СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ Советский патент 1995 года по МПК A61K39/205 

Описание патента на изобретение SU1367487A1

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к получению противовирусных вакцин.

Цель изобретения повышение чистоты целевого продукта, а также надежности инактивации вируса.

Способ осуществляют следующим образом. Производственный штамм вируса бешенства "Внуково-32" выращивают в культуре первичных клеток почек сирийского хомяка, полученную вируссодержащую культуральную жидкость собирают в бутыли по 15-18 л и для освобождения от клеточного детрита осветляют пропусканием через пористые мембраны с диаметром пор 1900-2000 нм. Осветленную вирусную взвесь инактивируют ультрафиолетовыми лучами в аппарате-иррадиаторе, где расстояние поступающей на вращающийся металлический круг вирусной суспензии от ультрафиолетовых ламп составляет 18 см, скорость вращения круга 20 об/мин. Затем к инактивированной ультрафиолетовыми лучами вирусной взвеси добавляют формалин из расчета 1 мл формалина на 8 л вирусной взвеси, что соответствует концентрации 0,0116-0,0125% взвесь тщательно перемешивают и помещают на 20-22 ч в холодильную камеру при 4оС. Инактивированную взвесь концентрируют на ультрафильтрационном аппарате с тангенциальным потоком жидкости с площадью фильтрующей поверхности мембран 1 2 м2. Диаметр пор мембран 40-60 нм. Давление на внутреннюю поверхность мембран 0,5-0,7 атм. Концентрирование продолжают 1-2 ч до уменьшения объема вируссодержащей жидкости в 45-50 раз. Для удаления вирусных частиц, адсорбировавшихся в пpоцессе концентрирования на внутренней поверхности мембран, в течение 10 мин проводят барботаж, заключающийся в попеременном закачивании в ультрафильтрационный аппарат концентрата и стерильного воздуха, дальнейшее концентрирование жидкости при этом не происходит. Концентрированную вирусную взвесь собирают в сосуд и проводят очистку ее на колонке с пористым кремнеземом МПС-1М-1000, модифицированным поливинилпирролидоном. Используют колонки размером 5,6 х 85 см с 2,1 л кремнезема в трис-фосфатном буфере, рН 7,8. Один цикл гель-фильтрации позволяет очистить 250 мл концентрированной вирусной взвеси и получить 400 мл очищенного пpепарата, содержащего не более 160 мкг/мл примесных белков и имеющего относительную иммуногенность не менее 2,5 МЕ. К полученному очищенному концентрату добавляют человеческий альбумин в трис-НСl буфере до конечной концентрации 0,05% сахарозу до конечной концентрации 7,5% желатозу до 1,0% разливают в ампулы по 1,5 мл и подвергают лиофильной сушке. Сухой препарат хранят при 4оС.

П р и м е р. Изготовление антирабической вакцины серии N 6.

Вируссодержащую культуральную жидкость штамма вируса бешенства "Внуково-32", полученную в культуре клеток почек серийского хомяка в объеме 40 л, осветляют путем фильтрации через лавсановые мембраны с диаметром пор 2000 нм, инактивируют в аппарате-иррадиаторе ультрафиолетовых лучей, добавляют 5 мл формалина (конечная концентрация 0,016-0,0125%) и выдерживают в течение 20 ч при 4оС. Содержание белка 5,6 мг/мл; относительная иммуногенность в опыте на мышах 0,6 МЕ.

Концентрирование проводят на ультрафильтрационном аппарате с тангенциальным потоком жидкости с площадью фильтрующей поверхности 2 м2. В качестве фильтрующих мембран используют пористые лавсановые фильтры с порами диаметром 40-60 нм. Давление 0,5 атм. Через 2 ч концентриpования объем концентрата доводят до 800 мл (содержание белка 10 мг/мл; относительная иммуногенность 4,09 МЕ), после чего в течение 10 мин проводят барботаж, заключающийся в попеременном закачивании в фильтрационный аппарат концентрата и стерильного воздуха, концентрирование жидкости при этом не происходит. Содержание белка увеличивается до 15 мг/мл; относительная иммуногенность 7,0 МЕ.

Очистку концентрированного вируса проводят на колонке с модифицированным поливинилпирролидоном МПС-1М-1000. После трех последовательных циклов гель-фильтрации получают 1200 мл очищенного концентрата, содержащего 140 мкг/мл белка, имеющего относительную иммуногенность на мышах 3,5 МЕ. К полученному очищенному концентрату добавляют человеческий альбумин в трис-НСl буфере до конечной концентрации 0,05% сахарозу до 7,5% желатозу до 1,0% разливают в ампулы по 1,5 мл, замораживают при -60оС, высушивают по вакуумом. Сухой препарат хранят при 4оС.

Способ обеспечивает получение антирабической вакцины с повышенной надежностью инактивации и высокой иммуногенной активностью.

Результаты испытания вакцины приведены в табл.1 и 2.

