Способ определения степени тяжести сердечной недостаточности у больных с ревматическим пороком сердца Советский патент 1986 года по МПК G01N33/92 

Изобретение относится к кардиологии, в частности к диагностике сердечной недостаточности.

Цель изобретения - повышение точности диагностики сердечной недостаточности.

Способ осуществляют следующим образом.

Производят биохимическое обследование пробы крови пациента. Определяют общее содержание жирных кислот, соотношение фракций жирных кислот (насыщенных, мононенасыщенных, полиненасыщенных) и глицерина, и по величине отношения жирных кислот к глицерину, и по величине индекса ненасыщенности по сравнению с нормой определяют степень тяжести сердечной недостаточности и контролируют эффективность лечения.

Содержание жирных кислот неуклонно нарастает, а содержание глицерина падает по мере утяжеления сердечной недостаточности. Величина отношения жирные кислоты /глицерин увеличивалась от 102 у здоровых людей до 270 при третьей стадии сердечной недостаточности.

По мере нарастания сердечной не- достаточности существенно нарастает относительное содержание полиненасыщенных жирных кислот и уменьшается содержание насыщенных жирных кислот. Индекс нeнacьш eннocти увеличивается от 3,6 у здоровых людей до 6,4 у бо-. льных третьей стадией сердечной недостаточности.

При сердечной недостаточности у больных с ревматическими пороками сердца уже на ранних стадиях недостаточности кровообращения выявляют изменения содержания жирных кислот, глицерина, которые определяют как синдром нарушения их утилизации,

Примеры, Больной К-н, 26 лет Диагноз: ревматизм, неактивная фаза, ревматический митральньй порок сердца: стеноз левого атриовентрикулярно- го отверстия, недостаточность клала- нЬв аорты. Порок выявлен с 1979 г,, клинических признаков сердечной недостаточности нет. Диагноз установлен на основании клинического исследования: характерной аускультативной кар-55 к 0,2 мл сыворотки добавляют 5 мл

тины сердца, записи ЭКГ, фонокардио- граммы. эхокардиограммы, рентгенологического исследования сердца, лег- . ких, подтвердившего отсутствие недо0

5

0

5

0

0 5

0

статочности по-малому кругу, Перефе- рических отеков нет. Печень не увеличена, т,е, нет застойных явлений по большому кругу кровообращения.

Проводят определение содержания жирных кислот ЖК, фракций жирных кислот, глицерина по следующим методикам,

А, Определение содержания жирных кислот в сыворотке крови. Для этого 0,2 мл сыворотки крови больного переносят в пробирку с притертой пробкой, в которую предварительно наливают . 0,3 мл дистиллированной воды. Добавляют 2,5 мл экстракционной смеси (4 объема изопропанола, 1 объем гептана и 0,1 объема н, раствора серной кислоты), перемешивают, Через 5 мин прибавляют . 1 мл дистиллированной воды и 1,5 мл гептана, затем энергично взбалтывают. Через несколько минут на- намечается гептанова я фаза - около

2.2мл, 1 мл этой фазы переносят в бюкс с притертой пробкой, осторожно добавляют 1 мл индикаторного раствора (4,5 мг натриевой соли метилрота в 100 мл изопропанола), Колориметрируют на фотоэлектроколориметре ФЭК-56 М

в кюветах 5 Mrt на сине-зеленом светофильтре (490 нм) относительно пробы, составленной из равных частей индикаторного раствора и гептана. По найденной экстинции в единицах оптической плотности строят график калибровочной кривой. Калибровочную кривую строят, используя 1 мл стандартного раствора пальмитиновой кислоты (51,8 мл пальмитиновой кислоты растворяют в 100 мл гептана) со следующими концентрациями: 0,05; 0,1; 0,2;

9.3мэкв на 1 мл гептана и обрабатывают их как пробу. По построенной таким образом калибровочной кривой ведут отсчет количества жирных кислот (неэстерифицированных), которое после умножения на 2,2 дает их содержание

пробе в мэкв/л,

Б, Исследование фракций высших жирных кислот.

Методику проводят в несколько этапов. Приготовление экстрак;тов, Липи- ды экстрагировали из сыворотки крови спирто-эфирной смесью 1:3, Для этого

предварительно нагретой спирто-эфир- ной смеси, экстракт фильтруют, К фильтрату добавляют 0,05 мл 10%-ного спиртового раствора едкого калия.

