Способ диагностики дисфункции коры надпочечников у новорожденных детей Советский патент 1989 года по МПК G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии и может быть использовано для дородовой диагностики дисфункции коры надпочечников у новорожденных детей.

Цель изобретения - повышение точности способа и более ранее выявление патологии.

Способ ос тцествляется следующим образом.

. - Дегидроэпианд ростерон сульфат (ДЭ-сульфат) в моче беременных опре10

деляют по методу Чевари и Чаба. Из суточного объема мочи беременных .отбирают 20 мл и проводят гидролиз с 3 мл концентрированной соляной кислоты в течение 10 мин на кипящей водяной бане. Затем, после охлаждения в ледяной воде к пробе добавляют 20 мл хлороформа, экстрагируют 10 мин встряхиванием и центрифугируют в течение 2 мин при 1500 об/мин. Верхнюю фазу отбрасьшают, а нижнюю сначала промывают 2 мл 5%-ного раствора NaOH,

10

затем дважды 5 мл дистиллированной воды. После последней промьшки смесь центрифугируют, промывную воду отбрасывают, нижнюю органическую фазу выпаривают насухо при . Сухой остаток растворяют в 0,05 мл хлороформа и микропипеткой наносят на линию старта предварительно активированной пластины с силикагелем размером 10х х20 см стандарт и пробу мочи, затем помещают в герметичную ванночку, на дно которой налито 50 мл хроматогра- фической смеси (хлороформ - ацетон - этиловый спирт - уксусная кислота 80:9:9:2). Растворитель поднимается вертикально до линии финиша на 15 см, после чего пластины вынимают и высушивают на воздухе. Местоположение фракции ДЭ-сульфата идентифицируют по 20 пятну стандарта при обработке пластины фосфорномолибденовой кислотой при в течение 5 мин. Соответ- ств5гющиё места на пробах соскабливают

ние эстриола - 32,1 нмоль/сут. б) анализ мочи ребенка: суммарные 17-ОКС - 4,9 йкмоль/сут; кортизол 0,198 мкмоль/сут; N-дезоксикорти- костерон - 0,34 мкмоль/сут; суммар ные 17-КС - 3,29 мкмоль/сут; ДЭ- сульфат - 0,1 мкмоль/сут. Течение периода новорожденности без особен ностей: физиологическая убыль веса 3%, вес восстановлен на 5-е сутки, пуповина отпала на 3-й сутки. Зажи ление пупочной ранки без осложнени По прототипу и по предложенному сп 15 собу дисфункции коры надпочечников у новорожденного ребенка не выявле

Пример 2. Беременная Н, 23 года. На основании жалоб и объе тивных клинических данных поставле диагноз: беременность 26 недель, . угроза невынашивания. Результаты л бораторных исследований: а) анализ мочи матери: содержание ДЭ-сульфат 3,42 мкмоль/сут; содержание эстрив пробирки, в которые вносят по 0,2 мл 25 ола - 32,07 мкмоль/сут; б) анализ

ние эстриола - 32,1 нмоль/сут. б) анализ мочи ребенка: суммарные 17-ОКС - 4,9 йкмоль/сут; кортизол - 0,198 мкмоль/сут; N-дезоксикорти- костерон - 0,34 мкмоль/сут; суммарные 17-КС - 3,29 мкмоль/сут; ДЭ- сульфат - 0,1 мкмоль/сут. Течение периода новорожденности без особенностей: физиологическая убыль веса 3%, вес восстановлен на 5-е сутки, пуповина отпала на 3-й сутки. Заживление пупочной ранки без осложнений. По прототипу и по предложенному спо- собу дисфункции коры надпочечников у новорожденного ребенка не выявлено.

