Способ прогнозирования осложненного течения инфаркта миокарда Советский патент 1988 года по МПК G01N33/49 G01N33/535 

И К1бретение относ тгя к медицине, а именно к кардиолоши и мс)жет быть использовано в клинической практике для прогнозирования осложнений и рецидивов инфаркта миокарда 1ИМ) в остром периоде с помощр ю иммунологических ис1:ледовании,

Целью изобретения является раннее выявление ос.гк.жнений при инфаркте миокарда.

Пример 1. Определение уровня и изменения концентрации антител (AT) против цитохрома . в сыноротке крови людей. В лунки 9Ь-ячеечной полисти- рольной плашки для иммуноферментного анализа добавляют пс 200 мкл раствора цитохрома С лощади в коипентрапии 130 иг/мл в 0,01 М Na-фосфатном буфере рН 7 ,0 и инкубируют 5-6 ч при ком- натной температуре или IO-1 З ч при 4°С. Плал1ку затем отмывают 5-6 раз 0,01 М Ыа-фосфатным буфером рН 7,0- 8,0 с 0,1 М NaCl и 0,05):; тритоном Х-100 (ТФБ). Затем в лунки плашки добавляют по 5 мкл сыворотки крови больного и по 195 мкл ТФН и плашку инкубируют 2-3 ч при комнатной температуре или 10-15 ч при 4 С. После повторного отм(1вания ТФЬ н лунки плаш ки добавляют по 200 MKJT кон1)Югата ЛТ против иммуног 1обу;п1Ь(ов человека с пероксидаз(й в конпентрации 2 -10 - 2 на ТФБ и платку инкубируют 2 ч при 37° С, н заци:ценном от света месте. Затем ее BHOBFI отмывают ТФЬ и в лунки добавляют по 2..)(j мкп 0,008%-ного с 3,7 мМ 2,4-орто- фенилендиамином в 0,05 М Na-К-фосфат ном буфере рН b,(i и инкубируют фиксированное время (от неско.гп.ких минут до 1 ч в занисимссти от активности конъюгата при в защищенном от света месте). Реакцию ос танавливают добавлением iOO мкл 4 н. Н „SO и плашку фотометрируют при длине вгхпны 485- 495 нм.Сароят графичес кую зависимость величины регистрируемого - оглощения от срока забора крови у больь п о.Увеличение поглощения соответствует увеличению конпентрации ЛГ н сыкс ротке крови.

Для прогностических целей рассчитывают среднее значение пси-лош.ения для неско:1ьких сроков забора крови и соотносят его с гоот -етствуюшим сред ним значением гкилоЕи.ения для сыворотки больного с анел,ом1.| Г ладким течением №1. V Гюльных с осложненным и

., 5 ,, 0

0

рецидивирующим течением величина средних значений поглощения выше в 2 раза и б(;лее, чем у больных с гладким течением.

Для правильной интерпретации результатов анализа важно точно выдерживать стандартные временные интерналы инкубации или в каждом опыте пересчитывать неличины поглощения на количество молей связавшегося конъюгата .

Пример 2. Способ прогноэиро- вану1я осложненного течения ИМ. Больной Р., 53 лет, доставлен в клинику через 2 ч от начала болевого приступа , По данным ЭКГ у бопьного наблюдались признаки острого нарушения коро- нарно о кровообращения. Через сутки сфс|рмирова. 1ись признаки крупноочагового lU-i. В последующие несколько дней состояние больного стабилизировалось, 6ojui утихли и через 3 сут основные биохимические показатели: активность креатинфосфокиназы,аспартатаминотранс- феразы, аланинам1 нотрансферазы и лейкоцитоз пришли в норму. Пробы крови для определения AT против цитохрома С берут 2 раза в течение 1-х суток заб11левзния, 3 раза в течение 2-х и 2 раза в течение 3-х суток. Урове 1ь AT определяют как в примере 1. Высокий уровень антител против цитохрома С ia фоне нормализации остальных биохимических показателей (креатинфосфокиназы, аспартатс1минотрансфера- зы, аланинамннотрансферазы) свиде- телйствовал о возможности рецидива ItM, И действи ельно, через 8 дн. от начала заболевания состояние больного резко ухудшилось: появились частые ангинозные приступы, а еще через 3 дн, развился рег.идив ИМ в той же зоне. Следующий рецидив произошел через 24 дн. от начала заболевания.

