СПОСОБ ЗАБОРА КРОВИ ИЗ РЕТРООРБИТАЛЬНОГО ВЕНОЗНОГО СПЛЕТЕНИЯ У МЕЛКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2025 года по МПК A61B5/153 

Изобретение относится к экспериментальной медицине, и может быть использовано для быстрого забора крови в необходимом объеме и качестве у мелких лабораторных животных.

Известны способы забора крови из подкожной вены и вен хвоста у крыс, под наркозом или без. Кроме этого они могут быть терминальные с общим подогревом или без подогрева с декапитацией.

Известен способ забора крови у крыс из периферических вен хвоста (RU 2719912 C1). С этой целью смачивают тканную салфетку в воде, подогретой до температуры 45°С. Салфетку отжимают и обертывают вокруг хвоста крысы по всей длине. Проводят 3 цикла прогревания по 15 с. с последующим забором крови из хвостовой вены. Способ позволяет получить достаточный объем материала для дальнейшего исследования. Позволяет проводить повторный забор крови через короткий промежуток времени. Кроме этого, снижает травмирование тканей хвоста крысы и обеспечивает чистоту полученной крови от чужеродных частиц, сводя к минимуму количество осложнений.

Недостатком известного способа является длительность проводимых манипуляций, а также проблема точного попадания в сосуд. Допустимый объем взятой крови - до 1 мл.

Известен способ забора крови у мелких лабораторных животных для выполнения низкочастотной пьезотромбоэластографии (RU 2648032 C1). Для этого выделяют и пунктируют левую сонную артерию шприцем с иглой 27-29 G, обращенной срезом книзу, которую располагают параллельно сосуду у головного конца и, прижимая к передней стенке, продвигают каудально до появления крови в шприце. Затем выполняют забор 0,45 мл крови за 8-10 секунд, помещая в дальнейшем ее в кювету низкочастотного пьезотромбоэластографа АРП-01М «Меднорд». Способ позволяет осуществить малотравматичный доступ и устранить ятрогенное влияние на изучаемые показатели низкочастотной пьезотромбоэластографии у мелких лабораторных животных. Забор крови осуществляется в пределах 10 секунд без кровопотери за счет выполнения пункции иглой, обращенной срезом книзу.

Однако, данная процедура достаточно сложная в исполнении.

Самым близким (прототипом) является способ забора крови из ретроорбитального венозного сплетения (Методические рекомендации по освоению дисциплины «Молекулярные основы рецепции фармакологических агентов». Образовательная программа «Фармакология, клиническая фармакология». Направление подготовки 30.06.01 Фундаментальная медицина/ М.В. Черников, М.А. Оганова. - Пятигорск: ПМФИ - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ, 2015. - 68 с.). Наркотизированную крысу захватывают левой рукой за кожу шеи большим и указательным пальцами, а другими пальцами надежно удерживают за кожу спины. Концом микропипетки пробуравливающими движениями прокалывают конъюнктиву внутреннего угла глаза и вводят на глубину 1-2 мм за глазное яблоко в венозное сплетение. При верном попадании в капилляр из ретроорбитального сплетения самотеком поступает кровь.

К недостаткам данного способа относится – трудность удержания животного на весу, за счет чего высок риск травм и осложнений - от воспалений в области глазницы до слепоты. Также возможно загрязнение образцов крови слезной жидкостью или препаратом для анестезии. Повторный забор крови возможен не менее, чем через 10 дней после процедуры.

Целью предлагаемого изобретения является минимизация травматических воздействий, снижение риска загрязнения чужеродными элементами, а также возможность повторного забора крови через небольшой промежуток времени.

В рамках предлагаемого изобретения животное фиксируют в прозрачной камере к платформе и после ингаляции наркозом голову обрабатывают 3% перекисью водорода, а рабочий глаз хлоргексидином и производят забор крови из ретроорбитального венозного сплетения.

Особенностью заявленного способа является то, что животное помещают на платформу, накрывают прозрачной камерой и фиксируют, обрабатывают голову 3% перекисью водорода, а рабочий глаз – хлоргексидином, затем в области внутреннего угла глаза вводят иглу 22 G длиной 1,6 или 3,2 см, предварительно обработанную гепарином, в ретроорбитальное венозное сплетение под углом 28-30° к поверхности носа на глубину 15-22 мм.

