Способ определения резистентности эритроцитов Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологическим исследованиям с целью диагностики заболеваний системы крови при токсикозах, бронхопневмониях, церрозе печени.

Цель изобретения - повышение чув ствительности способа и его ускорение за счет монотонного увеличения интенсивности ультразвука при одновременном контроле электропроводности исследуемого образца.

Способ осуществляется следующим образом.

Гепаринизированную (или цитратную) 5 ЮОО Гц. Измерительную ячейку изгокровь из любой сосудистой зоны помещают в измерительную ячейку, содержащую небольшое количество физиологического раствора, с целью уменьшения минимально необходимого объема исследуемой пробы. Затем, совместив ультразвуковой излучатель с поверхностью исследуемого образца, облучают его, плавно увеличивая интенсивность ультразвука, и одновременно контролируют его электропроводность. В момент начала увеличения электропроводности прекращают дальнейшее увеличение интенсивности ультразвука и осуществляют ее измерение. Измеренная интенсивность, как минимально необходимая для инициации процесса гемолиза, является параметром оценки резистентности эритроцитов.

Устройство содержит измерительную ячейку, на противоположных стенках которой размещены электроды измерителя электропроводности, ультразвуковой прибор с выноснь1м излучателем и измеритель интенсивности ультразвука.

Для определения резистентности эритроцитов исследуемую кровь в количестве 0,1 МП помещают в измерительную ячейку, содержащую 1 мл физиологического раствора. После этого . : внутрь ячейки вставляют ультразвуковой излучатель до соприкосновения его с поверхностью исследуемой пробы и облучают ее, плавно увеличивая интенсивность ультразвука с помощью ультразвукового прибора, начиная с уровня 0,01 Вт/см. Одновременно пос- ре дством измерителя электропроводности контролируют электропроводность исследуемой пробы. В момент начала ее; увеличения прекращают дальнейшее увеличение интенсивности ультразвука, которую измеряют измерителем интенсивности ультразвука. В момент време

ни TQ интенсивность ультразвука J, начиная с уровня 0,01 Вт/см, плавно увеличивают до момента времени Т, когда зафиксировано увеличение электропроводности ЭС . Затем измеряют значение интенсивности J, которое служит в качестве показателя, характеризующего резистентность эритроцитов.

При реализации способа в качестве измерителя электропроводности используют универсальный измеритель L, С, R Е7-11 в режиме измерения сопротивления на переменном токе частотой

0

5

0

5

0

тавливают из оргстекла, электроды из платиновой проволоки диаметром 1 мм. В качестве ультразвукового прибора используют серийно выпускаемый аппарат для ультразвуковой терапии Ульт- развук-Т5 с выносным излучателем активной площадью 1 см и незначительным изменением, заключающимся в замене ступенчатой регулировки интенсивности ультразвука на плавную. Эта модернизация свелась к замене в принципиальной схеме аппарата линейки сопротивлений R27 - R36 на одно переменное сопротивление величиной 100 кОм, и установкой его на внешней панели прибора. Оценку интенсивности ультразвука осуществляют путем измерения напряжения в цепи обратной связи высокочастотного генератора ультразвукового прибора Ультразвук-Т5, пропорционального напряжению, прикла- дьшаемому к обкладкам пьезопреобразо- вателя с помощью вольтметра В7-27А. При введении ультразвуковых колебаний в образец крови с использованием аппарата Ультразвук-Т5, в котором применен пьезопреобразователь из ти- таната бария, указанные константы юмеют следующие значения: С„

4, м/с;1„ 16,7 Н/В-м; f 880 кГц; ,13403 кг/м , 1500 м/с.

Со

Калибровку устройства в целом на нижнем пределе интенсивности ультра- - звука (0,01 Вт/см) проводят тепловым методом.

Вместо примененных при реализации способа измерителя Е7-11, ультразву- кового прибора Ультразвук-Т5, вольтметра В7-27А могут быть использованы любые серийно вьшускаемые приборы аналогичного назначения с близкими техническими характеристиками.