Пример 3. Способ прогнозирования гладкого течения 1-Ш. Больной Е., - 12 лет, поступил в клинику с диагнозом крупноочагового ИМ задней стенки левого желудочка. Пробы крови на определение антител против цитохрома С были взяты в первые сутки заболевания 2 раза и 3 раза в 3-й сутки AT в цитохрому С определяли как в примере 1. Уровень AT больного Е.представлен в сравнении с уровнем AT боль- Hoi o Р. (пример 2) с рецидивирующим течением. Низкий уровень AT против цитохрома С у больного Е. давал возможность прогнозировать гладкое течение заболевания, что и подтвердилось клиническими наблюдениями в течение 3 мес.

Пример А, Способ прогнозирования течения повторного ИМ. Больной Г., 58 лет. поступил в клинику с повторным трансмуральным ИМ. Предыдущий инфаркт был 11 лет назад. Пробы KPOBH для опреде.пения AT против цитохрома С были взяты 3 раза в течение 1-х сут, 2 раза в течение 2-х суток и 2 разг в 3-й сутки. В первые 2 сут (когда развивался некротический про- цесс) уровень AT бьш высок ( )Е 2,5), вероятно, в связи с повторным характером Ш. Однако на 3-й сутки уровень AT упал (j 0,85), что позволило прогнозировать гладкое течение забо- левания. И действительно, по клиническим показателям, в дальнейшем выздоровление шло гладко, без осложнений.

С помошью этого метода можно, прогнозировать осложненное течение болезни при нормальных значениях других биохимических показателей (пример 2, больной г.). И наоборот, при осложненном протекании начала заболевания можно прогнозировать дальнейшее выздоровление без рецидивов. Высокий уровень AT в остром периоде ИМ может быть следствием повторного ИМ (пример 4, больной Г.), но дальнейшее ил дение на третьи сутки их уровня к норме позволяет прогнозировать гладк I течение выздоровления без осложнений На основании результатов клинических исследований можно сделать заключение о том, что определение уровня AT против цитохрома С в сыворотке крови больных ИМ является важным прогностическим тестом в ранние сроки заболевания.

Формула изобретения

Способ прогнозирования осложненного течения инфаркта миокарда путем выявления антител в крови больных, отличающийся тем, что, с целью раннего выявления осложнений, в крови больных в течение 1-3 сут от начала заболевания выявляют в динамике антитела к цитохрому С с помощью иммуноферментного анализа и при повышении уровня антител в 2 раза и более по сравнению с гладким течением прогноз,ируют осложненное течение.

Изобретение относится к медицине, точнее к кардиологии, предназначено для прогнозирования рецидивов инфаркта миокарда (ИМ) в остром периоде с помощью иммунологических исследований в клинической практике. Цель изобретения - раннее выявление осложнений при инфаркте миокарда.Для этого в сыворотке крови больного определяют антитела к цитохрому С путем сорбирования цитохрома С на поли- стирольных плашках, добавления в плашки сыворотки крови больного,добавления конъюгата антител против иммуноглобулинов человека с пероксида- ЗОЙ, добавления в качестве субстрата пероксидазы перекиси водорода, а в качестве хромогена -2,4-орто-фенилен- диамина, добавления серной кислоты для остановки реакции, фотометриро- пания плашки при-длине волны 485- 49Ь нм, построения зависимости полученного поглощения от времени 5-7- кратного забора крови у больного в течение первых трех суток от начала исследований и по полученной зависимости судят об уровне антител против цитохрома С в крови больного, прямо пропорциональном вепячуте поглощения, который у больных с осложненным и рецидивирующим течением выше в 2 раза и более, чем у больных с гладким течением болезни. ю (Л со со со со