Способ определения чувствительности к антибактериальным препаратам у больных туберкулезом легких Советский патент 1987 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к биохимической диагностике.

Цель изобретения - более ранняя диагностика непереносимости препаратов.

Способ осзществляют следующим образом.

Готовят тонкие мазки крови из пальца. Высушивают их-на воздухе и фиксируют в 60% -ном ацетоне с добавлением трилона Б (рН рабочего раствора 5,2-5,4) в течение 30 с. Мазок прополаскивают в дистиллированной воде и высушивают на воздухе. Инкубируют препарат в течение часа в стандартной среде в термостате при . Прополаскивают дистиллированной водой, высушивают, окрашивают метиловым зеленым и смотрят под микроскопом с масляной и tмepcиeй,

Инкубационная среда: готовят фос- фатньтй буфер (рН 7,2-7,), на 60 мл фосфатного буфера добавляют 16 мг трилона Б + 16 мг паранитро-тетразо- ля фиоле тового + о - глицерофосфата 630 мг. Продукт реакции о/- глицеро- фосфатдегидрогеназы ( с(- ГФДГ) определяется в виде четко очерченных синих гранул. В мазке проводят-подсчет общего числа гранул в 50 лимфоцитах. Активность фермента выражают средним числом гранул в одном лимфоците.

При снижении активности фермента на одну и более гранул продукта реакции прогнозируют переносимость лекарственных препаратов.

Б процессе антибактериальной терапии у больных туберкулезом наблюдается улучшение самочувствия, уменьшение и полное исчезновение симптомов интоксикации, чему соответствует повышение активности d- ГФДГ до нормы и вьше. Снижение активности фер- мента лимфоцитов на фоне антибактериальной терапии не может быть связано у:ке со специфическим воспалением и зависит от влияния на энергетический обмен клеток самих лекарственных, препаратов.

П р и м е р 1. Больной, 59 лет, в течение 15 дней получает комбинированную терапию по поводу туберкуле- мы верхней доли правого легкого в фазе распада БК + . Активность ГФДГ 13,0. Через 15 дней отмечено снижение активности фермента до 12,0, Признаки клинической непереносимости

препаратов отсутствовали. При последующем исследовании отмечено дальнейшее снижение активности ./о -ГФДГ до

6,92. В это же время больной предъявлял жалобы на слабость, тошноту, отсутствие аппетита. Продолжение антибактериальной терапии привело к снижению активности фермента до 2,8.

Наросли клинические симптомы непереносимости лекарств(рвота после приема препаратов, боли в животе), что потребовало отмены всех антибактериальных препаратов.

Пример 2. Больной, 52 лет, по поводу инфильтративного .туберкулеза верхней доли правого легкого в фазе распада БК +, получал антибактериальную терапию в течение 15 дней.

Активность с/- ГФДГ - 10,02. На-30-й день лечения активность фермента снизилась до 8,1, еще через 15-дней - до 7,42. В это же время у больного появились боли в суставах, эозинофилия - 7%. Данные изменения потребовали коррекции лечения, после чего последовало постепенное повьш1ение . активности фермента до 23,9 ( на- 135-й день лечения) о При последую-. f.

щем исследовании отмечено вновь снижение активности о(- ГФДГ до 9,4, .а затем до 2,2. В это же время появилась эозинофилия - 6%, лейкоцитоз - 10-19 /л, АЛТ возросла до 1,26 мкм.

Больной предъявлял жалобы на слабость, плохое настроение, бессонницу, боль в правом подреберье. Антибактериальные препараты были отменены. П р и м е р 3. Больной , 70 лет,

в течение 15 дней получал антибактериальные препараты по поводу фиброз- но-кавернозного туберкулеза правого легкого БК +, активность W- ГФДГ- 12,6. Через 15 дней отмече;но снижение активности до 2,8. Б это же вре- мя на туловище и лице появились папулезные высыпания, кожный зуд. Отмена стрептомицина, назначение десенсибилизирующих средств привели к .

повьштению активности фермента до 10,4 и угасанию клинических симптомов непереносимости лекарственных препаратов.

Пример 4. Больная, 36 лет.