31280547д

тщательно встряхивают и ставят в во- В, Определение содержания глицеридяную баню на 45 мин для гидролиза.на крови,

В присутствии щелочи жирные кислоты, В центрифужную пробирку с 2,25 мл образующиеся при расщеплении жиров,3%-ной трихлоруксусной кислотой вно- нейтрализуются с образованием солей. 5сят 0,25 мл цельной крови. Центрифу- К сухому остатку прибавляют 5 мл ди-гируют 10 мин при 5000 тыс. об/мин, стилированной воды (растворение солейЗатем супернатант переносят в 2 про- жирных.ислот), 0,2 мл концентриро-бирки: в первую - 0,5 мл супернатанта ванной соляной кислоты. Жирные кисло-и проводят определение содержания глю- ты экстрагируют 5 мл петролейного JOкозы орто-толуидиновым способом, во эфира в течение суток в холодильнике,вторую чистую пробирку, помещенную в Затем петролейный эфир с растворенны-водяную баню, вносят 1 мл супернатан- ми жирными кислотами (верхняя фаза)та, прибавляют 0,5 мл смеси заранее отсасывают и выпаривают на водянойприготовленной из 0,2 М молярного ра- бане (в ультратермостате при 80°С). 15створа перйодат натрия и 1 н,раствора Жирные кислоты из сухого остаткасерной кислоты в отношении 1:4, переэкстрагируют 3-4 каплями петролейногомешивают и записывают время окислите- эфира и микропипеткой переносят нальной реакции. Через 15 мин, для пре- хроматографическую бумагу, предвари-кращения этой реакции и удаления не- тельно активированную. Предваритель- 20прореагировавшего перйодата прибавля- ная обработка бумаги.ют 0,2 мл 1 М раствора арсенида натрия

Размер полос хроматографическойи тщательно перемешивают. После исбумаги марки Б-скорая 300 на 135 см.чезновения желтой окраски от ёьщелйвДля удаления солей тяжелых металловшегося йода (5-7 мин) прибавляют

бумагу обрабатывают 0,5%-ным-раство- 0,1 мл 5%-ного феррицианида калия,

ром трилона Б в 50%-ном растворе ук-перемешивают, вносят 1 мл 0,4%-ного

сусной кислоты в течение 30 мин. За-раствора фенилгидразина, вновь перетем тщательно отмывают водой 2ч,мешивают и записывают время начала

высушивают и пропитывают 8%-ным раст-колориметрической реакции. Через

вором вазелинового масле в бензоле. -3020 мин прибавляют 2,3 мл 4 н. раствора соляной кислоты, перемешивают и

Процесс хроматографии. Разделение gpgg 3 мин, применяя зеленый свето- фракций жирных кислот проводят в гер-фильтр и 10 мм кюветы, определяют метичной стеклянной камере. Системуоптическую плотность с помощью фоторастворителей (96%-ная уксусная кис- 35электроколориметра ФЭК-56 М, сравни- лота, 851-ная муравьиная кислота ивая розовую окраску исследуемого ра- дистиллированная вода; в соотношении створа с дистиллированной водой. Из 75:25:2,5) помещают в специальной ло-полученной оптической плотности вычи- дочке, расположенной в верхней частитают экстинцию, соответствующую фак- камеры. Край бумаги со стороны линии 40тическому содержанию глюкозы. Для оп- старта погружают в лодочку, разделе-ределения глицерина (в мг%) и экстинп ние проводят нисходящим путем в тече-ции, соответствующей содержанию глю- ние 4,5 ч в термостате при37°С. Пос-козы, определенной орто-толуидиновым ле сушки на воздухе хроматограммуметодом, строят отдельно две калибро- обрабатывают в течение 20 мин раство-45вочные кривые: первая - с заданными ром уксуснокислой меди (20 мл насы- концентрациями глюкозы (50, 100, 150, щенного раствора уксуснокислой меди200 мг%) и вторая - с заданными кон- на 480 мл дистиллированной воды)дляцентрациями глицерина (5, 10, 15, перевода жирных кислот в медные мыла,20 мг%). Среднее содержание глицерина промывают водой и окрашивают 2%-ным 50у здоровых людей 4,5tO,l4 мг%. раствором железистосинеродистого калия в течение 5 мин. В результате - При определении содержания жирных на бумаге проявляют три пятна, соот-кислот, фракций жирных кислот, глице- ветствующие содержанию фракций жирныхрина получают следующие результаты: кислот: на старте - насьш1;енных, за- 55жирные кислоты 448 мэкв/л, глицерин тем - мононенасьш1енных и далее - по-4,33 мг%, фракции жирных кислот: на- линенасьш1енных. Соотношение фракцийсьш5енные 10,8%, полиненасыщенные в процентах определяли на денситомет-38,8%, коэффициент ЖК/глицерин 103, ре Биан.индекс ненасыщенности 3,6. Делают

вывод коэффициент ЖК/глицерин (у здоровых дюдей 102), и индекс ненасыщенности (у здоровых людей 3,6) по сравнению с нормой не изменен. После проведенного курса лечения режим палатный, диета 10 стол, тазепам по 1 табл. 2 раза в день, результаты сохраняются на прежних цифрах; коэффициент ЖК/ /глицерин 102,9; индекс ненасьпценнос25

ти 3,6, Обследование подтверждает от- fO 116 (норма 102), а индекс ненасыщен- сутствие сердечной недостаточности ности после лечения стал равным 3,82 у больного, нёвыявленной и по клики- . (норма 3,6). Способ позволяет устано- ческой оценке.вить наличие ранней стадии сердечной

