Способ диагностики сердечной недостаточности Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии.

Целью изобретения является определение сердечной недостаточности на Доклинической стадии.5

Способ осуществляют следующим образом.

В центрифужнзло пробирку к 9,0 мл 6%-ного раствора охлажденной хлорной кислоты добавляют 3,0 мл крови (соот- Ш ношение хлорной кислоты и крови 3:1). Центрифужную пробирку с пробкой центрифугируют .при 5-7°С в течение 20- 25 мин при 5000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают в другую емкость и нейтрализуют раствор)м едкого калия до рН 6,5 и оставляют до полного вьшадания осадка () при 2-4 С.-Затем центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об/мин. Полученную надосадочну1о жидкость (экстракт) отбирают в пробирку для определения в ней пирувата и оксалоацетата.

Для определения количества пирува- т а в кювету 1 ,0 см спектрофотометра (СФ-16) наливают 1,0 мл полученного экстракта, ,0 мл трис-буфера (рН 7,6) , 1,0 мл дистиллированной воды и 0.015 мл восстановитель никотинамиДЕ ощ

V

4KcipaiiTq

абсолютная величина разности показаний спектрофотометра до начала реа кции (Ер) и через 15 мин после начала реакции ( .

разведение, численно равное количеству миллилитров нейтрализованного экстракта; общий обър инкубированной среды в кювете; объем перхлорного экстракта

15

20

25

в кювете;

6,22 - коэффициент молярной экстинк- ции НАДН при 340 нм.

Пример 1. Больной Г., 37 лет, находился в стационарном лечении в пульмонологическом .отделении по поводу хронического бронхита, в фазе ремиссии, ДН 0-1 ст.

Клинических признаков сердечной недостаточности не выявлено.

Исследование Контроль

Пируват,

мкмоль/л 155,9 123,11

Оксалоаце- .

тат,мкмоль/л 59,9 86,0

Отношение пируват - оксалоацетат 2,62 (норма 1,43). Выявлено понижение количества оксалоацетата при

дадениндинуклеотида (НАДН) (3,3--10 М 30 умеренном увеличении содержания пирувата.

Данные хронокардиографии левогй желудочка сердца указьюают на некоторое удлинение фазы напряжения (0,10с

раствор). В такую же кювету с контрольным раствором, содержащим 1,0 мл указанного буфера, приливают дистиллированной воды до объема 3,015 мл. После измерения оптической плотности 35 при должной величине О ,084 с) , изотерьт обоих растворов (Е) при 340 нм до- ческого сокращения (0,04с при долж- бавляют в обе кюветы 0,01 мл лактат- ной 0,029с), укорочение фазы изгнания дегидрогеназы (ЛДГ) . Через 15 мин ; (0,20с при до.-ишой 0,244с), снижение вновь измеряют оптическую плотность растворов в обеих кюветах (Е ) 40

По этой же схеме определяют в экстракте количество оксалоацетата, для чего используют 1,5 мл экстракта, 1,47 мл трис-буфера (рН 7 ,6) и О ,02 мл ;

НАДН (2,2 1СГ М раствор). В контроль- 45 тельной функции сердца и подтверждает кую кювету наливают 1,47 мл наличие скрытой стадии сердечной не- фера и. 1 ,52 мл дистиллированной воды. достаточности. Для осуществления ферментативной реакции после измерения Е., добавляют П р и м а р 2. Больной, 40 лет, в обе кюветы по 0,01 мл малатдегидро-50 находился на стационарном лечении в геназы (МДГ), измеряют Е, .пульмонологическом отделении по повоРасчет концентрации пирувата и оксалоацетата проводят по формуле

механического коэффициента.

Изменения фазовой структуры левого желудочка характеризуют умеренновыра- л;енный синдром гиподинамии, что является показателем-нарушения сократиду хронического диффузного бронхита, ДН 0-, без клинически выраженных признаков сердечной недостаточности.

А ВП/,,

99,17

О, i. V экстрах-га

А - концентрация определяемого - субстрата;

ДЕ ощ

V

4KcipaiiTq

абсолютная величина разности показаний спектрофотометра до начала реа кции (Ер) и через 15 мин после начала реакции ( .

разведение, численно равное количеству миллилитров нейтрализованного экстракта; общий обър инкубированной среды в кювете; объем перхлорного экстракта

5

0

5

в кювете;

6,22 - коэффициент молярной экстинк- ции НАДН при 340 нм.

Пример 1. Больной Г., 37 лет, находился в стационарном лечении в пульмонологическом .отделении по поводу хронического бронхита, в фазе ремиссии, ДН 0-1 ст.

Клинических признаков сердечной недостаточности не выявлено.

Исследование Контроль

Пируват,

мкмоль/л 155,9 123,11

Оксалоаце- .

тат,мкмоль/л 59,9 86,0

Отношение пируват - оксалоацетат 2,62 (норма 1,43). Выявлено понижение количества оксалоацетата при

0 умеренном увеличении содержания пирувата.

