферической крови.

Таким образом, проведенные исследования позволили сделать вывод о том, что применение пробиотического препарата «Экофлор» способствовало активизации неспецифической резистентности в организме осетровых рыб.

Положительный эффект - предлагаемый способ позволяет повысить и скорректировать иммунитет в организме осетровых рыб за счет активизации неспецифической резистентности по составу лейкоцитов в периферической крови. Также наблюдается снижение антигенной нагрузки на организм осетровых рыб и усиление иммунологических реакций.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к рыбоводству и может быть использовано для кормления рыб. Способ включает покрытие корма защитным веществом и его скармливание. Корм предварительно смешивают с пробиотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма в течение 5 минут. Тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 3-4 г желатина на 70 мл воды при постоянном перемешивании и затем высушивают корм при при температуре не более 28°С в течение 3-4 часов. Изобретение обеспечивает повышение иммунитета осетровых рыб. 1 табл., 1 пр.

Способ коррекции иммунитета осетровых рыб, включающий покрытие корма защитным веществом и его скармливание, отличающийся тем, что корм предварительно смешивают с пробиотическим препаратом «Экофлор» в количестве 7 г/кг корма в течение 5 минут, затем тонкий слой корма покрывают смесью желатина и дистиллированной воды в соотношении 3-4 г желатина на 70 мл воды при постоянном перемешивании, и затем высушивают корм при температуре не более 28°С в течение 3-4 часов.