Испытания и эксперименты, проведенные на нормальной и патологической крови, а также при исследовании действия мембранотропных препаратов, показали, что применение предпагае- мого способа позволяет сократить более чем в 10 раз время и в 5 раз объем пробы, необходимые для проведения анализа одного образца, а также повысить чувствительность и точность в результате исключения из процедуры анализа апераций разведения и необходимости использования в качестве вспомогательного параметра показател гематокрита.

Опыт 1. Образец крови, взятый от беспородной крысы в количестве 0,1 мл, помещают в измерительную ячейку, содержащую 1 мл физраствора и электроды, соединенные с универсальным измерителем Е7-11, включенным в режим измерения сопротивления переменному току на частоте 1000 Гц. Затем посредством соответствующих регу- лировочных ручек измерителя, вынесенных на переднюю панель, стрелку гальванометра выставляют на отметку О. После этого внутрь ячейки вставляют выносной излучатель ультразвукового аппарата до соприкосновения излучающей поверхности с поверхностью жидкости. Ручку потенциометра, который включен в ультразвуковом аппарате вместо линейки сопротивлений R 26 - R 37, в крайнее левое положение. Включают кнопку Сеть ультразвукового аппарата и начинают плавно вращать ручку потенциометра по часовой стрелке. При этом одновременно контролируют положение стрелки гальванометра измерителя Е7-11. В момент ухода стрелки с нулевой отметки шкалы прекращают дальнейшее вращение ручки потенциометра, т.е. увеличение интенсивности ультразвука, и снимают показания вольтметра. На образцах крови, взятой от 15 беспородных крыс, средний вес которых составлял 180

Составитель М.Шерстнев Редактор А.Козориз Техред А.Кравчук Корректор М.Демчик

Заказ 5116/43 Тираж 775Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Мойква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

0

5

5

200 г, они равны 141i5 В. Соответствующие интенсивности ультразвука составили 0,08t5-10 3 Вт/см.

О п ы т 2. В образец крови, взятый от животного, используемого в опыте 1, в количестве 0,2 мл, вводят 10 мкл трифторперазина (концентрация 10 моль/л), После перемешивания извлекают О,1 мл исследуемой массы и помещают в измерительную ячейку, содержащую 1 мл физраствора. Дальше анализ проводят по опыту 1.

Величина интенсивностей ультразвуку, вводимого в исследуемый образец, необходимая для инициации гемолиза, составила в данном опыте 0,04i i7 Вт/см2.

Таким образом, введение в кровь n трифторперазина (концентрацией

/

10 моль/л) в соответствующей пропорции вызывает снижение резистентности эритроцитов.

I

Эксперименты, проведенные на тех же образцах крови известным способом, показали, что выход гемоглобина при анализе цельной крови составляет 15t1,5 г%, а при анализе образцов, обработанньк трифторперазином предлагаемым способом, - 16t1f%, что подтверждает высокую чувствительность последнего.

Формула изобретения

Способ определения резистентности эритроцитов путем их разрушения ультразвуком возрастающей интенсивности, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа и его ускорения, разрушение проводят с монотонным законом увеличения интенсивности ультразвука при одновременном контроле электропроводности исследуемого образца и по увеличению электропроводности относительно исходного уровня определяют резистентность эритроцитов.

0

5

0

5

Изобретение относится к гематологии. Цель изобретения - повьшение чувствительности способа и его ускорение. Гепаринизированную кровь поч мещают в измерительную ячейку. Плавно увеличивая интенсивность ультразвука, облучают исследуемьй образец и контролируют его электропроводность. В момент начала увеличения электропроводности прекращают увеличение интенсивности ультразвука и осуществляют ее измерение. Измеренная интенсивность является парамет-. ром оценки резистентности эритроцитов . i (Л : ( 00