ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] В настоящей заявке заявлен приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/769959, поданной 20 ноября 2018 года, полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0002] Настоящее описание относится к соединениям, способным модулировать активность декарбоксилазы полуальдегида α-амино-β-карбоксимуконовой кислоты (ACMSD). Соединения согласно настоящему описанию могут быть использованы в способах предупреждения и/или лечения заболеваний и расстройств, связанных с нарушением биосинтеза НАД+, например, метаболических расстройств, нейродегенеративных заболеваний, хронических воспалительных заболеваний, заболеваний почек и заболеваний, связанных со старением.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] ACMSD является необходимым ферментом для метаболизма триптофана и регулирует биосинтез НАД+ из триптофана. ACMSD представляет собой цинк-зависимую амидогидролазу, которая участвует в гомеостазе пиколиновой кислоты (PA), хинолиновой кислоты (QA) и НАД+. ACMSD находится в точке ветвления пути биосинтеза НАД+ из триптофана и определяет окончательное преобразование аминокислоты, то есть превращение в PA, полное окисление в цикле лимонной кислоты или превращение в НАД+ посредством синтеза QA.
[0004] ACMSD выделена из тканей печени, почек и головного мозга человека. Существуют две изоформы ACMSD1 и ACMSD2, полученные в результате дифференциального сплайсинга транскрипции гена ACMSD, но только ACMSD1 наделен ферментативной активностью. ACMSD1 направляет ACMS (полуальдегид -амино-ω-карбоксимуконовой кислоты) в каскад ацетил-CoA, и при ингибировании ACMSD1 ACMS неферментативно превращается в хинолиновую кислоту (QA), что приводит к образованию НАД+ и повышению внутриклеточного уровня НАД+.
[0005] Было показано, что повышенные уровни НАД+ защищают от нейродегенерации, улучшают мышечную функцию и окислительный метаболизм у мышей, а также увеличивают продолжительность жизни у червей. При этом пониженные уровни НАД+ связаны с рядом патофизиологических состояний, включая диабет 2 типа (T2D), гиперлипидемию (повышенный холестерин и TAG), митохондриальные заболевания, нейтропению, рак и заболевания почек.
[0006] Таким образом, ингибирование ACMSD представляет собой новый подход к повышению уровня НАД+ и изменению патофизиологии заболевания, связанного с дефектами биосинтеза НАД+.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0007] Задачей вариантов реализации данного описания является обеспечение новой серии соединений, способных модулировать активность декарбоксилазы полуальдегида α-амино-β-карбоксимуконовой кислоты (ACMSD), и указанные соединения пригодны для предупреждения и/или лечения заболеваний и расстройств, связанных с нарушениями биосинтеза НАД+, например, метаболических расстройств, нейродегенеративных заболеваний, хронических воспалительных заболеваний, заболеваний почек и заболеваний, связанных со старением.
[0008] Соединения формулы (I) или (II), описанные в настоящем документе, могут быть использованы для лечения заболевания или расстройства, в котором определенную роль играет ACMSD. В настоящем описании описаны способы лечения заболевания или расстройства, связанного с патологиями биосинтеза НАД+, посредством введения субъектам, страдающим или предрасположенным к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений, которые увеличивают содержание внутриклеточного НАД+ посредством ингибирования ACMSD1, в количестве, достаточном для активации сиртуинов (SIRT) и последующих мишеней SIRT, таких как PGC-1α, FoxO1 и/или супероксиддисмутаза (SOD). Способы согласно настоящему описанию могут быть использованы для лечения заболеваний, зависящих от НАД+, посредством ингибирования ACMSD. Ингибирование ACMSD может обеспечивать новый подход к предупреждению и лечению метаболических расстройств, нейродегенеративных заболеваний, хронических воспалительных заболеваний, заболеваний почек, заболеваний, связанных со старением, и других зависящих от ACMSD заболеваний или заболеваний, характеризующихся нарушенным синтезом НАД+.
[0009] В настоящем описании предложено соединение, представленное формулой (I):
и его фармацевтически приемлемые соли и таутомеры, где:
X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl;
W представляет собой N или C;
(i) если W представляет собой N, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, 
, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
(ii) если W представляет собой C, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q;
каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен или гетероарилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен или гетероарилен необязательно замещены одним или двумя Re;
R2 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил; или
R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S;
R3 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R4 представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
R7 представляет собой H, A, B или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол, -(CH2)rP(O)(OH)ORx, -(CH2)rS(O)2OH, -(CH2)rC(O)NHCN или -(CH2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом,
B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NRgRg', -(CH2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx,
C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S;
Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx;
Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил;
каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN;
Rf отсутствует, представляет собой H или метил;
Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2;
Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH;
Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила;
Ri представляет собой (i) -(CH2)sOC(O)C1-C6 алкил, причем указанный алкил замещен одним или более NH2; (ii) (CH2CH2O)nCH2CH2OH; или (iii) C1-C6 алкил, замещенный одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из OH и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из O, N или S;
Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN;
каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил;
каждый Ry и Rz независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил;
каждый m, p, q, r и t независимо равен 0, 1 или 2;
n равен 0, 1, 2 или 3;
s равен 1 или 2;
o равен 0, 1, 2, 3 или 4; и
представляет собой простую связь или двойную связь; и
при условии, что
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; то R7 не представляет собой -COOH;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; и R7 представляет собой тетразол; то Rc не представляет собой H;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -S-C(R5)2 или -SCH2CH2-; R1 отсутствует; то R7 не представляет собой COOH или тетразол;
если X представляет собой O, Rf представляет собой H; W представляет собой N; Rj отсутствует; Rd представляет собой метил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил; L представляет собой -SCH2- или -OCH2-; и R1 представляет собой фенилен; то R7 не представляет собой -COOH, -CH2COOH, 
или 
; и
если X представляет собой O, Rf представляет собой H, W представляет собой N, Rj отсутствует, L представляет собой -NHCH2- , -CH2NH- или -NH-C(O)-, и R1 представляет собой фенилен, то Rd не представляет собой фенил.
[0010] В настоящем описании предложено соединение, представленное формулой (II):
и его фармацевтически приемлемые соли и таутомеры, где:
X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl;
W представляет собой N или C;
(i) если W представляет собой N, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
(ii) если W представляет собой C, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q;
каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен, гетероарилен или C3-C8циклоалкилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен, гетероарилен и C3-C8циклоалкилен необязательно замещены одним или двумя Re;
R2 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил; или
R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S;
R3 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R4 представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
R7 представляет собой H, A, B или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол, -(C(R6)2)rP(O)(OH)ORx, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rC(O)NHCN или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом,
B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx,
C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S;
Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx;
Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил;
каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN;
Rf отсутствует, представляет собой H или метил;
Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2;
Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH;
Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила;
Ri представляет собой (i) -(CH2)sOC(O)C1-C6 алкил, причем указанный алкил замещен одним или более NH2; (ii) (CH2CH2O)nCH2CH2OH; или (iii) C1-C6 алкил, замещенный одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из OH и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из O, N или S;
Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN;
каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил;
каждый Ry и Rz независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил;
каждый m, p, q, r и t независимо равен 0, 1 или 2;
n равен 0, 1, 2 или 3;
s равен 1 или 2;
o равен 0, 1, 2, 3 или 4; и
представляет собой простую связь или двойную связь; и
при условии, что
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; то R7 не представляет собой -COOH;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; и R7 представляет собой тетразол; то Rc не представляет собой H;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -S-C(R5)2 или -SCH2CH2-; R1 отсутствует; то R7 не представляет собой COOH или тетразол;
если X представляет собой O, Rf представляет собой H; W представляет собой N; Rj отсутствует; Rd представляет собой метил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил; L представляет собой -SCH2- или -OCH2-; и R1 представляет собой фенилен; то R7 не представляет собой -COOH, -CH2COOH, или ; и
если X представляет собой O, Rf представляет собой H, W представляет собой N, Rj отсутствует, L представляет собой -NHCH2- , -CH2NH- или -NH-C(O)-, и R1 представляет собой фенилен, то Rd не представляет собой фенил.
[0011] В другом аспекте настоящего описания предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[0012] В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения в качестве лекарственного средства. В другом аспекте настоящего описания предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или (II), для применения в качестве лекарственного средства.
[0013] В другом аспекте настоящего описания предложен способ лечения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II). В другом аспекте настоящего описания предложен способ предупреждения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II). В другом аспекте настоящего описания предложен способ снижения риска заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II).
[0014] В другом аспекте настоящего описания предложен способ лечения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II). В другом аспекте настоящего описания предложен способ предупреждения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II). В другом аспекте настоящего описания предложен способ снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II).
[0015] В другом аспекте настоящего описания предложен способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II), что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложен способ предупреждения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II), что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложен способ снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II), что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[0016] В другом аспекте настоящего описания предложен способ ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II), что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[0017] В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для лечения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для предупреждения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для снижения риска заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[0018] В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для лечения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для предупреждения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II) для применения для снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[0019] В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II), обеспечивающее увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для применения для лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II), обеспечивающее увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для применения для предупреждения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II), обеспечивающее увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для применения для снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[0020] В другом аспекте настоящего описания предложено соединение формулы (I) или (II), обеспечивающее увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[0021] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для лечения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для предупреждения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для снижения риска заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[0022] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для лечения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для предупреждения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[0023] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для предупреждения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[0024] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), для ускорения окислительного метаболизма.
[0025] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для производства лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для производства лекарственного средства для предупреждения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) для производства лекарственного средства для снижения риска заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[0026] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) в производстве лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) в производстве лекарственного средства для предупреждения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+). В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II) в производстве лекарственного средства для снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[0027] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), в производстве лекарственного средства для лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), в производстве лекарственного средства для предупреждения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией. В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), в производстве лекарственного средства для снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[0028] В другом аспекте настоящего описания предложено применение соединения формулы (I) или (II), обеспечивающего увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[0029] В некоторых аспектах соединения согласно настоящему изобретению можно вводить отдельно или в комбинации с другими соединениями, включая другие соединения, модулирующие ACMSD, или другие терапевтические агенты.
[0030] Если не указано иное, все технические и научные термины, использованные в настоящем документе, имеют значение, обычно понятное для специалистов в той области техники, к которой относится настоящее описание. В тексте описания формы единственного числа также включают формы множественного числа, если в контексте в явном виде не указано иное. Несмотря на то, что при практическом осуществлении и испытании настоящего изобретения могут быть использованы способы и материалы, подобные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящем документе, ниже описаны подходящие способы и материалы. Все публикации, патентные заявки, патенты и другие источники, упомянутые в настоящем документе, включены посредством ссылки. Ссылки, цитированные в настоящем документе, не являются признанием известного уровня техники для заявленного описания. В случае противоречий следует руководствоваться настоящим описанием, включая определения. Кроме того, материалы, способы и примеры являются лишь иллюстративными и не предназначены для ограничения.
[0031] Другие признаки и преимущества настоящего изобретения станут понятны из следующего подробного описания и формулы изобретения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0032] Все ссылки, включая патенты или патентные заявки, цитированные в настоящем описании, включены в настоящий документ посредством ссылки. Авторы настоящего описания не считают, что какие-либо ссылки составляют предшествующий уровень техники. Кроме того, они не считают, что любая информация из предшествующего уровня техники составляет часть общеизвестных знаний в данной области.
[0033] Следует понимать, что в настоящем описании, если не указано иное, следующие термины имеют указанные ниже значения. Если термин не описан, то следует руководствоваться стандартным значением термина, известным специалистам в данной области техники.
[0034] В данном контексте термины «включающий», «содержащий» и «включающий в себя» использованы в открытом, не ограничивающем значении. В тексте описания и формулы настоящего изобретения слова «включают» и «содержат», а также варианты этих слов, например, «включая» и «включает», обозначают «включая, но не ограничиваясь этим», и не исключают другие группы, добавки, компоненты, целые числа или стадии. В тексте описания и формулы настоящего изобретения формы единственного числа включают формы множественного числа, если в контексте не требуется иное. В частности, при использовании термина в единственном числе следует понимать, что настоящее описание предусматривает термин во множественном числе, а также в единственном числе, если в контексте не требуется иное.
[0035] Термины в единственном числе, использованные в данном описании, относятся к одному или более (т.е. к по меньшей мере одному) грамматическому объекту описания. Например, «элемент» может означать один элемент или более одного элемента.
[0036] Термин «и/или», используемый в данном описании, может означать либо «и», либо «или», если не указано иное.
[0037] Для обеспечения более краткого описания некоторые количественные выражения, представленные в настоящем документе, не имеют оговорки «примерно». Следует понимать, что независимо от того, использован ли термин «примерно» или нет, каждое количество, представленное в настоящем документе, относится к фактическому данному значению, а также относится к приближению данного значения, которое целесообразно предположить на основании общих знаний в данной области техники, включая эквиваленты и приближения, обусловленные экспериментальными и/или измерительными условиями для данного значения. Если выход представлен в процентном выражении, то указанный выход относится к массе вещества, для которого дан выход, относительно максимального количества того же вещества, которое может быть получено в конкретных стехиометрических условиях. Концентрации, выраженные в процентах, относятся к массовым долям, если не указано иное.
[0038] Термин «алкил» в данном контексте относится к насыщенной неразветвленной или разветвленной углеводородной цепи. Углеводородная цепь предпочтительно содержит от одного до восьми атомов углерода (C1-8-алкил), более предпочтительно от одного до шести атомов углерода (C1-6-алкил), в частности, от одного до четырех атомов углерода (C1-4-алкил), включая метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, вторичный бутил, третичный бутил, пентил, изопентил, неопентил, третичный пентил, гексил, изогексил, гептил и октил. В предпочтительном варианте реализации «алкил» представляет собой C1-4-алкильную группу, которая, в частности, может включать метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, вторичный бутил и третичный бутил. Соответственно, термин «алкилен» означает соответствующий бирадикал (-алкил-).
[0039] Термин «циклоалкил» или «карбоцикл» в данном контексте относится к циклической алкильной группе, предпочтительно содержащей от трех до десяти атомов углерода (C3-10-циклоалкил или C3-10-карбоцикл), например, от трех до восьми атомов углерода (C3-8-циклоалкил или C3-10-карбоцикл), предпочтительно от трех до шести атомов углерода (C3-6-циклоалкил или C3-10-карбоцикл), включая циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Кроме того, термин «циклоалкил» в данном контексте может также включать полициклические группы, такие как, например, бицикло[2.2.2]октил, бицикло[2.2.1]гептанил, декалинил и адамантил. Соответственно, термин «циклоалкилен» означает соответствующий бирадикал (-циклоалкил-). Алкильные и циклоалкильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в алкильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил, карбамоил, оксо и -CN.
[0040] Термин «алкенил» в данном контексте относится к неразветвленной или разветвленной углеводородной цепи или циклическим углеводородам, содержащим одну или более двойных связей, включая диены, триены и полиены. Обычно алкенильная группа содержит от двух до восьми атомов углерода (C2-8-алкенил), например, от двух до шести атомов углерода (C2-6-алкенил), в частности, от двух до четырех атомов углерода (C2-4-алкенил), и содержит по меньшей мере одну двойную связь. Примеры алкенильных групп включают этенил; 1- или 2-пропенил; 1-, 2- или 3-бутенил, или 1,3-бутадиенил; 1-, 2-, 3-, 4- или 5-гексенил, или 1,3-гексадиенил, или 1,3,5-гексатриенил; 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-октенил или 1,3-октадиенил, или 1,3,5-октатриенил, или 1,3,5,7-октатетраенил, или циклогексенил. Соответственно, термин «алкенилен» означает соответствующий бирадикал (-алкенил-). Алкенильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в алкенильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил, карбамоил, оксо и -CN.
[0041] Термин «алкинил» в данном контексте относится к неразветвленной или разветвленной углеводородной цепи, содержащей одну или более тройных связей, включая диины, триины и полиины. Обычно алкинильная группа содержит от двух до восьми атомов углерода (C2-8-алкинил), например, от двух до шести атомов углерода (C2-6-алкинил), в частности, от двух до четырех атомов углерода (C2-4-алкинил), и содержит по меньшей мере одну тройную связь. Примеры предпочтительных алкинильных групп включают этинил; 1- или 2-пропинил; 1-, 2- или 3-бутинил, или 1,3-бутадиинил; 1-, 2-, 3-, 4- или 5-гексинил, или 1,3-гексадиинил, или 1,3,5-гексатриинил; 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- или 7-октинил, или 1,3-октадиинил, или 1,3,5-октатриинил, или 1,3,5,7-октатетраинил. Соответственно, термин «алкинилен» означает соответствующий бирадикал (-алкинил-). Алкинильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в алкинильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил, карбамоил, оксо и -CN.
[0042] Термины «гало» и «галоген», используемые в настоящем документе, относятся к фтору, хлору, брому или йоду. Так, тригалогенметильная группа представляет собой, например, трифторметильную группу или трихлорметильную группу. Предпочтительно, термины «гало» и «галоген» означают фтор или хлор.
[0043] Термин «галогеналкил» в данном контексте относится к алкильной группе, описанной в настоящем документе, которая один или более раз замещена одним или более галогенами. Примеры галогеналкильных групп включают, но не ограничиваются ими, трифторметил, дифторметил, пентафторэтил, трихлорметил и т.д.
[0044] Термин «алкокси» в данном контексте относится к группе «алкил-O-», где алкил является таким, как описано выше.
[0045] Термин «гидроксиалкил» в данном контексте относится к алкильной группе (как описано выше в настоящем документе), которая один или более раз замещена гидрокси-группой. Примеры гидроксиалкильных групп включают HO-CH2-, HO-CH2-CH2- и CH3-CH(OH)-.
[0046] Термин «окси» в данном контексте относится к группе «-O-».
[0047] Термин «оксо» в данном контексте относится к группе «=O».
[0048] Термин «амин» в данном контексте относится к первичным (R-NH2, R ≠ H), вторичным ((R)2-NH, (R)2 ≠ H) и третичным ((R)3-N, R ≠ H) аминам. Замещенный амин означает амин, в котором по меньшей мере один из атомов водорода заменен на заместитель.
[0049] Термин «карбамоил» в данном контексте относится к группе «H2N(C=O)-».
[0050] Термин «арил» в данном контексте, если не указано иное, включает карбоциклические ароматические кольцевые системы, полученные из ароматического углеводорода посредством удаления атома водорода. Кроме того, арил включает би-, три- и полициклические кольцевые системы. Примеры предпочтительных арильных фрагментов включают фенил, нафтил, инденил, инданил, флуоренил, бифенил, инденил, нафтил, антраценил, фенантренил, пенталенил, азуленил и бифениленил. Предпочтительный «арил» представляет собой фенил, нафтил или инданил, в частности, фенил, если не указано иное. Любой используемый арил может быть необязательно замещен. Соответственно, термин «арилен» означает соответствующий бирадикал (-арил-). Арильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в арильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил и -CN.
[0051] Термин «гетероарил» в данном контексте относится к ароматическим группам, содержащим один или более гетероатомов, выбранных из O, S и N, предпочтительно от одного до четырех гетероатомов и более предпочтительно от одного до трех гетероатомов. Кроме того, гетероарил включает би-, три- и полициклические группы, при этом по меньшей мере одно кольцо указанной группы является ароматическим, и по меньшей мере одно из указанных колец содержит гетероатом, выбранный из O, S и N. Гетероарил включает также кольцевые системы, замещенные одним или более оксо-фрагментами. Примеры предпочтительных гетероарильных фрагментов включают N-гидрокситетразолил, N-гидрокситриазолил, N-гидроксиимидазолил, фуранил, триазолил, пиранил, тиадиазинил, бензотиофенил, дигидробензо[b]тиофенил, ксантенил, изоинданил, акридинил, бензизоксазолил, хинолинил, изохинолинил, птеридинил, азепинил, диазепинил, имидазолил, тиазолил, карбазолил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, триазинил, изоиндолил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотриазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил, дигидрохинолил, тетрагидрохинолил, дигидроизохинолил, тетрагидроизохинолил, бензофурил, фуропиридинил, пирролопиримидинил, азаиндолил, пиразолинил, 1,2,3-оксадиазол-5(4H)-он и пиразолидинил. Неограничивающие примеры частично гидрированных производных представляют собой 1,2,3,4-тетрагидронафтил, 1,4-дигидронафтил и 1-окталин. Соответственно, термин «гетероарилен» означает соответствующий бирадикал (-гетероарил-). Гетероарильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в гетероарильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил и -CN.
[0052] Термин «гетероциклил» в данном контексте относится к циклическим неароматическим группам, содержащим один или более гетероатомов, выбранных из O, S и N, предпочтительно от одного до четырех гетероатомов и более предпочтительно от одного до трех гетероатомов. Кроме того, гетероциклил включает би-, три- и полициклические неароматические группы, и по меньшей мере одно из указанных колец содержит гетероатом, выбранный из O, S и N. Гетероциклил включает также кольцевые системы, замещенные одним или более оксо-фрагментами. Примеры гетероциклических групп представляют собой оксетан, пирролидинил, пирролил, 3H-пирролил, оксоланил, фуранил, тиоланил, тиофенил, пиразолил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолидинил, 3H-пиразолил, 1,2-оксазолил, 1,3-оксазолил, 1,2-тиазолил, 1,3-тиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, пиперидинил, пиридинил, оксанил, 2H-пиранил, 4H-пиранил, тианил, 2H-тиопиранил, пиридазинил, 1,2-диазинанил, пиримидинил, 1,3-диазинанил, пиразинил, пиперазинил, 1,4-диоксинил, 1,4-диоксанил, 1,3-диазинанил, 1,4-оксазинил, морфолино, тиоморфолино, 1,4-оксатианил, бензофуранил, изобензофуранил, индазолил, бензимидазолил, хинолинил, изохинолинил, хроманил, изохроманил, 4H-хроменил, 1H-изохроменил, циннолил, хиназолинил, хиноксалинил, фталазинил, пуринил, нафтиридинил, птеридинил, индолизинил, 1H-пирролизинил, 4H-хинолизинил и аза-8-бицикло[3.2.1]октан. Соответственно, термин «гетероциклилен» означает соответствующий бирадикал (-гетероциклил-). Гетероциклильные группы могут быть необязательно замещены 1-4 заместителями. Примеры заместителей в гетероциклильных группах включают, но не ограничиваются ими, алкил, алкенил, алкинил, галоген, галогеналкил, алкокси, гетероарил, арил, карбоциклил, гидроксил и -CN.
[0053] Термин «N-гетероциклическое кольцо» в данном контексте относится к гетероциклилу или гетероарилу, описанному выше, имеющему по меньшей мере один атом азота и связанному через атом азота. Примеры таких N-гетероциклических колец представляют собой пирролидинил, пирролил, 3H-пирролил, пиразолил, приазолидинил, имидазолил, имидазолидинил, 3H-пиразолил, 1,2-оксазолил, 1,2-тиазолил, 1,3-тиазолил, пиперидинил, пиридинил, пиридазинил, пиразинил, пиперазинил, морфолино, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразолил, пиразинил, тетразолил и т.д.
[0054] В настоящем описании структурная формула соединения в некоторых случаях для удобства иллюстрирует определенный изомер, но настоящее описание включает все изомеры, такие как геометрические изомеры, оптические изомеры на основе асимметричного атома углерода, стереоизомеры, таутомеры и т.п. Соответственно, следует понимать, что определение соединений формулы (I) или (II) включает каждый и все отдельные изомеры, соответствующие формуле (I) или (II), включая цис-транс изомеры, стереоизомеры и таутомеры, а также их рацемические смеси и фармацевтически приемлемые соли. Следовательно, определение соединений формулы (I) или (II) предназначено также для охвата всех R- и S-изомеров химической структуры в любом соотношении, например, с обогащением (т.е. энантиомерным избытком или диастереомерным избытком) одного из возможных изомеров и соответствующим меньшим содержанием других изомеров. Кроме того, соединениям, представленным формулой (I) или (II), может быть присущ полиморфизм. Следует отметить, что в объем настоящего описания включена любая кристаллическая форма, смесь кристаллических форм или их ангидрид или гидрат. Кроме того, так называемый метаболит, который образуется при разложении предложенного соединения in vivo, входит в объем настоящего описания.
[0055] «Изомерия» означает соединения, которые имеют одинаковые молекулярные формулы, но отличающиеся последовательностью связывания их атомов или расположением их атомов в пространстве. Изомеры, которые отличаются расположением атомов в пространстве, называют «стереоизомерами». Стереоизомеры, которые не являются зеркальным отображением друг друга, называют «диастереомерами», а стереоизомеры, которые являются несовместимыми зеркальными отображениями друг друга, называют «энантиомерами» или иногда оптическими изомерами. Смесь, содержащую равные количества отдельных энантиомерных форм противоположной хиральности, называют «рацемической смесью».
[0056] Атом углерода, связанный с четырьмя неидентичными заместителями, называют «хиральным центром».
[0057] «Хиральный изомер» означает соединение с по меньшей мере одним хиральным центром. Соединения, содержащие более одного хирального центра, могут существовать либо в виде отдельных диастереомеров, либо в виде смеси диастереомеров, называемой «диастереомерной смесью». При наличии одного хирального центра, стереоизомер может быть охарактеризован по абсолютной конфигурации (R или S) данного хирального центра. Абсолютная конфигурация относится к расположению в пространстве заместителей, присоединенных к хиральному центру. Заместители, присоединенные к рассматриваемому хиральному центру, классифицируют в соответствии с правилом последовательности Кана, Ингольда и Прелога. (Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; исправление 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn and Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (Лондон), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116).
[0058] Диастереоизомеры, т.е. есть не совмещаемые стереохимические изомеры, могут быть разделены стандартными способами, такими как хроматография, перегонка, кристаллизация или сублимация. Оптические изомеры могут быть получены разделением рацемических смесей стандартными способами, например, образованием диастереоизомерных солей посредством обработки оптически активной кислотой или основанием. Примеры подходящих кислот включают, без ограничения, винную, диацетилвинную, дибензоилвинную, дитолуоилвинную и камфорсульфоновую кислоту. Смесь диастереомеров может быть разделена кристаллизацией с последующим высвобождением оптически активных оснований из указанных солей. Альтернативный способ разделения оптических изомеров включает использование хиральной хроматографической колонки, оптимально подобранной для максимального разделения энантиомеров. Другой доступный способ включает синтез ковалентных диастереоизомерных молекул посредством взаимодействия соединений формулы (I) или (II) с оптически чистой кислотой в активированной форме или с оптически чистым изоцианатом. Синтезированные диастереоизомеры могут быть разделены обычными способами, такими как хроматография, перегонка, кристаллизация или сублимация, а затем гидролизованы с получением энантиомерно чистого соединения. Оптически активные соединения формулы (I) точно так же могут быть получены посредством использования оптически активных исходных материалов и/или посредством применения хирального катализатора. Указанные изомеры могут быть в форме свободной кислоты, свободного основания, сложного эфира или соли. Примеры приемов хирального разделения представлены в книге Chiral Separation Techniques, A Practical Approach, 2-е изд., G. Subramanian, Wiley-VCH, 2001.
[0059] «Геометрический изомер» означает диастереомеры, которые обязаны своим существованием затрудненному вращению вокруг двойных связей. Указанные конфигурации дифференцируют в названии с помощью приставок цис и транс, или Z и E, которые означают, что данные группы находятся на одной и той же или на противоположных сторонах двойной связи в молекуле, в соответствии с правилами Кана-Ингольда-Прелога.
[0060] Кроме того, структуры и другие соединения, рассмотренные в настоящем описании, включают все атропизомеры. «Атропизомеры» представляют собой тип стереоизомера, в котором атомы двух изомеров различным образом расположены в пространстве. Атропизомеры обязаны своим существованием ограниченному вращению, обусловленному затруднением вращения крупных групп вокруг центральной связи. Такие атропизомеры обычно существуют в виде смеси, однако благодаря недавним достижениям в технологии хроматографии в некоторых случаях стало возможным разделение смесей двух атропизомеров.
[0061] «Таутомер» представляет собой один из двух или более структурных изомеров, которые находятся в равновесии и легко превращаются из одной изомерной формы в другую. Такое превращение приводит к формальной миграции атома водорода, сопровождающейся перемещением смежных сопряженных двойных связей. Таутомеры существуют в виде смеси таутомерных форм в растворе. В твердой форме обычно преобладает один таутомер. В тех растворах, в которых возможна таутомерия, достигается химическое равновесие таутомеров. Точное соотношение таутомеров зависит от нескольких факторов, включая температуру, растворитель и рН. Понятие о таутомерах, которые являются взаимопревращаемыми посредством таутомеризации, называют таутомерией.
[0062] Среди различных возможных типов таутомерии обычно наблюдают два. При кето-енольной таутомерии происходит одновременное смещение электронов и атома водорода. Таутомерия кольцо-цепь возникает в результате взаимодействия альдегидной группы (-CHO) в молекуле сахарной цепи с одной из гидроксильных групп (-OH) в той же молекуле с образованием циклической (кольцевой) формы, которую можно наблюдать у глюкозы.
[0063] Распространенными таутомерными парами являются: кетон-енол, амид-нитрил, лактам-лактим, амид-имидокислотная таутомерия в гетероциклических кольцах (например, в нуклеооснованиях, таких как гуанин, тимин и цитозин), амин-енамин и енамин-енамин. Следует понимать, что соединения согласно настоящему описанию могут быть изображены как различные таутомеры. Также следует понимать, что если соединения имеют таутомерные формы, то в объем настоящего описания включены все таутомерные формы, и название соединений не исключает любую таутомерную форму.
[0064] Термин «кристаллические полиморфы», «полиморфы» или «кристаллические формы» означает кристаллические структуры, в которых соединение (или его соль или сольват) может кристаллизоваться в различных структурах упаковки кристалла, и все они имеют одинаковый элементный состав. Различные кристаллические формы обычно имеют разные диаграммы рентгеновской дифракции, инфракрасные спектры, температуры плавления, плотность, твердость, кристаллическую форму, оптические и электрические свойства, стабильность и растворимость. Растворитель, используемый для перекристаллизации, скорость кристаллизации, температура хранения и другие факторы могут обусловливать преобладание одной кристаллической формы. Кристаллические полиморфы предложенных соединений могут быть получены кристаллизацией в различных условиях.
[0065] Кроме того, соединения согласно настоящему описанию, например, соли таких соединений, могут существовать в гидратированной или негидратированной (безводной) форме или в виде сольватов с молекулами других растворителей. Неограничивающие примеры гидратов включают моногидраты, дигидраты и т.д. Неограничивающие примеры сольватов включают сольваты с этанолом, сольваты с ацетоном и т.д.
[0066] «Сольват» означает формы присоединения растворителя, которые содержат стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя. Некоторые соединения склонны к захвату определенного молярного соотношения молекул растворителя в твердом кристаллическом состоянии с образованием сольвата. Если растворителем является вода, то образующийся сольват представляет собой гидрат; и если растворителем является спирт, то образующийся сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются в результате объединения одной или более молекул воды с одной молекулой вещества, в котором вода сохраняет свое молекулярное состояние в форме H2O.
[0067] В данном контексте «субъект» или «субъект, нуждающийся в этом» представляет собой субъекта, страдающего от заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD) или подавляемого декарбоксилазой -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD). «Субъект» включает млекопитающее. Млекопитающее может быть, например, любым млекопитающим, например, человеком, приматом, птицей, мышью, крысой, дикой птицей, собакой, кошкой, коровой, лошадью, козой, верблюдом, овцой или свиньей. Предпочтительно, млекопитающее представляет собой человека.
[0068] Настоящее описание включает все изотопы атомов, встречающихся в предложенных соединениях. Изотопы включают те атомы, которые имеют такой же атомный номер, но другое массовое число. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, и изотопы углерода включают C-13 и C-14.
Соединения
[0069] Настоящее описание относится к соединениям формулы (I):
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе.
[0070] Настоящее описание относится к соединениям формулы (II):
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе.
[0071] В некоторых вариантах реализации формулы (I) или (II), если W представляет собой N, то настоящее описание относится к соединениям формулы (I-I):
(I-1)
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе для формулы (I) и (II).
[0072] В некоторых вариантах реализации формулы (I) или (II), если W представляет собой C, то настоящее описание относится к соединениям формулы (I-2):
(I-2)
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе для формулы (I) и (II).
[0073] В некоторых вариантах реализации формулы (I) или (II), если R1 представляет собой фенил, то настоящее описание относится к соединениям формулы (I-3):
(I-3)
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе для формулы (I) и (II).
[0074] В некоторых вариантах реализации формулы (I) или (II), если R1 отсутствует, то настоящее описание относится к соединениям формулы (I-4):
(I-4)
и их фармацевтически приемлемым солям и таутомерам, где заместители являются такими, как описано в настоящем документе для формулы (I) и (II).
[0075] Как описано выше, X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl. В некоторых вариантах реализации X представляет собой O, OH, ORh, F, Br или Cl. В некоторых вариантах реализации X представляет собой H, S, SR2, NR2 или NR2R2'. В некоторых вариантах реализации X представляет собой H. В некоторых вариантах реализации X представляет собой S. В некоторых вариантах реализации X представляет собой SR2. В некоторых вариантах реализации X представляет собой NR2. В некоторых вариантах реализации X представляет собой NR2R2'. В некоторых вариантах реализации Х представляет собой О. В некоторых вариантах реализации X представляет собой OH. В некоторых вариантах реализации X представляет собой ORh. В некоторых вариантах реализации X представляет собой F. В некоторых вариантах реализации X представляет собой Br. В некоторых вариантах реализации X представляет собой Cl.
[0076] Как описано выше, R2 представляет собой H или C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R2 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R2 представляет собой C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R2 представляет собой -CH3.
[0077] Как описано выше, R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил. В некоторых вариантах реализации R2' представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R2' представляет собой C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R2' представляет собой C3-C7 циклоалкил.
[0078] Как описано выше, R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S. В некоторых вариантах реализации R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 6-членное гетероциклоалкильное кольцо.
[0079] Как описано выше, Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила. В некоторых вариантах реализации Rh представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rh представляет собой C1-C4 алкил, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2. В некоторых вариантах реализации Rh представляет собой 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила.
[0080] Как описано выше, Rf отсутствует, представляет собой H или метил. В некоторых вариантах реализации Rf отсутствует. В некоторых вариантах реализации Rf представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rf представляет собой метил.
[0081] Как описано выше, W представляет собой N или C. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C.
[0082] Как описано выше, Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN. В некоторых вариантах реализации Rj отсутствует. В некоторых вариантах реализации Rj представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rj представляет собой C1-C6 алкил. В некоторых вариантах реализации Rj представляет собой -CN.
[0083] В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и Rj отсутствует. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и Rj представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и Rj представляет собой -CN.
[0084] Как описано выше, Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой C1-C6 алкил. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой C1-C6 галогеналкил. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой галоген. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой -CN. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой -ORx. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой -CO2Rx.
[0085] Как описано выше, Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой C1-C6 алкил. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой C6-C10 арил.
[0086] Как описано выше, Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил.
[0087] В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой метил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой CF3. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой CRfF2. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой -(C(R6)2)tC6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой -CH2C6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой -CH2C6арил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой необязательно замещенный C6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил. В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил.
[0088] Как описано выше, Rf отсутствует, представляет собой H или метил. В некоторых вариантах реализации Rf отсутствует. В некоторых вариантах реализации Rf представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rf представляет собой метил.
[0089] Как описано выше, t равен 0, 1 или 2. В некоторых вариантах реализации t равен 0. В некоторых вариантах реализации t равен 1. В некоторых вариантах реализации t равен 2.
[0090] Как описано выше, если W представляет собой N, то L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-.
[0091] В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой . В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1CH=CH-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -SCH2-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой N, и L представляет собой -NHCH2-.
[0092] Как описано выше, если W представляет собой C, то L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-.
[0093] В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)o-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой . В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mY1CH=CH-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p-. В некоторых вариантах реализации W представляет собой C, и L представляет собой -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-.
[0094] Как описано выше, Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q. В некоторых вариантах реализации Y1 представляет собой O. В некоторых вариантах реализации Y1 представляет собой NR4. Как описано выше, R4 представляет собой H или C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R4 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R4 представляет собой C1-C4 алкил.
[0095] В некоторых вариантах реализации Y1 представляет собой S(O)q. Как описано выше, q равен 0, 1 или 2. В некоторых вариантах реализации q равен 0. В некоторых вариантах реализации Y1 представляет собой S. В некоторых вариантах реализации q равен 1. В некоторых вариантах реализации q равен 2.
[0096] Как описано выше, каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R5 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R5 представляет собой C1-C4 алкил.
[0097] Как описано выше, R3 представляет собой H или C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R3 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R3 представляет собой C1-C4 алкил.
[0098] Как описано выше, каждый m и p независимо равен 0, 1 или 2. В некоторых вариантах реализации m равен 0. В некоторых вариантах реализации m равен 1. В некоторых вариантах реализации m равен 2. В некоторых вариантах реализации p pавен 0. В некоторых вариантах реализации p равен 1. В некоторых вариантах реализации p равен 2.
[0099] Как описано выше, o равен 0, 1, 2, 3 или 4. В некоторых вариантах реализации o равен 0. В некоторых вариантах реализации o равен 1. В некоторых вариантах реализации o равен 2. В некоторых вариантах реализации o равен 3. В некоторых вариантах реализации o равен 4.
[00100] Как описано выше, R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен или гетероарилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен или гетероарилен необязательно замещены одним или двумя Re. В некоторых вариантах реализации R1 отсутствует. В некоторых вариантах реализации R1 представляет собой C6-C10 арилен, который необязательно замещен одним или двумя Re. В некоторых вариантах реализации R1 представляет собой гетероарилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и необязательно замещен одним или двумя Re. В некоторых вариантах реализации формулы (II) R1 представляет собой C3-C8циклоалкилен, такой как, C4циклоалкилен, C5циклоалкилен, C6циклоалкилен, C7циклоалкилен или C8циклоалкилен.
[00101] Как описано выше, каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN.
[00102] Как описано выше, R7 представляет собой H, A, B или C. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой A. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой B. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой C.
[00103] Как описано выше для формулы (I), A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол, -(CH2)rP(O)(OH)ORx, -(CH2)rS(O)2OH, -(CH2)rC(O)NHCN или -(CH2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем указанный -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом.
[00104] Как описано выше для формулы (II), A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол, -(C(R6)2)rP(O)(OH)ORx, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rC(O)NHCN или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем указанный -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rтетразол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rоксадиазолон. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rтетразолон. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rтиадиазолол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rP(O)(OH)ORx. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OH. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NHCN. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2алкил.
