Способ экстракорпоральной детоксикации организма Советский патент 1984 года по МПК A61M1/03 

Од

1

;о

СП

4 Изобретение относится к медицине, в частно ти к гепатологии и токсикологии, и может быть использовано при лечении заболеваний и токсических поражениях печени с целью комле сации ее утраченных функций. Известен способ экстракорпоральной детокси кации организма путем использования взвеси изолированных клеток печеии, отделенных от крови полупроиицдемш мембраной 1. Однако .известный способ не всегда и не везде может быть использован в силу своей сложности, обязательного наличия сложного оборудования, т. е. центров, где имеются annaiраты искусственная почка, перитонеального диализа. Кроме того, не всегда возможно провести вмешательство на брюшной полости (это перитонеальш ш диализ), так как имеется спаечный процесс в брюшной полости, которые ограш1чивак т возможность проведения этой операции. Значит перитонеальный диализ имеет свои ограничения и не всегда может быть .использован для лечения больных с острой печеночнсж недостаточностью. При и щользовании этгих способов клеточная взвесь аллогенной печени применяется всего лишь раз и затем выбрасывается. Поэтому способ требует большо го количества заготовки биологического матери ала и запаса клеточной взвеси. Цель изобретения - повторное использование клеток печени. Указанная цель достигается тем, что согласно способу экстракорпоральной детоксикаоди орга низма путем использования взвеси изолированных клеток печени, отделеннь1х от крови полупроницаемой мембраной, взвесь изолированных клеток печени и питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,0-1,2 см , сформированные гранулы вносят в колонку, заполненную кровезаменителем, пропускают через нее кровь, по окончании перфузии гранулы отмывают Ч помещают в питательную среду для хранения. Способ осуществляют следующим образом. Взвесь изолированных клеток печени (полученную ферментно-механическим способом) разводят в среде 199 до концентрации 210 (20 млн/мл), заполняют ими .с.точной градуировкой и системой гибких сили коновых . Одновременно-Проводят подго товку полупроницаемой целлофановой пленки, рассекают ее на определенной формы квадраты, которые первоначально помещают в физиологический раствор, а затем переносят в раствор диоцида .1:2000 с последующим промьшанием дастиллированной водой. Участок пленки как бы надевают на конец силиконового шланга и, отступив на 1 см от его конЦа, накладьшают лигатуру, после чего в эту полость вводят 1 м клеточной взвеси и, затягивая шгатуру, удаляют силиконовый шланг. Избыток пленки и шовHojro материала удаляют. Готовят 250-300 гранул и помещают их во флакон со средой 199. Производя забор необходимого количества гранул, заполняют ими колонку, через которую проводят перфузию крови. Для этих целей вьщеляют сосуды (артерию и вену) и катетеризируют для формирования артериовенозного шунта. Колонку с гранулами подключают к шунту таким образом. Чтобы артериальная кровь в колонку поступала снизу вве|рх, заполняя ее на всем протямсенди, и выходила через верхнюю канюлю, которая соединяется с венозной системой. Перфузию продолжают в течение 2 ч со скоростью 100-120 мл/мин. Затем колонку отключают от шунта и кровь возвращается в систему. После этого осуществляют промывку колонки и гранул и последние помещают на 1-2 сут в среду 199. Этим самым П) создаем все условия для восстановления их запасов и ф)нкций, так как они находятся в культуральНйй среде, где есть все необходимые метаболиты.для их восстановления и обеспечения жизнеспособности. Следовательно, клет-. ки могут восстановить свой метаболический балансИ могут быть использованы повторно для детоксикации крови. Кроме того, клетки i находящиеся в гранулах (они подвергались обработке токсическими веществами), могут повышать свои детоксикационные свойства, как -бы тренируясь - отрабатывая свою детоксикационную функцию. Метаболизируя многие вещества, синтезируя многие ферменты и метаболиты, клетка как бы приближена в данных условиях к объекту действия, т. е. биолошчес КИМ средам, и будет значительно больше влиять на процессы восстановления равновесия биологической среды, так как она находится в малых объемах . Поэтому процессы диффузии и осмоса, ультрафильтрации будут осуществляться между гранулами- и средой зна штельно быстрее, чем Б системе аппарата Искусственная почка. После сохранения клеток в среде 199. их вновь помещают в колонку, последшою подключают к артериовенозному шунту и проводят перфузию в течение 1,5-2,0 ч. Затем колонку и гранулы промывают раствором Хенса и последние помещают в среду 199. Через 1-2 сут Гранулы вновь используютдля операии детоксикации организма. Таким образом, ранулы используют 3-5 раз для детоксикации крови и организма по указанной методике, Проведены операции подключения колонки гранулами у 3 больных 6 отравленными Cltt и печеночно-почечной недостаточностью. артериовенозному шунту подключают KortoHу объемом 350 мл, которую заполняют граулами и кровезаменителем так, чтобы-артерильная KjWBb заполняла ее снизу. Отток крови

регулируют уровнем подъема крлонки (40-60 см) и скоростью кровотока. Перфузию проводят в течение 1,5-2,0 ч. Во время проведения операции осуществляют клиническое наблюдение а больными и через 30-60 мин забор крови :5

для биохимического исследования. В результате проведения операции установлено, что у больн1 1Х улучшается общее состояние (сознание, АД, Р1, частота дыхания), больные становятся контактными, отвечают на вопросы. При биохимическом 10 контроле уменьшается концентрация токсических веществ на. 50-60% (аммиак, билирубин) и . повышается концентрация некоторых метаболитов на 20-40% (мочевина, холестерин). Все это . позволяет сделать вывод о благоприятном тече- is НИИ клинико-лабораторных тестов контроля у

больных и благоприятном влиянии проводимой . операции, что оказьшает существенное влияние на исход заболевания.

Способ найдет широкое пртменение в отделе-; ниях интенсивной терапии для лечения острой печеночной недостаточности при поражениях печени, использование его обеспечивает многократное эффективное применение взвеси изолированных клеток печени, оказьшает влияние на степень детокСицируемой и метаболической функции изолированных клеток. Прсщесс o6pkзсюания гранул позволяет успешно отделить клетки от крови и предупредить анфилактические реакции и в то же время приблизил их к объекту действия - биологическим жидкостям.

СПОСОБ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОЙ ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА путем использования взвеси изолированнь1х клеток печени, отделенных от крови полупроницаемой мембраной, отличающийся тем, что, с .Целью повторного использования клеток печени, взвесь изолированных клеток печени в питательной среде помещают в замкнутые оболочки из полупроницаемой мембраны объемом 1,01,2 см , сформированные гранулы вносят в колонку, заполненную кровезаменителем, про. пускают через нее кровь, по окончании перфузсш гранулы отмывают и помещают в питательную среду для хранения.