Похожие патенты SU1367487A1

название год авторы номер документа
СПОСОБ СТЕРИЛИЗУЮЩЕЙ ФИЛЬТРАЦИИ ВИРУССОДЕРЖАЩЕГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ 1989
  • Дулина А.В.
  • Крутилина Д.В.
  • Шафеева Р.С.
RU1755580C
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БЕШЕНСТВА И ЧУМЫ ПЛОТОЯДНЫХ 1994
  • Киктенко А.В.
  • Грибенча Л.Ф.
  • Ральф Н.М.
  • Кротова Л.И.
  • Белова Г.А.
  • Дроздов С.Г.
RU2080125C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСОКОСПЕЦИФИЧНОЙ ГЕТЕРОЛОГИЧНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ 2006
  • Ситник Наталья Павловна
  • Загидуллин Наиль Виленович
  • Исрафилов Азамат Габдельахатович
  • Еникеева Лилия Фаридовна
  • Мухачева Анастасия Вячеславовна
  • Шафеева Римма Сабировна
  • Кунцевич Юрий Геннадьевич
  • Петрова Ирина Ивановна
RU2322503C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНАКТИВИРОВАННОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ ПРИ БЕЗОПОРНОМ ВЫРАЩИВАНИИ КЛЕТОК И РЕПРОДУКЦИИ В НИХ ВИРУСА В УКОРОЧЕННОМ ЦИКЛЕ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ 2012
  • Рахманин Павел Петрович
  • Захарченко Олег Сергеевич
  • Крюков Сергей Вениаминович
  • Христюк Александр Александрович
  • Гусев Виталий Николаевич
  • Чудин Олег Васильевич
RU2537183C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМБИНИРОВАННОЙ БИВАЛЕНТНОЙ, КУЛЬТУРАЛЬНОЙ, ИНАКТИВИРОВАННОЙ, КОНЦЕНТРИРОВАННОЙ, ОЧИЩЕННОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ 2009
  • Ткаченко Евгений Александрович
  • Дзагурова Тамара Казбековна
  • Набатников Павел Алексеевич
  • Малкин Андрей Евгеньевич
  • Шевелёв Алексей Борисович
  • Воробьёва Мая Сергеевна
  • Белова Галина Андреевна
  • Киктенко Александр Васильевич
  • Михайлов Михаил Иванович
  • Коротина Наталья Александровна
  • Хапчаев Юсуф Хаджи-Бекович
RU2445117C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ 1991
  • Крутилина Д.В.
  • Маннанов Р.А.
RU2032738C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ 2005
  • Мельник Николай Васильевич
  • Зенов Николай Иванович
  • Крюков Сергей Вениаминович
  • Спиридонов Александр Витальевич
  • Иванов Виктор Серафимович
  • Красуткин Сергей Николаевич
  • Литенкова Ирина Юрьевна
  • Елисеев Анатолий Константинович
  • Маслов Евгений Витальевич
  • Хайкина Людмила Сергеевна
RU2287343C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ 2013
  • Самуйленко Анатолий Яковлевич
  • Зенов Николай Иванович
  • Красуткин Сергей Николаевич
  • Мельник Николай Васильевич
  • Пухова Нина Михайловна
  • Литенкова Ирина Юрьевна
  • Елисеев Анатолий Константинович
  • Абрашин Евгений Васильевич
  • Кожушко Маргарита Юрьевна
  • Маслов Евгений Витальевич
  • Хайкина Людмила Сергеевна
  • Иванова Александра Федоровна
  • Красуткина Светлана Владимировна
RU2538617C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ 2001
  • Скичко Н.Д.
  • Красуткин С.Н.
  • Мельник Н.В.
  • Иванов В.С.
  • Зенов Н.И.
RU2191600C1
СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2003
  • Жестерев В.И.
  • Горшкова Т.Ф.
  • Лаптева О.Г.
  • Балышева В.И.
  • Хрипунов Е.М.
  • Ковалев Николай Андреевич
  • Усеня Михаил Михайлович
RU2244557C2

Иллюстрации к изобретению SU 1 367 487 A1

Реферат патента 1995 года СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения антирабической вакцины. Цель изобретения повышение чистоты целевого продукта, а также повышение надежности инактивации вируса. Для осуществления способа штамм вируса бешенства "Внуково 32" выращивают в культуре клеток, собирают вируссодержащую жидкость, инактивируют ее последовательной обработкой ультрафиолетовыми лучами и формалином. Инактивированный вирус подвергают концентрированию и очистке с помощью ультрафильтрации через пористые мембраны и гель-фильтрации на пористых кремнеземах, модифицированных поливинилпирролидоном. 1 з.п.ф-лы, 2 табл.

Формула изобретения SU 1 367 487 A1

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ путем выращивания вакцинного штамма вируса бешенства "Внуково-32" в культуре клеток с последующей инактивацией вируссодержащей жидкости ультрафиолетовыми лучами, концентрированием и высушиванием целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения чистоты целевого продукта, концентрирование и очистку вируссодержащей жидкости осуществляют последовательно путем ультрафильтрации через пористые мембраны с диаметром пор 40 60 нм в тангенциальном потоке жидкости, а затем гель-фильтрации на пористых кремнеземах, модифицированных поливинилпирролидоном. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что, с целью повышения надежности инактивации вируса, после инактивации ультрафиолетовыми лучами суспензию вируса обрабатывают формалином в конечной концентрации 0,0116 0,0125% от объема суспензии вируса.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1995 года SU1367487A1

Авторское свидетельство СССР N 736633, кл
Способ гальванического снятия позолоты с серебряных изделий без заметного изменения их формы 1923
  • Бердников М.И.
SU12A1

SU 1 367 487 A1

Авторы

Аксенова Т.А.

Эльберт Л.Б.

Селимов М.А.

Красильников И.В.

Кротова Л.И.

Грибенча Л.Ф.

Даты

1995-10-27Публикация

1986-01-29Подача