Диагноз: Фиброзно- кавернозный туберкулез правого легкого в фазе инфильтрации и обсеменения БК +, туберкулез гортани. Показатели активности Ы - ГФДГ до лечения ина 15 день

лечения соответственно - 8,6 и 10,6. На 30-й день терапии активность фермента составила 9,9 гранул продукта реакции, самочувствие больной было удовлетворительным, переносимость препаратов хорошая. Активность фермента при последующем исследовании составила 11,3, Клинических симптомов непереносимости лекарственных препаратов не появилось.

Способ диагностики непереносимости лекарственных препаратов применен при лечении 99 больных (83 мужчин и 16 женщин в возрасте от 18 до 70 лет с впервые выявленным активным туберкулезом легких. Активность о(-ГФДГ изучалась в процессе лечения с интервалом в 15 дней.

У 67 человек (68%) в процессе антибактериальной терапии отмечены побочные реакции в виде сыпи, головной боли, головокружения, тошноты и рвоты, слабости, боли в суставах и мышцах. У 21 больного побочные ре- акции сопровождались эозинофилией (31%), у 10-лейкоцитозом (15%) у 5- повышением трансаминаз (8%). У всех больных отмечалось снижение активности с(-глицерофосфатдегидрогеназы лимфоцитов периферической крови по сравнению с предьщущим анализом на одну и более гранул формазана. Сни- жение активности фермента на 15-30 .дней предшествовало клиническим про- .явлениям непереносимости антибактериальных П1 епаратов.

Из приведенных примеров конкретного применения и анализа результатов.

полз енных на группе больных, следует, что предлагаемый способ обеспечивает более раннюю диагностику

Составитель Н.Гуляева Редактор Л.Повхан Техред М.Дидык Корректор М.Шароши

6331/3

Тираж 595Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

5

0 5 0 5

0

лекарственной непереносимости, позволяет прогнозировать непереносимость лекарственных препаратов и, следовательно, делает вполне разрешимой задачу избежать тяжелые и затяжные побочные реакции путем своевременной коррекции терапии.

По точности предлагаемый способ значительно превосходит известный способ лейкергин. Преимуществом предлагаемого способа, помимо доступности, надежности, является возможность оценки состояния организма до появления клинических признаков непереносимости антибактериальньтх препаратов и, следовательно, ее предупреждение. Простота данного способа позволяет применять его во всех учреждениях здравоохранения, имеющих биохимические лаборатории.

Формула изобретения

Способ определения чувствительности к антибактериальнь1м препаратам у больных туберкуле зом легких путем исследования лейкоцитов периферической крови, отличающийся тем, что, с целью более раннего определения непереносимости препарата, исследуют лимфоциты, в которых цито- химически определяют активность cf-- глицерофосфатдегидрогеназы путем обработки пробы п-нитротетразолем фиолетовым и подсчета гранул образовавшегося формазана и при увеличении среднего количества грАнул 6 расчете на лимфоцит по сравнению с нормой на 1 и более диагностируют непереноси- мость.

Изобретение о носится к медицине, точнее к биохимическойодиагностике. Цель изобретения - более ранняя диагностика непереносимости препаратов. Для этого тонкие мазки крови высушивают на воздухе, фиксируют в 60%-ном ацетоне с добавлением л рйлона Б (рН рабочего раствора 5,2-5,4) 30 с. Мазок полоскают в дистиллированной воде и высушивают. Инкубируют препарат 1 ч в стандартной среде в термостате при 37 С.Прополаскивают дистиллированной водой, высушивают, окрашивают метиловым зеленым и смотрят под микроскопом с масляной иммерсией. Инкубационная среда: 60 мл фосфатного буфера (рН 7,2-7,4)+16 мг трилона Б + 16 иг паранитротетразоля фиолетового + с/- глицерофосфата 630 мг. Продукт реакции of- глицерофосфатдегидрогеназы (о - ГФДГ) определяют в виде четко очерченных синих гранул. В мазке проводят подсчет общего числа гранул в 50 лимфоцитах. Активность фермента вьфажают средним числом гранул в одном лимфоците. При снижении активности фермента на одну и более гра- . нул продукта реакции судят о непереносимости лекарственных препаратов. о S (Л со 05 ю 4 СП