Пример 2. Беременная Н, 23 года. На основании жалоб и объективных клинических данных поставлен диагноз: беременность 26 недель, . угроза невынашивания. Результаты лабораторных исследований: а) анализ мочи матери: содержание ДЭ-сульфата- 3,42 мкмоль/сут; содержание эстриола - 32,07 мкмоль/сут; б) анализ

Изобретение относится к области медицины, в частности педиатрии. Целью изобретения является повышение точности способа и более раннее выявление патологии. Для этого в моче определяют содержание дегидро- эпиандростерона сульфата путем ее гидролиза, экстракции, разделения экстракта с последующим выпариванием нижней фазы и растворением сухого остатка нанесением его на активированную пластину с силикагелем. Местоположение фракции ДЭ-сульфата идентифицируют по пятну стандарта при обработке пластины фосфорномо- либденовой кислотой. Соответствующие места соскабливают в пробирки, вносят м-динитробензол, инкубируют и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре. При увеличении в моче содержания ДЭ-сульфата более 2 мкмоль/сут диагностируют дисфунк- , цию надпочечников. Способ позволяет повысить точность диагностики до 96%, выявлять дисфункцию коры надпочечников в более ранние сроки (на 26-й неделе беременности), а также снизить уровень перинаталь ной смертности на 2,6%. (Л сд СП со

96%-ного этанола, по 0,2 мл 2%-ного м-динитробензола и 5 н. КОН, После перемешивания и 15-минутной инкубации при 37 С в каждую пробирку приливают по 3 мл 75%-ного метанола, вновь перемешивают и через 5 мин измеряют оптическую плотность стандарта и опыта против слепой пробы на спектрофотометре при длине волны 550 нм.

Расчет проводится по формуле:

„ Е пр X С ет X Д/

.......J .. г мг/суту

ст

К (мкмоль/сут),

где С - концентрация пробы; экстинкция стандарта} Епр- экстинкция пробы; Cj.- концентрация стендарта; д суточный диурез (л); К - коэффициент перевода в

- мкмоль/сут, равный 3,4670. I

При увеличении в моче содержания

35

мочи ребенка: суммарные 17-ОКС - 8,9 мкмоль/сут, кортизол-0,5 мкмоль/ /сут, N-дезоксикортикостерон - 0,93 мкмоль/сут, суммарные 17-КС 30 2,1 мкмоль/сут; ДЭ-сульфат 0,21 мкмоль/сут. Течение периода новорожденности было с осложнением. Физиологическая убыль веса - 6,29%, на 5-е сутки вес не восстановлен, пуповина отпала на 4-е сутки, пупочная ранка полностью не зарубцевалась. Вес ребенка при рождении 2700 г, длина 49 см, весоростовой коэффициент 55. По прототипу дисфункции коры

40 надпочечников у новорожденного не выявлено, а по предлагаемому способу выявлена дисфункция коры надпочечников.

45 Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность диагностики с 84% (прототип) до 96%, выявить дисфункцию коры надпочечников в более ранние сроки, а также

ДЭ-сульфата свьш1е 2 мкмоль/сут диаг- 50 снизить уровень перинатальной смертности на 2,6%.

ностируют дисфункцию надпочечников у будущего ребенка.

Пример 1. Беременная А., 35 лет. На основании объективных клинических данных поставлен диагноз: беременность 26 недель. Результаты лабораторных исследований: а) анализ мочи матери: содержание ДЭ- сульфат а - 2,01 мкмоль/сут; содержа35

мочи ребенка: суммарные 17-ОКС - 8,9 мкмоль/сут, кортизол-0,5 мкмоль /сут, N-дезоксикортикостерон - 0,93 мкмоль/сут, суммарные 17-КС 30 2,1 мкмоль/сут; ДЭ-сульфат 0,21 мкмоль/сут. Течение периода новорожденности было с осложнением. Физиологическая убыль веса - 6,29%, на 5-е сутки вес не восстановлен, пуповина отпала на 4-е сутки, пупочная ранка полностью не зарубцевалась Вес ребенка при рождении 2700 г, длина 49 см, весоростовой коэффициент 55. По прототипу дисфункции коры

40 надпочечников у новорожденного не выявлено, а по предлагаемому способу выявлена дисфункция коры надпочечников.

45 Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность диагностики с 84% (прототип) до 96%, выявить дисфункцию коры надпочечников в более ранние сроки, а также

50 снизить уровень перинатальной смертности на 2,6%.

Формула изобретения

55 Способ диагностики дисфункции коры надпочечников у новорожденных детей путем определения биохимических параметров мочи у беременных женщин, ртличающийс я тем, что, с

514553106

целью повышения точности способа и стеронсульфат и при его содержании более раннего выявления патологии, больше 2 мкмоль/сут диагностируют в моче определяют дегидроэпиандро- дисфункцию коры надпочечников.