Устройство для тонкослойной хроматографии под давлением Советский патент 1988 года по МПК G01N30/00 

4

СО ОО

Изобретение относится к хроматографии и может быть использовано для анализа сложных смесей веш,еств.

Цель изобретения - расширение а нали- тических возможностей устройства для тон- кослойной хроматографии под давлением.

На фиг. 1 показано устройство, продольный разрез; на фиг. 2 - условная схема устройства; на фиг. 3 - один из вариантов расположения капиллярных штуцеров над поверхностью хроматографической пластины; на фиг. 4-8 - хроматограммы разделения сложной смеси органических веществ.

Устройство для тонкослойной хроматографии под давлением содержит корпус 1 с внутренней проточной полостью 2 для регу- лирования температуры и прижимными скобами 3.

На корпусе 1 размещена тонкослойная хроматографическая пластина 4, к которой прилегает мембрана 5. На корпусе 1 установлена также прозрачная крышка 6 с периферийным уплотнением 7 так, что между внутренней поверхностью крышки 6 и мембраной 5 образована полость 8 для создания противодавления на мембрану. Указанная полость через вентиль (не показан) сообщает- ся с источником давления (не показан). В крышке 6 расположены примыкающие к мембране 5 капиллярные штуцеры 9 для ввода пробы (показан один из них) и капиллярные штуцеры 10.1, 10.2, ..., Ю.п для ввода элюента, расположенные над периметром и внутренней зоной хроматографической пластины (фиг. 2 и 3).

Каждый из капиллярных штуцеров 10.1, 10.2, ..., Ю.п соединен (фиг. 2) через регулятор 11 расхода и побудитель 12 расхода с источником 13 элюента, а также через ре- гулятор 11 расхода с источником 14 разрежения. Капиллярные штуцеры 10.1, 10.2, ..., 10.п могут быть соединены между собой через регуляторы 11 расхода.

В предпочтительном варианте регулято- ры 11 расхода, побудители 12 расхода и источник 14 разрежения функционально связаны с блоком 15 управления.

Устройство работает следующим образом.

Пробу разделяемой смеси веществ на- носят на хроматографическую пластину предварительно либо через капиллярный штуцер 9.

В полости 8 с помощью вентиля создается определенное давление среды (жидкое- ти или газа). С помощью побудителя 12 расхода в капилярный штуцер 10.1 (или одновременно в несколько капиллярных штуцеров) подают под давлением элюент из источника 13 элюента (давление элюента зависит от давления в полости 8, толщины сорбционного слоя и вязкости элюента). Состав элюента .может изменяться по любому заранее заданному закону, можно составлять

0

5

5 0

5

0

Q 5

5

различные градиентные составы как с помощью одного побудителя 12 расхода, так и при помощи остальных побудителей 12 расхода. Для обеспечения необходимой траектории перемещения пробы через другой капиллярный щтуцер (или одновременно несколько таких штуцеров) начинают отбор элюата, подключая их к источнику 14 разрежения. Таким образом можно добиться любой траектории перемещения пробы и любой конфигурации фронта расворителя; длина пути разделения может быть неограниченной.

Данные о порядке подключения штуцеров 10.1, ..., Ю.п к источникам элюента и разрежения, о составе подаваемого элюента и его необходимом расходе получают в результате предварительной калибровки, либо детектируя результаты разделения непосредственно в ходе процесса, перемещая но прозрачной крыщке 6 торец световода оптического детектора. (В случае окращенных соединений движение элюируемых компонентов можно наблюдать непосредственно, в случае неокрашенных - с помощью, маркирующих красителей). В относительно простых случаях регулировку разделения можно проводить вручную; в более сложных работой устройства управляет блок 15 по заложенному алгоритму. В ходе разделения для получения более компактных хроматографических зон можно проводить фокусирование зон встречными потоками элюента одинакового или разного состава, подаваемых в соответствующие капиллярные штуцеры. При достаточном количестве капиллярных штуцеров хроматограф может осушествлять разделение по всем известным вариантам плоскостного разделения.