[00105] В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -Y2(C(R6)2)rCO2Rx. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rтетразол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rоксадиазолон. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rтетразолон. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rтиадиазолол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rизоксазол-3-ол. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rP(O)(OH)ORx. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rS(O)2OH. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rC(O)NHCN. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(CH2)rC(O)NHS(O)2алкил. В некоторых вариантах реализации указанный -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом.
[00106] Как описано выше для формулы (I), B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NRgRg', -(CH2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6) 2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx.
[00107] Как описано выше для формулы (II), B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’.
[00108] В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(CH2)rC(O)NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(CH2)rS(O)2NRgRg'. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(CH2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rCO2Ri. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6) 2)rNH2CO2Rx. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OH. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -O(C(R6)2)rS(O)2OH. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -(C(R6)2)rP(O)2ORx. В некоторых вариантах реализации B представляет собой -O(C(R6)2)rP(O)2ORx.
[00109] Как описано выше, C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S.
[00110] В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(CH2)rCN. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(CH2)sOH. В некоторых вариантах реализации C представляет собой галоген. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rгетероарил. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -O(C(R6)2)rгетероарил. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -O(C(R6)2)rOH. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -ORy. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NHCN. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -CH=CHCO2Rx. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил. В представленном выше описании арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S.
[00111] Как описано выше, каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил. В некоторых вариантах реализации R6 представляет собой H. В некоторых вариантах реализации R6 представляет собой C1-C4 алкил.
[00112] Как описано выше, каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой H. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой C1-C6 алкил. В некоторых вариантах реализации Rx представляет собой C6-C10 арил.
[00113] Как описано выше, каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S. В некоторых вариантах реализации Y2 представляет собой O. В некоторых вариантах реализации Y2 представляет собой NH. В некоторых вариантах реализации Y2 представляет собой S.
[00114] Как описано выше, каждый r равен 0, 1 или 2. В некоторых вариантах реализации r равен 0. В некоторых вариантах реализации r равен 1. В некоторых вариантах реализации r равен 2.
[00115] Как описано выше, s равен 1 или 2. В некоторых вариантах реализации s равен 1. В некоторых вариантах реализации s равен 2.
[00116] Как описано выше, Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2.
[00117] Как описано выше, Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH.
[00118] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rc представляет собой CN;
c) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, такой как тиофенил;
d) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
e) R1 представляет собой фенилен;
f) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00119] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rd представляет собой CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00120] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rc представляет собой CN;
c) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, такой как тиофенил;
d) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
e) R1 отсутствует;
f) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00121] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rd представляет собой CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 отсутствует;
e) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00122] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой C;
b) Rd представляет собой -(C(R6)2)tC6-C10 арил или -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил);
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00123] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой C;
b) Rd представляет собой -CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как COOH или тетразол.
[00124] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rc представляет собой CN;
c) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, такой как тиофенил;
d) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
e) R1 представляет собой фенилен;
f) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00125] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rd представляет собой CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00126] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rc представляет собой CN;
c) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил, такой как тиофенил;
d) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
e) R1 отсутствует;
f) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00127] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой N;
b) Rd представляет собой CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 отсутствует;
e) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00128] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой C;
b) Rd представляет собой -(C(R6)2)tC6-C10 арил или -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил);
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00129] В некоторых вариантах реализации настоящего описания предложено соединение формулы (I), имеющее один, два или три из описанных ниже признаков:
а) W представляет собой C;
b) Rd представляет собой -CF3;
c) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p, такой как -SCH2-;
d) R1 представляет собой фенилен;
e) R7 представляет собой A, такой как -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол.
[00130] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Ia), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Ia),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил;
b) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
c) R7 представляет собой A или C;
d) X, Rd, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой тиофенил. В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой C. В некоторых вариантах реализации C представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил, замещенный одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH. В некоторых вариантах реализации R7 представляет собой A. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Ia) имеет один, два, три или четыре признака (a)-(d).
[00131] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Ib), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Ib),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
b) R7 представляет собой A;
c) X, Rc, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Ib) имеет один, два или три признака (a)-(c).
[00132] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Ic), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Ic),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) Rd представляет собой 5- или 6-членный гетероарил;
b) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
c) R7 представляет собой A;
d) X, Rd, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации Rd представляет собой тиофенил. В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Ic) имеет один, два, три или четыре признака (a)-(d).
[00133] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Id), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Id),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
b) R7 представляет собой A;
c) X, Rd, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Id) имеет один, два или три признака (a)-(c).
[00134] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Ie), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Ie),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) Rd представляет собой -(C(R6)2)tC6-C10 арил или -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил);
b) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
c) R7 представляет собой A.
d) X, Rd, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Ie) имеет один, два, три или четыре признака (a)-(d).
[00135] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (If), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(If),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
b) R7 представляет собой A;
c) X, Rc, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации Rc представляет собой CN. В некоторых вариантах реализации формула (If) имеет один, два или три признака (a)-(c).
[00136] В некоторых вариантах реализации, с некоторыми из описанных выше признаках для формулы (I), в настоящем описании предложено соединение формулы (Ig), имеющее по меньшей мере один из следующих признаков:
(Ig),
и его фармацевтические соли и таутомеры, где
а) L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p;
b) R7 представляет собой A;
c) X, Rd, Rf, Rj, A, R5, Y1, m и p являются такими, как определено для формулы (I).
В некоторых вариантах реализации L представляет собой -SCH2- или -NHCH2-. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -(C(R6)2)rCOOH или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации A представляет собой -COOH, -CH2COOH, -тетразол или -(CH2)тетразол, причем указанный тетразол и -(CH2)rтетразол необязательно замещены C1-C6 алкилом. В некоторых вариантах реализации формула (Ig) имеет один, два или три признака (a)-(c).
[00137] В некоторых вариантах реализации соединение формулы (I) представляет собой соединение, выбранное из:
или его фармацевтически приемлемую соль или таутомер.
[00138] В некоторых вариантах реализации соединение формулы (I) или (II) представляет собой соединение, выбранное из:
[00139] В некоторых вариантах реализации соединение формулы (I) представляет собой соединение или его фармацевтически приемлемую соль, или таутомер, выбранный из:
или его фармацевтически приемлемую соль или таутомер.
[00140] В некоторых вариантах реализации соединение формулы (I) или (II) представляет собой соединение или его фармацевтически приемлемую соль, или таутомер, выбранный из:
[00141] Следует понимать, что указанные ссылки предназначены для охвата не только вышеуказанных общих формул, но и всех и каждого вариантов реализации и т.д., рассмотренных в следующем описании. Также следует понимать, что если не указано обратное, такие упоминания охватывают также изомеры, смеси изомеров, фармацевтически приемлемые соли, сольваты и пролекарства соединений формулы (I) или (II).
Способы получения соединений
[00142] Соединения согласно настоящему описанию (например, соединения формулы (I)) могут быть получены различными способами, хорошо известными специалистам в области органического синтеза. Например, соединения согласно настоящему описанию заявке могут быть синтезированы способами, описанными ниже, вместе со способами синтеза, известными в области синтетической органической химии, или их вариантами, понятными специалистам в данной области техники. Предпочтительные способы включают, но не ограничиваются ими, способы, описанные ниже. Конечные продукты реакций, описанных в настоящем документе, могут быть выделены стандартными технологиями, например, экстракцией, кристаллизацией, перегонкой, хроматографией и т.д.
[00143] Соединения согласно настоящему описанию могут быть синтезированы по следующим стадиям, представленным на общих схемах A - F, которые включают различные последовательности сборки промежуточных соединений Ia-Ih и Ij-Io. Исходные вещества либо доступны в продаже, либо получены известными способами, описанными в литературных источниках, или в соответствии с иллюстрацией. Подходящие стадии, которые можно использовать на стадиях получения предложенных соединений, известны опытным специалистам. Представленный ниже способ приведен в качестве неограничивающего примера получения предложенных соединений.
Общая схема А
где R1, Rc, Rd и L являются такими, как определено для формулы (I).
[00144] Общий способ получения соединений формулы (I) с применением промежуточных соединений Ia и Ib представлен на общей схеме A. Связывание Ia с Ib с помощью основания, т.е. карбоната калия (K2CO3), в растворителе, т.е. ацетонитриле (CH3CN), необязательно при повышенной температуре приводит к получению требуемого соединения формулы (I). Основания, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ими, карбонат натрия (Na2CO3), карбонат калия (K2CO3), N, N-диизопропилэтиламин (DIPEA) и триэтиламин. Растворители, используемые для реакции связывания, могут быть полярными или неполярными растворителями. Например, растворитель может представлять собой ацетонитрил (CH3CN), ацетон или диметилсульфоксид (ДМСО).
Общая схема В
где X представляет собой пригодную уходящую группу, т.е. Cl, Br, -SCH3 или S(O)2CH3, и R1, R2, Rc, Rd и p являются такими, как определено для формулы (I).
[00145] Альтернативно, соединения формулы (I) могут быть получены с использованием промежуточных соединений Ic и Id, как показано на общей схеме B. Аминирование промежуточного соединения Ic соединением Ie с помощью основания, т.е. гидроксида натрия (NaOH), гидроксида калия (KOH) и т.д. в растворителе, т.е. в метаноле (MeOH), этаноле (EtOH), воде (H2O) и т.д. приводит к получению соединений формулы (I).
Общая схема С
где X представляет собой пригодную уходящую группу, т.е. Cl, Br, -SCH3 или S(O)2CH3, и R1, R2, Rc, Rd и p являются такими, как определено для формулы (I).
[00146] Соединения формулы (I) также могут быть получены с использованием промежуточных соединений Ie и If, как показано на общей схеме C. Аминирование промежуточного соединения Ie соединением If с помощью основания, т.е. гидроксида натрия (NaOH), гидроксида калия (KOH) и т.д. в растворителе, т.е. в метаноле (MeOH), этаноле (EtOH), воде (H2O) и т.д. приводит к получению соединений формулы (I).
Общая схема D
где R1, Rc и Rd являются такими, как определено для формулы (I).
[00147] Альтернативно, соединения формулы (I) также могут быть получены с использованием промежуточных соединений Ig, Ih, Ij, Ik и Im, как показано на общей схеме D. Олефинирование промежуточного соединения Ig с помощью основания, т.е. карбоната калия (K2CO3) и диэтил(цианометил)фосфоната в растворителе, т.е. тетрагидрофуране (ТГФ), воде (H2O), необязательно при повышенной температуре приводит к получению промежуточного соединения Ih. Гидрирование соединения Ih с применением металлического катализатора, т.е. палладия на углероде (Pd/C), диоксида платины (PtO2) и т.д. и газообразного водорода (H2) в растворителе, т.е. в этаноле (EtOH) и/или тетрагидрофуране (ТГФ) приводит к образованию промежуточного соединения Ij. Промежуточное соединение Ik получают обработкой промежуточного соединения Ij кислотой, т.е. хлористоводородной кислотой (HCl) в растворителе, т.е. в этаноле (EtOH), дихлорметане (CH2Cl2) и т.д., с последующей обработкой основанием, т.е. аммиаком (NH3). Циклизация промежуточного соединения Ik и Im с помощью основания, т.е. гидроксида натрия (NaOH), гидроксида калия (KOH) и т.д. в растворителе, т.е. диметилацетамиде (ДМА), необязательно при повышенной температуре обеспечивает образование соединений формулы (I).
Общая схема Е
где R1, Rc и Rd являются такими, как определено для формулы (I).
[00148] Альтернативно, соединения формулы (I) могут быть получены с применением промежуточных соединений In и Io, как показано на общей схеме D. Ацилирование промежуточного соединения In соединением Io с помощью основания, т.е. гидроксида натрия (NaOH), гидроксида калия (KOH) и т.д. в растворителе, т.е. в метаноле (MeOH), этаноле (EtOH), воде (H2O) и т.д. приводит к образованию соединений формулы (I).
Общий способ F
где L, Rc, Rd, R1 и R7 являются такими, как определено для формулы (I).
[00149] Предложенный общий способ синтеза соединений (например, I-17 - I-30), имеющих общую формулу I, включает окончательное связывание между одним эквивалентом соответствующим образом замещенного производного 6-меркапто-2-оксо-4,5-дизамещенного-1,2-дигидропиридина со стехиометрическим количеством промежуточных соединений L-R1-R7 с использованием двух эквивалентов DIPEA в качестве основания и ацетона в качестве растворителя, с получением конечного соединения.
[00150] Альтернативно, некоторые соединения формулы (I) или (II) могут быть получены по схемам, представленным ниже, и соединения формулы (I) или (II), в целом, могут быть получены на основании схем, приведенных ниже.
Общая схема G. 6-оксо-2-[4-(1H-тетразол-5-ил)фениламино]-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
Общая схема H. 6-оксо-2-[4-(1H-тетразол-5-ил)циклогексиламино]-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
Общая схема I. 6-оксо-2-[4-(1H-тетразол-5-ил)пиперидин-1-ил]-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
Общая схема J. 6-оксо-2-[3-(1H-тетразол-5-ил)азетидин-1-ил]-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
Общая схема K. 4-бензил-6-оксо-2-[2-(1H-тетразол-5-ил)-бензилсульфанил]-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
[00151] Смесь энантиомеров, диастереомеров, цис/транс-изомеров, образующаяся в результате процесса, описанного выше, может быть разделена на отдельные компоненты технологией хиральных солей, хроматографией с применением нормально-фазовой, обращенно-фазовой или хиральной колонки, в зависимости от сущности разделения.
[00152] Следует понимать, что в настоящем описании и представленной выше формуле различные группы R1, R2, X, L, Y, Ra, Rb, Rc, Rd, Re, Rf, Rx, Ry, Rz, m, n, p, q, r и другие переменные являются такими, как определено выше в настоящем документе, за исключением тех случаев, где указано иное. Кроме того, соединения на общих схемах A-E являются лишь иллюстрацией синтеза, и радикалы выбраны для иллюстрации общей методики синтеза соединений формулы (I), определение которых представлено в настоящем документе.
Фармацевтические композиции
[00153] Соединение формулы (I) или (II) может быть представлено в любой форме, подходящей для предполагаемого введения, в частности, включая фармацевтически приемлемые соли, сольваты и пролекарства соединения формулы (I) или (II).
[00154] Фармацевтически приемлемые соли относятся к солям соединений формулы (I) или (II), которые считаются подходящими для клинического и/или ветеринарного применения. Типичные фармацевтически приемлемые соли включают соли, полученные посредством взаимодействия соединений формулы (I) или (II) с неорганической или органической кислотой, или с органическим или неорганическим основанием. Такие соли известны как соли присоединения кислот и соли присоединения оснований, соответственно. Следует понимать, что конкретный противоион, образующий часть любой соли, не имеет какого-либо специального состава, при условии, что указанная соль является фармацевтически приемлемой в целом, и при условии, что указанный противоион не обусловливает нежелательные свойства соли в целом. Такие соли могут быть получены способами, известными специалистам. Фармацевтически приемлемые соли представляют собой, например, соли, описанные и рассмотренные в книге Remington, Pharmaceutical Sciences, 17-е изд., Alfonso R. Gennaro (ред.), Mack Publishing Company, Истон, штат Пенсильвания, США, 1985, и в более поздних изданиях, а также в книге Encyclopedia of Pharmaceutical Technology.
[00155] Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения включают соли присоединения кислот, образованные с неорганическими кислотами, например, с хлористоводородной, бромистоводородной, серной, азотной, йодистоводородной, метафосфорной или фосфорной кислотой; и с органическими кислотами, например, с янтарной, малеиновой, уксусной, фумаровой, лимонной, винной, бензойной, трифторуксусной, яблочной, молочной, муравьиной, пропионовой, гликолевой, глюконовой, камфорсерной, изотионовой, муциновой, гентизиновой, изоникотиновой, сахарной, глюкуроновой, пирослизевой, глутаминовой, аскорбиновой, антраниловой, салициловой, фенилуксусной, миндальной, эмбоновой (памоевой), этансульфоновой, пантотеновой, стеариновой, сульфиниловой, альгиновой и галактуроновой кислотой; и арилсульфоновыми кислотами, например, бензолсульфоновой, п-толуолсульфоновой, метансульфоновой или нафталинсульфоновой кислотой; и соли присоединения оснований, образованные с щелочными металлами и щелочноземельными металлами, и с органическими основаниями, такими как N, N-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин), лизин и прокаин; и внутренние соли. Следует понимать, что все упоминания фармацевтически приемлемых солей включают формы присоединения растворителей (сольваты) или кристаллические формы (полиморфы) указанных солей, описанные в настоящем документе.
[00156] Соединение формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемая соль могут быть представлены в растворимой или нерастворимой форме вместе с фармацевтически приемлемым растворителем, таким как вода, этанол и т.п. Растворимые формы также могут включать гидратированные формы, такие как моногидрат, дигидрат, полугидрат, тригидрат, тетрагидрат и т.п.
[00157] Соединение формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемая соль могут быть представлены в форме пролекарства. Термин «пролекарство» в данном контексте означает соединение, которое при воздействии определенных физиологических условий высвобождает соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль, которая затем может проявлять требуемое биологическое действие. Типичным примером является лабильный карбамат амина.
[00158] Поскольку известно, что пролекарства усиливают многие желательные свойства фармацевтических средств (например, растворимость, биодоступность, технологичность и т.д.), то соединения согласно настоящему описанию могут быть доставлены в форме пролекарства. Так, настоящее описание включает пролекарства соединений, заявленных в настоящем описании, способы их доставки и композиции, содержащие их. «Пролекарства» включают любые ковалентно связанные носители, которые высвобождают активное исходное лекарственное соединение согласно настоящему описанию in vivo при введении такого пролекарства субъекту. Пролекарства в настоящем описании получают модификацией функциональных групп, присутствующих в соединении, таким образом, что указанные модификации расщепляются либо при обычных манипуляциях, либо in vivo, с образованием исходного соединения. Пролекарства включают соединения согласно настоящему описанию, в которых гидроксильная, амино, сульфгидрильная, карбоксильная или карбонильная группа связана с любой группой, которая может расщепляться in vivo с образованием свободной гидроксильной, свободной амино, свободной сульфгидрильной, свободной карбоксильной или свободной карбонильной группы, соответственно.
[00159] Примеры пролекарств включают, но не ограничиваются ими, сложные эфиры (например, ацетатные, диалкиламиноацетатные, формиатные, фосфатные, сульфатные и бензоатные производные) и карбаматы (например, N, N-диметиламинокарбонил) гидроксильных функциональных групп, сложные эфиры (например, C1-6 алкиловые сложные эфиры, например, метиловые сложные эфиры, этиловые сложные эфиры, 2-пропиловые сложные эфиры, фениловые сложные эфиры, 2-аминоэтиловые сложные эфиры, морфолиноэтанольные сложные эфиры и т.д.) карбоксильных функциональных групп, N-ацильные производные (например, N-ацетил), N-основания Манниха, основания Шиффа и енаминоны функциональных аминогрупп, оксимы, ацетали, кетали и енольные сложные эфиры кетоновых и альдегидных функциональных групп в соединениях согласно настоящему описанию, и т.п. См. Bundegaard, H., Design of Prodrugs, с. 1-92, Elesevier, Нью-Йорк - Оксфорд (1985).
[00160] Предложенные соединения или их фармацевтически приемлемые соли, сложные эфиры или пролекарства вводят перорально, назально, трансдермально, пульмонально, посредством ингаляции, буккально, сублингвально, интраперитонеально, подкожно, внутримышечно, внутривенно, ректально, интраплеврально, интратекально и парентерально. В одном варианте реализации соединение вводят перорально. Специалистам в данной области техники известны преимущества определенных способов введения.
[00161] Схему введения доз с применением предложенных соединений выбирают в соответствии с различными факторами, включая тип, биологический вид, возраст, массу, пол и медицинское состояние пациента; тяжесть патологического состояния, подлежащего лечению; способ введения; почечную и печеночную функцию пациента; и конкретное используемое соединение или его соль. Опытные врачи и ветеринары могут без труда определить и прописать эффективное количество соединения, необходимое для предупреждения, противодействия или остановки развития патологического состояния.
[00162] Технологии составления и введения лекарственных форм соединений согласно настоящему описанию представлены в публикации Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19е издание, Mack Publishing Co., Истон, штат Пенсильвания (1995). В одном варианте реализации соединения, описанные в настоящем документе, и их фармацевтически приемлемые соли используют для фармацевтических препаратов в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают инертные твердые наполнители или разбавители и стерильные водные или органические растворы. Предложенные соединения содержатся в таких фармацевтических композициях в количестве, достаточном для обеспечения требуемой дозы в диапазоне, описанном в настоящем документе.
[00163] В одном аспекте настоящего описания предложена фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента по меньшей мере одно соединение формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль, как описано в настоящем документе, и необязательно одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, разбавителей и/или носителей. Соединения формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемые соли можно вводить отдельно или в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами, в виде одной или нескольких доз. Подходящие фармацевтически приемлемые носители, разбавители и вспомогательные вещества включают инертные твердые разбавители или наполнители, стерильные водные растворы и различные органические растворители.
[00164] «Фармацевтическая композиция» представляет собой состав, содержащий соединения согласно настоящему описанию в форме, пригодной для введения субъекту. Фармацевтические композиции могут быть составлены с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями, а также с любыми другими известными адъювантами и вспомогательными веществами в соответствии с общепринятыми технологиями, такими как описаны в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21е изд., 2000, Lippincott Williams & Wilkins.
[00165] В данном контексте выражение «фармацевтически приемлемый» относится к таким соединениям, материалам, композициям, носителям и/или лекарственным формам, которые с медицинской точки зрения пригодны для применения в контакте с тканями организма человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соразмерно с разумным соотношением польза/риск.
[00166] «Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» означает вспомогательное вещество, пригодное для получения фармацевтической композиции, которое является, в целом, безопасным, нетоксичным и не является биологически или другим образом неприемлемым, и включает вспомогательное вещество, приемлемое для ветеринарного применения, а также для фармацевтического применения для людей. «Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» в настоящем описании и в формуле изобретения включает одно и более одного таких вспомогательных веществ.
[00167] Фармацевтические композиции, полученные объединением соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли, как описано в настоящем документе, с фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами, могут быть без труда введены в различных лекарственных формах, таких как таблетки, порошки, пастилки, сиропы, суппозитории, растворы для инъекций и т.п. В порошках носитель представляет собой тонкодисперсное твердое вещество, такое как тальк или крахмал, в смеси с тонкодисперсным активным компонентом. В таблетках активный компонент смешан в подходящем соотношении с носителем, имеющим необходимые связующие свойства, и спрессован до требуемой формы и размера.
[00168] Фармацевтические композиции могут быть специально получены для введения любым подходящим способом, таким как пероральный и парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, интратекальный, внутривенный и внутрикожный) способ. Следует понимать, что предпочтительный способ введения зависит от общего состояния и возраста субъекта, подлежащего лечению, природы патологического состояния, подлежащего лечению, и выбранного активного ингредиента.
[00169] Фармацевтические композиции для перорального введения включают твердые лекарственные формы, такие как капсулы, таблетки, драже, пилюли, пастилки, порошки и гранулы. Если это уместно, они могут быть получены с покрытиями, такими как энтеросолюбильные покрытия, или они могут быть получены так, чтобы обеспечивать контролируемое высвобождение активного ингредиента, такое как устойчивое или пролонгированное высвобождение, в соответствии со способами, общеизвестными в данной области техники.
[00170] Для перорального применения в форме таблетки или капсулы, соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемая соль, описанные в настоящем документе, могут быть надлежащим образом объединены с пероральным, нетоксичным, фармацевтически приемлемым носителем, таким как этанол, глицерин, вода или т.п. Кроме того, в смесь могут быть добавлены подходящие связующие агенты, смазывающие вещества, разрыхлители, ароматизаторы и красящие вещества, сообразно обстоятельствам. Подходящие связующие включают, например, лактозу, глюкозу, крахмал, желатин, гуммиарабик, трагакантовую камедь, альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски или т.п. Смазывающие вещества включают, например, олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия или т.п. Разрыхлители включают, например, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь, крахмалгликолят натрия, кросповидон, кроскармеллозу натрия или т.п. Дополнительные вспомогательные вещества для капсул включают макрогелы или жиры.
[00171] Для получения твердых композиций, таких как таблетки, активное соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль смешивают с одним или более вспомогательными веществами, такими как вспомогательные вещества, описанные выше, и с другими фармацевтическими разбавителями, такими как вода, с получением твердой предварительно составленной композиции, содержащей однородную смесь соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли. Термин «однородная» следует понимать как обозначающий, что соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемая соль равномерно диспергирована в композиции, так что указанная композиция может быть без труда разделена на равноэффективные единичные лекарственные формы, такие как таблетки или капсулы.
[00172] Жидкие композиции соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для перорального или парентерального введения включают, например, водные растворы, сиропы, эликсиры, водные или масляные суспензии и эмульсии со съедобными маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло. Подходящие диспергирующие или суспендирующие агенты для водных суспензий включают синтетические или природные камеди, такие как трагакант, альгинат, гуммиарабик, декстран, карбоксиметилцеллюлозу натрия, желатин, метилцеллюлозу или поливинилпирролидон.
[00173] Фармацевтические композиции для парентерального введения включают стерильные водные и неводные растворы для инъекций, дисперсии, суспензии или эмульсии, а также стерильные порошки, подлежащие разбавлению с получением стерильных растворов или дисперсий для инъекций непосредственно перед применением.
[00174] Для внутривенного введения подходящие носители включают физиологический солевой раствор, бактериостатическую воду, Cremophor EL™ (BASF, Парсиппани, штат Нью-Джерси) или фосфатно-солевой буферный раствор (PBS). Во всех случаях композиция должна быть стерильной и должна быть жидкой настолько, чтобы обеспечивать простое введение через шприц. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения, и должна быть защищена от заражения микроорганизмами, такими как бактерии и грибки. Носителем может быть растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, многоатомный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль, и т.п.) и их подходящие смеси. Необходимую текучесть можно поддерживать, например, с помощью покрытий, таких как лецитин, посредством сохранения требуемого размера частиц в случае дисперсий, а также с помощью поверхностно-активных веществ. Предотвращение заражения микроорганизмами может быть достигнуто различными антибактериальными и противогрибковыми средствами, например, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, аскорбиновой кислотой, тимеросалом и т.п. Во многих случаях предпочтительно включать в композицию изотонические агенты, например, сахара, многоатомные спирты, такие как маннит, сорбит и хлорид натрия. Пролонгированная абсорбция композиций для инъекций может быть достигнута посредством включения в композицию агента, замедляющего абсорбцию, например, моностеарата алюминия и желатина.
[00175] Получение всех указанных растворов в стерильных условиях без труда выполняют при помощи стандартных фармацевтических технологий, хорошо известных специалистам в данной области техники.
[00176] Например, стерильные растворы для инъекций могут быть получены введением требуемого количества активного соединения в соответствующий растворитель с одним или с комбинацией ингредиентов, указанных выше, по необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии получают введением активного соединения в стерильный жидкий носитель, который содержит основную дисперсионную среду и другие необходимые ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных растворов для инъекций, способы получения представляют собой вакуумную сушку и вымораживание, в результате которых из предварительно стерильно отфильтрованного раствора получают порошок активного компонента и любого дополнительного желаемого ингредиента. Композиции инъецируемых депо также предусмотрены как входящие в объем настоящего описания.
[00177] Для парентерального введения могут быть использованы растворы, содержащие соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль, в кунжутном или арахисовом масле, водном пропиленгликоле или в стерильном водном растворе. Указанные водные растворы должны быть надлежащим образом забуферены, при необходимости, и жидкий разбавитель изначально делают изотоничным при помощи достаточного количества солевого раствора или глюкозы. Указанные конкретные водные растворы особенно подходят для внутривенного, внутримышечного, подкожного и внутрибрюшинного введения. Масляные растворы подходят для внутрисуставных, внутримышечных и подкожных инъекций.
[00178] Помимо вышеупомянутых ингредиентов, композиции соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли могут содержать один или более дополнительных ингредиентов, таких как разбавители, буферы, ароматизаторы, красящие вещества, поверхностно-активные вещества, загустители, консерванты, например, метилгидроксибензоат (включая антиоксиданты), эмульгирующие агенты и т.п.
[00179] Термин «терапевтически эффективное количество» в данном документе относится к такому количеству фармацевтического агента, которое обеспечивает лечение, облегчение или предупреждение установленного заболевания, расстройства или патологического состояния, или демонстрирует обнаруживаемый терапевтический или ингибирующий эффект. Указанный эффект может быть обнаружен любым аналитическим способом, известным в данной области техники. Точное эффективное количество для субъекта зависит от массы тела субъекта, его размера и состояния здоровья; природы и тяжести патологического состояния; а также от терапевтического агента или комбинации терапевтических агентов, выбранных для введения. Терапевтически эффективное количество для данной ситуации можно определить обычным экспериментированием, в соответствии с опытом и решением клинициста. В предпочтительном аспекте заболевание или расстройство, подлежащее лечению, представляет собой заболевание или расстройство, связанное с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00180] Для любого соединения терапевтически эффективное количество можно первоначально оценить с помощью анализов в клеточной культуре, например, в клетках, или в животных моделях, обычно на крысах, мышах, кроликах, собаках или свиньях. Животную модель также можно использовать для определения подходящего диапазона концентрации и способа введения. Затем полученную информацию можно использовать для определения подходящих доз и способов введения для людей. Терапевтическую/профилактическую эффективность и токсичность можно определять стандартными фармацевтическими приемами в клеточных культурах или на экспериментальных животных, например, для определения ED50 (дозы, терапевтически эффективной у 50% популяции) и LD50 (дозы, летальной для 50% популяции). Соотношение доз между токсичным и терапевтическим эффектом представляет собой терапевтический индекс, и его можно выразить как отношение LD50/ED50. Предпочтительными являются фармацевтические композиции, демонстрирующие высокие терапевтические индексы. Доза может варьироваться в указанном диапазоне в зависимости от используемой лекарственной формы, восприимчивости пациента и способа введения.
[00181] Дозу и введение корректируют для обеспечения достаточного уровня активного агента(ов) или для поддержания требуемого эффекта. Факторы, которые можно учитывать, включают тяжесть болезненного состояния, общее состояние здоровья субъекта, возраст, массу и пол субъекта, рацион, время и частоту введения, комбинацию(ии) лекарств, аллергические реакции и переносимость/ответ на лечение. Фармацевтические композиции длительного действия можно вводить один раз в 3-4 дня, один раз в неделю или один раз в две недели, в зависимости от периода полувыведения и скорости клиренса конкретной лекарственной формы.
[00182] Подходящая доза соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли зависит от возраста и состояния пациента, тяжести заболевания, подлежащего лечению, и других факторов, хорошо известных практикующему врачу. Соединение может быть введено, например, перорально, парентерально или локально, в соответствии с различными схемами введения доз, например, ежедневно или с интервалами, такими как недельные интервалы. Обычно единичная доза составляет от 0,01 до 500 мг/кг массы тела, предпочтительно от примерно 0,05 до 100 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,1 до 50 мг/кг массы тела и наиболее предпочтительно от 0,1 до 25 мг/кг массы тела. Указанное соединение может быть введено в виде болюса (т.е. всю суточную дозу вводят за один раз) или в виде дробных доз два или более раз в сутки. Опытный врач может изменять вышеупомянутые диапазоны доз, учитывая известные факторы, такие как масса, возраст и состояние пациента, подлежащего лечению, тяжесть заболевания и конкретный способ введения.
[00183] Соединения формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемые соли можно также можно получать в фармацевтической композиции, содержащей одно или более дополнительных активных веществ, отдельно или в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами, в виде одной или нескольких доз. Подходящие фармацевтически приемлемые носители, разбавители и вспомогательные вещества описаны выше, а одно или более дополнительных активных веществ могут быть любыми активными веществами или предпочтительно активным веществом, описанным ниже в разделе «Комбинированное лечение».
Способы лечения
[00184] В другом аспекте настоящее описание относится к способу предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, в котором играет роль декарбоксилаза -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей.
[00185] Другой аспект настоящего описания относится к способу предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, в котором играет роль декарбоксилаза -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00186] Другой аспект настоящего описания относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей.
[00187] Другой аспект настоящего описания относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, связанного с ACMSD, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00188] В другом аспекте настоящее описание относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, в котором играет роль модулирование никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей.
[00189] В другом аспекте настоящее описание относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, в котором играет роль модулирование никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00190] В другом аспекте настоящее описание относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей.
[00191] В другом аспекте настоящее описание относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ.
[00192] Другой аспект настоящего описания относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей. В одном варианте реализации расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание. В предпочтительном варианте реализации расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой общее метаболическое расстройство, такое как ожирение или диабет II типа.
[00193] Другой аспект настоящего описания относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества. В одном варианте реализации расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание. В предпочтительном варианте реализации расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой общее метаболическое расстройство, такое как ожирение или диабет II типа.
[00194] В другом аспекте настоящее описание относится к способу ускорения окислительного метаболизма, включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00195] В другом аспекте настоящее описание относится к способу ускорения окислительного метаболизма, включающему введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, что приводит к увеличению внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00196] В другом аспекте настоящее описание относится к способу производства лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или патологического состояния, которое может быть опосредовано ингибированием ACMSD, причем указанное лекарственное средство содержит соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль.
[00197] В другом аспекте настоящее описание относится к способу производства лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или патологического состояния, которое может быть опосредовано ингибированием ACMSD, причем указанное лекарственное средство содержит фармацевтическую композицию, содержащую одно или более соединений формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00198] В другом аспекте настоящее описание относится к соединению для применения в способе лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или патологического состояния, которое может быть опосредовано ингибированием ACMSD, причем указанное соединение содержит соединение формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемую соль.
[00199] В другом аспекте настоящее описание относится к фармацевтической композиции для применения в способе лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или патологического состояния, которое может быть опосредовано ингибированием ACMSD, причем указанная композиция содержит одно или более соединений формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00200] Другой аспект настоящего описания относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00201] Другой аспект настоящего описания относится к применению фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00202] В другом аспекте настоящее описание относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00203] В другом аспекте настоящее описание относится к применению фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00204] Другой аспект настоящего описания относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00205] Другой аспект настоящего описания относится к применению фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00206] В другом аспекте настоящее описание относится к применению соединения формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00207] В другом аспекте настоящее описание относится к применению фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00208] Другой аспект настоящего описания относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00209] Другой аспект настоящего описания относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00210] В другом аспекте настоящее описание относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00211] В другом аспекте настоящее описание относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения в качестве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00212] Другой аспект настоящего описания относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00213] Другой аспект настоящего описания относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения в качестве лекарственного средства для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00214] В другом аспекте настоящее описание относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в качестве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00215] В другом аспекте настоящее описание относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения в качестве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00216] Другой аспект настоящего описания относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00217] Другой аспект настоящего описания относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00218] В другом аспекте настоящее описание относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00219] В другом аспекте настоящее описание относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения для лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00220] Другой аспект настоящего описания относится к соединению формулы (I) или (II) или его фармацевтически приемлемой соли для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00221] Другой аспект настоящего описания относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более соединений формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемых солей, и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества, для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00222] В некоторых вариантах реализации указанное заболевание или расстройство, связанное со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), представляет собой хроническую болезнь печени, включая, но не ограничиваясь ими, первичный билиарный цирроз (PBC), церебросухожильный ксантоматоз (CTX), первичный склерозирующий холангит (PSC), медикаментозный холестаз, внутрипеченочный холестаз беременных, холестаз, связанный с парентеральным питанием (PNAC), холестаз, связанный с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунный гепатит, хронический вирусный гепатит, алкогольную болезнь печени, неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП), неалкогольный стеатогепатит (НАСГ), болезнь «трансплантат против хозяина», связанную с трансплантацией печени, регенерацию печени живого донора трансплантата, врожденный фиброз печени, холедохолитиаз, гранулематозную болезнь печени, внутри- или внепеченочное злокачественное заболевание, синдром Шегрена, саркоидоз, болезнь Вильсона, болезнь Гоше, гемохроматоз или дефицит альфа-1-антитрипсина. В одном варианте реализации общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
[00223] В некоторых вариантах реализации расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
[00224] В другом аспекте настоящее описание относится к способу лечения, предупреждения, снижения риска или облегчения заболевания или расстройства посредством ингибирования декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающему введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или (II) или фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) или (II).
[00225] В данном контексте «лечение» или «лечить» описывает ведение и наблюдение пациента с целью реверсирования, замедления или борьбы с заболеванием, патологическим состоянием или расстройством и включает введение соединения согласно настоящему описанию (т.е. соединения формулы (I) или (II)) или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита, полиморфа или сольвата для реверсирования указанного заболевания, патологического состояния или расстройства, устранения указанного заболевания, патологического состояния или расстройства, или замедления развития указанного заболевания, патологического состояния или расстройства.
[00226] Соединение согласно настоящему описанию (т.е. соединение формулы (I) или (II)) или его фармацевтически приемлемую соль, пролекарство, метаболит, полиморф или сольват также можно использовать для предупреждения заболевания, патологического состояния или расстройства, или одного или более симптомов такого заболевания, патологического состояния или расстройства. В данном контексте «предупреждение» или «предупреждать» описывает уменьшение или исключение возникновения симптомов или осложнений заболевания, патологического состояния или расстройства.
[00227] Соединение согласно настоящему описанию (т.е. соединение формулы (I) или (II)) или его фармацевтически приемлемую соль, пролекарство, метаболит, полиморф или сольват также можно использовать для облегчения одного или более симптомов указанного заболевания, патологического состояния или расстройства. В данном контексте термин «облегчение» описывает процесс, благодаря которому снижается тяжесть признака или симптома расстройства. Важно отметить, что признак или симптом может быть облегчен, но не устранен. Предпочтительно, лечение приводит к полному выздоровлению или облегчению.
Клинические состояния и другое применение соединений
[00228] Соединения согласно Формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемые формы, композиции, лекарственные средства и соединения для применения, определенные в настоящем документе, подходят для лечения заболевания или нарушения, в котором играет роль модуляция -амино--карбоксимуконат--полуальдегиддекарбоксилазы (ACMSD). Указанные соединения можно применять как в медицине, так и в ветеринарии, и пациент может представлять собой любое млекопитающее, в особенности, человека. Лечение может включать введение любому млекопитающему, в особенности, человеку, страдающему заболеванием или нарушением, при котором играет роль модуляция -амино--карбоксимуконат--полуальдегиддекарбоксилазы (ACMSD), терапевтически эффективного количества соединения согласно Формуле (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в настоящем документе.
