Способ диагностики сердечной недостаточности при ишемической болезни сердца Советский патент 1991 года по МПК G01N33/573 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии.

Целью изобретения является повышение точности способа и возможность ранней диагностики.

Цель достигается за счет определения активности Са-АТФазы мембраны эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом,

В пробирки, содержащие 100 ЕД гепарина на 1 мл крови, утром натощак брали кровь с локтевой вены. Эритроциды осаждали в течение 5 мин при 1000 об/мин, освобождали от плазмы и клеток крови и трижды промывали 2-3-кратным объемом среды, содержащей 130 мМ KCI, 20 мМ ТРИС, 20 мМ ХЕПЕС. 0,25 мМ MgCl2 (pH 7,4). После этого

эритроциты промывали один раз средой со держащей 130 мМ KCI 20 мМ ТРИС 20 мМ ХЕПЕС, 10 мМ лимонной кислоты, 3 мМ MgClz (рН 7,4, 37°С) и этой же средой доводили гематокрит до 10% К полученной взвеси эритроцитов добавляли рзствор сапонина до конечной его концентрации 0,04% t что приводило к гемолизу эригроц1/- тов В гемолизате определяли активность Са-АТФазы. Для этого готовили два буфера № 1 для определения активности общей С Ма-АТФазы, содержащей 130 мМ KG, 20 чМ ТРИС, 20 мМ ХЕПЕС, 10 vM лимонной кислоты, 3 мМ MgCl2, 2 мМ АТФ, 2 мМ ЭПТЦр 7,4, 37°С); № 2 для определения активно -.. Мо-АТФазы, содержащей 130 мМ 20 vM ТРИС, 20 мМ ХЕПЕС. 10 мМ лимонной чис лоты, 3 мМ MgCl2 2 мМ АТФ 450 мкМ СаС

(рН 7,4, 37°С). К 200 мкл каждого буфера добавляли 200 мкл гемолизата и инкубировали 15 мин при 37°С. Реакцию останавливали 400 мкл 10% трихлоруксусной кислоты, Полученный осадок осаждали в течение 5 мин при 5000 об/мин. В надосадочной жидкости определяли количество неорганического фосфора, освободившегося из АТФ в результате действия АТФазы. Для этого к 150 мкл надосадка добавляли последовательно 50 мкл 24% серной кислоты, 150 мкл 0.1М молибдата натрия, 300 мкл 0,0185% раствора малахитового зеленого в 1 % поливиниловом спирте, инкубировали 40 мин и добавляли 2 мл 7,8% серной кислоты. Измерение проводили на спектрофотометре при 625 нм. Активность Са-АТФазы определяли по формуле

Акт (Ci C2) х К,

где Акт - активность Са-АТФазы в мкмоль Рн/л эритроцитов/1 мин;

Ci - количество гамм Рн в 150 мкл надосадка инкуб, среды № 1;

С2 количество гамм Р в 150 мкл надосадка инкуб, среды N 2;

К - коэффициент для пересчета активности з мкмоль Рн/л эритр./мин, равный 569,9.

П р и м е р 1. Больной Ивашковский А.И, находился на стационарном лечении в инфарктном отделении с диагнозом ишемиче- ская болезнь сердца, атеросклеротический кардиосклероз, стенокардия напряжения III. HKIc31.01.89. по 27.02.89.

Результаты обследования:

хронокардиография фаза напряжения 0,099 с,

фаза изгнания 0,208 с,

способ-прототип АТФ 29,2 мг%,

АДФ2,72мг%,

АМФО,57мг%,

предложенный способ - активность Са-АТФазы 27%.

Как видно из приведенного примера, у сольного при помощи хронокардиографии установлено наличие сердечной недостаточности, что подтверждается предложенным способом. Изменений со стороны показателей способа-прототипа нет.

Однако хронокардиография также не является идеальным способом диагностики сердечной недостаточности при ИБС. В некоторых случаях у больных с явно выраженными клиническими признаками сердечной недостаточности изменений со стороны хронокардиографии нет, а предложенный способ подтверждает клиническую картину (см. пример 2).

П р и м е р 2. Больной Партека М.Я. 49 лет, находился на стационарном лечении в инфарктном отделении с диагнозом ишеми- ческая болезнь сердца, постинфарктный

(1985 г.) кардиосклероз, стенокардия покоя и напряжения III, HK ПА с 22.03.88 по 10.04.88.

Клинически у больного определились признаки сердечной недостаточности НА

стадии: одышка при физической нагрузке (подъем на 2-й этаж), застойная печень (выступает из-под реберной дуги на 3 см), отеки на нижних конечностях, возникающие под конец рабочего дня.

Показатели хронокардиографии не изменены: фаза напряжения 0,086 с, фаза изгнания 0,240 с.

Активность Са-АТФазы 25%, что подтверждает клиническую картину,

Кроме того, использование хронокардиографии ограничено из-за недостаточного количества соответствующей дорогостоящей аппаратуры, применяемой для диагностики сердечной недостаточности.

П р и м е р 3. Больной Туровский Б.Г. 50

лет, находился на стационарном лечении в инфарктном отделении с диагнозом ишеми- ческая болезнь сердца, стенокардия напряжения III, атеросклеротический и

постинфарктный (1986 г.) кардиосклероз, HKI.

Активность Са-АТФазы составила 21%, что указывает на наличие сердечной недостаточности. Последнее подтверждается

данными хронокардиографии: фаза напряжения 0,110 с, фаза изгнания 0,212 с.

В практическом здравоохранении сердечная недостаточность устанавливается в результате клинического обследования

больных, на основании данных методов функциональной диагностики и биохимических изменений со стороны крови. Одним из базовых методов функциональной диагностики сердечной недостаточности в

большинстве клиник является хронокардиография или фазовый анализ систолы сердца.

В результате сравнительного анализа способа-прототипа и предложенного способа диагностики сердечной недостаточности с данными хронокардиографии установлено, что последние подтверждаются данными способа-прототипа в 66% случаев, а данные предложенного способа в 95% случаев.

Установлено, что при диагностике I стадии сердечной недостаточности способом- прототипом есть изменения изучаемых показателей. Однако при статистической обработке всего материала (т.е. не только 66% больных, у которых данные способа-прототипа совпадаютс данными хронокардиогра- фии, но и остальные 34%) эти изменения статистически недостоверны. При использовании предложенного способа уже при недостаточности кровообращения I стадии отмечаются статистически достоверные изменения. Таким образом, возможно уточнение диагноза на ранних стадиях развития заболевания.

0

Формула изобретения Способ диагностики сердечной недостаточности при ишемической болезни сердца путем исследования эритроцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и возможности ранней диагностики, определяют активность Са-АТ- Фазы мембран эритроцитов и при снижении этого показателя на 21% и более по сравнению с нормой диагностируют сердечную недостаточность.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может найти применение при диагностике сердечной недостаточности при ишемической болезни сердца (ИБС) Целью изобретения является повышение точности способа и возможность ранней диагностики Для этого проводят выделение эритроцидоо периферической крови больного, гемолиз и определение в гемолизате активности фермента Са-АТФазы При снижении активно сти этого фермента на 21% и более nj сравнению с нормой диагностируют сердеч ную недостаточность при ИБС Предложен ный способ позволяет повысить точность диагностики по сравнению с прототипом на 30% Точность способа составляет 95% Кроме этого, способ позволяет диагностировать сердечную недостаточность при ИБС на ранних стадиях развития заболевания