Способ получения фибринолитически активного сырья Советский патент 1986 года по МПК A61K35/14 

Изобретение относится к медицине и может использоваться для получения лечебного препарата тромболитического действия.

Целью изобретения является повышение выхода и специфической активности фиб- ринолитически активного сырья.

Способ поясняется следующим примером.

Заготовку «цельной крови от внезапно умерших осуществляют в соответствии с действуюш.ей инструкцией. Для этого, при соблюдении всех правил хирургической асептики и антисептики, в операционной производят кожный разрез на шее трупа, выделяют сосудистый пучок и в яремную вену вставляют две стеклянные канюли: У-образ- ную по направлению к голове и прямую - к сердцу. Обе канюли фиксируют в вене прочными лигатурами. Противоположный конец каждой канюли заблаговременно соединен с отводящими резиновыми трубками, свободный конец которых соединен с иглами из нержавеющей стали, которыми прокалывают пробки стерильных флаконов. Труп переводят в положение Транделенбурга, и кровь (1,0-1,5 л) самотеком истекает во флаконы, содержащие цитрат натрия. Таким образом осуществляют заготовку «цельной фибринолитически активной крови от внезапно умерших людей. В последующем стол с трупом переводят в горизонтальное по- лохсение. На трубки, соединенные с канюлями, вставленными в яремную вену, накладывают зажимы, а в общую сонную артерию вводят отдельно стеклянную канюлю, соединенную через резиновую трубку с пер- фузионным аппаратом, который заполняется стандартной промывной жидкостью следующего состава, г: сахароза 800; глюкоза (50; цитрат натрия двухамещенный 35; суль- фацил натрия 10; риванол 0,1; вода для инъекций до 10 л. В качестве перфузионного устройства используется аппарат для искусственного кровообращения, имеющий перистальтический насос, датчики давления, приспособления для автоматизированного нагревания и поддержания заданной темпера

туры промывного раствора. Далее зажимы с трубок от яремной вены снимают, включают перистальтический насос, и подогретый до 50-55° С «промывной раствор под пульсирующим давлением 180/16-160/ /НО мм рт. ст. нагнетают в сонную артерию. После введения 9-12 л промывного раствора через 15-20 мин из яремной вены получают 5-8 л перфузата, который истекает в стандартные стерильные флаконы для

крови.

Полученный пергЬузат подвергают центрифугированию при 3000 oft/мин в течение 20-30 мин при . Надосадочную жидкость отсасывают, ох.чаждаю д О С з реакторе и затем медленно при постоянно.м перемешивании добавляют предвэрителыю охлажденный до -10°С 53%-ный зтано.1 до конечной концентрации 17-20%, рН смеси доводят до 6,9--7,1 добавлением 0,5 н NaOH, Смесь постепенно охлаждают от -4 до - 6°С и оставляют при такой температуре на 6-12 ч. Осадок отделяют центрифугированием при 5000 об/мин в течение 30 мин при температуре от -3 до -5 С, подвергают лиофилизации или сохраняют Б замороженном состоянии от -20 до -ЗО С

до его использования. В дальнейшем осадок, содержащий концентрат ферментов фибри- колиза, подвергают обработке для получения тромболитического средства в соответствии с известным методом.

Получаемое фибринолитически активное

сырье представляет собой обогащенную бега- -глобулинами фракцию плазмы крови внезапно умерших людей. В нативном виде это пастообразная масса белого цвета, после лиофилизации - порошок. Это сырье обладает выраженной фибринолитической активностью, что позволяет использовать его для получения фибринолитического препарата. Активаторная фибринолитическая активность полученного сырья составляет 1-2 ФЕ/мг, что эквивалентно 250-500 МЕ/г

стрептазы. От одного трупа можно заго- товить 6000-12000 ФЕ ( млн .E стрептазы).