[00229] Настоящее изобретение также относится к соединению Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в настоящем документе, для применения при заболевании или нарушении, связанном с дисфункцией -амино--карбоксимуконат--полуальдегиддекарбоксилазы (ACMSD), таком как ожирение, диабет II типа и его осложнения (например, диабетическая ретинопатия и нефропатия), неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП), неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) или хроническая болезнь почек.
[00230] Термин «заболевание или нарушение, связанное с дисфункцией -амино--карбоксимуконат--полуальдегиддекарбоксилазы (ACMSD)» означает любое заболевание, характеризующееся пониженной экспрессией и/или активностью никотинамидадениндинуклеотида (НАД+) по меньшей мере в некоторых случаях указанного заболевания, или заболевание, которое облегчают путем повышения уровней НАД+.
[00231] Способы, лекарственные средства и соединения для применения в соответствии с настоящим изобретением подходят для лечения, облегчения симптомов или задержки возникновения нарушения, связанного с аберрантной функцией митохондрий. Нарушения, связанные с аберрантной функцией митохондрий, включают, например, метаболические нарушения, нейродегенеративные нарушения, нарушения, связанные со старением, и хронические воспалительные нарушения. Митохондриальные нарушения также включают заболевания с наследственной и/или приобретенной дисфункцией митохондрий (т.е. болезнь Шарко-Мари-Тута, тип 2A2, митохондриальную энцефалопатию, лактацидоз и инсульт (MELAS), синдром Лея, синдром Барта и оптическую нейропатию Лебера), нарушения, связанные с окислением жирных кислот, наследственные формы глухоты и слепоты, и метаболические нарушения, индуцированные воздействием токсичных химических веществ и/или лекарственных средств (например, глухота, индуцированная цисплатином).
[00232] Метаболические нарушения включают, например, диабет II типа, ожирение, гипергликемию, нарушение толерантности к глюкозе, инсулинорезистентность (т.е. гиперинсулинемию, метаболический синдром, синдром X), гиперхолестеринемию, гипертензию, гиперлипопротеинемию, гиперлипидемию (например, дислипидемию), гипертриглилцеридемию, сердечно-сосудистое заболевание, атеросклероз, заболевание периферических сосудов, болезнь почек, кетоацидоз, тромботические нарушения, нефропатию, диабетическую нейропатию, диабетическую ретинопатию, половую дисфункция, дерматопатию, диспепсию, гипогликемию, рак и отек.
[00233] Нейродегенеративные нарушения включают такие заболевания, как дегенерация фоторецепторов (т.е. пигментный ретинит), деменция, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и болезнь Хантингтона.
[00234] Хронические воспалительные заболевания включают такие заболевания, как целиакия, васкулит, волчанка, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), заболевание раздраженного кишечника, атеросклероз, артрит и псориаз.
[00235] Расстройства, связанные со старением, включают такие заболевания, как рак, деменция, сердечно-сосудистое заболевание (например, артериосклероз), гипертензия, сахарный диабет (I типа или II типа), артрит, катаракта, болезнь Альцгеймера, дегенерация желтого пятна и остеопороз.
[00236] Субъект может страдать метаболическим нарушением или быть предрасположенным к его развитию. Субъектов, страдающих или подверженных риску развития метаболического нарушения, идентифицируют способами, известными в этой области техники. Например, диабет можно диагностировать путем измерения уровня глюкозы в крови натощак или инсулина, или посредством теста на толерантность к глюкозе. Нормальный уровень глюкозы у взрослого составляет примерно 60-126 мг/дл. Нормальный уровень инсулина составляет примерно 7 мЕд/мл+3 мЕд. Гипертензию можно диагностировать по показаниям кровяного давления, которые постоянно находятся на уровне примерно 140/90 или превышают его. Сердечно-сосудистое заболевание можно диагностировать путем измерения уровня холестерина. Например, уровень холестерина ЛПНП выше примерно 137 или общего холестерина выше примерно 200 указывает на сердечно-сосудистое заболевание. Гипергликемию можно диагностировать по уровню глюкозы в крови, который выше примерно 10 ммоль/л (180 мг/дл). Нарушение толерантности к глюкозе можно диагностировать по уровням глюкозы от 140 до 199 мг на дл (от 7,8 до 11,0 ммоль) после проведения двухчасового перорального теста на толерантность к глюкозе, 75 г. Инсулинорезистентность можно диагностировать по уровню инсулина в сыворотке крови натощак выше приблизительно 60 пмоль/л. Гипогликемию можно диагностировать по уровню глюкозы в крови ниже примерно 2,8-3,0 ммоль/л (от 50 до 54 мг/дл). Ожирение можно диагностировать, например, по индексу массы тела. Индекс массы тела (ИМТ) измеряют в кг/м2 (или фунтах/дюйм2 х 704,5). В качестве альтернативы, может быть измерена окружность талии (оценка распределения жира), соотношение окружностей талии и бедер (оценка распределения жира), толщина кожной складки (при измерении в нескольких местах, оценка распределения жира) или биоимпеданс (основанный на принципе, что нежировая масса проводит ток лучше, чем жировая масса (т.е. жировая масса «сопротивляется» току), оценка % жира). Параметры для индивидуумов с нормальной массой тела весом, избыточной массой тела или ожирением следующие: недостаточная масса тела: ИМТ<18,5; нормальная: ИМТ от примерно 18,5 до примерно 24,9; избыточная масса тела: ИМТ=от примерно 25 до примерно 29,9. Индивидуумы с избыточной массой тела характеризуются окружностью талии >94 см для мужчин или >80 см для женщин и соотношениями окружностей талии и бедер >0,95 у мужчин и >0,80 у женщин. Для индивидуумов с ожирением характерны ИМТ от 30 до 34,9, превышение более чем на 20% «нормального» соотношения масса тела-рост, процент жира в организме >30% для женщин и 25% для мужчин, и окружность талии >102 см (40 дюймов) для мужчин или 88 см (35 дюймов) для женщин. Для индивидуумов с тяжелым или морбидным ожирением характерен ИМТ >35.
[00237] Способы, описанные в настоящем документе, могут обеспечивать снижение тяжести или облегчение одного или более симптомов метаболического нарушения. Например, симптомы диабета включают повышенные уровни глюкозы в крови натощак, кровяное давление на уровне или выше 140/90 мм/рт.ст.; аномальные уровни жира в крови, такие как уровень липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) ниже или равный 35 мг/дл, или уровень триглицеридов, выше или равный 250 мг/дл (мг/дл=миллиграммы глюкозы на децилитр крови). Эффективность лечения определяют в сочетании с любым известным методом диагностики метаболического нарушения. Облегчение одного или более симптомов метаболического нарушения указывает на то, что соединение оказывает полезный клинический эффект.
[00238] Способы согласно настоящему изобретению подходят для лечения, облегчения симптомов или отсрочивания возникновения болезни почек. Заболевания почек включают острое повреждение почек (ОПП) и хроническую болезнь почек (ХБП).
[00239] Субъект может страдать острым повреждением почек (ОПП) или быть предрасположенным к его развитию. Острое повреждение почек может характеризоваться одним или более клиническими критериями или состояниями (т.е. внезапным снижением способности почек выводить азотсодержащие продукты жизнедеятельности из крови, что приводит к азотемии). Субъектов, страдающих или подверженных риску развития острого повреждения почек (ОПП), идентифицируют способами, известными в этой области техники. Например, острое повреждение почек может характеризоваться повышением уровня креатинина сыворотки по меньшей мере на 50% по сравнению с исходным уровнем, абсолютным повышением уровня креатинина сыворотки по меньшей мере на 0,3 мг/дл по сравнению с исходным уровнем, снижением скорости клубочковой фильтрации по меньшей мере на 25% по сравнению с исходной, снижение диуреза до 0,5 мл на килограмм массы тела или менее в час, сохраняющееся на протяжении по меньшей мере 6 часов, или любым их сочетанием. Острое повреждение почек может быть вызвано ишемией, лекарственными средствами или токсическими агентами (т.е. радиоконтрастными средами, нестероидными противовоспалительными препаратами (НПВП), алкоголем или химиотерапевтическим агентом), вирусами и обструкцией.
[00240] Субъект может страдать хронической болезнью почек (ХБП) или быть предрасположенным к ее развитию. Хроническую болезнь почек (ХБП) определяют как либо (1) наличие поражения почек, определяемого структурными или функциональными аномалиями почек в течение 3 месяцев или дольше со снижением скорости клубочковой фильтрации (СКФ) или без него, либо (2) СКФ ниже 60 мл/мин/1,73 м2 в течение 3 месяцев или дольше с поражением почек или без него. Субъектов, страдающих или подверженных риску развития хронической болезни почек (ХБП), идентифицируют способами, известными в этой области техники. Структурные или функциональные отклонения проявляются в виде симптомов, таких как либо патологические отклонения или маркеры поражения почек, включая отклонения, выявленные в визуализирующих исследованиях, либо состав крови или мочи.
[00241] Например, ХБП можно диагностировать путем тестирования на специфический маркер. Например, маркеры поражения почек включают концентрацию креатинина в плазме выше примерно 1,6 мг/дл и концентрацию азота мочевины крови (АМК) выше примерно 20 мг/дл. Как правило, оба этих маркера повышены у индивидуумов с ХБП. Дополнительные маркеры поражения почек могут включать гематурию (т.е. любое детектируемое количество крови в моче), протеинурию (т.е. концентрации белка в моче выше примерно 100 мг/дл), альбуминурию (т.е. концентрации альбумина в моче выше примерно 100 мг/дл), концентрацию интактного паратиреоидного гормона (ПТГ) в крови выше примерно 150 пг/мл или уровни фосфатов в крови выше примерно 4,5 мг/дл. Одним из специфических маркеров болезни почек является СКФ-скорость выше нормы (т.е. СКФ выше примерно 90 мл/мин/1,73 м2), однако СКФ ниже нормы также указывает на ХБП.
[00242] Способы согласно настоящему изобретению подходят для лечения, облегчения симптомов или отсрочивания возникновения неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) и/или неалкогольного стеатогепатита (НАСГ). Субъект может страдать неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП) и/или неалкогольным стеатогепатитом (НАСГ) или быть предрасположенным к его развитию. Субъектов, страдающих или подверженных риску развития неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) и/или неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), идентифицируют способами, известными в этой области техники. Например, НАЖБП и/или НАСГ могут быть диагностированы путем биопсии печени.
[00243] Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП), как определено в настоящем документе, представляет собой заболевание с отложением жира в печени, которое возникает у пациентов, у которых история потребления алкоголя не является достаточно длительной, чтобы вызвать повреждение печени. Неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) можно дополнительно классифицировать на простую жировую болезнь печени, стеатогепатит и цирроз. Неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) относится к патологии, связанной с воспалением, некрозом, баллонированием и фиброзом клеток печени. Начало неалкогольной простой жировой болезни печени индуцируется отложением жира в клетках печени, и это накопление жира определяется балансом между повышающими факторами (приток и синтез жиров в клетках печени) и понижающими факторами (катаболизм жиров и их высвобождение из клеток печени). Как только происходит повреждение клеток печени в дополнение к этому отложению жира, неалкогольная простая жирования болезнь печень прогрессирует до неалкогольного стеатогепатита. Неалкогольный стеатогепатит является прогрессирующим и в конечном счете может прогрессировать до цирроза и гепатоцеллюлярной карциномы.
Комбинированное лечение
[00244] В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение включает соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль для применения в комбинированной терапии. Соединение, композиции, лекарственные средства и соединения для применения согласно Формуле (I) или (II), или их фармацевтически приемлемую соль можно также успешно применять в комбинации с одним или более другими терапевтическими агентами. Такие терапевтические агенты включают, но не ограничиваются ими, другие ингибиторы ACMSD; противодиабетические агенты, такие как агонисты PPARy, двойные агонисты PPAR/γ, агонисты PPARδ, бигуаниды, ингибиторы протеинтирозинфосфатазы-1B (PTP-1B), дипептидилпептидазы IV (DPP-IV), сульфонилмочевины, меглитиниды, ингибиторы альфа-глюкозидгидролазы, ингибиторы альфа-амилазы, стимуляторы секреции инсулина, антагонисты A2, инсулин или миметики инсулина, ингибиторы гликогенфосфорилазы, агонисты GLP-1, не-тиазолидиндионы, гликокиназа и ингибитор 11 HSD-1; агенты против ожирения, такие как активаторы разобщающего белка (UCP-1, UCP-2 и UCP-3, 3-адренергический рецептор (3), -агонисты тиреоидного гормона, ингибиторы синтазы жирных кислот (PAS), ингибиторы фосфодиэтеразы (PDE), ингибиторы липазы, ингибиторы обратного захвата серотонина, ингибиторы обратного захвата моноамина, агонисты Mc4r, агонисты 5HT2c, агонисты стимуляторов секреции гормона роста (GHS), производные CNTF, цилиарные нейротрофные факторы (CNTh), агонисты холецистокинина-A (CCK-A), антагонисты опиоидов, антагонисты орексина, ацилэстрогены, лептин, антагонисты NPY 5, антагонисты нейропептида Y5 (NPY5), агонисты нейропептида Y2 (NPY2), антагонисты рецепторов меланинконцентрирующего гормона (MCHLR) и рецептор меланинконцентрирующего гормона 2 (MCH2R), антагонисты MCH1R, нейропептид Y1, антагонисты грелина, каннабиноидный рецептор 1 (CB-1), ингибиторы транспорта серотонина (5HT), агонисты CCK-A и антагонисты/обратные агонисты гистамина 3 (H3); агенты, понижающие холестерин, такие как ингибиторы 3-гидрокси-3-метилглутарил-коэнзим-A (HMG-CoA)-редуктазы, ингибиторы HMG-CoA-синтазы, ингибиторы скваленэпоксидазы, фиброевые кислоты, смолы, связывающие желчные кислоты, пробукол и ниацин (никотиновая кислота); соединения, которые повышают уровни НАД+, такие как предшественники НАД+ (т.е. никотинамидрибоза (NA), никотинамидмононуклеотид (NMN), никотиновая кислота (NA) и никотинамид); и соединения, которые ингибируют потребление НАД+, такие как ингибиторы PARP и ингибиторы CD38.
[00245] Агонисты PPARy, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, глитазоны (например, балаглитазон, циглитазон, дарглитазон, энглитазон, изаглитазон (MCC-555), пиоглитазон, розиглитазон, троглитазон, CLX-09D21, 5-BTZD и т.п.); GW-0207, LG-100641, LY-300512, LY-519818, R483 (Roche), T131 (Tularik) и соединения, описанные в W097/27857, 97/28115, 97/28137 и 97/27847; и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Двойные агонисты PPAR/γ, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, CLX-0940, GW-1536, GW1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767, SB 219994 и мураглитазар, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. KRP-297 представляет собой 5-[(2,4-диоксо-5-тиазолидинил)метил]-2-метокси-N-[[4-(трифторметил)фенил]метил]бензамид и его фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Агонисты PPARδ, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, GW 501516, GW 590735 и соединения, описанные в JP 10237049, WO 02/14291 и WO 2018/125983; и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.
[00246] Бигуаниды, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, буформин, метформин и фенформин, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Метформин (Глюкофаж®) показан пациентам с инсулиннезависимым сахарным диабетом, в частности, пациентам с рефрактерным ожирением. Physician's Desk Reference стр. 1080-1086, (56-е изд. 2002).
[00247] Ингибиторы протеинтирозинфосфатазы-1B (PTP-1B), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, A-401,674, KR 61639, OC-060062, OC-83839, OC-297962, MC52445, MC52453 и соединения, описанные в WO 02/26707, WO 02/26743, JP 2002114768, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.
[00248] Ингибиторы дипептидилпептидазы IV (DPP-IV), такие как изолейцин-тиазолидид; NVP-DPP728; P32/98; и LAP 237, P 3298, TSL 225, валин-пирролидид, TMC-2A/2B/2C, ингибиторы CD-26, FE 999011, P9310/K364, VIP 0177, DPP4, SDZ 274A444; и соединения, описанные в WO 03/00449; WO 03/004496; EP 1 258 476; WO 02/083128; WO 021062764; WO 03/000250; WO 03/002530; WO 03/002531; WO 03/002553; WO 03/002593; WO 03/000180; и WO 03/000181.
[00249] Сульфонилмочевины, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, ацетогексамид, хлорпропамид, диабинез, глибенкламид, глипизид, глибурид, глимепирид, гликлазид, глипентид, гликидон, глизоламид, толазамид и толбутамид, их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Меглитиниды, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, репаглинид и натеглинид, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.
[00250] Ингибиторы альфа-глюкозидгидролазы (или ингибиторы глюкозидов), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, акарбозу, адипозин, камиглибозу, эмиглитат, миглитол, воглибозу, прадимицин-Q, салбостатин, CKD-711, MDL-25,637, MDL-73,945 и MOR 14, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры, и соединения, описанные в патентах США №№ 4062950, 4174439, 4254256, 4701559, 4639436, 5192772, 4634765, 5157116, 5504078, 5091418, 5217877 и 5091524. Ингибиторы альфа-амилазы, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, тендамистат, трестатин и A1-3688, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры, и соединения, описанные в патентах США №№ 4451455, 4623714 и 4273765.
[00251] Стимуляторы секреции инсулина, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, линоглирид и A-4166, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
[00252] Ингибиторы окисления жирных кислот, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, кломоксир и этомоксир, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры. Антагонисты A2, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, мидаглизол, изаглидол, дериглидол, идазоксан, эароксан, флупароксан и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры. Инсулин или миметики инсулина, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, биоту, LP-100, новарапид, инсулин детемир, инсулин лизпро, инсулин гларгин, инсулин-цинк суспензию (ленте и ультраленте), инсулин Lys-Pro, GLP- 1 (73-7) (инсулинтропин) и GLP-1 (7-36)-NH2), и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.
[00253] Ингибиторы гликогенфосфорилазы, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, CP-368, 296, CP-316,819, BAYR3401 и соединения, описанные в WO 01/94300 и WO 02/20530, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Агонисты GLP-1, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, эксендин-3 и эксендин-4, и соединения, описанные в US 2003087821 и NZ 504256, и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры.
[00254] Не-тиазолидиндионы, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, JT-501 и фарглитазар (GW-2570/GI-262579), и их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры. Активаторы гликокиназы, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, конденсированные гетероароматические соединения, такие как описаны в US 2002103199, и изоиндолин-1-он-замещенные соединения пропионамида, такие как описаны в WO 02/48106.
[00255] Ингибиторы транспорта серотонина (5HT), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, пароксетин, флуоксетин, фенфлурамин, флувоксамин, сертралин и имипрамин. Ингибиторы транспорта норэпинефрина (NE), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, GW 320659, деспирамин, талсупрам и номифенсин. Антагонисты/обратные агонисты каннабиноидного рецептора 1 (CB-1), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: патентах США №№ 5532237, 4973587, 5013837, 5081122, 5112820, 5292736, 5624941 и патенте США № 6028084, и заявках РСТ №№ WO 96/33159, WO 98/33765, W098/43636, W098/43635, WO 01/09120, WO 98/31227, WO 98/41519, WO 98/37061, WO 00/10967, WO 00/10968, WO 97/29079, WO 99/02499, WO 01/58869, WO 02/076949, WO 01/64632, WO 01/64633, WO 01/64634 и WO 03/007887, и заявке EPO № EP-658546. Конкретные антагонисты/обратные агонисты CB-1, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, римонабант (Sanofi Synthelabo), SR-147778 (Sanofi Synthelabo), BAY 65-2520 (Bayer) и SLY 319 (Solvay). Агонисты CCK-A, подходящие для настоящего изобретения, включают GI 181771 и SR 146131. Антагонисты грелина, подходящие для настоящего изобретения, включают: указанные в заявке РСТ № WO 01/87335 и WO 02/08250. Антагонисты/обратные агонисты гистамина 3 (H3), подходящие для настоящего изобретения, включают: указанные в заявке PCT № WO 02/15905 и O-[3-(1H-имидазол-4-ил)пропанол]карбаматы (Kiec-Kononowicz, K. et al., Pharmazie, 55:349-55 (2000)), пиперидинсодержащие антагонисты рецепторов гистамина H3 (Lazewska, D. et al., Pharmazie, 56:927-32 (2001), производные бензофенона и родственные соединения (Sasse, A. et al. Arch. Pharm.(Weinheim) 334:45-52 (2001)), замещенные N-фенилкарбаматы (Reidemeister, S. et al., Pharmazie, 55:83-6 (2000)) и производные проксифана (Sasse, A. et al., J. Med. Chem. 43:3335-43 (2000)). Конкретные антагонисты/обратные агонисты H3, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, тиоперамид, 3-(1H-имидазол-4-ил)пропил N-4-пентенил)карбамат, клобенпропит, йодофенпропит, имопроксифан, GT2394 (Gliatech) и A331440.
[00256] Антагонисты рецепторов меланинконцентрирующего гормона (MCHLR) и агонисты/антагонисты рецепторов меланинконцентрирующего гормона 2 (MCH2R), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в заявках на патент РСТ №№ WO 01/82925, WO 01/87834, WO 02/06245, WO 02/04433 и WO 02/51809, и заявке на патент Японии № JP 13226269. Конкретные антагонисты MCH1R, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, T-226296 (Takeda), SB 568849 и SNAP 7941. Антагонисты нейропептида Y1 (NPY1), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: патенте США № 6001836 и заявках РСТ №№ WO 96/14307, WO 01/23387, WO 99/51600, WO 01/85690, WO 01/85098, WO 01/85173 и WO 01/89528. Конкретные примеры антагонистов NPY1, подходящих для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, BIBP3226, J-115814, BIBO 3304, LY-357897, CP-671906 и GI-264879A. Агонисты нейропептида Y2 (NPY2), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, пептид YY (PYY) и PYY3_36, аналоги пептида YY, агонисты PYY и соединения, описанные в WO 03/026591, WO 03/057235 и WO 03/027637. Антагонисты нейропептида Y5 (NPY5), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, соединения, описанные в патентах США №№ 6140354, 6191160, 6258837, 6313298, 6337332, 6329395 и 6340683, патентах США №№ 6326375, 6329395, 6337332, 6335345, европейских патентах EP-01010691 и EP 01044970, и публикациях международных заявок на патент PCT WO 97/19682, WO 97/20820, WO 97/20821, WO 97/20822, WO 97/20823, WO 98/27063, WO 00/107409, WO00/185714, WO 00/185730, WO 00/64880, WO 00/68197, WO 00/69849, wo 01/09120, wo 01/85714, WO 01/85730, WO 01/07409, WO 01/02379, WO 01/02379, WO 01/23388, WO 01/23389, WO 01/44201, WO 01/62737, WO 01/62738, WO 01/09120, WO 02/20488, WO 02/22592, WO 02/48152, WO 02/49648 и WO 01/14376. Конкретные антагонисты NPY5, применимые в комбинациях согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, GW-569180A, GW-594884A, GW-587081X, GW-548118X, FR 235,208, FR226928, FR 240662, FR252384, 1229U91, GI-264879A, CGP71683A, LY-377897, LY366377, PD-160170, SR-120562A, SR-120819A, JCF-104 и H409/22. Дополнительные конкретные антагонисты NPY5, применимые в комбинациях согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, соединения, описанные в Norman et al., J. Med. Chem. 43:42884312 (2000). Лептин включает, но не ограничивается ими, рекомбинантный лептин человека (PEG-OB, Hoffman La Roche) и рекомбинантный метиониллептин человека (Amgen). Производные лептина (например, усеченные формы лептина), применимые в настоящем описании, включают указанные в: патентах №№ 5552524, 5552523, 5552522, 5521283 и международных публикациях РСТ WO 96/23513, WO 96/23514, WO 96/23515, WO 96/23516, WO 96/23517, WO 96/23518, WO 96/23519 и WO 96/235.
[00257] Антагонисты опиоидов, применимые в настоящем раскрытии, включают указанные в: заявке РСТ № WO 00/21509. Конкретные антагонисты опиоидов, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, налмефен (Ревекс), 3-метоксиналтрексон, налоксон и налтрексон. Антагонисты орексина, подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: заявках на патент РСТ №№ WO 01/96302, WO 01/68609, WO 02/51232, WO 02/51838 и WO 03/023561. Конкретные антагонисты орексина, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, SB-334867-A. Ацилэстрогены, подходящие для настоящего изобретения, включают олеоилэстрон (del Mar-Grasa, M. et al., Obesity Research, 9:202-9 (2001)). Агонисты холецистокинина-A (CCK-A), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в патенте США № 5739106. Конкретные агонисты CCK-A включают, но не ограничиваются ими, AR-R 15849, GI181771, JMv-180, A-71378, A-71623 и SR146131. Конкретные цилиарные нейротрофные факторы (CNTh), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, GI-181771 (GlaxoSmithKline), SR146131 (Sanofi Synthelabo), бутабиндид, PD170,292, PD 149164 (Pfizer). Производные CNTF, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, аксокин (Regeneron) и указанные в заявках РСТ №№ WO 94/09134, WO 98/22128 и WO 99/43813. Агонисты стимуляторов секреции гормона роста (GHS), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: патенте США № 6358951 и заявках на патент США №№ 2002/049196 и 2002/022637, и заявках РСТ №№ WO 01/56592 и WO 02/32888. Конкретные агонисты GHS включают, но не ограничиваются ими, NN703, гексарелин, MK-0677, SM-130686, CP424 391, L-692429 и L-163255.
[00258] Агонисты 5HT2c, подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: патенте США № 3914250 и заявках РСТ № WO 02/36596, WO 02/48124, WO 02/10169, WO 01/66548, WO 02/44152, WO 02/51844, WO 02/40456 и WO 02/40457. Конкретные агонисты 5HT2c, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, BVT933, DPCA37215, 1K264, PNU 22394, WAY161503, R-1065 и YM 348.
[00259] Агонисты Mc4r, подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: заявках РСТ №№ WO 99/64002, WO 00/74679, WO 01/991752, WO 01/74844, WO 01/70708, WO 01/70337, WO 01/91752, WO 02/059095, WO 02/059107, WO 02/059108, WO 02/059117, wo 02/12166, WO 02111715, WO 02/12178, WO 02/15909, WO 02/068387, WO 02/068388, WO 02/067869, WO 03/007949 и WO 03/009847. Конкретные агонисты Mc4r, подходящие для настоящего изобретения, включают CIR86036 (Chiron), ME-10142 и ME-10145 (Melacure).
[00260] Ингибиторы обратного захвата моноаминов, подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: заявках РСТ №№ WO 01/27068 и WO 01/62341. Конкретные ингибиторы обратного захвата моноамина, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, сибутрамин (Меридиа O/Редуктил), описанный в патентах США №№ 4746680, 4806570 и 5436272 и публикации патента США № 2002/0006964.
[00261] Ингибиторы обратного захвата серотонина и высвобождающие вещества, подходящие для настоящего изобретения, включают: дексфенфлурамин, флуоксетин и другие ингибиторы обратного захвата серотонина, включая, но не ограничиваясь ими, те, которые указаны в патенте США № 6365633 и в заявках на патент РСТ №№ WO 01/27060 и WO 01/162341.
[00262] Ингибитор 11 HSD-1, подходящий для настоящего изобретения, включает, но не ограничивается ими, BVT 3498, BVT 2733 и те соединения, которые описаны в WO 01/90091, WO 01/90090, WO 01/90092. Активаторы разобщающего белка (UCP-1, UCP-2 и UCP-3), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в заявке на патент РСТ № WO 99/00123. Конкретные активаторы несвязывающего белка (UCP-1, UCP-2 и UCP-3), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, фитановую кислоту, 4-[(E)-2-(5,6,7,8-тетрагидро-5,5,8,8-тетраметил-2-нафталенил)-1-пропенил]бензойную кислоту (TTNPB) и ретиноевую кислоту.
[00263] Агонисты 3-адренергического рецептора (3), подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: патенте США № 5705515 и патенте США № 5451677, и в заявках на патент РСТ № WO 01/74782 и WO 02/32897. Конкретные агонисты , подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, AD9677/TAK677 (Dainippon/Takeda), CL-316,243, SB 418790, BRL-37344, L-796568, BMS-196085, BRL- 35135A, CGP12177A, BTA- 243, GW 427353, Трекадрин, Зенека D7114 и SR 59119A.
[00264] -агонисты тиреодиного гормона, подходящие для настоящего изобретения, включают указанные в: заявке РСТ № WO 02/15845 и заявке на патент Японии № JP 2000256190. Конкретные агонисты тиреодиного гормона , подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются им, KB-2611 (KaroBioBMS). Конкретные ингибиторы синтазы жирных кислот (PAS), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, церуленин и C75. Конкретные ингибиторы фосфодиэтеразы (PDE), подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, теофиллин, пентоксифиллин, запринаст, силденафил, арнринон, милринон, цилостамид, ролипрам и циломиласт.
[00265] Ингибиторы липазы, подходящие для настоящего изобретения, включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы, раскрытые в заявке РСТ № WO 01/77094 и патентах США №№ 4598089, 4452813, 5512565, 5391571, 5602151, 4405644, 4189438 и 4242453. Конкретные ингибиторы липазы, применимые в настоящем раскрытии, включают, но не ограничиваются ими, тетрагидролипстатин (орлистат/Ксеникал), Тритон WR1339, RHC80267, липстатин, тизапонин (teasaponin) и диэтилумбеллиферилфосфат, FL-386, WAY-121898, Bay-N-3176, валилактон, эстерацин, эбелактон A, эбелактон B и RHC 80267.
[00266] Примеры ингибиторов HMG-CoA-редуктазы включают, но не ограничиваются ими, ловастатин, симвастатин, правастатин и флувастатин. Примерами ингибиторов HMG-CoA-синтазы являются производные бета-лактона, описанные в патентах США 4806564, 4816477, 4847271 и 4751237; производные бета-лактама, описанные в U.S. 4983597 и U.S.S.N. 07/540992, поданных 20 июня 1990 года; и замещенные аналоги оксациклопропана, описанные в публикации европейского патента EP 0411703. Примеры ингибиторов скваленэпоксидазы описаны в публикации европейского патента EP 0 318 860 и в публикации японского патента J02 169-571A. Примеры молекул-индукторов гена ЛПНП-рецепторов описаны в патенте США 5182298, зарегистрированном 18 марта 1991 года. Другие агенты, снижающие уровень холестерина, которые можно вводить, включают ниацин, пробукол, фиброевые кислоты (т.е. клофибрат и гемфиброзил) и индукторы гена ЛПНП-рецепторов.
[00267] Примеры ингибиторов PARP включают, но не ограничиваются ими, йодонитокумарин, 5-йод-6-нитрокумарин, 3,4-дигидро-5-метилизохинолинон, 4-амино-l,8-нафталимид, 3-метоксибензамид, 8- гидрокси-2-метил-3-гидрохиназолин-4-он, 2-{3-[4-(4-фторфенил)-3,6-дигидро-l(2h)-пиридинил]пропил}-8-метил-4(3h)-хиназолинон, 5-фтор-l-[4-(4-фенил-3,6-дигидропиридин-l(бутил]хиназолин-2,4(lh,3h)-дион, 3-(4-хлорфенил)хиноксалин-5-карбоксамид, 2-(3'-метоксифенил)бензирнидазол-4-карбоксам, бензамид, 3-аминобензамид, 3-аминофталгидразид и 1,5-дигидроксиизохинолин.
[00268] Вышеупомянутые соединения, которые можно применять в комбинации с соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью, могут быть получены и введены, как описано в этой области техники, например, в документах, указанных выше.
[00269] Вышеупомянутые соединения являются лишь иллюстрацией ингибиторов ACMSD, противодиабетических агентов, агентов против ожирения, агента, снижающего уровень холестерина, соединений, которые повышают уровни НАД+, соединений, которые ингибируют потребление НАД+, которые можно применять в композициях согласно настоящему изобретению. Поскольку этот перечень соединений не является исчерпывающим, в способах согласно настоящему изобретению можно применять любой агент против ожирения и любой противодиабетический агент, и они не ограничиваются никаким конкретным структурным классом соединений.
[00270] В настоящем описании термин «комбинированная терапия» включает введение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства, метаболита, полиморфа или сольвата и по меньшей мере второго агента в качестве части конкретной схемы лечения, обеспечивающей полезный эффект в результате совместного действия этих терапевтических агентов. Указанный полезный эффект комбинации включает, но не ограничивается им, совместное, например, синергическое действие и/или фармакокинетическое или фармакодинамическое совместное действие, или любую их комбинацию, обусловленную комбинацией терапевтических агентов. Введение этих терапевтических агентов в комбинации, как правило, осуществляют в течение определенного периода времени (обычно нескольких минут, часов, дней или недель в зависимости от выбранной комбинации). Термин «комбинированная терапия» может охватывать, но обычно не охватывает, введение двух или более из этих терапевтических агентов в качестве части отдельных режимов монотерапии, которые случайно и произвольно обеспечивают комбинации согласно настоящему изобретению.
[00271] Термин «комбинированная терапия» включает последовательное введение этих терапевтических агентов, при этом каждый терапевтический агент вводят в разное время и в любом порядке или поочередно и в любом порядке, а также по существу одновременное введение этих терапевтических агентов или по меньшей мере двух терапевтических агентов. По существу одновременное введение можно осуществлять, например, путем введения субъекту одной капсулы с фиксированным соотношением каждого терапевтического агента или нескольких отдельных капсул для каждого из терапевтических агентов. Последовательное или по существу одновременное введение каждого терапевтического агента можно осуществлять любым подходящим путем, включая, но не ограничиваясь, пероральные пути, внутривенные пути, внутримышечные пути и прямое всасывание через ткани слизистой оболочки. Терапевтические агенты можно вводить одним и тем же путем или разными путями. Например, первый терапевтический агент выбранной комбинации можно вводить путем внутривенной инъекции, тогда как другие терапевтические агенты комбинации можно вводить перорально. В качестве альтернативы, например, все терапевтические агенты можно вводить перорально или все терапевтические агенты можно вводить путем внутривенной инъекции. Последовательность введения терапевтических агентов не имеет строго критического значения.
Биологические анализы и исследования у животных
Метод скрининга ингибирования ACMSD1
[00272] Активность соединений в качестве ингибиторов ACMSD1 определяли в спектрофотометрическом анализе in vitro. Инкубировали предварительную смесь для анализа, а затем добавляли соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль и раствор ACMSD1. Влияние концентрации ACMS на активность фермента исследовали путем изменения концентрации 3-гидроксиантраниловой кислоты (3OH-HA) в предварительной смеси для анализа. Рассчитывали кинетические параметры на основе исходных данных о скорости с использованием графика Лайнуивера-Берка.
Методы клеточного анализа
[00273] Выращивали и высевали клеточные линии гепатоцитов мыши. Клетки выдерживали в культуре при 37°C, и после адгезии клеток добавляли различные концентрации соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли или ДМСО. Примерно через 24 часа собирали первичные гепатоциты.
Определение модуляции ACMSD-1 в клетках HEK293T.
[00274] Клетки HEK293T высевали и трансфицировали для временной экспрессии ACMSD. Затем клетки стимулировали различными концентрациями соединения Формулы (I) или (II), а затем лизировали для измерения активности ACMSD в спектрофотометрическом анализе in vitro. Общее содержание белка в клеточных лизатах определяли посредством анализа Брэдфорд и использовали для определения специфичной активности фермента, нормализованного во всех образцах.
Определение содержания НАД+ в первичных гепатоцитах человека
[00275] После высевания первичные гепатоциты обрабатывали различными концентрациями соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли, или MEHP (контроль). Соединение заменяли каждые 24 часа, а затем клетки непосредственно собирали и лизировали для определения содержания НАД+ посредством ЖХ-МС/МС (жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии/масс-спектроскопии).
Модуляция активности SOD2 в клетках AML12 и первичных гепатоцитах мыши
[00276] Лизировали первичные гепатоциты или клетки AML-12 и определяли общую концентрацию белка с использованием анализа Брэдфорд. Активность SOD2 определяли в указанные моменты времени после обработки соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью с использованием набора SOD Assay Kit. Определяли поглощение и результаты выражали в Ед/мл/мг белка в соответствии со стандартной кривой и измеренной концентрацией белка.
Определение содержания НАД+ в первичных гепатоцитах мыши
[00277] НАД+ экстрагировали с использованием метода кислотной экстракции, и образцы собирали и гомогенизировали. После осаждения нерастворимых белковых частей центрифугированием образцы разделяли путем высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и анализировали путем масс-спектрометрии. Белки в осадке подвергали количественному определению посредством анализа Брэдфорд и использовали для нормализации.
Получение РНК и ОТ-кПЦР-анализ ACMSD и SIRT1-регулируемых генов в клетках
[00278] Клетки (AML-12, Hepa-1.6, HEK-293, первичные гепатоциты человека и мыши) обрабатывали различными концентрациями соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли и определяли экспрессию гена ACMSD, Pgc1a, Sod1 и Sod2 (MnSOD) с использованием количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-кПЦР). Из клеток экстрагировали тотальную РНК и указанную экстрагированную РНК обрабатывали ДНКазой и использовали для обратной транскрипции (ОТ).
Модуляция активности каспазы 3/7 в клетках MDCK
[00279] Клетки MDCK культивировали в базовой среде до конечной концентрации 10%. Клетки высевали в 96 лунок и через 24 часа после высевания клеток среду заменяли свежей средой с добавлением 1% FBS. Затем использовали цисплатин для индукции повреждения клеток. Добавляли различные концентрации соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли (в ДМСО) в комбинации с цисплатином или перед добавлением цисплатина. Определяли активность каспазы 3/7 (Promega) в соответствии со стандартными методиками с использованием считывания люминесцентного сигнала на планшет-ридере. Каждый эксперимент/условие проводили в трех повторностях. Активность каспазы анализировали как эффект в процентах, приведенный к клеткам, обработанным только цисплатином и носителем.
Цитотоксичность и скрининг hERG
[00280] Высевали клетки HePG2 и AML-12 и определяли зависимость доза-ответ для соединения в различных концентрациях. Стимулировали клетки и использовали надосадочную жидкость для высвобождения лактатдегидрогеназы (ЛДГ) в качестве меры некроза во время лизиса клеток для определения уровней АТФ для определения жизнеспособности клеток.
