Фармацевтическая композиция, содержащая 5'-О-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин Российский патент 2025 года по МПК A61K9/20 A61K31/7068 A61P31/12 

Настоящее изобретение относится к медицине и химико-фармацевтической промышленности, а именно к новой фармацевтической композиции, содержащей 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин для лечения и/или профилактики вирусных инфекций.

Уровень техники

5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин, структурной формулы (1) (далее АФС SN9)

которое представляет собой биологически доступное пролекарство активного метаболита β-d-N4-гидроксиктидина (EIDD-1931, NHC), который, в свою очередь, представляет собой аналог рибонуклеозида и вызывает мутации в вирионах РНК.

EIDD-1931 (NHC) обладает противовирусной активностью широкого спектра против SARS-CoV-2, MERS-CoV, SARS-CoV и родственных ему зоонозных групп 2b или 2c Bat-CoV со средним IC50, равным 0,15 мкМ, а также повышенной эффективностью против - CoV, однако обладает низкой биологической доступностью [doi: 10.1016/)j.jvir.2017.11.026.].

АФС SN9 доказало свою эффективность против вирусов гриппа, коронавируса, арбовируса и ортопоксвируса. [RU2791806C1, RU2791523C1].

На сегодняшний день сохраняется необходимость в усовершенствовании лекарств, используемых для и/или профилактики вирусных инфекций. В частности, сохраняется необходимость в улучшенных пероральных фармацевтических композициях, которые было бы легко принимать и которые, таким образом, были бы более удобными для применения пациентами. Пероральные фармацевтические композиции должны обеспечить уровень активного вещества в плазме, достаточный для эффективной терапии. Это зависит от растворимости и характера высвобождения активного вещества. В случае твердой фармацевтической композиции важны свойства при растворении, а также химическая и механическая стабильность. Тип и количество носителей в сочетании с технологией приготовления являются существенными с точки зрения свойств растворения, биологической доступности соединения у млекопитающих, стабильности и применимости технологии изготовления фармацевтической композиции в производственных условиях.

Раскрытие сущности изобретения

Целью настоящего изобретения является создание фармацевтической композиции, содержащей АФС SN9, обладающей высоким уровнем биологической доступности, что позволяет осуществлять быстрое достижение плазменного уровня препарата в крови. При этом фармацевтическая композиция должна быть удобна в применении, обеспечивать высокую стабильность содержащегося АФС, и обладать достаточной твердостью.

Техническим результатом заявленного изобретения является обеспечение высокого уровня растворимости, а также повышение биологической доступности АФС SN9, что, в свою очередь позволяет повысить эффективность терапии с использованием указанного лекарственного вещества.

Также заявленная фармацевтическая композиция обеспечивает высокую биологическую доступность АФС SN9, позволяет достигать эффективный плазменный уровень лекарства при применении. Кроме того, предлагаемая фармацевтическая композиция обеспечивает высокую стабильность указанного соединения и необходимую твердость таблетки.

Технический результат заявленного изобретения обеспечивает фармацевтическая композиция для лечения и/или профилактики вирусных инфекций, представляющая собой таблетку, и включающая 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин в количестве 10-80% от массы композиции, разрыхлитель в количестве 2-6% от массы композиции, глидант в количестве до 1% от массы композиции, связующее вещество в количестве 3-7% от массы композиции, лубрикант в количестве до 1% от массы композиции, наполнитель в количестве до 75% от массы композиции.

Хотя таблетки, полученные в соответствии заявленным изобретением, могут иметь высокое содержание АФС SN9 (до 80%), во всех вариантах реализации они демонстрируют высокие значения растворения (не менее 85% растворившегося АФС SN9 за время 15 минут). АФС SN9 обладает расчетным pKa, равным около 1,48 и, следовательно, для эффективного всасывания должно растворяться в желудке. Таким образом, оптимальным временем растворения фармацевтической композиции, содержащей АФС SN9, является 15 минут.

Благодаря тому факту, что заявленная фармацевтическая композиция может содержать АФС SN9 в высокой концентрации, можно получать такую композицию в формах введения, размеры которых позволяют осуществлять легкое проглатывание.

Термин «соединение формулы (1)», а также термин «АФС SN9» относится не только к 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидину, как показано в структурной формуле (1), но и к его полиморфным модификациям, сольватам, гидратам или комбинации этих соединений.