Способ поясняется подробным описанием, примером и иллюстрациями, на которых изображено:

Фиг. 1 – фотоиллюстрация томографической реконструкции головы крысы с контрастированием венозных сосудов с иглой, введенной в зону ретроорбитального венозного сплетения согласно предложенному способу, и проведенным забором образца крови: а) боковая проекция, б) верхняя проекция, в) сагиттальный срез в области острия иглы.

Фиг. 2 –фотоиллюстрация шприца с иглами G 22: а) игла 1,6 см; б) игла 3,2см.

Фиг. 3 – фотоиллюстрация забора крови у наркотизированной крысы: а) под углом 28⁰; б) под углом 30⁰.

Фиг.4 – Внешний вид устройства для фиксации животных.

Способ осуществляют следующим образом.

Крысу фиксируют и наркотизируют эфирной ингаляцией, поверхность головы обрабатывают 3% перекисью водорода, а рабочий глаз хлоргексидином. Для забора крови используют шприц с иглой G 22 длиной 1,6 см или 3,2 см, обработанную гепарином (Фиг.2 а, б). Иглу вводят в ретроорбитальное венозное сплетение (Фиг.1 а, б, в) под углом 28-30ᵒ к поверхности носа на глубину 15-22 мм, поршень шприца оттягивают и осуществляют забор образца крови необходимого объема.

Способ иллюстрируется примерами выполнения.

Пример № 1.

Для забора крови из ретроорбитального венозного сплетения крысу накрыли прозрачной камерой и фиксировали к платформе с помощью лент (Фиг. 4).

Поверхность головы наркотизированной крысы обработали 3% перекисью водорода, глаз обработали хлоргексидином. После этого в ретроорбитальное венозное сплетение под углом 28⁰ от поверхности носа, как на Фиг. 1 а, б, в, ввели обработанную гепарином укороченную иглу 1,6 см G 22 на глубину 15 мм (Фиг.2 а). При оттягивании поршня кровь поступила в шприц (Фиг.3 а). Через сутки забор крови повторили из другого глаза. Изменений в орбитальной области обнаружено не было. 

Пример № 2.

Наркотизированную эфирной ингаляцией крысу фиксировали, после чего голову обработали 3% перекисью водорода. Затем в ретроорбитальное венозное сплетение в промытый глаз хлоргексидином, под углом 30ᵒ от поверхности носа, ввели иглу 3,2 см G 22 (Фиг. 2 б), обработанную гепарином, на глубину 22 мм (Фиг. 3 б).

Через сутки забор крови повторили.  Изменений в орбитальной области обнаружено не было.

Предложенный способ позволяет проводить манипуляции из ретроорбитального венозного сплетения с минимизацией травматических воздействий, исключающим риск загрязнения чужеродными элементами, с повторением процедуры забора крови, при необходимости, уже на следующие сутки из глазницы второго глаза.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для забора крови у мелких лабораторных животных. Животное помещают на платформу, накрывают прозрачной камерой и фиксируют. Обрабатывают голову 3% перекисью водорода, а рабочий глаз хлоргексидином. В области внутреннего угла глаза вводят иглу 22 G длиной 1,6 или 3,2 см, предварительно обработанную гепарином, в ретроорбитальное венозное сплетение под углом 28-30° к поверхности носа на глубину 15-22 мм. Способ позволяет проводить манипуляции из ретроорбитального венозного сплетения с минимизацией травматических воздействий, исключающих риск загрязнения чужеродными элементами, с повторением процедуры забора крови, при необходимости, на следующие сутки из глазницы второго глаза. 4 ил., 2 пр.

Способ забора крови из ретроорбитального венозного сплетения у мелких лабораторных животных, включающий проведение ингаляционного наркоза, фиксацию животного и обработку рабочей поверхности головы, отличающийся тем, что животное помещают на платформу, накрывают прозрачной камерой и фиксируют, обрабатывают голову 3% перекисью водорода, а рабочий глаз хлоргексидином, затем в области внутреннего угла глаза вводят иглу 22 G длиной 1,6 или 3,2 см, предварительно обработанную гепарином, в ретроорбитальное венозное сплетение под углом 28-30° к поверхности носа на глубину 15-22 мм.