[00281] Набор Predictor hERG assay kit стабильно трансфицировали калиевым каналом hERG и высокоаффинным красным флуоресцентным лигандом канала hERG и использовали для определения аффинного связывания канала hERG соединениями Формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемой солью. Соединения, которые связываются с белком канала hERG (конкурирующие соединения), идентифицировали по их способности вытеснять индикатор, что приводит к более низкой поляризации флуоресценции.
Эксперименты с C. elegans - сайленсинг ACMSD1, анализы продолжительности жизни, оценка подвижности и количественное определение GFP
[00282] Сайленсинг ACMSD1: эксперименты с бактериальной питающей РНКи для определения влияния понижающей регуляции или сайленсинга acmsd-1 на экспрессию гена и выживаемость проводили на нематоде Caenorhabditis elegans (C. elegans). Клоны, используемые для экспериментов с питанием бактериями, представляли собой acmsd-1, SIR-2.1 и DAF-16. Из клеток экстрагировали тотальную РНК и указанную экстрагированную РНК обрабатывали ДНКазой и использовали для обратной транскрипции (ОТ).
[00283] Червей выращивали на чашках с агаром NGM, дополнительно содержащих карбенициллин и IPTG, и высевали с бактериальными культурами. После обработки РНКи червей переносили в чашки, содержащие паракват, и высевали с бактериями РНКи. Контрольных животных выращивали на бактериях РНКи, содержащих пустой вектор (контроль), а затем переносят или в чашки, содержащие паракват, и высевали с бактериями РНКи. Осуществляли количественное определение экспрессии гена sod-3 на уровнях мРНК и уровнях белка с использованием ОТ-кПЦР и анализы выживаемости. Движение червей регистрировали в 1, 3 и 5 дни взрослого состояния.
Исследования противодиабетического действия на мышах C57BL/6J и KK-Ay
[00284] Мышей кормили обычным кормом или обеспечивали рационом с высоким содержанием жиров (HFD). Соединение Формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль вводили ежедневно, и собирали кровь и ткани для выделения РНК, измерения липидов и гистологии. Измеряли потребление кислорода, проводили гистологический анализ и трансмиссионную электронную микроскопию. Также проводили пероральный тест на толерантность к глюкозе и внутрибрюшинный тест на толерантность к инсулину для количественного определения глюкозы и измерения концентраций инсулина в плазме.
Исследования противодиабетического действия и действия против ожирения на мышах db/db с мутацией LepR
[00285] Животных обеспечивали рационом с высоким содержанием жиров (HFD). В случае субхронического вмешательства животных лечили один раз в день соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью в течение 14 дней. Брали образцы крови и определяли концентрацию глюкозы в каждом образце крови. В случае неотложного вмешательства брали исходные образцы крови, а затем вводили соединения Формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемую соль. Затем ограничивали доступ к питанию и брали второй образец крови. Мышей подвергали пероральному тесту на толерантность к глюкозе и определяли концентрации глюкозы в крови.
[00286] Для эугликемического гиперинсулинемического клэмп-теста животные получали первичную непрерывную инфузию [3-3H]глюкозы, а затем брали образец крови для определения в плазме концентраций инсулина, глюкозы и [3-3H]глюкозы, и расчета базальных скоростей появления эндогенной глюкозы. Затем мыши получали носитель или соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль через желудочный зонд. Затем животные получали инфузию [3-3H]глюкозы, содержащую инсулин, вызывающий умеренное чистое повышение концентраций инсулина в плазме. Измеряли концентрации глюкозы в крови и создавали целевую гликемию путем регулирования скорости инфузии глюкозы. Затем внутривенно вводили 2-дезокси-D-[1-14C] глюкозу и брали образцы крови. Затем мышей умерщвляли. Собирали ткань икроножной мышцы и эпидидимальную жировую ткань и определяли [3H]- и [14C]-радиоактивность в депротеинизированной плазме.
[00287] Оценивали массу тела и иссекали и взвешивали бурую жировую ткань (BAT) и гонадную белую жировую ткань (WAT). Измеряли объем кислорода (VO2) и объем выработки диоксида углерода (VCO2), и регистрировали в виде среднего VO2 в час, приведенного к массе тела (мл/ч/кг). Одновременно измеряли индекс активности по прерыванию инфракрасного луча и потреблению пищи.
Исследования неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) и неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) на самцах мышей C57BL/6J
[00288] Мышей обеспечивали рационом «Western» HF-HSD (рацион с высоким содержанием жиров и сахарозы) или обычным кормовым рационом (NCD) в качестве контроля. Затем животных лечили соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью в течение 4, 12 или 20 недель, а затем умерщвляли. Еженедельно осуществляли мониторинг массы тела и потребления пищи, и анализировали общую массу жира. Также выполняли интраперитонеальный тест толерантности к глюкозе (IPGTT) и измеряли уровни глюкозы в хвостовой вене после введения глюкозы. Рассчитывали инсулинорезистентность с использованием гомеостатической модели оценки инсулинорезистентности. Затем мышей умерщвляли путем взятия образца крови посредством пункции сердца. Получали плазму и вместе с плазмой собирали ткани для дальнейших биохимических и молекулярных анализов или для гистологического анализа.
Исследования неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП) и неалкогольного стеатогепатита (НАСГ) на мышах с дефицитом метионина и холина
[00289] Мышей массой 25 г обеспечивали либо рационом с дефицитом метионина и холина (MCD для индукции НАСГ), либо кормовым рационом (в качестве контроля). Эксперименты у животных и оценку НАЖБП и НАСГ проводили, как описано выше для мышей C57BL/6J, которых обеспечивали рационом с высоким содержанием жиров и высоким содержанием сахарозы.
Исследования атеросклероза на мышах с нокаутом LDL-R, которых обеспечивали рационом с высоким содержанием холестерина
[00290] Мышей с нокаутом (KO) LDL-R умерщвляли примерно через 12 недель после начала атерогенного питания, после чего сердце и аорту перфузировали PBS, а затем фиксировали. Измеряли атеросклероз и биохимические параметры с помощью соответствующих коммерчески доступных наборов. Для исследования липополисахаридов (LPS) in vivo мышам интраперитонеально вводили LPS путем инъекции и брали кровь из хвостовой вены. Количественно определяли уровни TNF с помощью ELISA-анализа TNF ELISA мыши. Определяли содержание клеток крови.
Исследования наследственных митохондриальных заболеваний на мышах Sco2KO/KI
[00291] Соединения Формулы (I) или (II) или их фармацевтически приемлемую соль растворяли в воде и добавляли к стандартному порошковому рациону в соответствующей концентрации. Рацион питания меняли каждые три дня и давали ad libitum в течение одного месяца. Собирали ткани для гистологического анализа. Для образцов четырехглавой мышцы измеряли спектрофотометрическую активность cI, cII, cIII и cIV, а также CS. Из тканей извлекали НАД+ с применением методов кислотной и щелочной экстракции соответственно, и анализировали с помощью масс-спектрометрии.
Исследования наследственного митохондриального заболевания на делеторных мышах
[00292] Самцам делеторных мышей и мышей дикого типа либо давали кормовой рацион (CD), либо вводили соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль в вмеси с CD. Осуществляли регулярный мониторинг мышей на предмет массы тела, потребления пищи и физической выносливости, и измеряли их способность к физической активности. Регистрировали потребление кислорода и выработку углекислого газа, а также спонтанную двигательную и пищевую активность. Собирали и препарировали срезы тканей из четырехглавой мышцы, печени и BAT. Замороженные срезы четырехглавой мышцы анализировали на предмет гистохимической активности циклооксигеназы (COX) и сукцинатдегидрогеназы (SDH)in situ, содержание крист как в BAT, так и в мышце определяли с помощью электронных микрофотографий, а образцы скелетной мышцы анализировали на предмет активности цитратсинтазы.
Исследования болезни почек
[00293] Мышей C57BL/6J дикого типа обеспечивали стандартным коммерческим рационом питания и делили на четыре группы: контрольная; цисплатин; соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемая соль, отдельно. Мышей умерщвляли и собирали образцы тканей и сыворотку. Измеряли уровни креатинина и азот мочевины крови (АМК), и количественно определяли провоспалительные цитокины TNF-, IL-1b и IL-6 из сыворотки или гомогенатов из ткани почек. Почки мышей собирали и окрашивали для анализа. Исследовали повреждение канальцев и оценивали его на основе процента кортикального некроза канальцев. Количественно оценивали инфильтрацию нейтрофилами на окрашенной ткани путем подсчета количества нейтрофилов в поле зрения под большим увеличением.
[00294] В качестве альтернативы, мышей C57BL/6J дикого типа нумеровали и выдерживали для акклиматизации в течение определенного периода, а затем рандомизировали в различные группы лечения на основе их массы тела. Разные группы держали на конкретном рационе питания в течение определенного периода времени. Измеряли массу тела и оценивали потребление пищи. Брали кровь путем ретроорбитальной пункции под легкой анестезией и использовали для анализа базальных уровней азота мочевины в крови (АМК).
[00295] Мышей анестезировали и помещали на хирургическую платформу. Обнажали обе почки путем разрезов, и пережимали почечные ножки с использованием сосудистых зажимов. Затем снимали зажим и ушивали область оперативного вмешательства. Ложнооперируемую группу подвергали аналогичным оперативным вмешательствам за исключением того, что не применяли пережимающего зажима. Осуществляли мониторинг животных до восстановления после анестезии и их возврата в домашнюю клетку. Животных ежедневно наблюдали на предмет общих клинических признаков и симптомов, а также смертности.
[00296] За день до окончания животных по отдельности помещали в метаболические клетки и собирали мочу для оценки содержания мочевины, креатинина, натрия и калия. Также брали кровь путем ретроорбитальной пункции под легкой анестезией и использовали плазму для анализа уровней азота мочевины крови (АМК) и креатинина сыворотки. Затем животных подвергали эвтаназии и собирали органы. Одну почку фиксировали, а другую подвергали мгновенной заморозке и использовали для оценки перекисного окисления липидов, уровней GSH, MPO и SOD.
Исследования острого повреждения почек, индуцированного ишемией/реперфузией
[00297] Мышей CD-1 (ICR) лечили соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью через желудочный зонд один раз в день. Мышей CD-1 делили на четыре группы: (1) молодые мыши с имитацией повреждения; (2) молодые мыши с ишемическим/реперфузионным (И/Р) повреждением; (3) взрослые мыши с имитацией повреждения; и (4) взрослые мыши с И/Р-повреждением. Еще 27 взрослых мышей рандомизировали в две группы: мыши, получающие соединение Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемую соль, и мыши, получающие носитель в качестве контроля. Измеряли уровень креатинина сыворотки и регистрировали измерения АМК. Затем оценивали ткань почек и повреждение канальцев.
Исследования острого повреждения почек, индуцированного цисплатином
[00298] Мышей C57BL6 лечили соединениями Формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемой солью через желудочный зонд один раз в день. Животным давали восстановиться и умерщвляли через 48, 72 и 96 часов после инъекции цисплатина.
[00299] Измеряли уровень креатинина сыворотки в качестве первичной конечной точки. Повреждение канальцев оценивали по шкале 0-4 на основе процента канальцев с некрозом, дилатацией или набуханием клеток: 0, менее 5%; 1, 5-25%; 2, 25-50%; 3, 50-75%; и 4, более 75%. Все поля зрения под большим увеличением (x 400) в коре и внешнем мозговом слове оценивал патолог слепым методом.
Влияние на острое повреждение почек, индуцированное сепсисом
[00300] Мышей C57BL6 мыши (возраст 12-15 недель) лечили соединениями Формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемой солью путем интраперитонеальной инъекции после сепсиса, индуцированного лигированием и пункцией слепой кишки.
[00301] В момент умерщвления собирали кровь и ткани почек для измерения первичных и вторичных конечных точек. Первичная конечная точка (через 48 часов): креатинин сыворотки. Вторичные конечные точки (через 48 часов) включают: маркер фенотипа макрофагов (IF окрашивание), NGAL плазмы, маркеры воспаления в плазме и почках (IL-6, IL-18, TNF) и маркеры повреждения почек (KIM-1, NGAL, TIMP2 и IGFBP7). Дополнительные конечные точки включают; гибель клеток (IF: аннексин V и йодид пропидия; каспаза 3/7), аутофагию, биогенез (PGC-1, митохондриальная ДНК), OXPHOS (активность комплекса I, III, IV), экспрессия Sirt1 и Sirt3, AMPK (тотальная, P-AMPK, P-ACC и HIF-1.
[00302] Гистологический анализ проводили с помощью окрашивания H&E и PAS с применением стандартных протоколов. Изображения собирали и анализировали с использованием светового микроскопа (IX71, Olympus, Токио, Япония) с аналитическим программным обеспечением DP (DP70-BSW, Токио, Япония). Повреждение канальцев на PAS-окрашенных срезах почек оценивали на основе процента кортикального некроза канальцев: 0=норма, 1=1-10, 2=11-25, 3=26-45, 4=46-75 и 5=76-100%. Оценку повреждения канальцев использовали для оценки защиты от повреждения почек.
Определение влияния на уровни фосфорилирования FoxO1
[00303] Клетки AML-12 обрабатывали различными концентрациями соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли. Затем клетки лизировали и анализировали путем SDS-ПААГ/вестерн-блоттинга. Затем осуществляли блокирование и инкубацию антител, и детектировали каждый присутствующий белок с помощью специфичного антитела.
Ингибирующее действие
[00304] Настоящее изобретение также относится к соединению Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли, определенным в настоящем документе, в способе ингибирования активности ACMSD. Указанный способ включает приведение клетки в контакт с соединением Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой солью. В родственном варианте реализации способ дополнительно предусматривает присутствие соединения в количестве, эффективном для получения концентрации, достаточной для селективного ингибирования ACMSD в клетке.
[00305] Таким образом, предпочтительно в анализе ингибирования ACMSD (т.е. в анализе ACMSD, описанном в настоящем документе, например, в биологическом примере 1, или в анализах ACMSD, известных в литературе), предпочтительные соединения Формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемая соль представляют собой соединения, способные уменьшать или предпочтительно ингибировать ACMSD и повышать уровни НАД+ и/или активировать SIRT и нижестоящие мишени SIRT, такие как PGC-1, FoxO1 и/или SOD. Предпочтительно, указанное ингибирование определяют как IC50 указанного соединения Формулы (I) или (II), или его фармацевтически приемлемой соли в соответствии с указанным анализом ингибирования ACMSD. Предпочтительные соединения формулы (I) или (II), или их фармацевтически приемлемая соль имеют IC50 на уровне или ниже 1 мкМ, более предпочтительно менее 300 нМ, например, менее 100 нМ, например, менее 50 нМ в отношении ингибирования ACMSD.
Иллюстративные варианты реализации
[00306] Некоторые варианты реализации настоящего описания представляют собой следующие варианты реализации I:
[00307] Вариант реализации I-1. Соединение, представленное Формулой (I):
(I)
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер,
где:
X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl;
W представляет собой N или C;
(i) если W представляет собой N, то:
L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
(ii) если W представляет собой C, то:
L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q;
каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен или гетероарилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен или гетероарилен необязательно замещены одним или двумя Re;
R2 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил; или
R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S;
R3 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R4 представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
R7 представляет собой H, A, B или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол, -(CH2)rP(O)(OH)ORx, -(CH2)rS(O)2OH, -(CH2)rC(O)NHCN или -(CH2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом,
B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NRgRg', -(CH2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx,
C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S;
Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx;
Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил;
каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN;
Rf отсутствует, представляет собой H или метил;
Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2;
Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH;
Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила;
Ri представляет собой (i) -(CH2)sOC(O)C1-C6 алкил, причем указанный алкил замещен одним или более NH2; (ii) (CH2CH2O)nCH2CH2OH; или (iii) C1-C6 алкил, замещенный одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из OH и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из O, N или S;
Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN;
каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил;
каждый Ry и Rz независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил;
каждый m, p, q, r и t независимо равен 0, 1 или 2;
n равен 0, 1, 2 или 3;
s равен 1 или 2;
o равен 0, 1, 2, 3 или 4; и
представляет собой простую связь или двойную связь; и
при условии, что
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; то R7 не представляет собой -COOH;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; и R7 представляет собой тетразол; то Rc не представляет собой H;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -S-C(R5)2 или -SCH2CH2-; R1 отсутствует; то R7 не представляет собой COOH или тетразол;
если X представляет собой O, Rf представляет собой H; W представляет собой N; Rj отсутствует; Rd представляет собой метил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил; L представляет собой -SCH2- или -OCH2-; и R1 представляет собой фенилен; то R7 не представляет собой -COOH, -CH2COOH, или ; и
если X представляет собой O, Rf представляет собой H, W представляет собой N, Rj отсутствует, L представляет собой -NHCH2- , -CH2NH- или -NH-C(O)-, и R1 представляет собой фенилен, то Rd не представляет собой фенил.
[00308] Вариант реализации I-2. Соединение по варианту реализации I-1, отличающееся тем, что X представляет собой O, OH, ORh, F, Br или Cl.
[00309] Вариант реализации I-3. Соединение по варианту реализации I-1, отличающееся тем, что X представляет собой H, S, SR2, NR2 или NR2R2'.
[00310] Вариант реализации I-4. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-3, отличающееся тем, что Rf отсутствует.
[00311] Вариант реализации I-5. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-3, отличающееся тем, что Rf представляет собой H или метил.
[00312] Вариант реализации I-6. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-5, отличающееся тем, что W представляет собой N.
[00313] Вариант реализации I-7. Соединение по варианту реализации I-6, отличающееся тем, что Rj отсутствует.
[00314] Вариант реализации I-8. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-5, отличающееся тем, что W представляет собой C.
[00315] Вариант реализации I-9. Соединение по варианту реализации I-8, отличающееся тем, что Rj представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN.
[00316] Вариант реализации I-10. Соединение по варианту реализации I-8 или I-9, отличающееся тем, что Rj представляет собой -CN.
[00317] Вариант реализации I-11. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-10, отличающееся тем, что Rc представляет собой C1-C6 алкил, -CN или галоген.
[00318] Вариант реализации I-12. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-11, отличающееся тем, что Rc представляет собой -CN или галоген.
[00319] Вариант реализации I-13. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-12, отличающееся тем, что Rc представляет собой -CN.
[00320] Вариант реализации I-14. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил.
[00321] Вариант реализации I-15. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5-10-членный арил.
[00322] Вариант реализации I-16. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил.
[00323] Вариант реализации I-17. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил.
[00324] Вариант реализации I-18. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил, циклогексил, пиридинил, тиазолил, фенил или тиенил.
[00325] 19. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил, циклогексил, пиридинил, тиазолил, тиенил или необязательно замещенный фенил.
[00326] Вариант реализации I-20. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил.
[00327] Вариант реализации I-21. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой -CF3.
[00328] Вариант реализации I-22. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой CRfF2.
[00329] Вариант реализации I-23. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)r-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)r-5- или 6-членный циклоалкил.
[00330] Вариант реализации I-24. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-13, отличающееся тем, что Rd представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил.
[00331] Вариант реализации I-25. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-24, отличающееся тем, что L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-.
[00332] Вариант реализации I-26. Соединение по варианту реализации I-25, отличающееся тем, что Y1 представляет собой S.
[00333] Вариант реализации I-27. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-24, отличающееся тем, что L представляет собой -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-.
[00334] Вариант реализации I-28. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-27, отличающееся тем, что R1 представляет собой C6-C10 арилен.
[00335] Вариант реализации I-29. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-27, отличающееся тем, что R1 представляет собой гетероарилен.
[00336] Вариант реализации I-30. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-27, отличающееся тем, что R1 отсутствует.
[00337] Вариант реализации I-31. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-30, отличающееся тем, что R7 представляет собой A.
[00338] Вариант реализации I-32. Соединение по варианту реализации I-31, отличающееся тем, что A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом.
[00339] Вариант реализации I-33. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-30, отличающееся тем, что R7 представляет собой B.
[00340] Вариант реализации I-34. Соединение по варианту реализации I-31, отличающееся тем, что B представляет собой -(CH2)rC(O)NRgRg' или -(CH2)rS(O)2NRgRg'.
[00341] Вариант реализации I-35. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-30, отличающееся тем, что R7 представляет собой C.
[00342] Вариант реализации I-36. Соединение по варианту реализации I-31, отличающееся тем, что C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH или -(C(R6)2)rC6-C10 арил, причем указанный арил замещен одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH.
[00343] Вариант реализации I-37. Соединение, его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранный из группы, состоящей из:
[00344] Вариант реализации I-38. Соединение, его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранный из группы, состоящей из:
[00345] Вариант реализации I-39. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00346] Вариант реализации I-40. Фармацевтическая композиция по варианту реализации I-39, содержащая один или более дополнительных терапевтических агентов.
[00347] Вариант реализации I-41. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли.
[00348] Вариант реализации I-42. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли.
[00349] Вариант реализации I-43. Способ по любому из вариантов реализации I-41 - I-42, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
[00350] Вариант реализации I-44. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00351] Вариант реализации I-45. Способ по варианту реализации I-44, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
[00352] Вариант реализации I-46. Способ по варианту реализации I-45, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
[00353] Вариант реализации I-47. Способ ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00354] Вариант реализации I-48. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства.
[00355] Вариант реализации I-49. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00356] Вариант реализации I-50. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00357] Вариант реализации I-51. Соединение по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00358] Вариант реализации I-52. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00359] Вариант реализации I-53. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00360] Вариант реализации I-54. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00361] Вариант реализации I-55. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для ускорения окислительного метаболизма.
[00362] Вариант реализации I-56. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00363] Вариант реализации I-57. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00364] Вариант реализации I-58. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00365] Вариант реализации I-59. Применение соединения по любому из вариантов реализации I-1 - I-38 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00366] Вариант реализации I-60. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации I-39.
[00367] Вариант реализации I-61. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации I-39.
[00368] Вариант реализации I-62. Способ по любому из вариантов реализации I-60 - I-61, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
[00369] Вариант реализации I-63. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации I-39.
[00370] Вариант реализации I-64. Способ по варианту реализации I-63, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
[00371] Вариант реализации I-65. Способ по п. 64, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
[00372] Вариант реализации I-66. Способ лечения ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации I-39.
[00373] Вариант реализации I-67. Фармацевтическая композиция по варианту реализации I-39 для применения в качестве лекарственного средства.
[00374] Вариант реализации I-68. Фармацевтическая композиция по варианту реализации I-39 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00375] Вариант реализации I-69. Фармацевтическая композиция по варианту реализации I-39 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00376] Вариант реализации I-70. Фармацевтическая композиция по варианту реализации I-39 для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00377] Вариант реализации I-71. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00378] Вариант реализации I-72. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00379] Вариант реализации I-73. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00380] Вариант реализации I-74. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 для ускорения окислительного метаболизма.
[00381] Вариант реализации I-75. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 для в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00382] Вариант реализации I-76. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00383] Вариант реализации I-77. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00384] Вариант реализации I-78. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации I-39 в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00385] Вариант реализации II-1. Соединение, представленное формулой (II):
(II)
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, где:
X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl;
W представляет собой N или C;
(i) если W представляет собой N, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
(ii) если W представляет собой C, то: L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q;
каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен, гетероарилен или C3-C8циклоалкилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен, гетероарилен и C3-C8циклоалкилен необязательно замещены одним или двумя Re;
R2 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил; или
R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S;
R3 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R4 представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
R7 представляет собой H, A, B или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол, -(C(R6)2)rP(O)(OH)ORx, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rC(O)NHCN или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем -(C(R6)2)rтетразол, -(C(R6)2)rоксадиазолон, -(C(R6)2)rтетразолон, -(C(R6)2)rтиадиазолол, -(C(R6)2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом,
B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx,
C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S;
Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx;
Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил;
каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN;
Rf отсутствует, представляет собой H или метил;
Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2;
Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH;
Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила;
Ri представляет собой (i) -(CH2)sOC(O)C1-C6 алкил, причем указанный алкил замещен одним или более NH2; (ii) (CH2CH2O)nCH2CH2OH; или (iii) C1-C6 алкил, замещенный одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из OH и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из O, N или S;
Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN;
каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил;
каждый Ry и Rz независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил;
каждый m, p, q, r и t независимо равен 0, 1 или 2;
n равен 0, 1, 2 или 3;
s равен 1 или 2;
o равен 0, 1, 2, 3 или 4; и
представляет собой простую связь или двойную связь; и
при условии, что
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; то R7 не представляет собой -COOH;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; и R7 представляет собой тетразол; то Rc не представляет собой H;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -S-C(R5)2 или -SCH2CH2-; R1 отсутствует; то R7 не представляет собой COOH или тетразол;
если X представляет собой O, Rf представляет собой H; W представляет собой N; Rj отсутствует; Rd представляет собой метил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил; L представляет собой -SCH2- или -OCH2-; и R1 представляет собой фенилен; то R7 не представляет собой -COOH, -CH2COOH, или ; и
если X представляет собой O, Rf представляет собой H, W представляет собой N, Rj отсутствует, L представляет собой -NHCH2- , -CH2NH- или -NH-C(O)-, и R1 представляет собой фенилен, то Rd не представляет собой фенил.
[00386] Вариант реализации II-2. Соединение, представленное Формулой (I):
(I)
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер,
где:
X представляет собой H, S, SR2, NR2, NR2R2', O, OH, ORh, F, Br или Cl;
W представляет собой N или C;
(i) если W представляет собой N, то:
L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-, -(C(R5)2)mY1CH=CH-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
(ii) если W представляет собой C, то:
L представляет собой -(C(R5)2)mCH=CH(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)o-, -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-, , -(C(R5)2)m Y1CH=CH-, -(C(R5)2)mC=(O)(CH2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)O(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mC=(O)NR3(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mфенил(C(R5)2)p-, -(C(R5)2)mпиридинил(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mтиофенил(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой O, NR4 или S(O)q;
каждый Y2 независимо представляет собой O, NH или S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен или гетероарилен, причем указанный гетероарилен содержит одно или два 5-7-членных кольца и 1-4 гетероатома, выбранных из N, O и S, и при этом указанный C6-C10 арилен или гетероарилен необязательно замещены одним или двумя Re;
R2 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R2' представляет собой H, C1-C4 алкил или C3-C7 циклоалкил; или
R2 и R2' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 дополнительных гетероатома, выбранных из N, O и S;
R3 представляет собой H или C1-C4 алкил;
R4 представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H или C1-C4 алкил;
R7 представляет собой H, A, B или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx, -Y2(C(R6)2)rCO2Rx, -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол, -(CH2)rP(O)(OH)ORx, -(CH2)rS(O)2OH, -(CH2)rC(O)NHCN или -(CH2)rC(O)NHS(O)2алкил, причем -(CH2)rтетразол, -(CH2)rоксадиазолон, -(CH2)rтетразолон, -(CH2)rтиадиазолол, -(CH2)rизоксазол-3-ол необязательно замещены C1-C6 алкилом,
B представляет собой -(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -O(C(R6)2)rS(O)2OC1-C4 алкил, -Y2(C(R6)2)rC(O)NRgRg', -Y2(C(R6)2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NRgRg', -(CH2)rS(O)2NRgRg', -(CH2)rC(O)NHS(O)2NRgRg’, -(C(R6)2)rCO2Ri, -(C(R6)2)rNH2CO2Rx, -(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -O(C(R6)2)rP(O)(ORx)2, -(C(R6)2)rS(O)2OH, -O(C(R6)2)rS(O)2OH, -(C(R6)2)rP(O)2ORx или -O(C(R6)2)rP(O)2ORx,
C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH, галоген, -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)rS-C6-C10 арил, -(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероарил, -O(C(R6)2)rгетероциклоалкил, -O(C(R6)2)rOH, -ORy, -(C(R6)2)rC(O)NHCN, -CH=CHCO2Rx или -(C(R6)2)rC(O)NHS(O)2C1-C4 алкил, причем указанный арил и гетероарил замещены одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH, и при этом указанный гетероциклоалкил замещен одной-двумя группами =O или =S;
Rc представляет собой H, C1-C6 алкил, C1-C6 галогеналкил, галоген, -CN, -ORx или -CO2Rx;
Rd представляет собой метил, CF3, CRfF2, -(C(R6)2)tC6-C10 арил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)t-5- или 6-членный циклоалкил, необязательно замещенный C6-C10 арил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил;
каждый Re в каждом случае независимо представляет собой C1-C6 алкил, C2-C6 алкенил, C2-C6 алкинил, галоген, C1-C6 галогеналкил, -NHRz, -OH или -CN;
Rf отсутствует, представляет собой H или метил;
Rg представляет собой H, C1-C6 алкил, OH, -S(O)2(C1-C6 алкил) или S(O)2N(C1-C6 алкил)2;
Rg' представляет собой H, C1-C6 алкил, C3-C7 циклоалкил, 4-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, C6-C10 арил или 5-7-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из галогена и -OH, и при этом указанный циклоалкил, гетероциклоалкил, арил и гетероарил необязательно замещены одним или более заместителями, независимо выбранными из C1-C6 алкила, галогена и -OH;
Rh представляет собой H, C1-C4 алкил или 3-7-членное гетероциклоалкильное кольцо, содержащее 1-3 гетероатома, выбранных из N, O и S, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из NH2, C1-C4 алкиламино, C1-C4 диалкиламино и C(O)NH2; и при этом указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила и C1-C6 галогеналкила;
Ri представляет собой (i) -(CH2)sOC(O)C1-C6 алкил, причем указанный алкил замещен одним или более NH2; (ii) (CH2CH2O)nCH2CH2OH; или (iii) C1-C6 алкил, замещенный одним или более заместителями, каждый из которых независимо выбран из OH и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из O, N или S;
Rj отсутствует, представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN;
каждый Rx в каждом случае независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C6-C10 арил;
каждый Ry и Rz независимо представляет собой H, C1-C6 алкил или C1-C6 галогеналкил;
каждый m, p, q, r и t независимо равен 0, 1 или 2;
n равен 0, 1, 2 или 3;
s равен 1 или 2;
o равен 0, 1, 2, 3 или 4; и
представляет собой простую связь или двойную связь; и
при условии, что
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; то R7 не представляет собой -COOH;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -SCH2-; R1 представляет собой фенилен или пиридин; и R7 представляет собой тетразол; то Rc не представляет собой H;
если X представляет собой O; Rf представляет собой H; W представляет собой C; Rj представляет собой -CN; L представляет собой -S-C(R5)2 или -SCH2CH2-; R1 отсутствует; то R7 не представляет собой COOH или тетразол;
если X представляет собой O, Rf представляет собой H; W представляет собой N; Rj отсутствует; Rd представляет собой метил, необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил, или необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил; L представляет собой -SCH2- или -OCH2-; и R1 представляет собой фенилен; то R7 не представляет собой -COOH, -CH2COOH, или 
; и
если X представляет собой O, Rf представляет собой H, W представляет собой N, Rj отсутствует, L представляет собой -NHCH2- , -CH2NH- или -NH-C(O)-, и R1 представляет собой фенилен, то Rd не представляет собой фенил.
[00387] Вариант реализации II-3. Соединение по варианту реализации II-1 или II-2, отличающееся тем, что X представляет собой O, OH, ORh, F, Br или Cl.
[00388] Вариант реализации II-4. Соединение по варианту реализации II-1 или II-2, отличающееся тем, что X представляет собой H, S, SR2, NR2 или NR2R2'.
[00389] Вариант реализации II-5. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-4, отличающееся тем, что Rf отсутствует.
[00390] Вариант реализации II-6. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-4, отличающееся тем, что Rf представляет собой H или метил.
[00391] Вариант реализации II-7. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-6, отличающееся тем, что W представляет собой N.
[00392] Вариант реализации II-8. Соединение по варианту реализации II-7, отличающееся тем, что Rj отсутствует.
[00393] Вариант реализации II-9. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-6, отличающееся тем, что W представляет собой C.
[00394] Вариант реализации II-10. Соединение по варианту реализации II-9, отличающееся тем, что Rj представляет собой H, C1-C6 алкил или -CN.
[00395] Вариант реализации II-11. Соединение по вариантам реализации II-9 или II-10, отличающееся тем, что Rj представляет собой -CN.
[00396] Вариант реализации II-12. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-11, отличающееся тем, что Rc представляет собой C1-C6 алкил, -CN или галоген.
[00397] Вариант реализации II-13. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-12, отличающееся тем, что Rc представляет собой -CN или галоген.
[00398] Вариант реализации II-14. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-12, отличающееся тем, что Rc представляет собой -CN.
[00399] Вариант реализации II-15. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил.
[00400] Вариант реализации II-16. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5-10-членный арил.
[00401] Вариант реализации II-17. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный гетероарил.
[00402] Вариант реализации II-18. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой необязательно замещенный 5- или 6-членный циклоалкил.
[00403] Вариант реализации II-19. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил, циклогексил, пиридинил, тиазолил, фенил или тиенил.
[00404] Вариант реализации II-20. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил, циклогексил, пиридинил, тиазолил, тиенил или необязательно замещенный фенил.
[00405] Вариант реализации II-21. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой метил.
[00406] Вариант реализации II-22. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой -CF3.
[00407] Вариант реализации II-23. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой CRfF2.
[00408] Вариант реализации II-24. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил, -(C(R6)2)r-5- или 6-членный гетероарил, -(C(R6)2)r-5- или 6-членный циклоалкил.
[00409] Вариант реализации II-25. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-14, отличающееся тем, что Rd представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил.
[00410] Вариант реализации II-26. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-25, отличающееся тем, что L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-.
[00411] Вариант реализации II-27. Соединение по варианту реализации II-26, отличающееся тем, что Y1 представляет собой S.
[00412] Вариант реализации II-28. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-25, отличающееся тем, что L представляет собой -(C(R5)2)mNR3C=(O)(C(R5)2)p- или -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-циклопропил-.
[00413] Вариант реализации II-29. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-28, отличающееся тем, что R1 представляет собой C6-C10 арилен.
[00414] Вариант реализации II-30. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-28, отличающееся тем, что R1 представляет собой гетероарилен.
[00415] Вариант реализации II-31. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-28, отличающееся тем, что R1 отсутствует.
[00416] Вариант реализации II-32. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-31, отличающееся тем, что R7 представляет собой A.
[00417] Вариант реализации II-33. Соединение по варианту реализации II-32, отличающееся тем, что A представляет собой -(C(R6)2)rCO2Rx или -(CH2)rтетразол, причем указанный -(CH2)rтетразол необязательно замещен C1-C6 алкилом.
[00418] Вариант реализации II-34. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-31, отличающееся тем, что R7 представляет собой B.
[00419] Вариант реализации II-35. Соединение по варианту реализации II-32, отличающееся тем, что B представляет собой -(CH2)rC(O)NRgRg' или -(CH2)rS(O)2NRgRg'.
[00420] Вариант реализации II-36. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-31, отличающееся тем, что R7 представляет собой C.
[00421] Вариант реализации II-37. Соединение по варианту реализации II-32, отличающееся тем, что C представляет собой -(CH2)rCN, -(CH2)sOH или -(C(R6)2)rC6-C10 арил, причем указанный арил замещен одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из C1-C6 алкила, C1-C6 галогеналкила, галогена и OH.
[00422] Вариант реализации II-38. Соединение, его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранный из группы, состоящей из:
[00423] Вариант реализации II-39. Соединение, его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранный из группы, состоящей из:
[00424] Вариант реализации II-40. Соединение, его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранный из группы, состоящей из:
[00425] Вариант реализации II-41. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
[00426] Вариант реализации II-42. Фармацевтическая композиция по варианту реализации II-41, содержащая один или более дополнительных терапевтических агентов.
[00427] Вариант реализации II-43. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли.
[00428] Вариант реализации II-44. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли.
[00429] Вариант реализации II-45. Способ по любому из вариантов реализации II-43 - II-44, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
[00430] Вариант реализации II-46. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00431] Вариант реализации II-47. Способ по варианту реализации II-46, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
[00432] Вариант реализации II-48. Способ по варианту реализации II-47, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
[00433] Вариант реализации II-49. Способ ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00434] Вариант реализации II-50. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства.
[00435] Вариант реализации II-51. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00436] Вариант реализации II-52. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00437] Вариант реализации II-53. Соединение по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00438] Вариант реализации II-54. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00439] Вариант реализации II-55. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00440] Вариант реализации II-56. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00441] Вариант реализации II-57. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для ускорения окислительного метаболизма.
[00442] Вариант реализации II-58. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00443] Вариант реализации II-59. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00444] Вариант реализации II-60. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00445] Вариант реализации II-61. Применение соединения по любому из вариантов реализации II-1 - II-40 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
[00446] Вариант реализации II-62. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации II-41.
[00447] Вариант реализации II-63. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации II-41.
[00448] Вариант реализации II-64. Способ по любому из вариантов реализации II-62 - II-63, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
[00449] Вариант реализации II-65. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации II-41.
[00450] Вариант реализации II-66. Способ по варианту реализации II-65, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
[00451] Вариант реализации II-67. Способ по варианту реализации II-66, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
[00452] Вариант реализации II-68. Способ лечения ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по варианту реализации II-41.
[00453] Вариант реализации II-69. Фармацевтическая композиция по варианту реализации II-41 для применения в качестве лекарственного средства.
[00454] Вариант реализации II-70. Фармацевтическая композиция по варианту реализации II-41 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00455] Вариант реализации II-71. Фармацевтическая композиция по варианту реализации II-41 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00456] Вариант реализации II-72. Фармацевтическая композиция по варианту реализации II-41 для применения для ускорения окислительного метаболизма.
[00457] Вариант реализации II-73. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00458] Вариант реализации II-74. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00459] Вариант реализации II-75. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00460] Вариант реализации II-76. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 для ускорения окислительного метаболизма.
[00461] Вариант реализации II-77. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 для в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы -амино--карбоксимуконат--полуальдегида (ACMSD).
[00462] Вариант реализации II-78. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
[00463] Вариант реализации II-79. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
[00464] Вариант реализации II-80. Применение фармацевтической композиции по варианту реализации II-41 в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
Примеры
[00465] Все проценты и соотношения, используемые в настоящем документе, если не указано иное, выражены по массе. Другие признаки и преимущества настоящего описания станут понятны из следующего различных примеров. Представленные примеры иллюстрируют различные компоненты и способы, подходящие для практического осуществления настоящего описания. В общем случае, настоящее описание распространяется на любую новую одну или любую новую комбинацию особенностей, раскрытых в настоящем описании (включая прилагаемую формулу изобретения и графические материалы). Приведенные примеры не ограничивают заявленное описание. Таким образом, признаки, целые числа, характеристики, соединения или химические фрагменты, описанные в связи с конкретным аспектом, вариантом реализации или примером настоящего описания, следует понимать как применимые к любому другому аспекту, варианту реализации или примеру, описанному в настоящем документе, если это не является не совместимым с ним. На основании предложенного описания специалисты в данной области техники могут определить и использовать другие компоненты и способы, подходящие для практического осуществления настоящего описания. Кроме того, если не указано иное, то любой признак, описанный в настоящем документе, может быть заменен альтернативным признаком, служащим для такой же или аналогичной цели.