Как вариант, в качестве наполнителя в составе заявленной лекарственной композиции, может быть использовано вещество, выбранное из, не ограничиваясь, микрокристалличесой целлюлозы, лактозы, лактозы моногидрата, маннитола, сорбитола, низкозамещенной гидрокиспропилцеллюлозы.

Как вариант, в качестве разрыхлителя в составе заявленной лекарственной композиции может быть использовано вещество, выбранное из, не ограничиваясь, кроскармелозы натрия, карбоксиметилкрахмала, карбоксиметилцеллюлозы, кросповидона, низкозамещенной гидрокиспропилцеллюлозы.

Как вариант, в качестве связующего вещества в составе заявленной лекарственной композиции может быть использовано вещество, выбранное из, не ограничиваясь, повидона, гидроксипропил целлюлозы, гидрокосипропилметилцеллюлозы, крахмала, полоксомера 188, полоксомера 237, полоксомера 338, полоксомера 407, метилцеллюлозы, поливинилового спирта, сополимера винилацетата и повидона, полиэтиленгликоля.

Как вариант, в качестве глиданта в составе заявленной лекарственной композиции может быть, например, использован кремния диоксид коллоидный.

Как вариант, в качестве лубриканта в составе заявленной лекарственной композиции может быть использовано вещество, выбранное из, не ограничиваясь, магния стреарата, полоксомера 188, полоксомера 237, полоксомера 338, полоксомера 407, стеарилфумарата натрия.

Как вариант, заявленная фармацевтическая композиция может быть покрыта пленочной оболочкой. Предпочтительно, такой пленочной оболочкой может являться оболочка Опадрай белый.

Предпочтительно заявленная фармацевтическая композиция может быть использована для перорального применения.

Как вариант, 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин может присутствовать в составе заявленной фармацевтической композиции в микронизированной форме. При этом, как вариант, не менее 90% частиц микронизированной формы 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидина в составе заявленной композиции (d90) может иметь размер от 8 до 300 мкм. Микронизация может достигаться стандартными методами измельчения, известным специалистам в данной области. Распределение частиц по размерам может быть оценено методом лазерной дифракции, известным специалистам в данной области (например, с использованием измерительного прибора HELOS, Sympatec).

Предпочтительно, заявленная фармацевтическая композиция может иметь твердость не менее 80 Н.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 приведены данные по оценке эффективности готовых лекарственных форм, содержащих АФС SN9. Приведены индивидуальные значения вирусной нагрузки (копии РНК SARS-CoV-2 на мг ткани легкого) и титра вируса (БОЕ/мг ткани легкого) для каждого животного. Данные проанализированы с помощью GraphPad Prism версии 9 метод Краскела-Уолиса с поправкой Данна: ** р <0.01, ****р 0.0001. Для попарных сравнений ГЛФ 1 и ГЛФ 2 использован критерий Манна-Уитни: * р<0.05. Различия между группами принимали статистически значимыми при р <0.05.

Осуществление изобретения

Осуществление изобретения подтверждается следующими примерами.

Пример 1. Получение заявленной фармацевтической композиции.

Заявленная фармацевтическая композиция может быть получена, например, следующим образом.

Производится смешение всех компонентов, указанных в составе (кроме пленочной оболочки) исходя из 100 г. Полученная смесь перемешивается с использованием V-образного смесителя Filra в течение 10 минут. Затем перемешанная смесь просеивается через сито с размером ячеек 1.2 мм и таблетируется с использованием полуавтоматического пресса Natoli 10А на пресс инструменте с размером рабочей части 16*8 мм двояковыпуклом. Полученные таблетки ядра обладают прочностью не менее 80Н, прочностью на истирание менее 0.3%. Далее таблетки ядра покрываются пленкообразующей суспензией Опадрай®. Суспензия готовится в соответствие с рекомендациями производителя в количестве 3% от средней массы ядра.

В отношении полученных вариантов заявленной фармацевтической композиции далее проводился тест растворения в соответствии с ОФС 1.4.2.0014.15 «Растворение для твердых дозированных лекарственных форм».

Контроль пробы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Вариант 1

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=95%.

Вариант 2

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=97%

Вариант 3

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=94%.

Вариант 4

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=98%.

Вариант 5

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=98%.

Вариант 6

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=94%.

Вариант 7

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=98%.

