Способ определения устойчивости эритроцитов к гемолизу Советский патент 1988 года по МПК A01N1/02 

(21)3963279/28-14

(22)05.10.85

(46) 30.09„88. Бни. № 36

(71) Институт проблем криобиологии

и криомедицины АН УССР

(72),Л.К. Стусь и В.М. Куракса

(53)616.003„215(088,8)

(56)Прототип в литературе не выявлен.

(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ К ГЕМОЛИЗУ

(57)Изобретение относится к гематологии. Определяют среднее время кислотного гемолиза эритроцитов в консервированной крови, В различные сроки хранения консервированной крови измеряют количество свободного гемоглобина. Установлена зависимость меж- ду этими величинами. Так в пробах крови с исходным средним временем гемолиза эритроцитов больше 5,76 мин или меньше 4,5 мин уровень свободно- то гемоглобина резко увеличивается через 2 недели хранения, Спедователы но, такую кровь можно использовать только в течение двух недель.

э

OS

on ю ю

I Изобретение относится к мер. и может применяться па станциях и в отделеш1ях переливания крови при определении сроков использования для Трансфузии консервированной донор- с1кой крови,

I Способ осуществляют следующим обт азоМо

I При заборе крови у донор ов на i Tane взятия проб для контрольных серологических и биохимических иссле йований определяют среднее время те мопиза эритроцитов в кислотном гемо- литике после определения кислотных Ьритрограмм по

-де

JN

r.f- dN ...

J

dt

- процент эритроцитов, re-. молиаировавщих между дву- I мя отсчетами времени при

Iполучении эритрограммы;

t - время в минутах, отсчи. тднное от начала гемолиза;

I п5(ц- исходное количество эрит- роцитс)в в единице объема

Iпробы в процентах (прини; . . мается за 100%)

; ПосУ1е определения среднего вре ме- ;. ни гемолиза эритрогдитов в кислотном I гемолитике его указывают на фг акопе 1 с консервированной кровью, который ; помещают на хранение, J. Через определенные промежутки времени измеряют количество свободного гемоглобина в хранимой крови. Между лизисом эритроцитов в процессе

Сделанньй вьшод п одтвержден данными анализа состояния эритроцитов в процессе храненияj которое, оценивали по количеству свободного гемогло- 2Q бйна в надосадке консервированной

1ФОВИ.

€пргделилн содержаш1е свободного гемоглобина в консервированной крови донора № 1, в завистюсти от сроков 25 хранения

Количество свободного

30

CPQK хранения, сутки

3 7

10 14 20

гемоглобина, мг%

15 25 30 35

Таким образом очевидно, что пос 35 ле двух недель хранеш я уровень свободного гекоглобина в крови резко увеличиваетс.ч, что .делает ее нвгфи годной для переливагшя,

Пример 2. Кровь донора № 2, хранения, вьфажаюац-шйя в выходе сво- 40 взятую .на глюгицире, щательно пе- Lбoднoгo гемоглобина в межютеточноеремешали, разлили во флаконы в стерильных условиях, гермет- гчнс за1фы- ,ли и помести,т1и на хранение при 4 С, . Из флакона с кровью, оставленной

пространство, и начальным состоянием эритроцитов,- характеризующимся сред- ним временем гемолиза эритроцитов в

дованиЙ8 зэяди .эрктрогщты для опреде ления вре...5ени. их. гемолиза в кислот- ном гемоли гкке.

50

кислотном гемолитике, выявлена ) для проведешгя сврологи ческик иссле- циональная зависимость.

Примеры конкретного осуш есТЕленик способа;

Пример 1 Кровь донора К 1, взятую на глюгицире, тщательно перемешали, разлили во флаконы в стерильных условиях, герметшпю закрыли и поместили на хранение при 4 С, . Из фяакона с 1фовью, оставленной для , серологических и других исследованийз отобрали эритроциты длп определашгя их исходного среднего времени гемолиза, которое определя.г;и по формуле

t -

-0,5% 1,0 мин 0,5%;

lTSn° , J l-il ,r -

)(1,5 мии -V 0%«2 мин OJ%s2,5 мин -f. 2,6% 3sO мин 3.2%-3,4 ьшн 9,7% iин 14у4% 455 жн « 21.4% 5,0 мин + 20эЗ% 555 ьшн -i- 1. кбрО шн 4- 8,3%кб,5 t«H 4- 35l%J. 5 ,7,0 мин -1- 055% 7,5 + 0,2% 8,0 мин) 5,15 1-.5ИН .

t

1 мин + 0% 1,5 мин 4o

1

100%

+ 0%-2 мин 2,95x2-,5 мки + l3,85%X е ,чЗ,0 + 19,55%-3,5 мин + 1б,85%-4мин + 4- 13,9% 4,5 №га 11,65% 5,0 + +9,75%«5,5 мин +7,i5%Xi60 гетн -ь + 3.,0% б,5 мин , l , 1%,«7,0 мин +

-J- ) 4,29 мин.