[00466] Далее данное изобретение описано лишь в качестве примера и со ссылкой на представленные ниже примеры:
ПРИМЕРЫ
ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ
Общие способы и материалы
[00467] Все химические реактивы приобретали у компаний Sigma-Aldrich, Alfa Aesar. Спектры 1H ЯМР записывали при 200 и 400 МГц, а спектры 13C ЯМР записывали при 100,6 и 50,3 МГц, используя дейтерированные растворители, указанные ниже. ТСХ проводили на пластинах из диоксида кремния с алюминиевой подложкой (силикагель 60 F254). Все реакции проводили в атмосфере азота, используя дистиллированные растворители. Чистота всех испытанных соединений, по данным анализа ВЭЖХ, составляла >95%. Воду марки «для ВЭЖХ» получали на тандемной установке Milli-Ro/Milli-Q. Аналитические измерения ВЭЖХ проводили на приборе Shimadzu LC-20AProminence, оснащенном модулем коммуникационной шины CBM-20A, двумя двухпоршневыми насосами LC-20AD, фотодиодным матричным детектором SPD-M20A и инжектором Rheodyne 7725i с петлей из нержавеющей стали объемом 20 мкл.
[00468] Сокращения, использованные в следующих примерах и иных местах настоящего описания:
Ac2O уксусный ангидрид
AcOH уксусная кислота
AIBN азобисизобутиронитрил
атм. атмосфера
ш широкий
DIPEA N, N-диизопропилэтиламин
ДХМ дихлорметан
ДМЭ диметоксиэтан
ДМФА N, N-диметилформамид
ДМСО диметилсульфоксид
BPO дибензоилпероксид
EDC N-(3-Диметиламинопропил)-N’-этилкарбодиимида гидрохлорид
ИЭР электрораспылительная ионизация
EtOAc этилацетат
EtO2 диэтиловый эфир
EtOH этанол
EtO- Na+ этоксид натрия
Et3NH+Cl- гидрохлорид триэтиламина
ч. час(ы)
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ЖХМС жидкостная хроматомасс-спектрометрия
м мультиплет
MeI метилиодид
MeOH метанол
МГц мегагерц
мин. минуты
MS молекулярные сита
МТБЭ 2-метокси-2-метилпропан
Микроволн. микроволновый
NBS N-бромсукцинамид
ЯМР ядерный магнитный резонанс
PET петролейный эфир
м.д. миллионные доли
p-TSA пара-толуолсульфоновая кислота
комн. т-ра комнатная температура
ТСХ тонкослойная хроматография.
Пример 1: Промежуточное соединение 1.4. 4-оксо-6-тиофен-2-ил-2-тиоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-карбонитрил
[00469] К перемешанному раствору соединения 1.1 (0,96 г, 8,8 ммоль), 1.2 (672 мг, 8,8 ммоль) и 1.3 (1 г, 0,83 мл) в этаноле (55 мл) добавляли K2CO3 (1,57 г, 11,44 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Образовавшееся желтоватое твердое вещество собирали после охлаждения, растворяли в горячей воде и снова фильтровали. Водную фазу подкисляли до pH 1, осадок отфильтровывали и сушили при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение 1.4 получали в виде желтоватого твердого вещества (1 г, 4,25 ммоль). Выход 49%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 7,22 (м, 1H), 7,68 (м, 1H), 7,85 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,05 (с, 1H).
Пример 2: Промежуточное соединение 2.2. 6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-тиолат натрия
[00470] Натрий (0,35 г, 16,29 ммоль) растворяли в абсолютном EtOH (25 мл) в атмосфере N2. К полученному раствору добавляли этилтрифторацетоацетат 2.1 (1,59 мл, 10,86 ммоль) и тиомочевину 1.2 (0,91 г, 11,94 г). Смесь перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры полученный осадок собирали фильтрованием под вакуумом и промывали холодным EtOH (2×5 мл) с получением (1,34 г, 6,14 ммоль) промежуточного соединения 2.2. Выход 38%. МС-ИЭР (-) m/z: 194,8 [M-H].
Пример 3: Промежуточное соединение 3.3. 2-Меркапто-6-оксо-4-фенил-1,6-дигидропиридин-3-карбонитрил
[00471] К перемешанному раствору KOH (0,58 г, 10,41 ммоль) в абсолютном EtOH (20 мл) добавляли этил-3-оксо-3-фенилпропионат 3.1 (1,80 мл, 10,41 ммоль) и 2-цианотиоацетамид 3.2 (1,04 г, 10,41 ммоль) и перемешивали полученную смесь, и кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем смесь охлаждали при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенную смесь выливали в H2O (20 мл) и промывали AcOEt (2×15 мл). Органическую фазу подкисляли до pH=2, добавляя 37% водный раствор HCl, и собирали полученный осадок фильтрованием под вакуумом, и промывали H2O (2×5 мл). Затем твердое вещество растирали с AcMe с получением промежуточного соединения 3.3 (0,49 г, 2,14 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 21%. МС-ИЭР (-) m/z: 227,3 [M-H]-
Пример 4: Промежуточное соединение 4.2. 4-Бензил-2-меркапто-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил
[00472] К раствору фенилацетальдегида 4.1 (1,5 г, 16,65 ммоль), этилцианоацетата 1.1 (1,41 г, 16,65 ммоль) и тиомочевины 1.2 (950 мг, 16,65 ммоль) в EtOH (35 мл) добавляли K2CO3 (2,2 г, 21,6 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Белое твердое вещество собирали, растворяли в воде. рН доводили до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным Na2SO4. Указанное в заголовке промежуточное соединение 4.2 (800 мг, 3,28 ммоль) Получали в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 20%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 3,93 (с, 2H), 7,26-7,41 (м, 5H), 13,15 (шс, 1H).
Пример 5: Промежуточное соединение 5.2. 2-Меркапто-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиридин-3-карбонитрил
[00473] К перемешанному раствору KOH (0,28 г, 5,04 ммоль) в абсолютном EtOH (10 мл) добавляли этил-3-оксо-3-тиофен-2-илпропионат 5.1 (0,77 мл, 5,04 ммоль) и 2-цианотиоацетамид 3.2 (0,50 г, 5,04 ммоль) и перемешивали полученную смесь при кипении с обратным холодильником в течение 8 часов. Затем смесь охлаждали при комнатной температуре и собирали образовавшийся осадок фильтрованием под вакуумом, и промывали EtOH (2×5 мл) с получением промежуточного соединения 5.2 (0,17 г, 0,72) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 12%. МС-ИЭР (-) m/z: 233,3 [M-H]-.
Пример 6: Промежуточное соединение 6.4. 6-Меркапто-2-оксо-4-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиридин-3,5-дикарбонитрил
Стадия 1: Этиловый эфир 2-циано-3-тиофен-2-илакриловой кислоты (6.1)
[00474] К раствору тиофен-2-карбоксальдегида 1.3 (1 г, 8,9 ммоль), этилцианоацетата 1.1 (0,94 мл, 8,9 ммоль) в EtOH (20 мл) добавляли пиперидин (3 капли). Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 16 часов. Растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенный продукт растворяли в воде, экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Органическую фазу собирали, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным Na2SO4. Указанное в заголовке промежуточное соединение 6.1 (1,3 г, 6,27 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 70%.
Стадия 2: 6-Меркапто-2-оксо-4-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиридин-3,5-дикарбонитрил (6.2)
[00475] К раствору промежуточного соединения 6.1 (1,2 г, 5,79 ммоль) в EtOH (15 мл) добавляли пиперидин (4 капли). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. После охлаждения образовался красный осадок. Осадок собирали, промывали холодным EtOH и сушили под вакуумом. Указанное в заголовке промежуточное соединение 6.2 (640 мг, 2,46 ммоль) получали в виде красного порошка. Выход 42%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 7,24-7,27 (м, 1H), 7,53-7,55 (м, 1H), 7,94-7,95 (м, 1H), 13,0 (шс, 1H).
Пример 7: Промежуточное соединение 7.1. 3-Циано-6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиридин-2-тиолат калия
[00476] К перемешанному раствору KOH (0,91 г, 16,29 ммоль) в абсолютном EtOH (32 мл) добавляли этилтрифторацетоацетат 2.1 (2,38 мл, 16,29 ммоль) и 2-цианотиоацетамид 3.2 (1,63 г, 16,29 ммоль) и перемешивали полученную смесь, и кипятили с обратным холодильником в течение 7 часов. Затем смесь охлаждали при комнатной температуре и оставляли стоять в течение ночи. Полученный в результате обильный осадок собирали фильтрованием под вакуумом и промывали EtOH (2×5 мл) с получением промежуточного соединения 7.1 (2,01 г, 7,78 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 48%. МС-ИЭР (-) m/z: 218,9 [M-H]-
Пример 8: Промежуточное соединение 8.3. Этиловый эфир (3-бромметилфенил)уксусной кислоты
Стадия 1: Этиловый эфир м-толилуксусной кислоты (8.2)
[00477] К раствору 8.1 (15 г, 99,88 ммоль) в EtOH (абсолютный) (400 мл) добавляли HCl (конц.) (0,3 мл, 9,9 ммоль) и продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в ДХМ (200 мл) и сушили над Na2SO4, и выпаривали при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение 8.2 получали в виде бесцветного маслянистого вещества (17 г, 95,39 ммоль). Выход 96%. 1H ЯМР (200 МГц, CDCl3) δ 1,28 (т, J=7,1 Гц, 3H), 2,37 (с, 2H), 3,6 (с, 2H), 4,18 (к, J=7,11 Гц, 2H), 7,20-7,35 (м, 4H). ГХ/МС m/z 178,1 (M+).
Стадия 2: Этиловый эфир (3-бромметилфенил)уксусной кислоты (8.3)
[00478] NBS (10,1 г, 58,9 ммоль) и BPO (70%) (68 мг, 0,28 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 8.2 (10 г, 56,11 ммоль) в CH3CN (300 мл). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный остаток разделяли между EtOAc (300 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (300 мл). Органическую фазу собирали и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (сухая загрузка), элюируя смесью PET/Et2O от 2% до 4%, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение 8.3 (10 г, 38,89 ммоль) получали в виде желтоватого маслянистого вещества. Выход 66%. 1H ЯМР (200 МГц, CDCl3) δ 1,27 (т, J=7,1 Гц, 3H), 3,62 (с, 2H), 4,17 (к, J=7,13 Гц, 2H), 4,50 (с, 2H), 7,09-7,13 (м, 3H), 7,21-7,28 (м, 1H).
Пример 9: Промежуточное соединение 9.3. 3-Бромметилбензамид
Стадия 1: 3-Метилбензамид (9.2)
[00479] Раствор соединения 9.1 (1,54 мл, 12,8 ммоль) и K2CO3 (707 мг, 5,12 ммоль) в H2O (5 мл) нагревали под микроволновым излучением при 130 C, 200 фунт/кв.дюйм, 200 Вт в течение 20 минут. После охлаждения полученный белый осадок собирали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения 9.2 в виде белых кристаллов (870 мг, 6,4 ммоль). Выход 50%. ГХ-МС (m/z) 135,1 (M+).
Стадия 2: 3-Бромметилбензамид (9.3)
[00480] NBS (434,6 мг, 2,4 ммоль) и BPO (70%) (8 мг, 0,022 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 9.2 (300 мг, 2,22 ммоль) в CH3CN (20 мл). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный продукт разделяли между EtOAc (300 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (300 мл). Органическую фазу собирали и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение 9.3 (250 мг, 1,16 ммоль) получали в виде желтоватого твердого вещества. Выход 53%.
Пример 10: Промежуточное соединение 10.4. 3'-Бромметил-3,5-дифтор-4-метоксибифенил
Стадия 1: 3,5-Дифтор-4-метокси-3'-метилбифенил (10.3)
[00481] К раствору соединения 10.1 (0,18 мл, 1,33 ммоль) в ДМЭ (15 мл) добавляли тетракис-палладий (50 мг, 0,039 ммоль). Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 5 минут. Последовательно добавляли м-толилбороновую кислоту 10.2 (202 мг, 1,35 ммоль) и K2CO3 (745 мг, 3,56 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяли в воде и экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Чистое указанное в заголовке соединение 10.3 (282 мг, 1,22 ммоль) получали в виде бесцветного маслянистого вещества и использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход 91%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 2,43 (с, 3H), 4,04 (с, 3H), 7,14 (д, J=9,3, 2H), 7,32-7,33 (м, 4H).
Стадия 2: 3'-Бромметил-3,5-дифтор-4-метоксибифенил (10.4)
[00482] К раствору промежуточного соединения 10.3 (260 мг, 1,1 ммоль) в CH3CN (15 мл) добавляли BPO (4 мг, 0,0055 ммоль) и NBS (210 мг, 1,22 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Удаляли растворитель при пониженном давлении. Реакционную смесь разделяли между NaHCO3(насыщ.р-р) и ДХМ. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя PET/Et2O, с получением указанного в заголовке соединения 10.4 (250 мг, 0,77 ммоль) в виде желтого маслянистого вещества. Выход 72%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4,06 (д, J=3,7 Гц, 3H), 4,55 (с, 2H), 7,14 (д, J=6,2 Гц, 1H), 7,16 (д, J=6,1 Гц, 1H), 7,41-7,47 (м, 3H), 7,54 (с, 1H).
Пример 11: Промежуточное соединение 11.2. (3-Бромметилфенил)уксусная кислота
[00483] К суспензии соединения 11.1 (750 мг, 5 ммоль) в CCl4 (15 мл) добавляли AIBN (41 мг, 0,25 ммоль) и NBS (933,7 мг, 5,24 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Удаляли растворитель при пониженном давлении. Реакционную смесь растворяли в воде, экстрагировали EtOAc (3×20 мл), промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя CH2Cl2/MeOH (3% для продукта), с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 11.2 (800 мг, 3,49 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 70%. ГХ/МС (m/z) 227,9 (M+).
Пример 12: Промежуточное соединение 12.2. [3-(4-Хлор-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота
Стадия 1: [3-(5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (12.1)
[00484] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 1.4 (500 мг, 2,12 ммоль) и DIPEA (0,4 мл, 2,12 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (487 мг, 2,12 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Неочищенную реакционную смесь выливали в воду и промывали полученную водную смесь EtOAc, подкисляли до pH 3 и экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Указанное в заголовке промежуточное соединение 12.1 получали (200 мг, 0,52 ммоль) в виде чистого желтоватого твердого вещества после очистки с помощью флэш-хроматографии, элюируя CH2Cl2/MeOH (10% для продукта), и измельчения со смесью EtO2/ацетона. Выход 25%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,49 (с, 2H), 4,53 (с, 2H), 7,16 (д, J=6,8 Гц, 1H), 7,26 (т, J=7,2 Гц, 1H), 7,36 (м, 3H), 8,05 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,27 (с, 1H), 12,13 (с, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,3, 40,9, 88,5, 116,8, 127,6, 128,9, 129,1, 129,8, 130,4, 131,9, 135,2, 135,8, 137,0, 139,9, 159,1, 161,6, 165,7, 172,9. ВЭЖХ 95,8%.
Стадия 2: [3-(4-Хлор-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (12.2)
[00485] Смесь промежуточного соединения 12.1 (300 мг, 0,78 ммоль) и POCl3 (6 мл) нагревали при 80°C в течение 4 часов. Затем неочищенную реакционную смесь выливали в лед. Полученный желтый осадок собирали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 12.2 (250 мг, 0,62 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 79%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,53 (с, 2H), 4,50 (с, 2H), 7,16 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,27 (т, J=7,4 Гц, 1H), 7,36-7,39 (м, 3H), 8,13 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,3 (д, J=3,9 Гц, 1H), 12,25 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 35,1, 40,9, 97,7, 115,5, 127,6, 128,8, 129, 130,2, 130,4, 133,3, 135,7, 136, 137, 138,6, 160,3, 163,2, 172,9, 174.
Пример 13: Промежуточное соединение 13.3. [3-(4-Хлор-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота
Стадия 1: 3-(5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (13.2)
[00486] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 1.4 (250 мг, 1,06 ммоль) и K2CO3 (440 мг, 3,18 ммоль) в CH3CN (15 мл) добавляли 3-(хлорметил)бензойную кислоту 13.1 (180 мг, 1,06 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Затем удаляли летучие вещества при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в воде, промывали EtOAc, подкисляли до pH 1 и экстрагировали EtOAc (350 мл). После измельчения с горячим ацетоном получали указанное в заголовке промежуточное соединение 13.2 (45 мг, 0,12 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 12%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,62 (с, 2H), 7,33 (т, J=4,3 Гц, 1H), 7,44 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,82 (д, J=7,5 Гц, 1H), 8,05 (м, 2H), 8,26 (д, J=3,8 Гц, 1H), 12,99 (с, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО) δ 33,9, 88,7, 116,5, 128,8, 129,3, 129,9, 130,2, 131,5, 132,1, 133,7, 135,4, 137,9, 139,7, 159,0, 161,2, 165,3, 167,4. ВЭЖХ: 97,2%
Стадия 2: 3-(4-Хлор-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (13.3)
[00487] Смесь промежуточного соединения 13.2 (300 мг, 0,81 ммоль) и POCl3 (6 мл) нагревали при 80°C в течение 4 часов. Затем реакционную смесь выливали в лед. Полученный желтый осадок собирали и очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH (3% для продукта) с получением промежуточного соединения 13.3 (120 мг, 0,3 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 79%. 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,8, 88,7, 116,5, 128,8, 129,3, 129,9, 130,2, 131,4, 132,1, 133,7, 135,5, 137,9, 139,6, 159, 161,1, 165,2, 167,3.
Пример 14: Промежуточное соединение 14.2. 3-Бромметилбензонитрил
[00488] К раствору соединения 14.1 (2 мл, 17,07 ммоль) в CCl4 добавляли смесь NBS (2,9 г, 17,1 ммоль) и BPO (16 мг, 0,06 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов и затем оставляли реакционную смесь нагреваться до комнатной температуры. Полученное твердое вещество собирали, промывали CCl4 и сушили при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение 14.2 выделяли в виде белого твердого вещества (2,84 г, 14,5 ммоль). Выход 85%. ГХ/МС-) 196,9 (M+).
Пример 15: Промежуточное соединение 15.1. 2-(3-Бромметилфенил)этанол
[00489] К раствору промежуточного соединения 11.2 (500 мг, 2,17 ммоль) в ТГФ (10 мл) при 0°C по каплям добавляли BH3-ТГФ (1 M в ТГФ, 2,8 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа и затем при комнатной температуре в течение 12 часов. Смесь разбавляли ТГФ/H2O (1:1 об.:об., 15 мл) и промывали насыщенным водным раствором K2CO3. Фазы разделяли и экстрагировали водный слой EtOAc (3×20 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. После очистки неочищенного продукта с помощью флэш-хроматографии (элюировали ДХМ/MeOH) получали указанное в заголовке промежуточное соединение 15.1 (400 мг, 1,85 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 85%. ГХ/МС (m/z) 214 (M+).
Пример 16: Промежуточное соединение 16.2. 2 (3-Бромметилфенил)ацетонитрил
[00490] NBS (338 мг, 1,9 ммоль) и BPO (70%) (28,7 мг, 0,11 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 16.1 (0,5 мл, 2,37 ммоль) в CH3CN (15 мл). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Удаляли летучие вещества при пониженном давлении. Неочищенный продукт разделяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (100 мл). Органическую фазу собирали и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение 16.2 (250 мг, 1,18 ммоль) получали в виде желтоватого твердого вещества после очистки с помощью флэш-хроматографии (элюировали PET/EtOAc). Выход 50%.
Пример 17: Промежуточное соединение 17.3. 5-(3-Бромметилфенил)-2-метил-2H-тетразол
Стадия 1: 5-м-толил-2H-тетразол (17.1)
[00491] Смесь соединения 14.1 (1,02 мл, 8,54 ммоль), NaN3 (832 мг, 12,8 ммоль) и Et3N∙HCl (1,76 г, 12,8 ммоль) в толуоле (20 мл) нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 4 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенную смесь выливали в воду и подкисляли полученный водный раствор до pH 1 с помощью 3 н. HCl, и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение 17.1 (1,22 г, 7,6 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 89%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 2,39 (с, 3H), 7,39 (м, 1H), 7,48 (т, J=7,58 Гц, 1H), 7,80 (с, 1H), 7,85 (м, 1H); ГХ/МС (m/z) 160,1 (M+).
Стадия 2: 2-Метил-5-м-толил-2H-тетразол (17.2)
[00492] К раствору промежуточного соединения 17.1 (1 г, 6,2 ммоль) в воде (5 мл) и NaOH (500 мг, 12,5 ммоль) добавляли раствор MeI (0,38 мл, 6,1 ммоль) в ацетоне (10 мл). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 6 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении и растворяли полученный остаток в EtOAc и H2O. Отделяли органический слой, сушили над Na2SO4 и выпаривали досуха в вакууме. После очистки неочищенного продукта получали указанное в заголовке промежуточное соединение 17.2 (500 мг, 2,87 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 46%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4,37 (с, 3H), 7,26-7,39 (м, 1H), 7,35-7,39 (м, 1H), 7,91-7,96 (м, 2H).
Стадия 3: 5-(3-Бромметилфенил)-2-метил-2H-тетразол (17.3)
[00493] К суспензии соединения 17.2 (200 мг, 1,15 ммоль) в CH3CN (15 мл) добавляли BPO (21 мг, 0,057 ммоль) и NBS (163,5 мг, 0,92 ммоль). Продолжали перемешивание при 92C в течение ночи. Удаляли растворитель при пониженном давлении. Реакционную смесь растворяли в воде, экстрагировали EtOAc (320 мл), промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя CH2Cl2/MeOH (7% для продукта) с получением указанного в заголовке соединения 17.3 (261 мг, 1,03 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 90%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4,41 (с, 3H), 4,56 (с, 2H), 7,46-7,52 (м, 1H), 8,07-8,09 (м, 1H), 8,19 (с, 1H).
Пример 18: Промежуточное соединение 18.1. 5-(3-Бромметилфенил)-1H-тетразол
[00494] К суспензии соединения 17.1 (300 мг, 1,87 ммоль) в CH3CN (15 мл) добавляли AIBN (31 мг, 0,18 ммоль) и NBS (333 мг, 1,87 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение ночи. Удаляли растворитель при пониженном давлении. Реакционную смесь растворяли в воде, экстрагировали EtOAc (320 мл), промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя CH2Cl2/MeOH (7% для продукта), с получением указанного в заголовке соединения 18.1 (150 мг, 0,62 ммоль) в виде светло-желтого твердого вещества. Выход 34%.
Пример 19: Промежуточное соединение 19.5. 3-Бромметилбензолсульфонамид
Стадия 1: 3-Хлорсульфонилбензойная кислота (19.2)
[00495] Смесь соединения 19.1 (1 г, 8,13 ммоль) и хлорсульфоновой кислоты (4 мл) перемешивали при 125C в течение 2 часов. Смесь по каплям выливали в ледяную воду. Полученное твердое вещество собирали, солюбилизировали в EtOAc и промывали водой (320 мл). Органический слой сушили над Na2SO4 и выпаривали при пониженном давлении. Указанное в заголовке промежуточное соединение 19.2 (1,19 г, 5,39 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 65%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 7,45 (т, J=7,69 Гц, 1H), 7,65 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,86 (д, J=7,6 Гц, 1H), 8,1 (с, 1H), 13,9 (шс, 1H).
Стадия 2: 3-Сульфамоилбензойная кислота (19.3)
[00496] К холодному раствору 25% NH4OH (10 мл) по частям добавляли промежуточное соединение 19.2 (1,10 г, 5,39 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали полученную смесь. Неочищенный продукт суспендировали в воде (4 мл) и затем к смеси по каплям добавляли 37% раствор HCl. Полученный осадок собирали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 19.3 (943 мг, 4,6 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 87%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 7,50 (шс, 2H), 7,71 (т, J=7,78 Гц, 1H), 8,04 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,13 (д, J=7,7 Гц, 1H), 8,38 (с, 1H), 13,4 (шс, 1H).
Стадия 3: 3-Гидроксиметилбензолсульфонамид (19.4)
[00497] К перемешанному раствору промежуточного соединения 19.3 (940 мг, 4,67 ммоль) по каплям добавляли охлажденный до 0°C комплекс BH3-ТГФ (14 мл, 14,01 ммоль) и продолжали перемешивание в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°C и гасили, по каплям добавляя MeOH. Через 15 минут к смеси добавляли 3 н. раствор HCl (37 мл) и удаляли летучие вещества при пониженном давлении. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 19.4 (785 мг, 4,2 ммоль) в виде бесцветного маслянистого вещества. Выход 89%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,51 (с, 2H), 7,34 (с, 2H), 7,5 (д, J=5 Гц, 2H), 7,68 (т, J=5,2 Гц, 1H), 7,8 (с, 1H).
Стадия 4: 3-Бромметилбензолсульфонамид (19.5)
[00498] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 19.4 (200 мг, 1,07 ммоль) в ДХМ (3,5 мл) добавляли PBr3 и продолжали перемешивание при 20°C в течение 16 часов. Затем к смеси осторожно добавляли воду и разделяли фазы. Водную фазу экстрагировали ДХМ (220 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 19.5 (120 мг, 0,47 ммоль) в виде бесцветного маслянистого вещества. Выход 45%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 4,53 (с, 2H), 7,54 (т, J=10,7 Гц, 1H), 7,69 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,97 (с, 1H).
Пример 20: Промежуточное соединение 20.2. 4-Бензил-2-меркапто-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-карбонитрил
[00499] К раствору промежуточного соединения 20.1 (1,2 г, 6,24 ммоль) и трет-бутоксида калия (764 мг, 6,24 ммоль) в ДМФА (15 мл) добавляли соединение 3.2 (31 мг, 0,18 ммоль). Продолжали перемешивание при 85C в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду, рН понижали до 5, добавляя AcOH, затем промывали EtOAc (320 мл). Затем доводили рН до 3, добавляя 3 н. раствор HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (330 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным Na2SO4. Указанное в заголовке соединение (600 мг, 2,47 ммоль) получали в виде светло-желтого твердого вещества. Выход 40%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,63 (с, 2H), 5,81 (с, 1H), 7,17-7,36 (м, 5H), 13,1 (шс, 1H).
Пример 21: Этиловый эфир [3-(5-циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусной кислоты (соединение I-1)
[00500] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 1.4 (2,13 г, 9,1 ммоль) и K2CO3 (1,88 г, 13,6 ммоль) в CH3CN (80 мл) добавляли промежуточное соединение 8.3 (2,45 г, 9,52 ммоль) и продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в воде и нейтрализовали полученный водный раствор 3 н. раствором HCl. Полученное бледно-желтое твердое вещество собирали, промывали ледяной водой и сушили при пониженном давлении. Указанное в заголовке соединение I-1 (3,1 г, 7,46 ммоль) получали в виде серого твердого вещества после растиранием с Et2O. Выход 82%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 1,15 (д, J=7,03 Гц, 3H), 3,62 (с, 2H), 4,03 (к, J=7,16 Гц, 2H), 4,55 (с, 2H), 7,17 (д, J=7,1 Гц, 1H), 7,28 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,38 (м, 3H), 8,1 (д, J=4,7 Гц, 1H), 8,29 (д, J=3,35 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 14,4, 34,2, 60,7, 88,6, 116,6, 127,8, 129,1, 129,1, 129,9, 130,3, 132,1, 135,2, 135,5, 137,1, 139,7, 159,1, 161,1, 165,3, 171,4. ВЭЖХ > 97,9%.
Пример 22: 3-(5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензамид (соединение I-2)
[00501] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 1.4 (182 мг, 0,78 ммоль) и промежуточного соединения 9.3 (200 мг, 0,65 ммоль) в CH3CN (20 мл) добавляли K2CO3 (119 мг, 0,86 ммоль) и продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Удаляли летучие вещества при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в воде и подкисляли полученную водную смесь до pH 3 с помощью 3 н. раствора HCl, и экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке соединения I-2 (120 мг, 0,24 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества после растирания с горячим Et2O. Выход 42%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,61 (с, 2H), 7,3 (м, 1H), 7,41 (м, 2H), 7,63 (д, J=7,12 Гц, 1H), 7,76 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,97 (с, 2H), 8,01 (д, J=4,47 Гц, 1H), 8,3 (д, J=2,8 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,5, 88,1, 117,1, 127,3, 129,1, 129,3, 130,4, 132,5, 132,5, 135,5, 135,9, 137,7, 140,2, 159,4, 161,6, 165,7, 168,4. ВЭЖХ > 94,2%.
Пример 23: 2-({[3-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил)фенил]метил}сульфанил)-6-оксо-4-(тиофен-2-ил)-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-3)
Стадия 1: 2-({[3-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил)фенил]метил}сульфанил)-6-оксо-4-(тиофен-2-ил)-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (22.1)
[00502] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (152 мг, 0,65 ммоль) и промежуточного соединения 10.4 (250 мг, 0,77 ммоль) в ДМСО (6 мл) добавляли DIPEA (0,13 мл, 0,72 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 4 часов. Неочищенную смесь выливали в воду и промывали полученную водную смесь EtOAc, подкисляли до pH 3 и экстрагировали EtOAc (350 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением промежуточного соединения 22.1 (180 мг, 0,0,38 ммоль) в виде бледно-желтого порошка после флэш-хроматографии, элюируя CH2Cl2/MeOH (4% для продукта). Выход 55%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,93 (с, 3H), 4,60 (с, 2H), 7,34-7,43 (м, 4H), 7,5 (д, J=4,3 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,84 (с, 1H), 8,0 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,29 (д, J=4,9 Гц, 1H), 13,9 (шс, 1H).
Стадия 2: 2-({[3-(3,5-дифтор-4-гидроксифенил)фенил]метил}сульфанил)-6-оксо-4-(тиофен-2-ил)-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-3)
[00503] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 22.1 (170 мг, 0,36 ммоль) в ДХМ (25 мл) добавляли 1 М раствор BBr3 в ДХМ (0,72 мл, 0,72 ммоль) и продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили, добавляя MeOH, и удаляли летучие вещества при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH (5% для продукта). Указанное в заголовке соединение I-3 (90 мг, 0,2 ммоль) получали в виде белого твердого вещества после растирания с горячим Et2O. Выход 42%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 4,59 (с, 3H), 7,31 (д, J=9,1 Гц, 2H), 7,36 (м, 1H), 7,39 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,45 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,56 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,81 (с, 1H), 8,07 (д, J=5 Гц, 1H), 8,3 (д, J=3,8 Гц, 1H), 10,34 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 88,7, 110,3 (2JCF=15,1 Гц), 110,3 ( 2JCF=15,5 Гц), 125,8, 127,4, 128,5, 129,7, 130, 130,5, 132,1, 133,5 (3JCF=16 Гц), 133,7 (3JCF=16 Гц), 135,3, 138,1, 138,4, 139,7, 152,9 (1JCF=239,9 Гц), 153,01 (1JCF=240,1 МГц), 159,0, 161,3, 165,5. ВЭЖХ: 98,4%.
Пример 24: [3-(5-Циано-4-метокси-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-4)
[00504] К перемешанному раствору промежуточного соединения 12.2 (80 мг, 0,19 ммоль) и MeOH (0,04 мл, 0,95 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли K2CO3 (60 мг, 0,43 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали полученную водную смесь EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. После очистки неочищенного продукта с помощью флэш-хроматографии (элюировали ДХМ/MeOH, 1,5% для продукта) получали указанное в заголовке соединение I-4 (45 мг, 0,11 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 58% ; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,56 (с, 3H), 3,66 (с, 2H), 4,54 (с, 2H), 7,17 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7,27 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,33-7,38 (м, 3H), 8,07 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,28 (д, J=3,6 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,2, 40,3, 52,1, 88,5, 116,6, 127,8, 129, 129,1, 129,8, 130,3, 132, 135,1, 135,3, 137,1, 139,8, 159,1, 161,4, 165,5, 171,8. ВЭЖХ > 97,1%.
Пример 25: [3-(4-Бром-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-5)
[00505] К перемешанному раствору промежуточного соединения 12.2 (30 мг, 0,051 ммоль) в AcOH (3.0 мл) добавляли HBr (36% раствор в AcOH, 0,17 мл, 1,029 ммоль) и перемешивали полученную смесь при 60°C в течение 72 часов. Затем реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл), промывали H2O (310 мл), насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (ДХМ/MeOH/AcOH, от 99:1:0,1 до 92:8:0,1) с получением указанного в заголовке соединения I-5 (17 мг, 0,038 ммоль) в виде желтого твердого вещества. Выход 75%. МС/МС ИЭР (+): 447,8, 401,9, 338,3. 1H-ЯМР (CDCl3, 400 МГц) δ: 3,63 (с, 2H), 4,45 (с, 2H), 7,21 (м, 1H), 7,31 (м, 2H), 7,39 (м, 2H), 7,70 (шс, 1H), 8,45 (шс, 1H). 13C-ЯМР (CDCl3, 100 МГц) s: 29,3, 40,7, 100,1, 116,0, 127,9, 128,7, 128,9, 129,4, 130,1, 133,1, 133,6, 134,6, 136,6, 138,7, 155,8, 159,7, 174,3, 177,1. ВЭЖХ > 95%.
Пример 26: [3-(5-Циано-4-циклопропиламино-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-6)
[00506] К перемешанному раствору промежуточного соединения 12.2 (200 мг, 0,49 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли циклопропиламин (0,037 мл, 0,55 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным солевым раствором, выливали в воду и экстрагировали полученную водную смесь EtOAc (320 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение I-6 (80 мг, 0,2 ммоль) получали в виде белого твердого вещества после измельчения с Et2O. Выход 39%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 0,73 (м, 4H), 2,95 (м, 1H), 3,53 (с, 2H), 4,45 (с, 2H), 7,13 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,23-7,29 (м, 2H), 7,33-7,35 (м, 2H), 7,93 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,18 (д, J=3,2 Гц, 1H), 8,21 (с, 1H), 12,3 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 6,6, 6,6, 25, 34,3, 40,8, 79,7, 116,7, 127,3¸128,5, 128,6, 129,2, 130,1, 130,7, 133,2, 135,4, 138,3, 140,1, 158,7, 162,8, 172,8, 172,8. ВЭЖХ > 99,3%.
Пример 27: [3-(4-Амино-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-7)
[00507] [3-(4-Хлор-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусную кислоту (12.2) (100 мг, 0,248 ммоль) растворяли в 0,4 М растворе NH3 в ТГФ (18 мл, 7,466 ммоль) и перемешивали полученный полупрозрачный раствор при комнатной температуре в течение 72 часов. Затем смесь выливали в AcOEt (15 мл), промывали 3 М раствором HCl (5 мл), насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл), насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (CH2Cl2/MeOH/AcOH, от 99:1:0,1 до 90:10:0,1) с получением указанного в заголовке соединения I-7 (86 мг, 0,22 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 94%; МС/МС ИЭР (+): 382,9. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,53 (с, 2H), 4,39 (с, 2H), 7,13 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,24 (т, J=7,1 Гц, 1H), 7,29 (м, 1H), 7,35 (м, 2H), 7,8 (шс, 1H), 7,94 (д, J=4,3 Гц, 1H), 8,20 (м, 1H), 12,32 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,3, 40,9, 78,9, 116,9, 127,6, 128,6, 128,7, 129,3, 130,4, 130,8, 133,4, 135,5, 138,3, 140,4, 159,1, 163,7, 173. ВЭЖХ > 97,9%.
Пример 28: [3-(5-Циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-8)
[00508] Et3N (0,15 мл, 1,119 ммоль) добавляли к перемешанному раствору промежуточного соединения 12.2 (150 мг, 0,373 ммоль) в ТГФ (3,7 мл). Полученный раствор непрерывно гидрировали в течение 12 часов, используя гидрогенизатор Thales Nano H-Cub (картридж: Pd/C 10%, давление H2: 8 бар, температура: 40 C, растворитель для переноса: ТГФ, скорость потока: 1,0 мл/мин.). Полученную реакционную смесь (примерно 5 мл) разбавляли EtOAc (15 мл), промывали 3 М раствором HCl (5 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией (колонка: RP-18, элюировали H2O/MeOH от 80/20 до 10/90) с получением указанного в заголовке соединения I-8 в виде белого порошка. Выход 34%. МС/МС ИЭР (+): 368,1. 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц) δ: 3,60 (с, 2H), 4,45 (с, 2H), 7,15 (м, 1H), 7,25 (м, 1H), 7,36 (м, 4H), 8,06 (шс, 1H), 8,30 (точный с, 1H), 9,03 (с, 1H).
Пример 29: [3-(5-Циано-4-метиламино-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-9)
[00509] К перемешанному раствору промежуточного соединения 12.2 (100 мг, 0,25 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли 33% раствор MeNH2 (0,03 мл, 0,27 ммоль) в этаноле и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным солевым раствором, выливали в воду, подкисляли до рН 6, добавляя 3 М раствор HCl, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке соединения I-9 (80 мг, 0,2 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 80%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,93 (д, J=4,5 Гц, 3H), 3,53 (с, 2H), 2,92 (с, 2H), 7,13 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,24 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,27-7,29 (м, 1H), 7,33 (м, 2H), 7,94 (д, J=5,1 Гц, 1H), 8,1 (к, J=4,5 Гц, 1H), 8,18 (д, J=3,8 Гц, 1H), 12,33 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 28,6, 34,5, 40,9, 79,6, 116,9, 127,4, 128,6, 128,7, 129,3, 130,2, 130,7, 133,3, 135,5, 138,3, 140,3, 158,5, 161,9, 172,9, 173,1. ВЭЖХ > 98,1%.