Пример. Разделяемая смесь включает: а - 1,3 - дипальмитилглицерид; b - 1,2- дипальмитилглицерид; с - дипальмитилглицерид; d - холестерин; е - пальмитиновую кислоту; f - метилпальмитат; g - 2- монопальмитат; h - 1-монопальмитат; i-мо- ногалактозилтриглицерид; j - холестерил- пальмитат; k - тетракозан; 1 - сквален; m - дигалактозилдиглицерид; п - лецитин; о - лизолецитин. Разделение .проводят на слое силикагеля размеров 20x20 см. На фиг. 4-8 расположение капиллярных штуцеров 10.1 -10.9 для ввода элюента обозначено крестиком, элюированные компоненты .смеси обозначены буквами.

На первом этапе штуцеры 10.1, 10.6 и 10.9 соединяют с источником элюента состава хлороформ - этанол - триметилборат (100:1:6), а штуцеры 10.3, 10.4 и 10.7 - с источником разрежения. После завершения разделения в первом направлении (фиг. 4) штуцеры 10.1, 10.2 и 10.3 соединяют с источником элюента состава бензон-этил- ацетат-триметилборат (100:20:7,2), штуце ры 10.7, 10.8 и 10.9 соединяют с источником разрежения, штуцеры 10.4 и 10.6 отключают. После завершения процесса во втором направлении (фиг. 5) аналогично отключают штуцеры 10.2 и 10.8, штуцеры 10.1, 10.6 и 10.9 соединяют с источником разрежения, а

10.3,10.4 и 10.7 - с источником элюента состава гептан-бензол (3:2). Результат разделения в третьем направлении показан на фиг. 6. Далее отключали штуцеры 10.3,

10.4,10.7 и 10.1, штуцер 10.9 соединяют с источником элюента-гептана, а 10.6 - с источником разрежения, чем достигается разделение компонентов k и 1 (фиг. 7). Для разделения компонентов т, п и о в капиллярный штуцер 10.1 подают элюент состава хлороформ - метанол - вода (69:21:2,6), элюат отбирают через штуцер 10.2 (остальные штуцеры перекрыты). Хроматограмма разделенной смеси приведена на фиг. 8.

Формула изобретения

Устройство тонкослойной хроматографии под давлением, содержащее корпус-с внутренней проточной полостью для регулирования температуры и прижимными скобами, тонкослойную хроматографическую пластину, размеш,енную на корпусе, мембрану, прилегающую к хроматографической пластине, прозрачную крышку с периферийным уплотнением, установленную на корпусе так, что между внутренней поверхностью крышки и мембраной образована полость для создания противодавления на мембрану,

расположенные в крышке и примыкающие к мембране капиллярные штуцеры для ввода пробы и капиллярный штуцер для ввода элюента, соединенный с источником элюента через регулятор рас.хода и побудитель расхода, отличающееся тем, что, с целью расши5 рения аналитических возможностей, устройство снабжено дополнительными капиллярными штуцерами для ввода элюента, соединенными с источниками элюента через регуляторы расхода и побудители расхода и

хч расположенными над периметром и внутренней зоной хроматографической пластины, причем все капиллярные штуцеры для ввода элюента соединены с источником разрежения через регуляторы расхода.

Изобретение позволяет расширить аналитические возможности устройства за счет введения дополнительных капиллярных штуцеров для ввода элюента, расположенных над периметром и внутренней зоной хрома- тографической пластины. Каждый из капиллярных штуцеров соединен через регулятор расхода и побудитель расхода с источником элюента, а также через регулятор расхода - с источником разрежения. Элюент подают в один или несколько капиллярных штуцеров. Для обеспечения необходимой траектории перемеш,ения пробы через другой капиллярный штуцер или несколько штуцеров отбирают элюат, подключая штуцеры к источнику разрежения. Таким, об разом, можно добиться любой траектории перемещения пробы при неограниченном пути разделения в любой конфигурации фронта элюента. 8 ил.

0U2.2

Фиг.З

if i I

7/

i

//bjkx

/fcf

1

Qf

ФигЛ

Фие.6

Ю.7

Фиг. 5

Фиг. 7

Фиг. 8