Способ определения трофической активности планктонных организмов Советский патент 1983 года по МПК G01N33/52 A01K67/00 

Ф

СО Изобретение относится к гидробиологии и может быть использовано в водной токсикологиил экологии и рыбо водстве. Известен способ определения биоло гической активности фитопланктонных организмов путем дифференциального окрашивания после патогенного воздействия i 3« Однако этот способ не обеспечивае высокой точности измерения, требует много времени и является трудоемким Известен способ оценки токсичност химических веществ для водных органи мов путем предварительной экспозиции тест-объектов в условиях гипоосмотической нагрузки с последующим выдерживанием в опытной и контрольной средах С 2 3 Этот способ также является трудоемким, требует много времени и не обеспечивает высокой точности измерения. Наиболее близким техническим.:решением к предложенному является спо СО& определения трофической активнос ти планктонных организмов, включающий их выдерживание в темноте, посл дующее освещение прерывистым светом с длиной волны 600-670 нм и измерение интенсивности замедленной флу|Оресцендии .31, Однако известный, способ не обеспечивает высокой точности измерений Целью изобретения является повышение точности измерения. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения трофической активности планктон ных организмов, включающему их выдерживание в темноте, последующее освещение прерывистымсветом с длиной волны 600-670 нм и измерение интенсивности замедленной флуоресценции, используют планктонные орга низмы в концентрации 1000-20000 кле ток/мл в экспоненциальной фазе роста, а перед освещением вносят орга низМы-фитофаги, выдержанные без кор ма в течение 1-3 сут в количестве 1-10 особей на 1 мл культуры планк тонных организмов, и по снижению сигнала замедленной флуоресценции определяют трофическую активность. Пример 1. Берут культуру хлореллы в экспоненциальной фазе ро та в концентрации 8000 клеток/мл, помещгиот в кварцевые кюветы объемом 5 мл, выдерживают в темноте 10 мин, в каждую кювету вносят фитофаги (да нии) , вьадержанные без корма в течение 1 сут в количестве 20 ocoбeйi Кюветы с организмами освещают в камере фосфороскопа прерывистым свето длиной волны 630 нм и измеряют замедленную флуоресценцию в течение 10 с через каждые 10 мин на протяжении 40 мин. Величина дафний составляет 9 мин. Пример 2. То же, что в примере 1, но берут культуру хлореллы в концентрации 20000 клеток/мл, выдержанную в темноте 15 мин, вносят в кюветы по 50 дафний, освещают светом с А 670 нм и измеряют сигнал замедленной флуоресценции в течение 60 мин. Величина БТ составляет 12 мин.. Пример 3. То же, что в примере 1, но концентрация хлореллы составляет 1000 клеток/мл, выдержка в темноте 5 мин, количество вносимых дафний 5 особей, Л 600 нм, длительность измерения 30 мин. Величина ЕТдо равняется 11 мин. Пример 4.То же, что в примере 1, но концентрация хлореллы составляет 35000 клеток/мл, выдержка в темноте 20 мин, количество дафний 75 особей, Л 700 нм, длительность измерения 100 мин, ЕТ не поддается точному графическому определению в связи с тем, что снижение сигнала замедленной флуоресценции во времени носит нелинейный характер из-за внесения погрешности в сигнал за счет флуоресценции самих дафний, присутствующих в большом количестве в единице объема. П р и N(L е р 5. То же, что в примере 1, но концентрация хлореллы составляет 5000 клеток/мл, выдержка в темноте 2 мин, количество дафний 2 особи, Л 580 нм, длительность (измерения 15 мин. Величина ЕТ равняется 34 мин. При указанных экспериментальных условиях продолжительность опыта увеличивается более чем в 3 раза.,. .Пример 6. То же, что в примере 1, но дафнии перед внесением в кварцевую кювету экспонируют в присутствии поверхностно-активного вещества в концентрации 10 мг/л. Величина ETj.Q равняется .600 мин, что указывает на подавление трофической активности дафний в 66 раз . Предложенный способ можно использовать для оценки нарушения трофич(еской активности планктонных фитофагов под влиянием.любых физико-химических факторов, в том числе и загрязняющих примесей типа ртути, мышьяка и др., а также для выявления скрытых сублетательных эффектов По сравнению с известными предложенный способ требует значительно меньших затрат квалифицированного труда и времени (минуты вместо суток). Кроме того, его отличает более высо31029079

кая точность, так как он учитывает рые вносят значительные погрешности выедание только живой взвеси и не ре при измерении остальными спосогистйирует косные компоненты, кото- бами..

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОфЙЧЕСКСЛ АКТИВНОСТИ ПЛАНКТОННЫХ ОРГАНИЗМОВ, включакщий их вьщерживание в темноте, последуюй ее освещение преptiiBHCTbiM светом с длинвй волны 600670 нм и измерение интенсивности замешенной флуоресценции, о т л ичающийся. тем, что, с повышения точности, использу|рт планктонные организмы в концентрация 1000-20000 клеток/мл в экспоненциальной фазе роста, а перед освещением вносят организмы-фитофаги, выдержанные без корма в течение; 1-3 сут. в количестве 1-10 особей на 1 мл культуры планктонных организмов, к по снижению сигнааа замедленной флуоресценции определяют .трофическую I активность., л с