Пример 30: 3-(5-Циано-4-метиламино-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (соединение I-10)
[00510] К перемешанному раствору промежуточного соединения 13.3 (90 мг, 0,23 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли 33% раствор MeNH2 (0,03 мл, 0,25 ммоль) в этаноле и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным солевым раствором, выливали в воду, подкисляли до рН 6, добавляя 3 М раствор HCl, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH (4% для продукта), с получением указанного в заголовке соединения I-10 (45 мг, 0,12 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 51%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,94 (д, J=4,4 Гц, 3H), 4,49 (с, 2H), 7,28 (т, J=4,4 Гц, 1H), 7,44 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,70 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,81 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,92 (д, J=5, Гц, 1H), 8,04 (к, J=4,5 Гц, 1H), 8,06 (с, 1H)), 8,18 (д, J=3,8 Гц, 1H), 12,92 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 28,6, 34,2, 79,8, 116,8, 128,3, 129,1, 129,2, 130, 130,7, 131,3, 133,3, 133,5, 139,3, 140,2, 158,5, 161,9, 167,4, 172,9. ВЭЖХ > 95,1%.
Пример 31: 2-(3-Цианобензилсульфанил)-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-11)
[00511] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и K2CO3 (133 мг, 0,93 ммоль) в ацетоне (20 мл) добавляли промежуточное соединение 14.2 (133 мг, 0,93 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Полученную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 6, добавляя 3 М раствор HCl, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH, с получением указанного в заголовке соединения I-11 (50 мг, 0,17 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 17%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,60 (с, 2H), 7,35 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,54 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,74 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,83 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,96 (с, 1H), 8,1 (д, J=5,02 Гц, 1H), 8,27 (д, J=3,9 Гц, 1H), 13,80 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,2, 88,8, 111,8, 116,5, 118,9, 130, 130,2, 131,6, 132,1, 132,8, 134,1, 135,4, 139,3, 139,6, 159, 161,2, 165,1. ВЭЖХ > 99,1%.
Пример 32: 2-[3-(2-Гидроксиэтил)бензилсульфанил]-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-12)
[00512] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,93 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 15.1 (201 мг, 0,93 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 6, добавляя 3 М раствор HCl, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH, с получением указанного в заголовке соединения I-12 (120 мг, 0,32 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 38%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,47, (т, J=8,35 Гц, 2H), 2,67 (т, J=7,01 Гц, 2H), 4,48 (с, 2H), 4,51 (шс, 1H), 7,11 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,22 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,29 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,32-7,36 (м, 2H), 8,06 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,27 (д, J=3,9 Гц, 1H), 13,80 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,3, 62,3, 62,3, 88,3, 116,9, 126,8, 128,5, 128,8, 129,8, 129,9, 131,8, 135,1, 136,9, 139,9, 140,3, 159, 162, 165,9. ВЭЖХ > 96,1%.
Пример 33: 2-(3-Цианометилбензилсульфанил)-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-13)
[00513] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,2 мл, 0,94 ммоль) в ацетоне (20 мл) добавляли промежуточное соединение 16.2 (196 мг, 0,94 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Полученную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 6, добавляя 3 М раствор HCl, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH (2,5% для продукта), с получением указанного в заголовке соединения I-13 (300 мг, 0,82 ммоль) в виде желтого твердого вещества. Выход 96%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,01 (с, 2H), 4,52 (с, 2H), 7,24 (д, J=7,49 Гц, 1H), 7,31-7,36 (м, 2H), 7,43-7,45 (м, 2H), 8,0 (д, J=5 Гц, 1H), 8,23 (д, J=3,8 Гц, 1H), 13,80 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 22,6, 33,9, 87,9, 117,5, 119,5, 127,5, 128,5, 128,9, 129,6, 129,6, 131,3, 131,9, 134,5, 138,6, 140,3, 159,1, 164,1, 166,7. ВЭЖХ > 97,7%.
Пример 34: 2-[3-(2-Метил-2H-тетразол-5-ил)-бензилсульфанил]-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-14)
[00514] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,17 мл, 0,93 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 17.3 (236 мг, 0,93 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Полученное твердое вещество собирали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения I-14 (200 мг, 0,49 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 58%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,40 (с, 3H), 4,66 (с, 2H), 7,35 (м, 1H), 7,51 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,66 (д, J=6,9 Гц, 1H), 7,94 (д, J=7,2 Гц, 1H), 8,08 (д, J=4,1 Гц, 1H), 8,21 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 13,80 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,9, 40,5, 88,7, 116,5, 125,7, 127,2, 127,5, 129,9, 130, 131,3, 132,1, 135,4, 138,6, 139,7, 159,1, 161,1, 164,2, 165,2. ВЭЖХ > 99,3%.
Пример 35: [3-(5-Циано-4-морфолин-4-ил-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-15)
[00515] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 12.2 (100 мг, 0,25 ммоль) в CH3CN (10 мл) добавляли морфолин (0,023 мл, 0,27 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в воде и экстрагировали полученную водную смесь EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке соединения I-15 (80 мг, 0,18 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 71%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 3,60 (с, 2H), 3,79 (м, 4H), 3,93 (м, 4H), 4,41 (с, 2H), 7,17-7,20 (м, 2H), 7,27-7,36 (м, 2H), 7,37 (д, J=8,23 Гц, 2H), 7,61 (д, J=5,1 Гц, 1H), 8,32 (д, J=3,5 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, CDCl3) δ 35,1, 40,6, 47,7, 47,7, 66,5, 66,5, 80,6, 118,4, 127,7, 128,3, 128,6, 128,8, 129,7, 131,7, 132,4, 133,5, 137,6, 139,9, 161,6, 162,9, 172,6, 176,3. ВЭЖХ > 98,1%.
Пример 36: [3-(5-Циано-4-пиперазин-1-ил-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-16)
Стадия 1 . трет-Бутиловый эфир 4-[2-(3-Карбоксиметилбензилсульфанил)-5-циано-6-тиофен-2-ил-пиримидин-4-ил]-пиперазин-1-карбоновой кислоты (36.1).
[00516] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 12.2 (250 мг, 0,62 ммоль) и K2CO3 (128 мг, 0,93 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли 1-boc-пиперазин (127 мг, 0,68 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Полученную смесь растворяли в воде, водную смесь экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH (4% для продукта) с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 35.1 (60 мг, 0,11 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 18%.
Стадия 2 . [3-(5-Циано-4-пиперазин-1-ил-6-тиофен-2-ил-пиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (I-16).
[00517] К перемешанному раствору промежуточного соединения 35.1 (65 мг, 0,12 ммоль) в ДХМ (15 мл) добавляли ТФК (0,28 мл, 3,6 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенную смесь растворяли в воде и экстрагировали полученную водную смесь EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение I-16 (20 мг, 0,044 ммоль) получали в виде белого твердого вещества после измельчения с горячим Et2O. Выход 37%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,83 (м, 4H), 3,51 (с, 2H), 3,81 (м, 4H), 4,39 (с, 3H), 7,13 (д, J=7,03 Гц, 1H), 7,24-7,33 (м, 4H), 7,95 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,20 (д, J=2,8 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,6, 41,2, 45,5, 45,5, 48,4, 48,4, 118,7, 127,2, 128,6, 128,7, 129,2, 130,1, 131,8, 133,7, 135,8, 138,1, 140,1, 161,5, 162,4, 172, 173,1. ВЭЖХ > 90,9%.
Пример 37. Этиловый эфир [3-(5-циано-1-метил-4-оксо-6-тиофен-2-ил-1,4-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусной кислоты (соединение I-17).
[00518] К перемешанной суспензии соединения I-1 (300 мг, 0,73 ммоль) и K2CO3 (151 мг, 1,09 ммоль) в ДМФА (15 мл) по каплям добавляли MeI (0,047 мл, 0,77 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученную смесь выливали в воду, и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке соединения I-17 (298 мг, 0,7 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества. Выход 96%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 0,14 (т, J=7,12 Гц, 3H), 3,41 (с, 3H), 3,62 (с, 2H), 4,03 (к, J=7,1 Гц, 2H), 4,64 (с, 2H), 7,19 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,27-7,31 (м, 1H), 7,35 (т, J=4,1 Гц, 1H), 7,40 (м, 2H), 8,08 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,28 (д, J=3,8 Гц, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 14,4, 31,1, 36,1, 40,5, 60,6, 87,5, 116,5, 127,9, 129,1, 129,2, 130, 130,4, 132,1, 135,3, 135,4, 136,2, 139,5, 157,1, 160,1, 166,4, 171,3. ВЭЖХ > 95,1%.
Пример 38. 3-(5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензолсульфонамид (соединение I-18)
[00519] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (107 мг, 0,45 ммоль) и DIPEA (0,08 мл, 0,49 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 19.5 (125 мг, 0,49 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенную смесь растворяли в воде и затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение I-18 (50 мг, 0,12 ммоль) получали в виде желтоватого твердого вещества после растирания с горячим Et2O. Выход 28%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,65 (с, 2H), 7,34 (т, J=4,6 Гц, 1H), 7,40 (с, 2H), 7,52 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,72 (т, J=6,1 Гц, 2H), 7,94 (с, 1H), 8,06 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,27 (д, J=3,6 Гц, 1H), 13,8 (с, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,7, 88,6, 116,6, 125,2, 126,1, 129,7, 129,9, 132, 132,5, 135,4, 138,4, 139,7, 144,8, 159,1, 161,4, 165,3. ВЭЖХ > 95,1%.
Пример 39: [3-(3-Циано-6-оксо-4-фенил-1,6-дигидропиридин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-19)
[00520] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 3.3 (100 мг, 0,44 ммоль) и DIPEA (0,09 мл, 0,53 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (94 мг, 0,44 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляли дробленым льдом и водой. рН доводили до 5, добавляя AcOH. Собирали осадок, промывали холодной водой и сушили под вакуумом. Соединение I-19 (60 мг, 0,16 ммоль) получали в виде коричневатого порошка. Выход 37%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,55 (с, 2 H), 4,5 (с, 2H), 6,51 (с, 1H), 7,16 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,27 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,37 (м, 2H), 7,51-7,53 (м, 3H), 7,55-7,56 (м, 2H), 12,17 (шс, 2H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,5, 40,6, 95,9, 108, 116,2, 127,6, 128,3, 128,3, 128,5, 128,5, 128,9, 128,9, 130, 130,3, 135,4, 135,9, 137,5, 155,9, 162,1, 164,9, 172,7; ВЭЖХ: 96,88%.
Пример 40: [3-(3-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиридин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-20)
[00521] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 5.2 (153 мг, 0,56 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,67 ммоль) в смеси ДМСО/ацетон (15/4 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (121 мг, 0,56 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляли дробленым льдом и водой. Доводили рН до 5, добавляя AcOH. Собирали осадок, промывали холодной водой и сушили под вакуумом. Соединение I-20 (90 мг, 0,22 ммоль) получали в виде коричневатого порошка. Выход 42%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,55 (с, 2H), 4,51 (с, 2H), 6,62 (с, 1H), 7,15 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,24-7,28 (м, 2H), 7,35 (д, J=6,4 Гц, 2H), 7,75 (д, J=3,5 Гц, 1H), 7,85 (д, J=4,9 Гц, 1H), 12,1 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,6, 40,6, 93,8, 104,5, 116,5, 127,6, 128,6, 128,6, 128,7, 128,7, 129,5, 130,3, 130,3, 135,4, 136,6, 137,4, 147,4, 165,1, 172,7; ВЭЖХ: 96,5%.
Пример 41: [3-(3,5-Дициано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиридин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-21)
[00522] К перемешанному раствору промежуточного соединения 6.2 (200 мг, 0,77 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,92 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (165 мг, 0,77 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 5, добавляя AcOH. Собирали осадок, промывали холодной водой и сушили под вакуумом. Соединение I-21 (110 мг, 0,27 ммоль) получали в виде коричневатого порошка. Выход 35%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,56 (с, 2H), 4,48 (с, 2H), 7,63 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,24-7,28 (м, 2H), 7,38-7,40 (м, 2H), 7,54 (дд, J=1,1 Гц, J=3,6 Гц, 1H), 7,93 (дд, J=1,1 Гц, J=5 Гц, 1H), 8,12 (шс, 1H), 12,29 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,3, 40,6, 85,8, 93,1, 115,5, 127,8, 128, 128, 128,6, 130,5, 130,9, 131,4, 131,4, 132,9, 135,3, 137,4, 150,8, 159,8, 166,9, 172,8; ВЭЖХ: 97,5%.
Пример 42: 2-оксо-6-[3-(1H-тетразол-5-ил)-бензилсульфанил]-4-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиридин-3,5-дикарбонитрил (соединение I-22)
[00523] К перемешанному раствору промежуточного соединения 6.2 (150 мг, 0,57 ммоль) и DIPEA (0,18 мл, 0,68 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 18.1 (138 мг, 0,57 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили pH до 5, добавляя AcOH. Собирали осадок, промывали холодной водой и сушили под вакуумом. Соединение I-22 (90 мг, 0,27 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 38%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,6 (с, 2H), 7,26 (дд, J=5,0 Гц, J=3,6 Гц, 1H), 7,54-7,56 (м, 2H), 7,76 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,90-7,94 (м, 2H), 8,1 (с, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,2, 86,2, 93,4, 115,7, 124,9, 126,2, 128,1, 128,2, 129,8, 131,2, 131,6, 131,6, 132,5, 133, 139,5, 151,1, 155,8, 160,1, 166,8; ВЭЖХ: 96,7%
Пример 43: [3-(4-Бензил-3-циано-6-оксо-1,6-дигидропиридин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-23)
[00524] К перемешанному раствору промежуточного соединения 20.2 (154 мг, 0,63 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,7 ммоль) в ацетоне (15 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (150 мг, 0,7 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 5, добавляя AcOH. Собирали осадок, промывали холодной водой и сушили под вакуумом. Соединение I-23 (100 мг, 0,25 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 40%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,37 (с, 2H), 3,98 (с, 2H), 4,48 (с, 2H), 6,34 (с, 1H), 7,13-7,32 (м, 9H), 12,1 (шс, 1H); ВЭЖХ: 98,5%.
Пример 44: (5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанил)уксусная кислота (соединение I-24)
[00525] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,18 мл, 1,02 ммоль) в ацетоне/ДМСО (20:2 мл) добавляли хлоруксусную кислоту (80 мг, 0,85 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Затем добавляли еще 0,3 эквивалента DIPEA и хлоруксусной кислоты для завершения реакции. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Собирали осадок и очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 10 до 80%. Соединение I-24 (210 мг, 0,71 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 83%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,0 (с, 2H), 7,33 (т, J=4,7 Гц, 1H), 8,1 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,25 (д, J=3,8 Гц, 1H), 12,8 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,4, 88,5, 116,5, 129,8, 132,3, 135,6, 139,5, 159, 161,1, 165,2, 169,3; ВЭЖХ: 99,6%.
Пример 45: 6-оксо-2-(1H-тетразол-5-илметилсульфанил)-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-25)
[00526] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,18 мл, 1,02 ммоль) в ацетоне/ДМСО (20:2 мл) добавляли промежуточное соединение 5-хлорметил-1H-тетразол (101 мг, 0,85 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Затем добавляли еще 0,3 эквивалента DIPEA и 5-хлорметил-1H-тетразола для завершения реакции. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили pH до 3, добавляя 3 н. HCl. Осадок собирали и очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 10 до 80%. Соединение I-25 (120 мг, 0,37 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 44%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,82 (с, 2H), 7,31 (т, J=4,2 Гц, 1H), 8,0 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,22 (д, J=3,8 Гц, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 23,6, 88,7, 116,4, 129,9, 132,2, 135,6, 139,4, 157,1, 159,0, 161,4, 164,4; ВЭЖХ: 94,6%.
Пример 46: 2-(1H-Тетразол-5-илметилсульфанил)-6-трифторметил-3H-пиримидин-4-он (соединение I-26)
[00527] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2.1 (100 мг, 0,56 ммоль) и DIPEA (0,13 мл, 0,73 ммоль) в ацетоне (5 мл) добавляли 5-хлорметил-1H-тетразол (87 мг, 0,73 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили pH до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Соединение I-26 (60 мг, 0,19 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 35%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,69 (с, 2H), 6,67 (с, 1H), 15,1 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 23,1, 107,7, 120,6 (к, JCF=2,7 Гц), 152, 154,3, 163,9, 164,8; ВЭЖХ: 97,9%
Пример 47: (6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанил)уксусная кислота (соединение I-27)
[00528] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2.1 (200 мг, 0,85 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,94 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли хлоруксусную кислоту (89 мг, 0,94 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенную реакционную смесь очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 5 до 65%, с получением продукта. Соединение I-27 (125 мг, 0,49 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 58%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,96 (с, 2H), 6,63 (с, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,1, 108, 120,6 (к, JCF=2,7 Гц), 163,1, 165,4, 169,5; ВЭЖХ: 95,9%.
Пример 48: [3-(6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-28)
[00529] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2.1 (150 мг, 0,64 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,71 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (152 мг, 0,71 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенную реакционную смесь очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 5 до 80%, с получением продукта. Соединение I-28 (100 мг, 0,29 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 45%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,54 (с, 2H), 4,52 (с, 2H), 6,87 (с, 1H), 7,16 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,26 (т, J=7,4 Гц, 1H), 7,33-7,35 (м, 2H), 12,18 (шс, 1H); ВЭЖХ: 98,1%.
Пример 49: 2-[3-(1H-Тетразол-5-ил)бензилсульфанил]-6-трифторметил-3H-пиримидин-4-он (соединение I-29)
[00530] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2.1 (150 мг, 0,64 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,71 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли промежуточное соединение 18.1 (152 мг, 0,64 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Собирали белое твердое вещество и описывали как указанное в заголовке соединение. Соединение I-29 (160 мг, 0,45 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 70%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,50 (с, 2H), 6,63 (с, 1H), 7,54 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,64 (д, J=7,5 Гц, 1H), 7,9 (д, J=7,6 Гц, 1H), 8,13 (с, 1H), 13,3 (шс, 1H); ВЭЖХ: 95,2%.
Пример 50: (4-Бензил-5-циано-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанил)уксусная кислота (соединение I-30)
[00531] К перемешанному раствору промежуточного соединения 4.2 (110 мг, 0,45 ммоль) и DIPEA (0,086 мл, 0,5 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли хлоруксусную кислоту (43 мг, 0,45 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Неочищенную реакционную смесь очищали обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 5 до 80%, с получением продукта. Соединение I-30 (95 мг, 0,32 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 69%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,92 (с, 2H), 4,0 (с, 2H), 7,24-7,28 (м, 1H), 7,31-7,32 (4H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,4, 42,6, 95,0, 115,4, 127,4, 129, 129, 129,3, 129,3, 136,4, 160,7, 166,3, 169,4, 169,4; ВЭЖХ: 98,9%.
Пример 51: 3-(6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (соединение I-31)
[00532] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2.1 (200 мг, 0,92 ммоль) и DIPEA (0,19 мл, 1,1 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли 3-(2-хлорметил)бензойную кислоту 13.1 (170 мг, 1 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Собирали белый осадок и сушили под вакуумом. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 4 до 80%. Соединение I-31 (120 мг, 0,36 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход 40%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,5 (с, 2H), 4,45 (с, 2H), 6,61 (с, 1H), 7,42 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,48 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,81 (д, J=7,58 Гц, 1H), 8,02 (с, 1H), 13,12 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,8, 107,7, 120,6 (к, JCF=2,7 Гц), 128,6, 128,9, 130,4, 131,3, 134, 138,3, 150, 163, 165, 167,4; ВЭЖХ: 98,8%.
Пример 52: 3-(6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (соединение I-32)
[00533] К перемешанному раствору промежуточного соединения 4.2 (200 мг, 0,92 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,9 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли 5-хлорметил-1H-тетразол (97 мг, 0,82 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Смесь экстрагировали EtOAc (330 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Соединение I-32 (58 мг, 0,18 ммоль) получали в виде белого порошка после очистки обращенно-фазовой флэш-хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 5 до 80%. Выход 20%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,90 (с, 2H), 4,74 (с, 2H), 7,13-7,21 (м, 5H); ВЭЖХ: 98,9%.
Пример 53: [3-(4-Бензил-5-циано-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (Соединение I-33)
[00534] К перемешанному раствору промежуточного соединения 4.2 (150 мг, 0,2 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,68 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (146 мг, 0,68 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли дробленым льдом и водой. рН доводили до 5, добавляя AcOH. Осадок собирали и сушили под вакуумом. Указанное в заголовке соединение I-33 (80 мг, 0,2 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход: 33%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,5 (с, 2H), 4,0 (с, 2H), 4,37 (с, 2H), 7,12-7,32 (м, 9H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,2, 42,6, 54,1, 95,2, 116, 127,5, 127,8, 128,9, 129, 129,1, 129,1, 129,6, 129,6, 130,4, 135,7, 136,8, 137,5, 161, 166,7, 172,6, 173,1; ВЭЖХ: 90,2%
Пример 54: 4-Бензил-6-оксо-2-[3-(1H-тетразол-5-ил)-бензилсульфанил]-1,6-дигидропиримидин-5 карбонитрил (соединение I-34)
[00535] К перемешанному раствору промежуточного соединения 4.2 (150 мг, 0,62 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,68 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли промежуточное соединение 18.1 (162 мг, 0,68 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при кипении с обратным холодильником. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли дробленым льдом и водой. рН доводили до 5, добавляя AcOH. Осадок собирали и сушили под вакуумом. Неочищенный продукт суспендировали в воде, подкисляли до рН 3, добавляя 3 н. раствор HCl, и экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение I-34 (125 мг, 0,31 ммоль) получали в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 50%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,0 (с, 2H), 4,51 (с, 2H), 7,17-7,28 (м, 5H), 7,41-7,47 (2H), 7,90 (д, J=6,82 Гц, 1H), 8,06 (с, 2H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,7, 42,5, 95,5, 115,5, 124,7, 126,2, 127,3, 128,8, 128,9, 128,9, 129,4, 129,4, 129,9, 132,1, 136,5, 139, 158, 160,6, 166,2, 172,7; ВЭЖХ: 93%.
Пример 55: 3-(4-Бензил-5-циано-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанилметил)бензойная кислота (соединение I-35)
[00536] К перемешанному раствору промежуточного соединения 4.2 (150 мг, 0,62 ммоль) и DIPEA (0,14 мл, 0,82 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли 3-(2-хлорметил)бензойную кислоту 13.1 (116 мг, 0,68 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Собирали осадок и сушили под вакуумом. Указанное в заголовке соединение I-35 (160 мг, 0,42 ммоль) получали в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 68%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,0 (с, 2H), 4,46 (с, 2H), 7,25-7,36 (м, 5H), 7,44 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,81 (д, J=7,6 Гц, 1H), 8,0 (с, 1H), 13,1 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,7, 42,5, 95,5, 115,5, 127,4, 128,6, 129, 129, 129,1, 129,4, 129,4, 130,3, 131,2, 133,8, 136,5, 138,1, 160,5, 166,2, 167,4, 172,7; ВЭЖХ: 98%, ВЭЖХ: 98%.
Пример 56: [3-(3-циано-6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиридин-2-илсульфанилметил)фенил]уксусная кислота (соединение I-36)
[00537] К перемешанному раствору промежуточного соединения 7.1 (164 мг, 0,63 ммоль) и DIPEA (0,12 мл, 0,71 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли промежуточное соединение 11.2 (150 мг, 0,71 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl, затем экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали обращенно-фазовой хроматографией, элюируя смесью H2O/MeOH от 8% до 40%, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение I-36 (85 мг, 0,23 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход: 37%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,55 (с, 2H), 4,53 (с, 2H), 6,87 (с, 1H), 7,16 (м, 1H), 7,26 (м, 1H), 7,35 (м, 2H), 12,2 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 34,1, 40,8, 91,5, 105,3, 113,8, 121,5 (к, JCF=2,7 Гц), 127,8, 128,8, 129, 130,6, 135,7, 137,1, 142 (к, JCF=0,3 Гц), 164,6, 165,6, 173; ВЭЖХ: 97,8%.
Пример 57: [3-(5-Циано-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанил)пропионовая кислота (соединение I-37)
[00538] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1.4 (200 мг, 0,84 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,93 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли 3-бромпропионовую кислоту (57.1) (142 мг, 0,93 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Затем смесь разбавляли дробленым льдом и водой, и доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Полученный осадок собирали и сушили под вакуумом. Указанное в заголовке соединение I-37 (180 мг, 0,58 ммоль) получали в виде светло-желтого твердого вещества. Выход: 69%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,75-2,80 (м, 2H), 3,34-3,39 (м, 2H), 7,32-7,36 (м, 1H), 8,0-8,24 (м, 1H), 8,24-8,27 (м, 1H), 12,18 (шс, 1H), 13,72 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 26,2, 33,8, 40,7, 88,4, 1116,6, 130,1, 131,9, 135,4, 139,9, 158,9, 161,1, 165,6, 173,1; ВЭЖХ: 96,6%.
Пример 58: 3-(6-оксо-4-трифторметил-1,6-дигидропиримидин-2-илсульфанил)пропионовая кислота (соединение I-38)
[00539] К перемешанному раствору промежуточного соединения 2,2 (150 мг, 0,69 ммоль) и DIPEA (0,13 мл, 0,75 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли 3-бромпропионовую кислоту (57.1) (115 мг, 0,75 ммоль). Продолжали перемешивание в течение ночи при комнатной температуре. Разбавляли смесь дробленым льдом и водой и доводили рН до 3, добавляя 3 н. HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение I-38 (65 мг, 0,24 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход: 35%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 2,69 (т, J=6,68 Гц, 2H), 3,27 (т, J=6,7 Гц, 2H), 6,61 (с, 1H), 12,9 (шс, 2H); ВЭЖХ: 98,8%.
Пример 59: 2-(3,5-Дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-39)
Стадия 1: 2-(3,5-Дифтор-4-метоксибензилсульфанил)-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (59.2)
[00540] К раствору промежуточного соединения 1.4 (150 мг, 0,64 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA (0,12 мл, 0,7 ммоль) и промежуточное соединение 59.1 (135 мг, 0,7 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Неочищенную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 3, добавляя 3 н. раствор HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Промежуточное соединение 59.2 (168 мг, 0,42 ммоль) получали в виде оранжевого порошка. Выход: 67%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,87 (с, 2H), 4,5 (с, 3H), 7,28 (д, J=9,1 Гц, 2H), 7,36 (т, J=4,6 Гц, 1H), 8,1 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,28 (д, J=3,8 Гц, 1H).
Стадия 2: 2-(3,5-Дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-оксо-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (I-39)
[00541] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 59.2 (160 мг, 0,41 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли охлажденный до 0°C 1 M раствор BBr3 в ДХМ (0,5 мл, 0,45 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили, добавляя MeOH, и удаляли растворители в вакууме. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH от 0 до 6%, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение I-39 (68 мг, 0,18 ммоль) получали в виде белого порошка после растирания с Et2O. Выход: 44%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 4,47 (с, 2H), 7,17 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,36 (т, J=4,6 Гц, 1H), 8,28 (д, J=3,9 Гц, 1H), 10,25 (с, 1H), 13,9 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,3, 88,7, 112,7 (д, JCF=28,6 Гц), 112,9 (д, JCF=28,6 Гц), 116,5, 127,8 (т, JCF=32,8 Гц), 130, 132,1, 133,4 (т, JCF=63,7 Гц), 135,4, 139,7, 151,0 (д, JCF=28,9 Гц), 153,4 (д, JCF=28,6 Гц), 158,9, 161,2, 165,2; ВЭЖХ: 95,7%.
Пример 60: 2-(3,5-Дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-трифторметил-3H-пиримидин-4-он (соединение I-40)
Стадия 1: 2-(3,5-Дифтор-4-метоксибензилсульфанил)-6-трифторметил-3H-пиримидин-4-он (60.1)
[00542] Способом, описанным в примере 59 (стадия 1), и исходя из промежуточного соединения 2.2 (200 мг, 0,91 ммоль), 59.1 (211,8 мг, 1,1 ммоль) и DIPEA (0,19 мл, 1,1 ммоль) в ДМСО (5 мл), получали указанное в заголовке промежуточное соединение 60.1 (200 мг, 0,56 ммоль) в виде белого порошка. Выход 62%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,88 (с, 2H), 4,33 (с, 3H), 6,63 (с, 1H), 7,21 (д, J=9,2 Гц, 2H).
Стадия 2: 2-(3,5-Дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-трифторметил-3H-пиримидин-4-он (I-40)
[00543] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 60.1 (190 мг, 0,54 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли охлажденный до 0°C 1 M раствор BBr3 в ДХМ (0,6 мл, 0,59 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили MeOH. Растворители удаляли под вакуумом. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH от 0 до 6%, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение I-40 (61 мг, 0,18 ммоль) получали в виде белого порошка после растирания с Et2O. Выход: 33%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 4,29 (с, 2H), 6,63 (с, 1H), 7,11 (д, J=7,82 Гц, 2H), 10,19 (с, 1H), 13,15 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСО-d6) δ 33,3, 113,1 (д, JCF=28,2 Гц), 113,2 (д, JCF=28,4 Гц), 119,6, 122,3, 128,2, 133,3 (т, JCF=64,1 Гц), 150,9 (д, JCF=28,3 Гц), 153,3 (д, JCF=28,4 Гц); ВЭЖХ: 98,3%.
Пример 61: 4-Бензил-2-(3,5-дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-41)
Стадия 1: 4-Бензил-2-(3,5-дифтор-4-метокси-бензилсульфанил)-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (61.1)
[00544] Способом, описанным в примере 59 (стадия 1), и исходя из промежуточного соединения 4.2 (200 мг, 0,82 ммоль), 59.1 (189,9 мг, 0,98 ммоль) и DIPEA (0,17 мл, 0,98 ммоль) в ДМСО (5 мл), получали указанное в заголовке промежуточное соединение 60.1 (200 мг, 0,5 ммоль) в виде белого порошка. Выход 61%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 3,87 (с, 2H), 4,02 (с, 2H), 4,35 (с, 2H), 7,0 (д, J=8,9 Гц, 2H), 7,3 (м, 5H).
Стадия 2: 4-Бензил-2-(3,5-дифтор-4-гидроксибензилсульфанил)-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-41)
[00545] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 61.1 (190 мг, 0,54 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли охлажденный до 0°C 1 M раствор BBr3 в ДХМ (0,5 мл, 0,52 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили MeOH. Удаляли растворители под вакуумом. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH от 0 до 6%, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение I-41 (40 мг, 0,1 ммоль) получали в виде белого порошка после растирания с Et2O. Выход: 22%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 4,02 (с, 2H), 4,3 (с, 2H), 6,93 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,27 (м, 4H), 7,9 (шс, 1H), 10,2 (с, 1H), 13,92 (шс, 1H); ВЭЖХ 96,7%.
Пример 62: 6-оксо-2-{[4-(1H-тетразол-5-ил)циклогексилметил]амино}-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-42)
Стадия 1: трет-Бутиловый эфир (4-карбамоилциклогексилметил)карбаминовой кислоты 62.2)
[00546] К раствору исходного промежуточного соединения 62.1 (1,3 г, 5,1 ммоль) в CH3CN (20 мл) добавляли пиридин (0,45 мл, 5,55 ммоль), Boc2O (1,67 г, 7,65 ммоль) и бикарбонат аммония (605 мг, 7,65 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Неочищенную смесь выливали в воду. Водную фазу экстрагировали EtOAc (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение 62.2 (1 г, 3,9 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход: 76%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 0,8 (к, J=2,6 Гц, 2H), 1,45 (с, 9H), 1,63 (с, 2H), 1,86 (д, J=13,3 Гц, 2H), 1,97 (д, J=13,4 Гц, 2H), 2,11 (т, J=3,4 Гц, 1H), 2,99 (м, 2H), 4,5 (с, 1H), 5,38 (м, 2H).
Стадия 2: трет-Бутиловый эфир (4-цианоциклогексилметил)карбаминовой кислоты (62.3)
[00547] К раствору исходного промежуточного соединения 62.2 (200 мг, 0,78 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли (0,3 мл, 1,95 ммоль). Смесь охлаждали до 0°C и по каплям добавляли ангидрид ТФК (0,14 мл, 0,98 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали ДХМ (320 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4 с получением указанного в заголовке соединения 62.3 (150 мг, 0,62 ммоль) в виде желтого маслянистого вещества. Выход 84%. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 0,98-1 (м, 2H), 1,46 (с, 9H), 1,52 (м, 2H), 1,57-1,61 (m,1H), 1,75-1,77 (м, 1H), 1,83-1,87 (м, 2H), 2,12-2,16 (м, 2H), 2,35-2,42 (м, 1H), 2,98 (т, J=6,4 Гц, 2H), 3,58 (д, J=6,8 Гц, 1H), 4,61 (шс, 1H).
Стадия 3: трет-Бутиловый эфир [4-(1H-тетразол-5-ил)циклогексилметил]карбаминовой кислоты (62.4)
[00548] К раствору исходного промежуточного соединения 62.3 (200 мг, 0,84 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли азид натрия (164 мг, 2,52 ммоль) и NH4Cl (135 мг, 2,52 ммоль). Продолжали перемешивание при 140°C в течение 25 часов. Неочищенную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 3, добавляя 3 М раствор HCl. Водную фазу экстрагировали EtOAc (3x 20 мл). Объединенную органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке соединение 62.4 (160 мг, 0,56 ммоль) получали в виде белого порошка. Выход: 67%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 1,01 (т, J=6,8 Гц, 2H), 1,36-1,52 (м, 11H), 1,76 (д, J=11,7 Гц, 2H), 2,01 (д, J=11,0 Гц, 2H), 2,72-2,96 (м, 3H), 6,59-6,87 (м, 1H), 14,1 (шс, 1H).
Стадия 4: C-[4-(1H-Тетразол-5-ил)циклогексил]метиламин (62.5)
[00549] К раствору промежуточного соединения 62.4 (450 мг, 1,60 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли 4 М раствор HCl в диоксане (13,2 мл). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Удаляли растворитель под вакуумом с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 62.5 (378 мг, 1,73 ммоль) в виде белого порошка в форме хлоргидратной соли. Выход 95%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСО-d6) δ 1,0-1,14 (м, 2H), 1,46-1,52 (м, 3H), 1,84 (д, J=13,1 Гц, 2H), 2,01 (д, J=13,4 Гц, 2H), 2,64-2,70 (м, 2H), 2,93 (м, 1H), 8,05 (шс, 3H).
Стадия 5: 6-оксо-2-{[4-(1H-тетразол-5-ил)циклогексилметил]амино}-4-тиофен-2-ил-1,6-дигидропиримидин-5-карбонитрил (соединение I-42)
[00550] К перемешанному раствору промежуточного соединения 62.6 (250 мг, 0,88 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA (0,3 мл, 1,76 ммоль) и промежуточное соединение 62.5 (211 мг, 0,97 ммоль). Продолжали перемешивание при 80°C в течение 4 часов. Неочищенную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 3 и экстрагировали EtOAc (320 мл). Неочищенный продукт реакции очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH (6% для продукта). Указанное в заголовке соединение I-42 (24 мг, 0,06 ммоль) получали в виде желтоватого твердого вещества. Выход 7%. МС-ИЭР (-) m/z: 381,4 (M-H). ВЭЖХ: 88%
Пример 63: Получение промежуточного соединения 1b.3
Стадия 1: Получение промежуточного соединения 1b.2
[00551] К перемешанному раствору соединения 1b.1 (500 мг, 2,13 ммоль) в смеси H2O/EtOH (2 мл+4 мл) добавляли NaOH (85 мг, 2,13 ммоль) и MeI (0,12 мл, 2,13 ммоль). Продолжали перемешивание при 60°C в течение 30 минут. Указанное в заголовке соединение 1b.2 после фильтрования реакционной смеси собирали в виде желтого порошка (491 мг, 4,9 ммоль). Выход 92%.
Стадия 2: Получение промежуточного соединения 1b.3
[00552] К перемешанному раствору соединения 1b.2 (200 мг, 0,8 ммоль) в CHCl3 (6 мл) добавляли mCPBA (207 мг, 1,2 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 16 часов. Собирали желтое твердое вещество и промывали ДХМ и Et2O. Указанное в заголовке соединение 1b.3 получали (190 мг, 0,67 ммоль) в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход 84%.
Пример 64: Получение промежуточного соединения 2b.2
Стадия 1: Получение промежуточного соединения 2b.2
[00553] К раствору исходного промежуточного соединения 2b.1 (200 мг, 0,83 ммоль) в MeOH (3 мл) добавляли 30% раствор аммиака в воде (2 мл). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем удаляли растворитель под вакуумом. Указанное в заголовке промежуточное соединение 2b.2 (143 мг, 0,74 ммоль) получали в виде желтоватого порошка без дополнительной очистки. Выход 90%.
Пример 65: Получение промежуточного соединения 3b.6
Стадия 1: Получение промежуточного соединения 3b.2
[00554] К перемешанному и кипящему раствору 3b.1 (1,00 г, 7,62 ммоль) в MeCN (30 мл) по каплям добавляли раствор NBS (1,42 г) и BPO 70% (13 мг, 0,04 ммоль) в MeCN (10 мл). Через 30 минут смесь медленно охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (15 мл). Смесь экстрагировали AcOEt (330 мл), промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке промежуточное соединение 3b.2 напрямую использовали (1,60 г) на следующей стадии.
Стадия 2: Получение промежуточного соединения 3b.3
[00555] Раствор промежуточного соединения 3b.2 (1,60 г, неочищенный продукт предыдущей стадии) в MeOH (15 мл) обрабатывали 28% водным раствором NH3 (15 мл) и перемешивали полученную смесь в течение 16 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и выливали неочищенную смесь в H2O (30 мл), и промывали AcOEt (330 мл). Водную фазу концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке промежуточное соединение 3b.3 (1,17 г) использовали на следующей стадии без очистки.
Стадия 3: Получение промежуточного соединения 3b.4
[00556] В перемешанную суспензию промежуточного соединения 3b.3 (1,17 г, неочищенный продукт предыдущей стадии) в CH2Cl2 (30 мл) добавляли Boc2O (1,99 г, 9,14 ммоль) и DIPEA (3,32 мл, 19,06 ммоль), смесь оставляли взаимодействовать при комнатной температуре на 2 часа с получением полупрозрачного раствора. Добавляли H2O (20 мл), разделяли две фазы и промывали органическую фазу 0,5 М водным раствором лимонной кислоты (220 мл), H2O (20 мл), насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии (петролейный эфир/AcOEt от 9:1 до 7:3) с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 3b.4 в виде плотного маслянистого вещества с выходом 28% из 3.1. МС-ИЭР (+) m/z: 247,2 (M+H).