Данные хронокардиографии левогй желудочка сердца указьюают на некоторое удлинение фазы напряжения (0,10с

при должной величине О ,084 с) , изотерьт ческого сокращения (0,04с при долж- ной 0,029с), укорочение фазы изгнания (0,20с при до.-ишой 0,244с), снижение

при должной величине О ,084 с) , изотерьт ческого сокращения (0,04с при долж- ной 0,029с), укорочение фазы изгнания (0,20с при до.-ишой 0,244с), снижение

тельной функции сердца и подтверждает наличие скрытой стадии сердечной не- достаточности. П р и м а р 2. Больной, 40 лет, находился на стационарном лечении в пульмонологическом отделении по повомеханического коэффициента.

Изменения фазовой структуры левого желудочка характеризуют умеренновыра- л;енный синдром гиподинамии, что является показателем-нарушения сократительной функции сердца и подтверждает наличие скрытой стадии сердечной не- достаточности. П р и м а р 2. Больной, 40 лет, находился на стационарном лечении в пульмонологическом отделении по поводу хронического диффузного бронхита, ДН 0-, без клинически выраженных признаков сердечной недостаточности.

Исследов ания Пируват,

мкмоль/л 153,1 Оксалоацетат,мкмоль/л 72,9

Контроль 123,1+3,5 86,0±3,9

313

Отношение пируват - оксалоацетат 2,1 (контроль 1,4+0,1)свидетельст-. вующее о снижении оксалоацетата при умеренном увеличении содержания пиру- вата, определяет величину коэффициента пируват - оксалоацетат, что указывает на снижение энергообразования при ранней доклинической стадии сердечной недостаточности.

, При хронокардиографии левого желудочка выявлено некоторое удлинение фазы напряжения (0,12с при должной 0,085с) и изометрического сокращения (0,05с при должной 0,03с), укорочение фазы изгнания (0,22с при должной 0,25с). В условиях велоэргометри- ческой пробы констатировано удлине- ние времени восстановления фазовых периодов до 15 мин. Приведенные изменения фазовой структуры левого желудочка указывают на нарушение сократительной функции миокарда, начальные признаки скрытой доклинической стадии сердечной недостаточности.

Приме р. Больной, 38 лет, находился на стационарном лечении в пульмонологическом отделении по поводу хронического диффузного бронхита, ДН 0-1 ст, без клинических признаков сердечной недостаточности. Исследования Контроль

Пируват,

мкмоль/л 143,4 123,1±3,5

Оксалоацет

тат, мкмоль/л .62,3 86,7+3,9 Отношение пируват - оксалоацетат 2,3 (контроль 1,4±0,1).

Полученное увеличение коэффициента пируват - оксалоацетат обусловле

30

123,1±3,5 86,0+3,9

178 165,0±4,6 71,6+2,0

Достоверность разницы по отношению к контролю при ,05.

ВНИИПИ Заказ 2208/46 Тираж 777

Подписное

Произв.-полигрг пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

94

но снижением количества оксалоацетата при умеренном увеличении пирувата.

По данным хронокардиографии левого желудочка выявлено удлинение фазы напряжения (0,13с при должной 0,083с), изометрического сокращения (0,04с при должной 0,03с), укорочение фазы изгна- - ния (0,20с при должной 0,23с), что свидетельствует о снижении сократительной функции миокарда. При выполнении пробы с физической нагрузкой получено удлинение времени восстановления фазовых показателей до 18 мин, что подтверждает наличие доклинической стадии-сердечной недостаточности. Благодаря дополнительному определению уровня оксалоацетата в крови и отношения пируват - оксалоацетат, что указьшает на начальные изменения

энергетического обмена в тканях,предлагаемый способ позволяет диагностировать сердечную недостаточность на доклинических стадиях ее развития.

Среднестатистические показатели содержания в крови пирувата и оксало- - ацетата, отношения пируват - оксалоацетат приведены в таблице;

Формула изобретения

Способ диагностики сердечной не- достаточ;ности, включающий определение содержания пирувата в крови, отличающийся тем, что, с целью

определения сердечной недостаточности на доклинической стадии, дополнительно определяют содержание в крови оксалоацетата и при отношении перво- го показателя к второму 2,1-2,6 диагностируют доклиническую стадию сер- дечыой недостаточности.

1,4+0,1

2,3+0,1

Подписное

Изобретение относится к медицине, точнее к кардиологии. Цель изобретения - определение сердечной недостаточности на доклинической стадии. Для этого пробирку с хлорной кислотой и пробой крови (в соотношении 3:1) центрифугируют при 5-7 С 20- 25 мин при 5000 об/мин. Надосадок сливают в другую емкость и нейтрализуют 46%-ным раствором едкого калия до рН 6,5. Затем центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин. В полученном надосадке (экстракт) определяют пиру- ват и оксалоацетат. Затем определяют отношение пируват - оксалоацетат. Благодаря дополнительному определению уровня оксалоацетата в крови и отношения пируват - оксалоацетат, указывающего на начальные изменения энергетического обмена в тканях при показателях 2,1-2,6, предлагаемый способ позволяет диагностировать сердечную недостаточность на доклинических стадиях его развития. I табл. i (Л 00 4 to а QD