Таким образом, среднее время гемолиза эритроцитов.крови в кислотном гемолитике р.авно 4,29 мин,, Следова- тельно,, кровь донора № 1 можно использовать для трансфузий в течение двух недель .

Сделанньй вьшод п одтвержден данными анализа состояния эритроцитов в процессе храненияj которое, оценивали по количеству свободного гемогло- Q бйна в надосадке консервированной

1ФОВИ.

€пргделилн содержаш1е свободного гемоглобина в консервированной крови донора № 1, в завистюсти от сроков 5 хранения

Количество свободного

5

0

CPQK хранения, сутки

3 7

10 14 20

гемоглобина, мг%

15 25 30 35

дованиЙ8 зэяди .эрктрогщты для определения вре...5ени. их. гемолиза в кислот- ном гемоли гкке.

для проведешгя сврологи ческик иссле-

t -

-0,5% 1,0 мин 0,5%;

lTSn° , J l-il ,r -

)(1,5 мии -V 0%«2 мин OJ%s2,5 мин -f. 2,6% 3sO мин 3.2%-3,4 ьшн 9,7%Ч iин 14у4% 455 жн « 21.4% 5,0 мин + 20эЗ% 555 ьшн -i- 1. кбрО шн 4- 8,3%кб,5 t«H 4- 35l%J. 5 ,7,0 мин -1- 055% 7,5 + 0,2% 8,0 мин) 5,15 1-.5ИН .

Среднее время гемолиза эритроци тов в кислотном гемолитике 5,15 мин, Следовательно, кровь донора № 2 может использоваться для трансфузий в течение трех недель.

Определяли содержание свободного гемоглобина в консервированной крови донора № 2 в зависимости от сроков хранения

ранения сутки

Количество свободного гемоглобина, мг%

8

11,5 25 28 30 90

Кровь донора № 2, может храниться и использоваться для первлива1шя в течение трех недель, так как уровень свободного гемоглобина не превышает в этот период 0,4 г/л.

Пример 3. Кровь донора № 3, взятую на глюгицире, перемешали, раэ лили во флаконы в стерильных условиях, герметично закрыли и поместили на хранение при 4°С, .Из флакона с кровью, оставленной для серологических исследований, отобрали для определения времени гемолиза эритроцитов в кислотном гемолитике.

t --г (-0,7%) 1,0 мин + (-1%)х :.,Х1, №-1Н + 0,65% 2,5мин -f + 0,65%«3,0 мин -S-. 1% 3,5 мин. 4- 4,5%х Х4 мин и- 11,% 4,5 мин + 14% + - + 5,0 мин -1- 14,0% 5,5 мш + t4,3%x ,0 idHH + 13,3% б,5 мин 11,95%х )7,0 мин + 8,2%-7,5 мин + 551%Х К8,0 мин + 2,0% 8,5 мин + 0,35%; Х9,0 мин +.0% 9,5 шш) 6,0 мин.

Среднее время гемолиза эритроци- той крови донора № 3 в кислотном гемолитике 6,0 мин,следовательно, она может использоваться для транс- фузий в течение двух недаль.

Определили соцержание свободного гемоглобина в консервированной крови донора № 3 в процессе хранения:

Сроки хранения, сутки 3 7

10 ,14

20

Количество свободного гемоглобина, мг%

19

26

29

45

90

После двух недепь хранения уровень свободного гемоглобина в крови значительно увеличился, т.е, такую кровь можно использовать для перели вания только в течение двух недель.

При определении описанным способом в пробах крови с исходным средним временем гемолиза эритроцитов 4,5-5,75 мин содержание свободного гемоглобина не превышало 0,5 г/л в течение .трех недель хранения.

В пробах кроЕи с исходным средним временем гемолиза .зритрои(итов бсхльше 5j75 или меньше 4,5 мин уровень свободного гемоглобина резко увеличивался через две недели хранения.

Формула изобретения

Способ определения устойчивости эритроцитов к гемолизу, включающий 35 определение среднего времени кислот- i него гемолиза эритроцитов в консер ви рованной крови, помещение крови на хранение и определеш-ie количества свободного гемоглобина в различные 40; сроки хранения, -выявление зависимос- ти прироста свободного гемоглобина при хранении крови от величины среднего времеш кислотного гемолиза., а при значении среднего времени кис- 45 лотного гемолиза 4,,76 мин опре- деляют устойчивость эритроцитов до трех недель, а за пределами этих па- ,раметров - до двух.