Стадия 4: Получение промежуточного соединения 3b.5
[00557] Смесь промежуточного соединения 3b.4 (525 мг, 2,13 ммоль), азида натрия (415 мг, 6,39 ммоль) и хлорида триэтиламмония (880 мг, 6,39 ммоль) в толуоле (40 мл) перемешивали и кипятили с обратным холодильником в течение 18 часов. После охлаждения до комнатной температуры добавляли насыщенный водный раствор NaHCO3 (15 мл) и энергично перемешивали смесь в течение 10 минут. Разделяли две фазы и экстрагировали органическую фазу H2O (330). Все водные фазы объединяли и подкисляли до pH=3, добавляя 0,5 М лимонную кислоту. Полученную кислую водную фазу экстрагировали CH2Cl2 (350 мл), промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении. Указанное в заголовке промежуточное соединение 3b.5 (214 мг, 0,74 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход: 35%. МС-ИЭР (-) m/z: 288,2 (M-H).
Стадия 5: Получение промежуточного соединения 3b.6
[00558] Промежуточное соединение 3b.5 (205 мг, 0,71 ммоль) растворяли в MeOH (10 мл) и обрабатывали 37% HCl (0,29 мл, 3,35 ммоль) при 50°C в течение 2 часов. Удаляли летучие вещества при пониженном давлении с получением промежуточного соединения 3b.6 с почти количественным выходом в форме гидрохлоридной соли. МС-ИЭР (+) m/z: 190,3 (M+H); МС-ИЭР (-) m/z: 188,2 (M-H).
Пример 66: Получение промежуточного соединения 4b.4
Стадия 1: Получение промежуточного соединения 4b.2
[00559] К раствору промежуточного соединения 4b.1 (2 г, 11,86 ммоль) в ДХМ (20 мл) добавляли ТЭА (1,99 мл, 14,2 ммоль) и BOC2O (2,717 г, 12,45 ммоль). Продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 5 часов. Неочищенную смесь выливали в воду и экстрагировали ДХМ. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Na2SO4. Указанное в заголовке промежуточное соединение 4b.2 (2 г, 8,61 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 72%.
Стадия 2: Получение промежуточного соединения 4b.3
[00560] К раствору исходного промежуточного соединения 4b.2 (2 г, 7,26 ммоль) в ДМФА (6 мл) добавляли NaN3 (839 мг, 12,91 ммоль) и хлорид аммония (689 мг, 12,91 ммоль). Продолжали перемешивание при 140°С в течение 6 часов. Неочищенную смесь выливали в воду и насыщенный солевой раствор, затем экстрагировали EtOAc при pH=3. Органическую фазу сушили над Na2SO4 и выпаривали под вакуумом. Указанное в заголовке промежуточное соединение 4b.3 (2,2 г, 8,0 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 93%.
Стадия 3: Получение промежуточного соединения 4b.4
[00561] Исходное промежуточное соединение 4b.3 (1,5 г, 5,48 ммоль) перемешивали в течение ночи в 4 М растворе HCl в диоксане (10 мл). Растворитель удаляли под вакуумом. Указанное в заголовке промежуточное соединение 4b.4 (1,14 г, 5,38 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 98%.
Пример 67: Получение промежуточного соединения 5b.2
[00562] К раствору промежуточного соединения 5b.1 (1 г, 6,1 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли NH2CN (0,7 мл, 9,1 ммоль) и HNO3 (0,25 мл, 6,1 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли Et2O. Собирали белый осадок. В результате получали указанное в заголовке промежуточное соединение 5b.2 (1 г, 3,7 ммоль) в виде белого твердого вещества в форме соли с HNO3. Выход 60%.
Пример 68: Получение промежуточного соединения 6b.2
[00563] К раствору промежуточного соединения 6b.1 (1 г, 6,1 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли NH2CN (0,7 мл, 9,1 ммоль) и HNO3 (0,25 мл, 6,1 ммоль). Продолжали перемешивание при кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли Et2O. Собирали белый осадок. Получали указанное в заголовке промежуточное соединение 6b.2 (1,2 г, 4,4 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества в форме соли с HNO3. Выход 72%.
Пример 69: Получение соединения I-43
[00564] К перемешанной суспензии промежуточного соединения 1b.3 (200 мг, 0,85 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA (0,29 мл, 1,7 ммоль) и промежуточное соединение 2b.2 (164 мг, 0,94 ммоль). Продолжали перемешивание при 80 С в течение 4 часов. Неочищенную смесь выливали в воду, подкисляли до рН 3 и экстрагировали EtOAc (320 мл). Неочищенную реакционную смесь очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH (3% для продукта). Указанное в заголовке соединение I-43 (50 мг, 0,13 ммоль) получали в виде желтоватого твердого вещества. Выход 15%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 4,69 (2H), 7,25 (м, 1H), 7,58 (м, 2H), 7,91 (м, 2H), 8,0 (с, 1H), 8,16 (м, 1H), 11,94 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 44,2, 81,8, 117,8, 124,6, 126,1, 126,3, 129,3, 129,9, 130,7, 130,9, 130,9, 133,9, 140,5, 141,1, 154,4, 161,6, 162,1. ВЭЖХ 96,3%.
Пример 70: Получение соединения I-44
Стадия 1: Синтез промежуточного соединения 8b.2
[00565] К раствору промежуточного соединения 8b.1 (195 мг, 0,72 ммоль) и промежуточного соединения 5b.2 (150 мг, 0,72 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляли пиперидин (0,14 мл, 1,45 ммоль). Смесь герметично закрывали в устройстве Q-tube и нагревали при 120°C в течение 16 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду, экстрагировали EtOAc и очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH (5% для продукта). Указанное в заголовке промежуточное соединение 8b.2 (200 мг, 0,39 ммоль) получали в виде коричневатого порошка. Выход 54%
Стадия 2: Синтез соединения I-54
[00566] К раствору промежуточного соединения 8b.2 (150 мг, 0,41 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 1 M раствор NaOH (1,2 мл). Продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Собирали осадок фильтрованием и растворяли его в воде. Доводили рН до 3, добавляя 3 н. раствор HCl. Осадок собирали и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения I-44 (100 мг, 0,295 ммоль) в виде коричневого твердого вещества. Выход 72%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 7,31 (т, J=4,22 Гц, 1H), 7,50 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,72 (д, J=7,48 Гц, 1H), 7,88 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,99 (д, J=4,7 Гц, 1H), 8,25 (м, 2H), 10,1 (с, 1H), 11,9 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 83,5, 117,4, 122,4, 125,3, 125,7, 129,5, 129,6, 131,2, 131,8, 134,3, 137,9, 140,8, 152,5, 161,4, 161,9, 167,3. ВЭЖХ: 98,4%
Пример 71: Получение соединения I-45
Стадия 1: Синтез промежуточного соединения 9b.1
[00567] К раствору промежуточного соединения 8b.1 (990 мг, 0,72 ммоль) и промежуточного соединения 6b.2 (1,18 г, 4,34 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли пиперидин (0,86 мл, 8,68 ммоль). Смесь нагревали при 150°С в течение 16 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду, доводили рН до 3, добавляя HCl (3 н.). Твердое вещество собирали и промывали ацетоном. Указанное в заголовке промежуточное соединение 9b.1 (250 мг, 0,68 ммоль) получали в виде серого порошка. Выход 14%
Стадия 2: Синтез соединения I-45
[00568] К раствору промежуточного соединения 9b.1 (150 мг, 0,41 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 1 М раствор NaOH (1,2 мл). Продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Удаляли растворитель под вакуумом. Твердое вещество суспендировали EtOH (5 мл), обрабатывали ультразвуком и фильтровали. Натриевую соль растворяли в воде со льдом, доводили рН до 3, добавляя 3 н. раствор HCl. Смолистый осадок собирали и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения I-45 (90 мг, 0,21 ммоль) в виде коричневого твердого вещества. Выход 65%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 7,32 (д, J=4,1 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,96 (д, J=8,6 Гц, 2H), 8,0 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,24 (д, J=3,8 Гц, 1H), 10,23 (с, 1H), 11,9 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 83,9, 117,2, 120,5, 120,5, 126,2, 129,7, 130,7, 130,7, 131,3, 134,5, 140,7, 141,9, 152,5, 161,3, 167,2; ВЭЖХ: 95,56%.
Пример 72: Получение соединения I-46
[00569] К раствору промежуточного соединения 1b.3 (100 мг, 0,36 ммоль) в ДМСО (3 мл) добавляли 1,4-транс-аминоциклогексан (51 мг, 0,36 ммоль). Продолжали перемешивание при 80°C в течение 16 часов. Смесь выливали в воду, доводили рН до 3, добавляя HCl (3 н. раствор). Смолистый осадок собирали и сушили под вакуумом. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией, элюируя 15% смесью ДХМ/MeOH и ацетоном вследствие низкой растворимости соединения. Указанное в заголовке соединение I-46 (40 мг, 0,12 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 32%. 1H ЯМР (200 МГц, ДМСОd6) δ 1,34 (м, 4H), 1,92 (м, 4H), 2,20 (шс, 1H), 3,73 (шс, 1H), 7,27 (т, J=4,2 Гц, 1H), 7,61 (с, 1H), 7,91 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,15 (м, 1H), 12,0 (шс, 1H). 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 27,8, 27,8, 31,1, 31,1, 41,7, 41,7, 50,2, 81,05, 118,0, 129,4, 130,7, 133,9, 141,3, 153,9, 161,6, 176,8; ВЭЖХ: 96,3%.
Пример 73: Получение соединения I-47
[00570] К раствору промежуточного соединения 1b.3 (150 мг, 0,53 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли 1,4-цис-аминоциклогексан (76 мг, 0,53 ммоль). Продолжали перемешивание при 80°C в течение 16 часов. В смесь добавляли лед при перемешивании. Твердое белое вещество собирали и затем очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH. Указанное в заголовке соединение I-47 (70 мг, 0,2 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. Выход 38%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 1,71 (м, 8H), 2,4 (шс, 1H), 4,05 (с, 1H), 7,28 (т, J=4,2 Гц, 1H), 7,3 (м, 1H), 7,93 (д, J=4,6 Гц, 1H), 8,18 (д, J=3,23 Гц, 1H), 10,9 (шс, 1H), 12,1 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 24,6, 28,8, 47,6, 48,9, 55,3, 55,3, 81,2, 117,8, 129,4, 130,8, 133,9, 141,2, 153,6, 161,6, 161,7, 176,5; ВЭЖХ: 98,51%.
Пример 74: Получение соединения I-48
Стадия 1: Синтез промежуточного соединения 12b.2
[00571] К раствору исходного промежуточного соединения 1b.3 (400 мг, 1,42 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA (0,36 мл, 2,13 ммоль) и промежуточное соединение 12b.1 (344 мг, 1,7 ммоль). Продолжали перемешивание при 80°C в течение 16 часов. Неочищенную смесь выливали в воду. рН раствора доводили до 3, добавляя HCl (3 н. раствор). Водную фазу экстрагировали EtOAc. Смесь очищали флэш-хроматографией, элюируя смесью ДХМ/MeOH. Указанное в заголовке промежуточное соединение 12b.2 (200 мг, 0,54 ммоль) получали в виде желтоватого порошка. Выход 38%.
Стадия 2: Синтез соединения I-48
[00572] К раствору промежуточного соединения 12b.2 (200 мг, 0,52 ммоль) в MeOH (15 мл) добавляли 1 М раствор NaOH (3 мл). Продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Удаляли растворитель под вакуумом. Натриевую соль растворяли в воде со льдом, доводил рН до 3, добавляя 3 н. раствор HCl. Гелеобразный осадок собирали и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения I-48 (150 мг, 0,42 ммоль) в виде желтоватого твердого вещества после растирания с Et2O. Выход 82%. МС-ИЭР (+) m/z: 353,3 (M+H).
Пример 75: Получение соединения I-49
[00573] К перемешанному раствору промежуточного соединения 1b.3 (150 мг, 0,53 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли промежуточное соединение 3b.6 (120 мг, 0,53 ммоль) и DIPEA (0,46 мл, 2,65 ммоль) и проводили реакцию в смеси при 105C в течение 6 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь выливали в H2O (25 мл) и промывали Et2O (220 мл). К водному раствору добавляли 3,0 М HCl до pH=1 и экстрагировали смесь, используя CH2Cl2/MeOH 9:1 (об./об., 330 мл). Объединенные органические фазы концентрировали при пониженном давлении и очищали неочищенный продукт обращенно-фазовой флэш-хроматографией (H2O/MeCN от 8:2 до 1:9). Собранное соединение с примесями (15 мг) растирали с холодным ацетоном с получением 10 мг чистого соединения I-49 (выход: 5%). МС-ИЭР (-) m/z: 389,4 (M-H). 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 4,25 (с, 2H), 4,55 (д, J=4,74 Гц, 2H), 7,17 (с, 1H), 7,26 (м, 4H), 7,91 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,94 (шс, 1H), 8,16 (д, J=3,3 Гц, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 29,4, 44,3, 81,5, 117,9, 126,5, 127,9, 128,2, 129,1, 129,3, 130,8, 133,9, 136,8, 139,4, 141,1, 154,6, 155,8, 161,6, 162,4; ВЭЖХ: 99,5%.
Пример 76: Получение соединения I-50
Стадия 1: Синтез промежуточного соединения 14b.2
[00574] К раствору промежуточного соединения 1b.3 (200 мг, 0,71 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA (0,18 мл, 1,07 ммоль) и промежуточное соединение 14b.1 (164 мг, 0,85 ммоль). Продолжали перемешивание при 80°С в течение 16 часов. Смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc (320 мл). Смесь очищали флэш-хроматографией, элюируя 1,5% смесью ДХМ/MeOH, с получением продукта. Указанное в заголовке промежуточное соединение 14b.2 (173 мг, 0,43 ммоль) получали в виде желтого твердого вещества. Выход 62%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 1,13 (т, J=7,1 Гц, 3H), 3,63 (с, 2H), 4,02 (к, J=7,0 Гц, 2H), 4,56 (д, J=5,8 Гц, 2H), 7,16 (м, 1H), 7,27 (м, 4H), 7,93 (м, 1H), 7,94 (д, J=4,0 Гц, 1H), 8,17 (д, J=3,8 Гц, 1H), 11,91 (шс, 1H).
Стадия 2: Синтез соединения I-50
[00575] К раствору промежуточного соединения 14b.2 (165 мг, 0,42 ммоль) в EtOH (6 мл) добавляли 1 М раствор NaOH (1,3 мл). Продолжали перемешивание при слабом кипении с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и собирали осадок. Натриевую соль растворяли в воде со льдом, доводили рН до 1, добавляя 3 н. раствор HCl. Осадок собирали и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения I-50 (75 мг, 0,21 ммоль) в виде белого твердого вещества. Выход 49%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 3,55 (с, 2H), 4,57 (д, J=5,8 Гц, 2H), 7,16 (м, 1H), 7,27 (м, 4H), 7,84 (м, 1H), 7,92 (д, J=4,5 Гц, 1H), 8,17 (д, J=3,7 Гц, 1H), 11,73 (шс, 1H), 12,49 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 41,0, 44,3, 81,6, 117,8, 126,3, 128,7, 129,1, 129,1, 129,3, 130,9, 134,0, 135,5, 138,8, 141,1, 154,3, 161,7, 161,9, 173,0; ВЭЖХ: 95,2%.
Пример 77: Получение соединения I-51
[00576] К раствору промежуточного соединения 4b.2 (211,6 мг, 1 ммоль) в ДМСО (5 мл) добавляли DIPEA и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем добавляли раствор соединения 1b.3 в ДМСО. Продолжали перемешивание при 90°С в течение 16 часов. Собирали неочищенный продукт, сушили и очищали флэш-хроматографией, элюируя 6% смесью ДХМ/MeOH, с получением продукта. Указанное в заголовке соединение I-51 получали (25 мг, 0,06 ммоль) в виде желтого твердого вещества после растирания с EtOAc. Выход 7%. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОd6) δ 4,68 (д, J=5,7 Гц, 2H), 7,27 (т, J=4,1 Гц, 1H), 7,60 (д, J=7,7 Гц, 2H), 7,9 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,0 (д, J=7,7 Гц, 2H), 8,18 (д, J=3,6 Гц, 1H), 12,1 (шс, 1H); 13C ЯМР (100 МГц, ДМСОd6) δ 44,2, 53,9, 81,7, 117,8, 123,6, 127,4, 127,4, 128,7, 129,3, 130,9, 134,0, 141,0, 142,2, 154,5, 155,7, 161,6, 162,1; ВЭЖХ: 96,6%.
БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ
Биологический пример 1: Определение ингибирования ACMSD1
[00577] Активность соединений 1-36 как ингибиторов ACMSD1 определяли посредством измерения превращения 3OH-антраниловой кислоты в продукт (т.е. ACMS) в спектрофотометрическом анализе in vitro.
[00578] Предварительную смесь для анализа, состоящую из 3-гидроксиантраниловой кислоты (3OH-HA), 3-гидроксиантраниловой кислоты, 3,4-диоксигеназы (HAO) и диализированного неочищенного экстракта клеток E. coli BL21 (DE3), экспрессирующих рекомбинантный фермент, инкубировали при 25 С, контролируя увеличение поглощения при 360 нм в результате образования ACMS из 3OH-HA. После завершения реакции за ~2 минуты добавляли аликвоту раствора ACMSD1 (полученного и очищенного из дрожжей Pichia Pastoris, сверхэкспрессирующих рекомбинантный фермент), и отслеживали уменьшение поглощения при 360 нм с интервалами в 15 секунд. Влияние концентрации ACMS на активность фермента изучали посредством изменения концентрации 3OH-HA с 2 до 20 мкМ. Параметры кинетики рассчитывали по исходным значениям скорости, используя график Лайнуивера-Берка.
[00579] Скорость уменьшения поглощения, обусловленного ACMSD1, рассчитывали вычитанием значения поглощения в контрольной реакционной смеси без ACMSD из значения поглощения, описанного выше. Единица активности ACMSD означает количество фермента, превращающего 1 ммоль ACMS в минуту при 25 C. Отсутствие или снижение активности ACMSD1 (например, с использованием ингибиторов ACMSD) приводит к медленному самопроизвольному разложению ACMS (т.е. к циклизации с образованием хинолиновой кислоты).
[00580] Ферментативную активность определяли при концентрации HAA 10 мкМ в присутствии соединений из таблицы 1, представленной ниже. Соединения испытывали в концентрации примерно 5 мкМ и 10 мкМ и рассчитывали IC50 для соединений, демонстрирующих ингибирующую активность более 50%. Результаты представлены в таблице 1. В таблице 1 A означает <0,1 мкМ; B означает от 0,1 до 1 мкМ; C означает от 1 до 10 мкМ; и D означает >10 мкМ.
ТАБЛИЦА 1:
IC50 hACMSD
Биологический пример 2: Определение модулирования ACMSD-1 в клетках HEK293T
[00581] Клетки HEK293T (ATCC) высевали в шестилуночные планшеты и трансфицировали, используя Fugene HD, для временной экспрессии ACMSD. Через 24 часа после трансфекции клетки стимулировали на протяжении 48-72 часов различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, и затем лизировали для измерения активности ACMSD посредством измерения превращения 3OH-антраниловой кислоты в продукт (т.е. -амино--карбоксимуконат--полуальдегид, ACMS) в спектрофотометрическом анализе in vitro. Содержание общего белка в клеточных лизатах определяли анализом Бредфорда. Полученное значение использовали для определения удельной активности фермента, нормализованной во всех образцах (мЕд/мл или δE/δt/мг общего белка).
[00582] Известно, что фермент ACMSD-1 экспрессируется в печени, почках и головном мозге; поэтому тестировали доступные клеточные линии для указанных типов клеток для определения уровней экспрессии ACMSD. Авторы изобретения выясняли, экспрессируется ли ACMSD-1 в трансформированных клеточных линиях из печени и почек, таких как HepG2, HEK293T, Hep3B и т.д. Осуществляли трансфекцию ACMSD для экспрессии фермента в условиях различных клеток, таких как COS-7, HEK293T и HepG2. Установлено, что клетки HEK293T являются наилучшей системой с наибольшей выработкой белка, что обеспечивает возможность надежного измерения активности фермента ACMSD1. Вероятно, это обусловлено более эффективной трансфекцией, наблюдаемой в HEK293T.
[00583] После определения оптимального времени стимуляции и протокола трансфекции клетки стимулировали различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли (от примерно 50 нМ до примерно 5 мкМ).
Биологический пример 3: Определение содержания НАД+ в первичных гепатоцитах человека, обработанных соединением согласно настоящему описанию
[00584] Концентрацию или содержание НАД+ определяли в первичных гепатоцитах человека, обработанных соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью. В качестве контрольного образца использовали носитель (NT).
[00585] Проводили по меньшей мере три эксперимента, обрабатывая первичные гепатоциты различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли (0,5 мкМ и 5 мкМ) через 48 часов после посева. Соединения заменяли каждые 24 часа и затем напрямую собирали клетки и лизировали смесью ACN/H2O (соотношение 5:1). Использовали ЖХМС/МС для определения и измерения концентрации/содержания НАД+.
Биологический пример 4: Определение содержания НАД+ в первичных гепатоцитах человека, обработанных соединением согласно настоящему описанию
[00586] Концентрацию или содержание НАД+ определяли в первичных гепатоцитах человека, обработанных соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью, а также известным ингибитором ACMSD, MEHP. В качестве контрольного образца использовали MEHP.
[00587] Проводили по меньшей мере три эксперимента, обрабатывая первичные гепатоциты различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли (0,5 мкМ, 5 мкМ и 50 мкМ) через 48 часов после посева. Соединения заменяли каждые 24 часа и затем напрямую собирали клетки и лизировали смесью ACN/H2O (соотношение 5:1). Использовали ЖХМС/МС для определения и измерения концентрации/содержания НАД+.
Биологический пример 5: Модулирование активности SOD2 в клетках AML-12 и в первичных гепатоцитах мышей
[00588] Измеряли модулирование активности SOD-2 в клетках AML-12 и в первичных гепатоцитах мышей, обработанных соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью.
[00589] Клеточную линию гепатоцитов мышей AML-12 (альфа-клетки печени мышей 12) приобретали у компании ATCC и выращивали при 37C в увлажненной атмосфере из 5% CO2/95% воздуха в среде Игла в модификации Дульбекко в комбинации с питательной смесью F-12 (DMEM/F-12) с добавлением 0,005 мг/мл инсулина, 0,005 мг/мл трансферрина, 5 нг/мл селена, 40 нг/мл дексаметазона и 1% гентамицина. Сначала ингибиторы ACMSD разводили из порошка в ДМСО с получением исходной концентрации 1 мМ. Полученный исходный раствор дополнительно разбавляли водой до концентрации 100 мкМ, которую использовали для обработки клеток.
[00590] Первичные гепатоциты получали от 8-12-недельных мышей C57BL/6J методом перфузии с коллагеназой. Печень мышей опрыскивали сбалансированным солевым раствором Хенкса (HBSS, KCl, 5,4 мМ; KH2PO4, 0,45 мМ; NaCl, 138 мМ; NaHCO3, 4,2 мМ; Na2HPO4, 0,34 мМ; глюкоза, 5,5 мМ; HEPES, 1 M; ЭГТК, 50 мМ; CaCl2, 50 мМ; pH 7,4). Затем промывали печень со скоростью 5 мл/мин. через воротную вену. После промывания печень опрыскивали раствором коллагеназы (0,025%). Оценивали жизнеспособность клеток методом с трипановым синим. Выделенные первичные гепатоциты помещали на планшет в среде DMEM (Gibco), содержащей 10% FCS, 10 единиц на мл пенициллина и HEPES для обеспечения буферных свойств. Клетки выдерживали в культуре при 37°С в увлажненной атмосфере из 5% CO2/95% воздуха. Через 6-8 часов прикрепления клеток среду заменяли средой, содержащей различные концентрации ингибитора ACMSD (т.е. соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли) или соответствующие концентрации ДМСО (в качестве контрольного образца). Первичные гепатоциты собирали примерно через 24 часа, если не указано иное.
[00591] Затем первичные гепатоциты или клетки AML-12 лизировали в 20 мМ буфере HEPES (Gibco), pH 7,2, содержащем 1 мМ ЭГТК (Sigma), 210 мМ маннита (Sigma) и 70 мМ сахарозы (AMRESCO). Концентрацию общего белка определяли анализом Бредфорда (BioRad). Активность SOD-2 определяли в разные моменты времени после обработки ингибитором ACMSD с помощью набора для анализа SOD (Cayman Chemical) по инструкциям производителя. В частности, для определения активности SOD2 в аналитический раствор добавляли 2 мМ цианид калия, который ингибирует и Cu/Zn-SOD, и внеклеточный SOD, в результате чего обнаруживается только активность Mn-SOD (SOD-2). Поглощение измеряли на многоканальном планшетридере Victor X4 (Perkin-Elmer) при 450 нм. Результаты выражали в Ед/мл/мг белка в соответствии со стандартной кривой и измеренной концентрацией белка.
[00592] Стойкость к окислительному стрессу исследовали посредством измерения активности SOD2.
Биологический пример 6: Определение содержания НАД+ в первичных гепатоцитах мышей
[00593] Уровни НАД+ определяли в первичных гепатоцитах человека, обработанных соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью.
[00594] НАД+ экстрагировали методом кислотной экстракции. Образцы собирали и гомогенизировали в 70% ледяной перхлорной кислоте (HClO4). После гранулирования нерастворимых фрагментов белка посредством добавления карбоната калия (K2CO3), образцы разделяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и анализировали с помощью масс-спектрометрии. Белки в гранулах количественно определяли анализом Бредфорда и использовали для нормализации.
[00595] Изучали обработку первичных гепатоцитов ингибитором ACMSD формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью в концентрации 5 нМ, 10 нМ и 50 нМ в течение 24 часов для определения существенного и дозозависимого увеличения внутриклеточных уровней НАД+.
Биологический пример 7: ОТ-кПЦР анализ SIRT1-регулируемых генов в клетках AML-12, клетках Hepa-1.6 и первичных гепатоцитах мышей, обработанных соединением согласно настоящему описанию
[00596] Экспрессию генов ACMSD и генов, которые, как известно, регулируются действием SIRT1 (фермента, который строго зависит от НАД+), например Pgc1a, Sod1, Sod2 (MnSOD), анализировали в клетках AML-12, клетках Hepa-1.6 и первичных гепатоцитах мышей, обработанных соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью.
[00597] Клетки (AML-12, Hepa-1.6, HEK-293, первичные гепатоциты человека и мышей) обрабатывали различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Общую РНК экстрагировали из клеток с помощью TRIzol (Invitrogen) по инструкциям производителя. РНК обрабатывали ДНКазой и использовали 2 мкг РНК для обратной транскрипции (ОТ). Использовали разбавленную 50X кДНК для реакций количественной ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-кПЦР). Реакции ОТ-кПЦР проводили на системе Light-Cycler (Roche Applied Science) и qPCR Supermix (QIAGEN) с указанными праймерами. Для каждой точки биологических данных использовали среднее значение для по меньшей мере трех технических повторений.
[00598] Известно, что дозозависимое увеличение уровня экспрессии мРНК генов регулируется SIRT1 (ферментом, который строго зависит от НАД+), например, Pgc1a, Sod2 (MnSOD), но не Sod1 (Cu-Zn SOD). Первичные гепатоциты мышей обрабатывали в течение 24 часов соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью (диапазон от 5 нМ до 500 нМ) и наблюдали изменения уровней экспрессии и уровней мРНК Pgc1a и Sod2 (MnSOD). Изменения экспрессии мРНК соответствуют активации SIRT1, с последующей индукцией уровней НАД+ вследствие ингибирования активности ACMSD1.
Биологический пример 8: Модулирование активности каспазы 3/7 в клетках MDCK
[00599] Проводили in vitro исследование в клетках MDCK для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на острое повреждение почек.
[00600] Клетки MDCK (MDCK (NBL-2) ATCC CCL-34™) выращивали в базовой среде ATCC, готовой минимальной необходимой среде Игла, № по каталогу 30-2003, с эмбриональной бычьей сывороткой (FBS) до конечной концентрации 10%. 10000 клеток помещали в 96 лунок, и через 24 часа после внесения клеток на планшет меняли среду на свежую среду с добавлением 1% FBS. Затем использовали цисплатин (50 мкМ в течение 16 часов) для инициации клеточного повреждения. Различные концентрации (от примерно 1 мкМ до примерно 125 мкМ) соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли (в 1% ДМСО) добавляли в комбинации с цисплатином или за 1 час до добавления цисплатина.
[00601] Активность каспазы 3/7 (Promega) определяли стандартными способами, считывая люминесцентный сигнал на планшетридере Victor V (PerkinElmer). Каждый эксперимент/условие эксперимента осуществляли в трех повторениях.
[00602] Активность каспазы анализировали как процентный эффект, нормализованный к чистому цисплатину (100%) и к клеткам, обработанным носителем, использованным в качестве образца с 0% активностью каспазы. Данные анализировали с помощью программного обеспечения GraphPad. Для статистических анализов использовали однофакторный дисперсионный анализ (критерий множественного сравнения Даннетта).
[00603] Клетки MDCK обрабатывали различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли.
Биологический пример 9: Цитотоксичность и скрининг hERG
[00604] Цитотоксичность: 20000 клеток HePG2 и AML-12 высевали в 96-луночный планшет (Viewplate, PerkinElmer). Зависимость ответа от дозы соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли определяли с помощью цифрового дозатора HP D300 в диапазоне концентраций от 10 нМ до 300 мкМ с постоянным содержанием ДМСО 1% в среде. Клетки стимулировали в течение 4 часов при 37°С; надосадочный раствор использовали для высвобождения LDH (Cytotox-one, Promega) как меры некроза, лизируя клетки для измерения уровня АТФ для определения клеточной жизнеспособности (Celltiter-glo, Promega) по инструкциям производителя.
[00605] Аналитический набор Predictor hERG (Invitrogen), содержащий препараты мембран из клеток яичников китайских хомячков, стабильно трансифицированных кальциевым каналом hERG и выскоаффинным красным флуоресцентным лигандом канала hERG (меченое соединение), использовали для определения аффинности связывания канала hERG соединениями формулы (I) или их фармацевтически приемлемыми солями. Соединения, которые связываются с белком канала hERG (конкурирующие соединения), идентифицировали по их способности вытеснять меченое соединение, обусловливающей уменьшение флуоресцентной поляризации. Конечную концентрацию ДМСО в каждой лунке поддерживали при 1%. Анализы проводили по протоколу производителя (Invitrogen).
Биологический пример 10: Антидиабетический эффект у мышей C57BL/6J и KK-Ay
[00606] Тест на переносимость глюкозы проводили на самцах мышей C57BL/6J и KK-Ay для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на уровни глюкозы и инсулина.
[00607] Самцов мышей C57BL/6J и KK-Ay возрастом 6-7 недель приобретали, например, у компаний Charles River Laboratories (Франция) и CLEA (Япония), соответственно. Начиная с 8-недельного возраста мышам давали стандартный корм (CD-Harlan 2018), корм с высоким содержаниемжиров (HFD-Harlan 06414). Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль смешивали с HFD в количестве 180 мг.кг-1 корма. В пересчете на суточный прием корма это обеспечивает суточную дозу примерно 15 мг.кг-1 массы тела. Мышей оставляли без корма за 4 часа до сбора крови и тканей для выделения РНК, измерения липидов и гистологии. Потребление кислорода измеряли на приборе Oxymax (Columbus Instruments). Проводили гистологический анализ и анализ просвечивающей электронной микроскопии.
[00608] Пероральный тест толерантности к глюкозе проводили на животных, выдержанных без корма в течение ночи. Глюкозу вводили через зонд в дозе 2 г/кг. Интраперитонеальный тест толерантности к инсулину проводили на животных, выдержанных без корма в течение 4 часов. Инсулин вводили инъекцией в дозе 0,75 Ед/кг массы тела. Глюкозу количественно измеряли с помощью глюкометра Maxi Kit 4 (Bayer Diagnostic) или Glucose RTU (bioMerieux Inc.) и измеряли концентрации инсулина в плазме с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (Cristal Chem Inc.). Статистическое различие определяли с помощью дисперсионного анализа или t-критерия Стьюдента.
Биологический пример 11: Антидиабетический эффект и влияние на ожирение у мышей db/db с мутацией LepR
[00609] Проводили исследование антидиабетического эффекта соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей у мышей с генетическим ожирением Leprdb /J (db/db).
[00610] Животных разводили и содержали в условиях с контролируемой температурой и влажностью, в соответствии с протоколами FELASA. С трехнедельного возраста мышам давали корм с высоким содержанием жиров (HFD) (Harlan 06414). Большинство фармакологических исследований начинали на восьминедельных мышах db/db с диабетом или на контрольных животных дикого типа (wt).
Субхроническое вмешательство
[00611] Мышам db/db один раз в сутки между 5 и 6 часами вечера, до наступления фазы темноты (6 часов вечера) вводили соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль на протяжении 14 дней. Образцы крови собирали через 4 часа после прекращения доступа мышей к корму, до введения первой дозы и через 18 ± 2 часа после последней дозы. Определяли концентрации глюкозы в каждом образце крови.
Острое воздействие глюкозы
[00612] Исходные образцы крови брали случайным образом у мышей db/db, имевших свободный доступ к корму, в интервале с 6 до 8 часов утра, после наступления световой фазы (6 часов утра), затем вводили соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли, ограничивали доступ к корму и брали второй образец крови через 4 часа после введения препарата. Затем на мышах проводили пероральный тест толерантности к глюкозе (OGTT1: 1 г глюкозы/кг массы тела) и определяли концентрации глюкозы в крови через 0,5, 1, 2, 3 и 4 часа после каждой глюкозной нагрузки.
Эугликемический гиперинсулинемический клэмп-тест
[00613] Мышам db/db в яремную вену вставляли постоянный катетер под анестезией с кетамином/ксилазином. Через шесть-семь дней (после 6 часов утра) прекращали доступ к корму. Мышей в сознании помещали в фиксатор для крыс завышенного размера и согревали с помощью грелок. Затем концы катетера соединяли со шприцами в насосах CMA402 (Axel Semrau, Шпроккхефель, Германия). Через 110 минут первичной непрерывной инфузии [3-3H]глюкозы (1,85 кБк/мин) брали образец крови для определения концентраций инсулина, глюкозы и[3-3H]глюкозы в плазме и для расчета исходной скорости выработки эндогенной глюкозы. Затем мышам через зонд вводили носитель или соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль.
[00614] Затем через зажим глюкозы-1 начинали инфузию [3-3H]глюкозы (3,7 кБк/мн), содержащей инсулин (36 пмоль/кг*мин-1; HumulinR, Лилли, США), создавая умеренное нетто-увеличение концентрации инсулина в плазме. Концентрации глюкозы в крови измеряли каждые 10 минут и достигали требуемого уровня гликемии посредством регулирования скорости инфузии 20% глюкозы (GIR). На 120 минуте внутривенно вводили 2-дезокси-D-[1-14C]глюкозу (370 кБк). Образцы крови брали на 30, 60, 90, 100, 110, 120, 122, 125, 130 и 140 минуте. Затем мышей усыпляли (т.е. посредством внутривенной передозировки кетамина/ксилазина). Собирали икроножные мышцы и эпидидимальную жировую ткань, сразу подвергали мгновенной заморозке в жидком азоте и хранили при -80°C. Из ткани экстрагировали 2-[14C]дезоксиглюкоза-6-фосфат и рассчитывали степень усвоения глюкозы (Rg).
[00615] Радиоактивность [3H] и [14C] в плазме определяли в освобожденной от белков плазме после выпаривания [3H2O]. Потоки глюкозы в исходных условиях и в интервале 60-90 минут и 90-120 минут в «глюкозных тисках» оценивали следующим образом: скорость исчезновения глюкозы во всем организме (Rd) = [3-3H]GIR (распадов в минуту)/удельная активность [3-3H]глюкозы в плазме (распадов в минуту*моль); исходное значение эндо-Ra=[3-3H]GIR (распадов в минуту)/удельная активность [3-3H]глюкозы в плазме (распадов в минуту*моль); значение эндо-Ra в «глюкозных тисках» = GIR˗Rd. Сцинтилляционный коктейль Ultima-Gold, радиоизотопы и Tri-Carb2910TR приобретали у компании Perkin Elmer (Германия).
Анализ крови, плазмы, мочи
[00616] Образцы крови брали из боковых хвостовых вен. Глюкозу в крови измеряли глюкометром (Contour, Bayer Vital, Германия), глюкозу в моче и плазме измеряли колориметрическим анализом глюкозы Glucose LabAssay (Wako, Германия), а также с помощью HbA1c с A1cNow+ (Bayer Vital) или анализатора Clover (Inopia, Южная Корея).
Анализ начала заболевания и выживания
[00617] Начало заболевания определяли как последний день индивидуальной пиковой массы тела перед постепенным снижением массы. Стадии заболевания определяли следующим образом: раннюю стадию заболевания определяли как продолжительность времени между пиковой массой тела и потерей 10% от пиковой массы тела. Позднюю стадию заболевания определяли как продолжительность времени между потерей 10% от пиковой массы тела до конечной стадии заболевания. Конечную стадию заболевания определяли как день, когда животное уже не могло за 30 секунд встать после укладывания его на бок в течение трех последовательных испытаний. На конечной стадии заболевания животных усыпляли.
Измерение состава тела
[00618] Массу тела измеряли один раз в неделю в течение по меньшей мере 13 недель. Для указанного возраста вырезали бурую жировую ткань (BAT) и гонадную белую жировую ткань (WAT). Общую тощую массу, % WAT и BMD (минеральная плотность костной ткани) определяли с помощью DEXA (PIXImus DEXA; GE).
Косвенная калориметрия, потребление пищи и активность
[00619] Сначала животных взвешивали и оставляли привыкать к экспериментальной клетке. Измеряли объем кислорода (VO2) и объем вырабатываемого диоксида углерода (VCO2) каждые 20 минут с помощью системы для всестороннего наблюдения лабораторных животных (CLAMS) (Columbus Instruments) и записывали как среднее значение VO2 в час, нормализованное к массе тела (мл/ч/кг). С помощью прибора CLAMS одновременно измеряли степень активности, подсчитывая количество прерываний инфракрасного луча, а также потребление пищи. Более конкретно, потребление пищи измеряли вычитанием массы гранул порошкообразного корма в конце эксперимента из исходной массы в начале эксперимента. Чтобы дополнить описанный эксперимент и контролировать новые условия, которые могут повлиять на пищевое поведение, авторами изобретения также проведен более «ручной» эксперимент, в котором кормовые гранулы заданной массы каждый день в одно и то же время помещали в чистую клетку, в которой жила мышь. На следующий день записывали массу оставшихся гранул и вычитали из начальной массы. Описанный эксперимент проводили на протяжении 14 дней подряд. Ежедневно записывали также массу тела каждой мыши. Результаты, полученные для каждого генотипа, аналогичны результатам, полученным с помощью CLAMS.