недостаточности и при повторном опреПример 2. Больная М-ва, 34 лет,,5 делении перед выпиской объективно под- Диагноз: ревматизм, неактивная фаза, .зердить эффективность лечения, ревматический митральный порок серд- в группе больных с ревматическими ца, недостаточность митрального кла- „„роками с клинически выявленной 1-ой пана, стеноз левого атриовентрикуляр- сердечной недостаточности ного отверстия, Пароксизмальная тахи-20 фиксируют изменения коэффициента ЖК/ кардия. Недостаточность кровообраще- /рдицерин и индекса ненасьщенности,

средние цифры при поступлении: коэффициент ЖК/глицерин 4,7; индекс ненасыщенности 168, которые после лечения стали близки к показателям здоровых людей.

В группах больных ревматическими J пороками с клинически выявленными стадиями (2А, 2Б, 3-ей) сердечной неклинического исследования: характер- 30 достаточности в изменении показателей ных изменений звуков сердца, записи способа обнаруткивают следующие зако- ЭКГ в покое (выявлена гипертрофия левого желудочка), фонокардиограммы, рентгенологического исследования легких, сердца, при котором обнаружено и 35 /глицерин 2 lO,3, индекс ненасыщеннос- изменение размеров сердца, увеличение 5,9; в группе 3 от,: коэфф. Ж/ правого и левого желудочков, корни /глицерин 270,5, индекс ненасьщеннос- несколько расширены, однако застойных т,,, А

1И и,.

изменении.в легких нет. Отеков нет. Коэффициент Ж/глицерин и индekc печень не увеличена,40 ненасьщенности - точные показатели

При осуществлении способа диагно- .стики степени тяжести сердечной недостаточности получают следующие резуния 1-ой стадии по клинической оценг ке. Порок выявлен с 1982 г,, после присоединения приступов пароксизмаль- ной тахикардии появились признаки сердечной недостаточности. Диагноз установлен на основании жалоб больной (на одышку при физической нагрузке, сердцебиение, перебои в работе сердца)

номерности в-группе 2А ст,: коэфф. Ж/глицерин 178, индекс ненасыщенности 5,4; в группе 2Б ст.: коэфф, ЖК/

степени тяжести сердечной недостаточности.

льтаты: жирные кислоты 660 мэкв/л, глицерин 4,0 мг%, коэффициент жирные кислоты/глицерин 165, фракции жирных кислот: насыщенные 9,0%, ненасыщенные 43%, индекс ненасьщенности 4,77, Таким образом коэффициент Ж/глицеФормула изобретения

Способ определения степени тяжести сердечной недостаточности у больных с ревматическим пороком сердца путем исследования в крови уровня жирных

рик увеличен до 165 (у здоровых людей кислот, обличающийся тем, равняется 102), индекс ненасыщенности что, с целью повышения точности спо- увеличен до 4,77 по сравнению с резу- соба при определении различных ревма- льтатами;У здоровых людей 3,6, После тических пороков, дополнительно опре- проведенного курса лечения: дигоксин деляют глицерин и по увеличению соот- по 1/2 таблетки 3 раза в день, затем 55 ношения первого к второму в сравнении

по 1/2 табл, 2 раза в день, оратат калия по 1 таблетки 4 раза в день.

фуросемид 1 таблетки 2 раза в неделю, ,результаты приблизились к результатам здоровых людей, т.е.: жирные кислоты 512 мэкв/л, глицерин 4,4 мг%, коэффи- циент ЖК/глицерин 116 (норма 102), фракции жирных кислот: насыщенные 10,0%, ненасыщенные 38,2%, индекс ненасыщенности 3,82, Т,е, коэффициент ЖК/глицерин после лечения стал равным

В группах больных ревматическими J пороками с клинически выявленными стадиями (2А, 2Б, 3-ей) сердечной недостаточности в изменении показателей способа обнаруткивают следующие зако-

/глицерин 2 lO,3, индекс ненасыщеннос- 5,9; в группе 3 от,: коэфф. Ж/ /глицерин 270,5, индекс ненасьщеннос- т,,, А

номерности в-группе 2А ст,: коэфф. Ж/глицерин 178, индекс ненасыщенности 5,4; в группе 2Б ст.: коэфф, ЖК/

степени тяжести сердечной недостаточности.

Формула изобретения

с нормой определяют степень тяжести заболевания.

Изобретение относится к кардиологии, в частности к диагностике сердечной недостаточности. Цель изобретения - повышение точности способа. В крови пациента определяют общее содержание жирных кислот, соотношение фракций жирных кислот и глицерина. По величине соотношения жирных кислот и глицерина и по величине индекса ненасыщенности по сравнению с нормой определяют степень тяжести недостаточности и контролируют эффективность лечения. По мере нарастания сердечной недостаточности содержание жирных кислот значительно увеличивается, а содержание глицерина падает. При третьей стадии сердечной недостаточности индекс ненасыщенности увеличивается до 6,4. i (Л N9 00 О СП 4iik