Вариант 8

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=102%.

Вариант 9

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=102%.

Вариант 10

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=94%.

Вариант 11 (отклонение от заявленной рецептуры)

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q)=60%.

Вариант 12 (отклонение от заявленной рецептуры)

Результат теста растворения

Массовая доля растворившегося АФС SN9 от заявленного количества (Q))=63%.

Таким образом, использование заявленной фармацевтической композиции (варианты 1-10) позволяет достичь высокого значения растворения АФС SN9 за 15 минут (94-102%). При этом отклонения от рецептуры заявленной фармацевтической композиции (варианты 11-12) приводят к резкому снижению растворения АФС SN9.

Пример 2. Оценка фармакокинетики заявленной фармацевтической композиции.

Дизайн исследования

Исследование проводили на кроликах, давая им микротаблетки с дозировкой 40 мг/кг веса животного. Относительное содержание компонентов в составе фармацевтической композиции для группы «Пероральное введение ГЛФ SN9 вариант состава 1» соответствует варианту рецептуры 1 (пример 1, исследуемый образец). Относительное содержание компонентов в составе фармацевтической композиции для группы «Пероральное введение ГЛФ SN9 вариант состава 11» соответствует варианту рецептуры 11 (пример 1, контроль). Группе «Пероральное введение АФС SN9» вводилось 40 мг/кг АФС SN9 (контроль).

Анализ плазмы крови животных проводили заранее валидированной аналитической методикой. Условия анализа приведены в таблице 14.

Результаты исследования представлены в таблице 15.

Из полученных данных можно сделать вывод о том, что применение образца, полученного в соответствии с заявленным изобретением, позволяет достигать больших, по сравнению с контрольными образцами, значений максимальной концентрации АФС SN9 в крови животных. Также применение образца, полученного в соответствии с заявленным изобретением, позволяет достигать больших, по сравнению с контрольными образцами, значений AUC - фармакокинетического параметра, характеризующего суммарную концентрацию лекарственного препарата в плазме крови в течение всего времени наблюдения. Таким образом, использование заявленной фармацевтической композиции позволяет повысить уровень биологической доступности АФС SN9.

Пример 3. Оценка эффективности АФС SN9 в составе заявленной композиции.

Дизайн исследования

Самкам сирийских хомячков (n=10) давали готовые лекарственные формы (ГЛФ) АФС SN9 в виде таблеток (12 мг АФС SN9) в дозе 200 мг/кг. Группа ГЛФ 1 получала таблетки с вариантом состава 1 (рецептура в соответствии с заявленной фармацевтической композицией, см. пример 1), группа ГЛФ 2 получала таблетки с вариантом состава 11 (отклонение от рецептуры заявленной фармацевтической композиции, см. пример 1). Группа Vehicle представляет собой таблетки, полученные в соответствии с вариантом состава 1, без включения АФС SN9.

Затем, производили интраназальное заражение животных дозой 10⁵ TCID₅₀ вируса SARS-CoV-2 BF.7. Все последующие дни животным давали исследуемые ГЛФ два раза в день в течение четырех дней. На четвертый день животных выводили из эксперимента. После эвтаназии производили их вскрытие и забор легких. Легкие хомяков подвергали гомогенизации (гомогенизатор Tissue Lyser) с последующим отделением супернатанта низкоскоростным центрифугированием (10 000 об/ мин.). Титр вируса определяли в монослое клеток Vero E6, выращенных в 48-луночных планшетах. Титр вируса для каждого образца гомогената легких определяется спустя 72 часа, и выражали в виде БОЕ (бляшкообразующие единицы) на 1 мг легкого. Для определения вирусной нагрузки измеряли количество копий РНК на 1 мг легкого. Для этого тотальную РНК из гомогенатов легких выделяли с помощью реагента ExtractRNA (Евроген, Россия) согласно инструкции производителя. Реакция обратной транскрипции и ПЦР выполнялась с помощью набора реагентов для количественного определения РНК коронавируса SARS-CoV-2 «SARS-CoV-2 FRT» (НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи) с использованием панели охарактеризованных по количеству копий амплифицируемого фрагмента SARS-CoV-2 и построением калибровочной прямой. Результаты выражали в виде чисел, преобразованных в log10 вирусной нагрузки РНК копий SARS-CoV-2 на мг ткани легкого.