Статистический анализ.
[00620] Принимая статистически значимое значение 1-, превышающее 0,9, авторы изобретения изначально оценивали соответствующее количество групп из пробных исследований. Проводили однофакторный или двухфакторный дисперсионный анализ (тесты полученных результатов Бонферрони) или t-тесты.
Биологический пример 12: Влияние на неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) у мышей
[00621] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) у самцов C57BL/6J, принимавших корм с высоким содержанием жиров и с высоким содержанием сахарозы.
[00622] Самцов мышей C57BL/6J (The Jackson Laboratory, Бар-Харбор, штат Мэн, США) содержали с циклом 14 часов света - 10 часов темноты при 21-23°С и обеспечивали свободный доступ к воде в течение всего эксперимента. С 6-недельного возраста мышам давали корм ‘Western’ HF-HSD с 44,6% ккал, получаемых из жира (из которых 61% насыщенных жирных кислот), и 40,6% ккал, получаемых из углеводов (главным образом, из сахарозы, 340 г/кг корма) (TD.08811, корм с 45% ккал из жиров, Harlan Laboratories Inc., Мэдисон, штат Висконсин, США), или нормальный корм (NCD) в качестве контрольного образца (V1534-000 Ssniff R/M-H, Ssniff Spezialdiäten GmbH, Зост, Германия). Затем животным вводили соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, или контрольный агент на протяжении 4, 12 или 20 недель (n=8 на группу для каждой точки времени), после чего их усыпляли.
[00623] Массу тела и потребление корма контролировали один раз в неделю, в тот же день. После успокоения с помощью пентобарбитала натрия (интраперитонеальная инъекция, 50 мг/кг массы тела) анализировали общую массу жира с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA) (денситометр PIXImus, Lunar Corp., Мэдисон, штат Висконсин, США). Интраперитонеальный тест переносимости глюкозы (IPGTT) проводили у мышей, не имевших доступа к корму в течение 6 часов. Уровни глюкозы в хвостовой вене измеряли глюкометром Bayer Contour непосредственно до (точка времени 0 мин) и через 15, 30, 60, 90 и 150 минут после введения глюкозы (1 г глюкозы/кг массы тела). Инсулинорезистентность рассчитывали, используя индекс гомеостатической модели оценки резистентности к инсулину (HOMA-IR): (инсулин натощак (нг/мл) глюкоза натощак (мг/дл))/405.
Усыпление
[00624] Через 6 часов голодания мышей анестезировали пентобарбиталом натрия (интраперитонеальная инъекция, 50 мг/кг массы тела) и усыпляли, сливая кровь пункцией сердца. Плазму получали центрифугированием крови (6000 об/мин в течение 5 минут при 4°С), которую собирали в гепаринизированные шприцы. Ткани либо подвергали мгновенной заморозке в жидком азоте или хранили при -80°С вместе с плазмой для дальнейших биохимических и молекулярных анализов, либо консервировали для гистологического анализа.
Гистологические анализы
[00625] Образцы печени стандартным образом фиксировали в забуференном формалине (4%) и заливали в парафин. Серийные срезы толщиной 4 мм окрашивали с помощью H&E и пикросириуса красного для оценки фиброза. Замороженные срезы печени окрашивали масляным красным O для оценки накопления липидов. Все биописийные образцы печени анализировал патологоанатом, специализирующийся на печени, не информированный об условиях питания или хирургическом вмешательстве. Стеатоз, активность и фиброз полуколичественно оценивали в соответствии с критериями Сети центров клинических исследований НАСГ. Степень стеатоза (процент гепатоцитов, содержащих жировые капли) оценивали как 0 (<5%), 1 (5-33%), 2 (>33-66%) и 3 (>66%). Баллонирование гепатоцитов оценивали как 0 (отсутствие), 1 (несколько) или 2 (много клеток/явное баллонирование). Очаги лобулярного воспаления оценивали как 0 (отсутствие очагов), 1 (<2 очагов на 200 поле), 2 (2-4 очага на 200 поле) и 3 (>4 очагов на 200 поле). Фиброз оценивали как фиброз стадии F0 (без фиброза), стадии F1a (легкая, зона 3, перисинусоидальный фиброз), стадии F1b (умеренная, зона 3, перисинусоидальный фиброз), стадии F1c (портальный/перипортальный фиброз), стадии F2 (перисинусоидальный и портальный/перипортальный фиброз), стадии F3 (мостовидный фиброз) и стадии F4 (цирроз). Диагностика НАСГ основана на принятых гистологических критериях. Тяжесть заболевания оценивали с использованием NAS (оценки активности НАЖБП) как невзвешенную сумму оценок стеатоза, баллонирования гепатоцитов и лобулярного воспаления. Процент фиброза количественно определяли морфометрией из оцифрованных срезов, окрашенных сириусом красным, с использованием системы Aperio после настройки порога обнаружения фиброза под визуальным контролем. Результаты выражены как площадь, пропорциональную коллагену.
Биологический пример 13: Влияние на неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) у мышей с дефицитом метионина и холина
[00626] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на неалкогольную жировую болезнь печени (НАЖБП) и неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) у самцов мышей дикого типа, принимавших корм с дефицитом метионина и холина.
[00627] Использовали мышей дикого типа, которых содержали с циклом 12 часов освещения/темноты, со свободным доступом к корму и воде. В каждой точке времени анализировали по меньшей мере 5 животных. Все эксперименты повторяли по меньшей мере три раза. Для изучения влияния питания 8-12-недельным самцам мышей массой 25 г обеспечивали доступ к корму с дефицитом метионина и холина (MCD для инициации НАСГ) или к обычному корму (в качестве контрольного образца). Эксперименты на животных и оценку НАЖБП и НАСГ проводили так, как описано выше в примере 55 для мышей, которым обеспечивали корм с высоким содержанием жиров и с высоким содержанием сахарозы.
Биологический пример 14: Влияние на атеросклероз у мышей с нокаутом LDL-R, получавших корм с высоким содержанием холестерина
[00628] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на атеросклероз у мышей с нокаутом LDL-R, получавших корм с высоким содержанием холестерина.
[00629] Мышей с нокаутом LDL-R (KO) подвергали обратному скрещиванию в течение десяти поколений с линией C57BL/6J с получением конгенных животных C57BL/6J. Используемые контрольные животные во всех экспериментах являются однопометниками. Животным вводили соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, или контрольный агент. Мышей усыпляли через 12 недель после начала атерогенной диеты (TD94059; Harlan), после чего сердце и аорту перфузировали, используя PBS, и затем фиксировали (Shandon Formal Fixx, Thermo Scientific). Атеросклероз оценивали по окрашиванию корня аорты масляным красным О и количественно определяли с помощью программного обеспечения MetaMorph. Биохимические параметры измеряли с помощью соответствующих наборов в COBAS C111 (Roche). Для in vivo исследования липополисахаридов (LPS) мышам интраперитонеально вводили инъекцию 100 мг LPS и брали кровь из хвостовой вены. Уровни TNF количественно определяли с помощью твердофаного иммуноферментного анализа TNF Ready-SET-Go! (eBioscience). Количество кровяных клеток определяли с помощью Advia2120 (Siemens Healthcare Diagnostics).
[00630] Для расчета статистической значимости использовали t-критерий Стьюдента. В случае многофакторного тестирования (т.е. сравнения более чем двух групп) перед указанным тестом проводили дисперсионный анализ. Статистически значимым считали значение P<0,05. Результаты выражали как среднее значение ± СОС.
Биологический пример 15: Влияние на врожденное митохондриальное заболевание у мышей Sco2KO/KI
[00631] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на врожденное митохондриальное заболевание у мышей Sco2KO/KI.
[00632] Анти-COI, анти-COX5a, анти-Ndufa9, анти-SDH-HA и анти-Core 2 приобретали у компании Invitrogen; анти-GAPDH приобретали у компании Millipore; анти-FoxO1 и анти-ацетилированный-FoxO1 приобретали у компаний Cell Signaling и Santa Cruz, соответственно. Антимышиные вторичные антитела приобретали у компании Amersham. Химические реагенты приобретали у компании Sigma. Олигонуклеотиды приобретали у компании PRIMM, Италия.
[00633] Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли растворяли в воде и добавляли в стандартный порошкообразный корм (Mucedola, Италия) в соответствующей концентрации, 50 мг/кг/сутки. Гранулы, содержащие соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли, или носители, разводили вручную и хранили в замороженном состоянии при -20°С до использования. Корм меняли каждые три дня, и каждый раз оттаивали только необходимое количество, и обеспечивали свободный доступ к корму в течение одного месяца. Мышей Sco2KO/KI содержали в помещении с контролируемой температурой и влажностью, с 12-часовым циклом освещения/темноты и свободным доступом к воде и корму. Животных усыпляли смещением шейного позвонка.
Морфологический анализ
[00634] Для гистохимического анализа ткани замораживали в изопентане, предварительно охлажденном жидким азотом. Серии срезов толщиной 8 мм окрашивали для определения COX и SDH.
Биохимический анализ комплексов MRC
[00635] Образцы квадрицепсов хранили в жидком азоте и гомогенизировали в 10 мМ фосфатном буфере (рН 7,4) и измеряли спектрофотометрическую активность cI, cII, cIII и cIV, а также CS, в соответствии с описанием. Следует отметить, что все блоки с активностью cII умножены на 10 для наглядности.
Определение НАД+
[00636] НАД+ экстрагировали методом кислотной и щелочной экстракции, соответственно. Тканевый НАД+ анализировали масс-спектрометрически, как описано ранее.
Биологический пример 16: Влияние на врожденное митохондриальное заболевание у делеторных мышей
[00637] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на врожденное митохондриальное заболевание у делеторных мышей.
[00638] Модель делеторных мышей создана на конгенном фоне C57BL/6 и охарактеризована ранее (Tyynismaa et al., 2005); мыши WT являются однопометниками той же конгенной линии мышей C57BL/6J. Самцы делеторных или WT мышей получали нормальный корм (CD) или соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с CD в соответствующей концентрации. Гранулы корма получали вручную, смешивая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль с порошкообразным кормом, как описано в примере 58 для мышей Sco2KO/KI, и хранили при -20°C. Мышей содержали в стандартном помещении для животных с циклом освещения/темноты по 12 часов. Они имели свободный доступ к корму и воде. Группа до проявления состояла из 12 делеторных и 12 WT мышей, а группа после проявления состояла из 24 делеторных и 24 WT мышей, которым вводили соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, либо корм CD. Во время вмешательства стандартным образом контролировали массу мышей, прием пищи и физическую выносливость. Способность к физическим нагрузкам измеряли дважды с помощью теста упражнений на тредбане (Exer-6M Treadmill, Columbus Instruments) в начале и в конце периода приема указанного рациона. Протокол теста с физической нагрузкой состоял из первоначальной скорости бега 7 м/с, которую увеличивали каждые 2 минуты на 2 м/с и продолжали до тех пор, когда животное уже не могло бежать или несколько раз падало с ленты у места раздражителя.
[00639] Потребление кислорода и выработку диоксида углерода, а также самопроизвольное движение и пищевое поведение записывали на системе для всестороннего наблюдения лабораторных животных (CLAMS; Columbus Instruments, штат Огайо, США). Мышей содержали в отдельных клетках внутри камеры CLAMS на протяжении 3 дней; в первый день и ночь, составившие период выравнивания, записи не вели, затем осуществляли 24-часовую запись при термонейтральности (+30°С). Результаты потребления O2 и выработки CO2 использовали для расчета скорости дыхательного газообмена и анализировали по отдельности в светлую (неактивную) и темную (активную) часть суток.
Морфологический анализ
[00640] Срезы ткани получали из квадрицепсов, печени и бурой жировой ткани (BAT). Образцы заливали компаундной средой для заливки OCT (Tissue-Tek) и подвергали мгновенной заморозке в 2-метилбутане в жидком азоте. Замороженные срезы (12 мкм) из квадрицепсов одновременно анализировали на in situ гистохимическую активность COX и сукцинатдегидрогеназы (SDH). Рассчитывали активности на срезах квадрицепсов, COX-негативных и COX-негативных плюс SDH-позитивных, а также на нормальных волокнах. Из каждого мышиного образца подсчитывали приблизительно 2000 волокон. Интенсивность гистохимической активности COX из квадрицепсов для оксидативных и неоксидативных волокон измеряли с помощью программного обеспечения Image J. Замороженные срезы (8 мкм) из печени и BAT окрашивали масляным красным O. Для пластической заливки образцы квадрицепсов, печени и BAT фиксировали в 2,5% глутаральдегиде, обрабатывали 1% тетраоксидом осмия, дегидратировали в этаноле и заливали в эпоксидную смолу. Полутонкие (1 мкм) срезы окрашивали метиловым синим (0,5% мас./об.) и борной кислотой (1% мас./об.). Интересующие области для ультраструктурного анализа выбирали посредством осмотра срезов под световым микроскопом. Для просвечивающей электронной микроскопии ультратонкие (60-90 нм) срезы разрезали на решетках и окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца, и визуально изучали с помощью просвечивающего электронного микроскопа. Содержание крист в BAT и мышцах определяли по электронным микрофотографиям, используя «внутримитохондриальную измерительную палочку» размером 1 мкм, расположенную перпендикулярно кристе. Образцы скелетных мышц также анализировали на активность цитратсинтетазы.
Биологический пример 17: Влияние на заболевание почек
[00641] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на заболевание почек у мышей C57BL/6J WT. (Wei, Q., et al., “Mouse model of ischemic acute kidney injury: technical notes and tricks” American Journal of Physiology-Renal Physiology, 303(11), F1487-F1494)
[00642] Мышей C57BL/6J WT приобретали у компании Charles-River. Всем мышам обеспечивали доступ к стандартному коммерческому корму при содержании при температуре окружающей среды 20-22°C с относительной влажностью 50 ± 5% с циклами освещения-темноты 12/12 часов в специальном помещении без патогенов. Экспериментальные мыши были 8-недельными, и их разделяли на четыре группы: (1) контроль (n=5); (2) цисплатин (20 мг/кг; Sigma Chemical, Сент-Луис, штат Миссури; n=5); (3) соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль и цисплатин (n=5); и (4) соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль в чистом виде (40 мг/кг; n=5). Дозу и время введения цисплатина для инициации нефротоксичности выбирали в соответствии с опубликованным способом. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль вводили перорально один раз в сутки на протяжении 4 дней. Цисплатин вводили однократной инъекцией через 12 часов после первого введения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Мышей усыпляли через 72 часа после однократной инъекции цисплатина.
Анализ маркеров почечной функции и провоспалительных цитокинов
[00643] Для анализа почечной функции выделяли сыворотку и хранили при -80°С до использования. Уровни креатинина и АМК в сыворотке измеряли с помощью аналитического набора по инструкциям производителя (BioVision, Милпитас, штат Калифорния). Кроме того, количественно измеряли провоспалительные цитокины TNF-, IL-1b и IL-6 в сыворотке или в гомогенатах почечной ткани с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (набор Quantikine; R&D Systems, Миннеаполис, штат Миннесота) по инструкциям производителя. Для измерения цитокинов почечную ткань гомогенизировали в фосфатно-солевом буферном растворе, содержащем 0,05% Tween-20. Использовали аликвоты, содержащие 300 мг общего белка. Для сбора мочи для анализа уровня цитокинов в моче использовали метаболическую клетку. Размер выборки для каждой группы равен пяти.
Альтернативное исследования влияния на заболевание почек
[00644] Альтернативно, мышей C57BL/6J WT нумеровали и выдерживали 5-7 дней для акклиматизации до начала эксперимента. (Wei, Q., et al. “Mouse model of ischemic acute kidney injury: technical notes and tricks”, American Journal of Physiology-Renal Physiology, 303(11), F1487-F1494). Мышей случайным образом разделяли на различные группы лечения по массе их тела. Различные группы выдерживали на корме Harlan 2916. Затем мышей выдерживали на соответствующих диетах в течение 10 дней до двухстороннего ишемического повреждения почек. Массу тела измеряли один раз при рандомизации и один раз на 7 день. Потребление корма определяли однократно на 7 день. Кровь собирали посредством ретроорбитальной пункции под легкой изофлурановой анестезией и использовали для анализа исходного уровня азота мочевины в крови (АМК) на 9 день.
[00645] Мышей анестезировали кетамином (80 мг/кг, i.p.) и/или ксилазином (10 мг/кг, i.p.) и помещали на операционную платформу в положении лежа на спине. Обе почки обнажали через боковые разрезы, и пережимали ножки почек сосудистыми зажимами на 25 минут. Затем снимали зажим и зашивали область оперативного вмешательства. После закрытия раны внутрибрюшинно вводили 1 мл физиологического раствора для предотвращения обезвоживания. В группе с имитацией операции проводили аналогичные хирургические операции, за исключением того, что не применяли окклюзионный зажим. За животными наблюдали до выхода из наркоза и возвращения в их домашнюю клетку. У животных ежедневно проверяли общие клинические признаки, симптомы и смертность.
[00646] В предпоследний день животных по отдельности помещали в метаболические клетки на 12 часов и собирали мочу для определения мочевины, креатинина, натрия и калия.
[00647] На 12, 14 и 16 дни собирали кровь ретроорбитальной пункцией под легкой изофлурановой анестезией, а плазму использовали для анализа уровней азота мочевины в крови (АМК) и креатинина в сыворотке. Затем животных усыпляли посредством ингаляции CO2 и собирали органы. Одну почку фиксировали в 10% нейтральном забуференом формалине, а другую подвергали мгновенной заморозке в жидком азоте, хранили при -80°C и использовали для оценки перекисного окисления липидов, уровней GSH, KIM1, MPO, NGAL и SOD.
Гистологический анализ и подсчет нейтрофилов
[00648] Почки мышей фиксировали в 4% формальдегиде и заливали в парафиновый воск. Срезы толщиной 5 мм депарафинизировали в ксилоле и регидратировали градуированными концентрациями этанола. Окрашивание с применением H&E и PAS осуществляли по стандартным протоколам. Записывали и анализировали изображения с помощью светового микроскопа (IX71, Olympus, Токио, Япония) с программным обеспечением анализатора DP (DP70-BSW, Токио, Япония). Канальцевое повреждение в срезах почек, окрашенных PAS, изучали под световым микроскопом и оценивали на основании процента кортикального канальцевого некроза: 0=нормальный, 1=1-10, 2=11-25, 3=26-45, 4=46-75 и 5=76-100%. Слайды оценивали слепым методом и выражали результаты как средние значения ± СО для 10 репрезентативных полей на одну группу. Для классификации образцов использовали критерий тяжести канальцевого некроза, отображающий потерю проксимальной щеточной каймы канальца и образование мочевых цилиндров. Размер выборки для каждой группы составлял 10. Инфильтрацию нейтрофилов количественно оценивали на ткани, окрашенной PAS, привлекая для этой работы патологоанатома, специализирующегося на почках, который проводил подсчет количества нейтрофилов на одном поле зрения под большим увеличением (х400). Для каждого слайда подсчитывали по меньшей мере 10 полей на внешней кайме наружной медуллы.
[00649] Все значения представлены как среднее ± СО. Использовали однофакторный дисперсионный анализ для расчета статистической значимости результатов в сех анализов, и статистически значимыми считали значения P < 0,05.
Биологический пример 18: Влияние на острое повреждение почек, вызванное ишемией/реперфузией
[00650] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на острое повреждение почек, вызванное ишемией/реперфузией (И/Р-индуцированное) у мышей CD-1 (ICR).
[00651] Мышей CD-1 (ICR) приобретали у компании Charles River Laboratory (Уилмингтон, штат Массачусетс). Мышей содержали в условиях с контролируемой температурой и влажностью с циклом освещения-темноты 12:12 часов, и обеспечивали свободный доступ к стандартному корму для грызунов (TekLad, Мэдисон, штат Висконсин) и питьевой воде.
[00652] Мышам делали разрез по средней линии спины, и обе почечные ножки зажимали на 45 минут зажимами для микроаневризмы (00396-01; Fine Science Tools, Фостер Сити, штат Калифорния). После удаления зажима осматривали почки на предмет восстановления кровотока. Животных оставляли восстанавливаться и усыпляли их через 48 часов после реперфузии. Один раз в сутки мышам вводили 100 мг/кг соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли через желудочный зонд. Мышей CD-1 делили на четыре группы: (1) молодые мыши с имитацией повреждения (n=4) (возраст 6-7 недель); (2) молодые мыши с И/Р повреждением (n=8); (3) взрослые мыши с имитацией повреждения (n=4) (возраст 20-24); и (4) взрослые мыши с И/Р повреждением (n=11). Еще 27 взрослых мышей (возраст 20-24 недель) случайным образом делили на две группы: 13 мышей получали соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, а остальные 14 мышей получали носитель в качестве контрольного образца.
[00653] Уровень креатинина в сыворотке измеряли с помощью набора для анализа креатинина QuantiChrom (DICT-500, BioAssay Systems, Хейвард, штат Калифорния). Измерение АМК осуществляли с помощью стабильного жидкого реагента для измерения (азота) мочевины Infinity (TR12421; ThermoTrace, штат Виктория, Австралия).
Оценка почечной ткани
[00654] Почки фиксировали в 4% параформальдегиде, заливали в парафин и окрашивали гематоксилином и эозином (толщина 4 мм). Повреждение канальцев оценивали по шкале от 0 до 4 на основании процента канальцев с некрозом, дилатацией или набуханием клеток: 0, менее 5%; 1, 5-25%; 2, 25-50%; 3, 50-75%; и 4, более 75%. Все поля зрения под большим увеличением (х400) в коре и наружной медулле патологоанатом оценивал слепым методом.
[00655] Все значения выражены как среднее значение ± СО. Статистический анализ осуществляли с помощью GraphPad Prism 4.00 (Сан-Диего, штат Калифорния) с непарным t-критерием Стьюдента для двух наборов данных, а также дисперсионным анализом с поправкой Бонферрони для нескольких групп. Значение P<0,05 считали достоверным.
Биологический пример 19: Влияние на острое повреждение почек, вызванное цисплатином
[00656] Проводили исследование для определения влияния соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей на острое повреждение почек, вызванное цисплатином, у мышей C57BL6.
[00657] Мышей C57BL6 приобретали у компании Charles River Laboratory (Уилмингтон, штат Массачусетс). Мышей содержали в условиях с контролируемой температурой и влажностью с циклом освещения-темноты 12:12 часов, и обеспечивали свободный доступ к стандартному корму для грызунов (TekLad, Мэдисон, штат Висконсин) и питьевой воде.
[00658] Мышам делали разрез по средней линии спины, и обе почечные ножки зажимали на 45 минут зажимами для микроаневризмы (00396-01; Fine Science Tools, Фостер Сити, штат Калифорния). Вводили интраперитонеальную инъекцию цисплатина, 20 мг/кг массы тела. Животных оставляли восстанавливаться и усыпляли их через 48, 72 и 96 часов после инъекции цисплатина. Один раз в сутки мышам вводили 100 мг/кг соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли через желудочный зонд. Мышей C57BL6 делили на четыре группы: (1) молодые мыши с имитацией повреждения (n=4) (возраст 6-7 недель); (2) молодые мыши с повреждением, вызванным цисплатином (n=8); (3) взрослые мыши с имитацией повреждения (n=4) (возраст 20-24); и (4) взрослые мыши с повреждением, вызванным цисплатином (n=11). Еще 27 взрослых мышей (возраст 20-24 недель) случайным образом делили на две группы: 13 мышей получали соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, а остальные 14 мышей получали носитель в качестве контрольного образца.
[00659] Уровень креатинина в сыворотке измеряли с помощью набора для анализа креатинина QuantiChrom (DICT-500, BioAssay Systems, Хейвард, штат Калифорния). Измерение АМК осуществляли с помощью стабильного жидкого реагента для измерения (азота) мочевины Infinity (TR12421; ThermoTrace, штат Виктория, Австралия).
Оценка почечной ткани
[00660] Почки фиксировали в 4% параформальдегиде, заливали в парафин и окрашивали гематоксилином и эозином (толщина 4 мм). Повреждение канальцев оценивали по шкале от 0 до 4 на основании процента канальцев с некрозом, дилатацией или набуханием клеток: 0, менее 5%; 1, 5-25%; 2, 25-50%; 3, 50-75%; и 4, более 75%. Все поля зрения под большим увеличением (х400) в коре и наружной медулле патологоанатом оценивал слепым методом.
[00661] Все значения выражены как среднее значение ± СО. Статистический анализ осуществляли с помощью GraphPad Prism 4.00 (Сан-Диего, штат Калифорния) с непарным t-критерием Стьюдента для двух наборов данных, а также дисперсионным анализом с поправкой Бонферрони для нескольких групп. Значение P < 0,05 считали достоверным.
Биологический пример 20: Влияние на острое повреждение почек, вызванное сепсисом
[00662] Проводили исследование для определения эффекта соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей против острого повреждения почек, вызванного сепсисом, у мышей C57BL6 (возраст 12-15 недель).
[00663] Мышей C57BL6 приобретали у компании Charles River Laboratory (Уилмингтон, штат Массачусетс). Мышей содержали в условиях с контролируемой температурой и влажностью с циклом освещения-темноты 12:12 часов, и обеспечивали свободный доступ к стандартному корму для грызунов (TekLad, Мэдисон, штат Висконсин) и питьевой воде. Сепсис индуцировали лигированием и пункцией слепой кишки (CLP). Ниже описана процедура CLP: нижнюю часть живота брили, очищали 70% этанолом и выполняли лапаротомия на 1 см, в результате чего идентифицировали и выводили наружу слепую кишку. Измеряли слепую кишку от илеоцекального клапана до кончика, лигировали на отметке ~50%, прокалывали один раз (насквозь) иглой 21 размера и возвращали в брюшную полость после сцеживания с целью выдавливания фекальных масс. Затем брюшную стенку закрывали лоскутами с помощью непрерывного шовного материала Silk 4-0. Контрольным животным проводили такую же лапаротомию, идентификацию и экстернализацию слепой кишки, но без лигирования или прокалывания. Затем животным подкожно вводили 1 мл физраствора и бупренорфина в загривок шеи и укладывали на термоодеяла под наблюдением. Животным вводили ампициллин сульбактам (250 мг/кг каждые 12 часов IP в течение 3 дней) и анальгетики (0,05 мг/кг бупренорфина в течение 3 дней).
[00664] Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль вводили в два различных момента времени: A. В момент CLP (ранняя фаза); и B. Через 24 часа после CLP посредством IP инъекции.
[00665] Кровь и почечную ткань собирали во время усыпления для измерения первичных и вторичных конечных точек.
[00666] Первичная конечная точка (через 48 часов): креатинин в сыворотке. Вторичные конечные точки (через 48 часов) включают: Маркер фенотипа макрофагов (краситель IF), NGAL в плазме, маркеры воспаления в плазме и почках (IL-6, IL-18, TNF) и маркеры почечного повреждения (KIM-1, NGAL, TIMP2 и IGFBP7). Дополнительные конечные точки включают: гибель клеток (IF: аннексин V и йодид пропидия; каспаза 3/7), аутофагия, биогенез (PGC-1, митохондриальная ДНК), OXPHOS (активность комплекса I, III, IV), экспрессия Sirt1 и Sirt3, AMPK (общая, P-AMPK), P-ACC и HIF-1.
Гистологический анализ
[00667] Почки мышей фиксировали в 4% формальдегиде и заливали в парафиновый воск. Срезы толщиной 5 мм депарафинизировали в ксилоле и регидратировали градуированными концентрациями этанола. Окрашивание с применением H&E и PAS осуществляли по стандартным протоколам. Записывали и анализировали изображения с помощью светового микроскопа (IX71, Olympus, Токио, Япония) с программным обеспечением анализатора DP (DP70-BSW, Токио, Япония). Канальцевое повреждение в срезах почек, окрашенных PAS, изучали под световым микроскопом и оценивали на основании процента кортикального канальцевого некроза: 0=нормальный, 1=1-10, 2=11-25, 3=26-45, 4=46-75 и 5=76-100%. Слайды оценивали слепым методом и выражали результаты как средние значения ± СО для 10 репрезентативных полей на одну группу. Для классификации образцов использовали критерий тяжести канальцевого некроза, отображающий потерю проксимальной щеточной каймы канальца и образование мочевых цилиндров. Размер выборки для каждой группы составлял n=6 на группу в группах 2, 4-9; и n=3 для группы 1, всего 45. Оценку канальцевого повреждения использовали для оценки защиты против повреждения почек.
Биологический пример 21: Влияние на уровень фосфорилирования FoxO1
[00668] Клетки AML-12 обрабатывали различными концентрациями соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли в течение 24 часов. Затем клетки лизировали в лизисном буфере (50 мМ Tris, 150 мМ KCl, ЭДТК 1 мМ, NP40 1%), содержащем ингибиторы протеазы и фосфатазы, и анализировали с помощью ДНС-ПААГ/вестерн-блоттинга. Блокирование и инкубацию антител осуществляли в 5% молоке. Каждый присутствующий белок обнаруживали с помощью его специфического антитела. Тубулиновое антитело приобретали у компании Sigma Inc, антитела FoxO1 и фосфо-FoxO1 (Ser256) приобретали у компании Cell Signaling. Реакции обнаружения антител проводили с помощью усиленной хемолюминесценции (Advansta, штат Калифорния, США), используя рентгеновские пленки.
[00669] При отсутствии иного определения, все технические и научные термины, использованные в данном документе, имеют то же значение, которое обычно подразумевается специалистом в той области техники, к которой относится настоящее изобретение. В настоящем описании формы единственного числа включают также формы множественного числа, если из контекста очевидно не следует иное. Несмотря на то, что при практическом осуществлении или испытании настоящего изобретения могут быть использованы те же или эквивалентные способы и материалы, описанные в настоящем документе, ниже описаны подходящие способы и материалы. Все публикации, патентные заявки, патенты и другие ссылки, упомянутые в данном контексте, в явном виде включены в настоящий документ посредством ссылки. Ссылки, цитированные в данном контексте, не являются предшествующим уровнем техники для заявленного описания. В случае противоречий следует руководствоваться настоящим описанием, включая определения. Кроме того, представленные материалы, способы и примеры являются лишь иллюстративными и не являются ограничивающими.
ЭКВИВАЛЕНТЫ
[00670] Специалистам в данной области техники понятны, или с применением не более чем стандартных экспериментов могут быть установлены многочисленные эквиваленты конкретных вариантов реализации и способов, описанных в настоящем документе. Такие эквиваленты считаются входящими в объем настоящего описания.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ГЕТЕРОАРИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2013 |
|
RU2644558C2 |
| МОДУЛЯТОРЫ АНДРОГЕНОВОГО РЕЦЕПТОРА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2797622C2 |
| ИНГИБИТОРЫ АЛЬДОЗОРЕДУКТАЗЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2017 |
|
RU2795195C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(1-ОКСОИЗОИНДОЛИН-2-ИЛ)ПИПЕРИДИН-2,6-ДИОНА И ВАРИАНТЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2795850C2 |
| ПИРРОЛОПИРРОЛОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ В КАЧЕСТВЕ АКТИВАТОРОВ ПИРУВАТКИНАЗЫ (PKR) | 2018 |
|
RU2736217C2 |
| АМИДЫ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ | 2014 |
|
RU2658920C2 |
| СПОСОБЫ И МАТЕРИАЛЫ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ УРОВНЕЙ ПОЛИПЕПТИДА ФАКТОРА ТРАНСКРИПЦИИ EB | 2020 |
|
RU2838857C2 |
| КОНДЕНСИРОВАННЫЕ БИЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ | 2015 |
|
RU2741387C2 |
| ПИРИДОНАМИДЫ В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ | 2014 |
|
RU2808424C2 |
| НЕЙРОАКТИВНЫЕ 19-АЛКОКСИ-17-ЗАМЕЩЕННЫЕ СТЕРОИДЫ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ С ИХ ПРИМЕНЕНИЕМ | 2013 |
|
RU2663665C2 |
Изобретение относится к соединениям, представленным формулой (II):
или их фармацевтически приемлемой соли или таутомеру, где:
X представляет собой O или OH;
W представляет собой N;
L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p-;
Y1 представляет собой S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H;
R7 представляет собой A или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rтетразол,
C представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил, причем указанный арил замещен одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена и OH;
Rc представляет собой H или -CN;
Rd представляет собой CF3, -(C(R6)2)tC6-C10 арил;
Rf представляет собой H;
Rj отсутствует;
каждый m, p, q и r независимо равен 0, 1 или 2;
каждый t равен 1 или 2; и
представляет собой простую связь или двойную связь, которые способны ингибировать активность декарбоксилазы полуальдегида α-амино-β-карбоксимуконовой кислоты (ACMSD), которые пригодны для предупреждения и/или лечения заболеваний и расстройств, связанных с нарушениями биосинтеза НАД+, например, метаболических расстройств, нейродегенеративных заболеваний, хронических воспалительных заболеваний, заболеваний почек и заболеваний, связанных со старением. В настоящей заявке также описаны фармацевтические композиции, применение указанных соединений в качестве лекарственного средства. 26 н. и 28 з.п. ф-лы, 1 табл., 98 пр.
1. Соединение, представленное формулой (II):
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, где:
X представляет собой O или OH;
W представляет собой N;
L представляет собой -(C(R5)2)mY1(C(R5)2)p–;
Y1 представляет собой S;
R1 отсутствует или представляет собой C6-C10 арилен;
каждый R5 в каждом случае независимо представляет собой H;
каждый R6 в каждом случае независимо представляет собой H;
R7 представляет собой A или C;
A представляет собой -(C(R6)2)rтетразол,
C представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил, причем указанный арил замещен одним-тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена и OH;
Rc представляет собой H или -CN;
Rd представляет собой CF3, -(C(R6)2)tC6-C10 арил;
Rf представляет собой H;
Rj отсутствует;
каждый m, p, q и r независимо равен 0, 1 или 2;
каждый t равен 1 или 2; и
представляет собой простую связь или двойную связь.
2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что Rc представляет собой Н.
3. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что Rc представляет собой -CN.
4. Соединение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что Rd представляет собой -CF3.
5. Соединение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что Rd представляет собой -(C(R6)2)rC6-C10 арил.
6. Соединение по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что R1 представляет собой C6-C10 арилен.
7. Соединение по любому из пп. 1-5, отличающееся тем, что R1 отсутствует.
8. Соединение по любому из пп. 1-7, отличающееся тем, что R7 представляет собой A.
9. Соединение по любому из пп. 1-7, отличающееся тем, что R7 представляет собой C.
10. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой C6-C10 арилен и R7 представляет собой A.
11. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 отсутствует и R7 представляет собой C.
12. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранные из группы, состоящей из:
13. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер, выбранные из группы, состоящей из:
14. Фармацевтическая композиция, способная ингибировать активность декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли и по меньшей мере один из фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя или вспомогательного вещества.
15. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли.
16. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли.
17. Способ по любому из пп. 15 или 16, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
18. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что почечное нарушение представляет собой острое повреждение почек (ОПП) или хроническую болезнь почек (ХБП).
22. Способ ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества одного или более соединений по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли, что обеспечивает увеличение внутриклеточного никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
23. Соединение по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства, обладающего ингибирующей активностью в отношении декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
24. Соединение по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
25. Соединение по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
26. Соединение по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для ускорения окислительного метаболизма.
27. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с дисфункцией декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
28. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
29. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
30. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для ускорения окислительного метаболизма.
31. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с модуляцией декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
32. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
33. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
34. Применение соединения по любому из пп. 1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для производства лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
35. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, ингибируемого декарбоксилазой α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию указанного заболевания или расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 14.
36. Способ лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+), включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем НАД+, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 14.
37. Способ по любому из пп. 35 или 36, отличающийся тем, что указанное заболевание представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из первичного билиарного цирроза (PBC), церебросухожильного ксантоматоза (CTX), первичного склерозирующего холангита (PSC), медикаментозного холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, связанного с парентеральным питанием (PNAC), холестаза, связанного с чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), болезни «трансплантат против хозяина», связанной с трансплантацией печени, регенерации печени живого донора трансплантата, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочного злокачественного заболевания, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза и дефицита альфа-1-антитрипсина.
38. Способ лечения расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 14.
39. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указанное расстройство, связанное с митохондриальной дисфункцией, представляет собой наследственное митохондриальное заболевание, общее метаболическое расстройство, нейродегенеративное заболевание, расстройство, связанное со старением, почечное нарушение или хроническое воспалительное заболевание.
40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что общее метаболическое расстройство представляет собой ожирение или диабет II типа.
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что почечное нарушение представляет собой острое повреждение почек (ОПП) или хроническую болезнь почек (ХБП).
42. Способ лечения ускорения окислительного метаболизма, включающий введение субъекту, страдающему или предрасположенному к развитию метаболического расстройства, терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 14.
43. Фармацевтическая композиция по п. 14 для применения в качестве лекарственного средства, обладающего ингибирующей активностью в отношении декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
44. Фармацевтическая композиция по п. 14 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
45. Фармацевтическая композиция по п. 14 для применения для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
46. Фармацевтическая композиция по п. 14 для применения для ускорения окислительного метаболизма.
47. Применение фармацевтической композиции по п. 14 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с модуляцией декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
48. Применение фармацевтической композиции по п. 14 для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
49. Применение фармацевтической композиции по п. 14 для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
50. Применение фармацевтической композиции по п. 14 для ускорения окислительного метаболизма.
51. Применение фармацевтической композиции по п. 14 для в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного с модуляцией декарбоксилазы α-амино-β-карбоксимуконат-ε-полуальдегида (ACMSD).
52. Применение фармацевтической композиции по п. 14 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска заболевания или расстройства, связанного со сниженным уровнем никотинамид-аденин-динуклеотида (НАД+).
53. Применение фармацевтической композиции по п. 14 в производстве лекарственного средства для лечения, предупреждения или снижения риска расстройства, связанного с митохондриальной дисфункцией.
54. Применение фармацевтической композиции по п. 14 в производстве лекарственного средства для ускорения окислительного метаболизма.
| WO 2018125983 A1, 05.07.2018 | |||
| WO 2016030534 A1, 03.03.2016 | |||
| DATABASE REGISTRY [Online], CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, Retrieved from REGISTRY; STN, Database accession no | |||
| Способ определения модуля упругости материала | 1981 |
|
SU954850A1 |