Статистическую обработку количественных данных выраженных в виде БОЕ/мг легкого и РНК копий SARS-CoV-2 на мг ткани легкого проводили с использованием GraphPad Prism версии 9. Для оценки статистической значимости различий между группами при множественных сравнениях использовали метод Краскела-Уолиса с поправкой Данна, а для попарных сравнений критерий Манна-Уитни. Различия между группами принимали статистически значимыми при р<0.05.

Результаты исследования

Установлено, что оба состава ГЛФ обладали противовирусным эффектом. Использование ГЛФ1 и ГЛФ 2 приводило к снижению на 2.5 Log10 и 1.5 Log10 РНК копий SARS-CoV-2 на мг ткани легкого и 3 Log10 и 2 Log10 БОЕ/мг легкого, соответственно. Исходные данные приведены в таблице 14. Результаты статистической обработки представлены на рисунке 1. Наиболее выраженный антивирусный эффект наблюдали при лечении животных с использованием таблеток на основе ГЛФ 1. Различия в противовирусной активности как в части снижения РНК копий SARS-CoV-2 на мг ткани легкого, так и снижения БОЕ/мг легкого были статистически значимы (критерий Манна-Уитни, р<0.05).

Результаты оценки эффективности готовых лекарственных форм, содержащих

АФС SN9, приведены в таблице 16. Приведены индивидуальные значения вирусной нагрузки (копии/мг) и титра вируса (БОЕ/мг) для каждого животного.

Полученные данные проанализированы с помощью GraphPad Prism версии 9 с использованием метода Краскела-Уолиса с поправкой Данна. Результаты представлены на фиг. 1. ** р<0.01, ****р 0.0001. Для попарных сравнений. ГЛФ 1 и ГЛФ 2 критерий Манна-Уитни: * р<0.05. Различия между группами принимали статистически значимыми при р<0.05. Из диаграммы можно сделать вывод о том, что значения вирусной нагрузки (копии РНК SARS-Cov-2 на мг ткани легкого) и титра вируса (БОЕ/мг ткани легкого) для ГЛФ 1 статистически значимо отличались как от соответствующих значений в контрольной группе (Vehicle), так и от соответствующих значений для ГЛФ 2.

Таким образом, использование заявленной фармацевтической композиции позволяет повысить эффективность терапии SARS-CoV-2 с использованием АФС SN9.

Настоящее изобретение относится к медицине и химико-фармацевтической промышленности, а именно к новой фармацевтической композиции, содержащей 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин для лечения и/или профилактики вирусных инфекций, представляющей собой таблетку, и включающей 5'-O-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин в количестве 70-80% от массы композиции, разрыхлитель в количестве 2-6% от массы композиции, глидант в количестве до 1% от массы композиции, связующее вещество в количестве 3-7% от массы композиции, лубрикант в количестве до 1% от массы композиции, наполнитель в количестве до 15% от массы композиции. Изобретение обеспечивает высокий уровень растворимости, а также повышение биологической доступности АФС SN9, что, в свою очередь позволяет повысить эффективность терапии с использованием указанного лекарственного вещества. 5 з.п. ф-лы, 1 ил., 16 табл., 3 пр.

1. Фармацевтическая композиция для лечения и/или профилактики вирусных инфекций, представляющая собой таблетку и включающая:

5'-О-(3-фенилпропионил)-N4-гидроксицитидин в количестве 70-80% от массы композиции,

разрыхлитель, выбранный из кроскармелозы натрия, карбоксиметилкрахмала, кросповидона, в количестве 2-6% от массы композиции,

кремния диоксид коллоидный в количестве до 1% от массы композиции,

связующее вещество, выбранное из повидона, гидрокосипропилметилцеллюлозы в количестве 3-7% от массы композиции,

магния стеарат, в количестве до 1% от массы композиции,

наполнитель, выбранный из микрокристаллической целлюлозы, лактозы моногидрата, маннитола, в количестве до 15% от массы композиции.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что покрыта пленочной оболочкой.

3. Фармацевтическая композиция по п. 2, отличающаяся тем, что пленочной оболочкой является Опадрай белый.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1 для перорального применения.

5. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой активное вещество присутствует в микронизированной форме.

6. Фармацевтическая композиция по п. 5, в которой не менее 90% микронизированной формы активного вещества имеет размер частиц от 8 до 300 мкм.