Способ определения послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений Советский патент 1989 года по МПК G01N33/573 

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для определения послеоперационных гвойно-воспалительных осложнений.

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение времени исследования.

Способ осуг1ествляют следующим образом.

До операции и через 24 ч после нее из вены берут кровь и получают сыворотку. Затем 0,1-0,2 мл сыворотки вносят в кювету спектрофотометра и добавляют туда 2 мл свежеприготовлен- ;ной среды, .состоящей из 0,05 М , , ЭДТА, ксанти- на и 2,5 нитросинего тетразолия (рН среды 9,3, t ), а также для инициирования реакции 20 мл ксан- тиноксидазы. Состав перемешивают и кювету помещают в ячейку спектрофотометра. При длине волны 560 нм измеряют изменение скорости супероксиданион Oj -зависящего образования. Сначала записывают скорость свободно го неингибированного автоокисления (контрольная проба), затем определяют начальную скорость автоокисления ксантиноксидазы в присутствии супероксиддисмутазы (СОД) исследуемых проб в двухволновом режиме 7, Л 560/650 нм в течение 1 мин. По стандартному графику определяют количество (в миллилитрах) сыворотки (V), вызывающее 50%-ное ингибирование этой реакции. Для подсчета удельной активности СОД дополнительно в этой же сыворотке биуретовым методом определяют концентрацию белка следующим образом. 20 мкл исследуемой.сыворотки разводят 1:500 фосфатным буфером, далее на 0,5 мл разбавленного раствора добавляют 0,5 мл раствора А состоящего из 0,05% сульфата меди, 0,1% тартрата винокислого натрия 0,5М раствора NaOH и 10% ,, и в течение 10 мин держат при комнатной температуре. Затем в эту смесь добавляют 2 мл 0,11 н. реактива Фолина в разведении 1:9 и в течение 5 мин держат в водяной бане при 55°С. Далее охлаждают во льду в те- . чение 2 мин, измеряют оптическую плотность полученных проб на спектрофотометре при длине волны 650 нм и по калибровочной кривой определяют концентрацию белка (С) в мг/мл.Далее по метбду Асада высчитывают удельную активность СОД по формуле 1/V-C, где V - количество сыворотки, которое вызывает 50%-ное ингибирование описанной реакции автоокисления ксантиноксидазы в присутствии СОД исследуемых проб, С - концентрация белка. При повышении уровня активности СОД в сыворотке относительно доопе- рационного значения диагностируют гнойно-воспалительные осложнения.

Пример 1, Больной А., 48 лет, поступил с диагнозом острьм аппендицит, по поводу чего в тот же день была произведена апендэктомия. Рана ита послойно, наглухо. До и через 24 ч после операции в сыворотке крови больного определяли СОД-актив- ность, которая была до операции 1,9 ед.акт., после операции 1,77 ед. акт., что свидетельствовало об отсутствии в ране признаков гнойного воспаления. Рана зажила первичным на,

10

, 490649

тяжением и больной через 7 дней после операции был выписан.

П р и м е р 2. Больной Д., 49 лет, поступил с диагнозом послеоперационная вентральная грыжа, по поводу которой был оперирован. До и через 24 ч после операции из вены взята кровь, в сыворотке которой определена СОД- активность. После исследования сыворотки .выяснилось, что СОД-активность через 24 ч после операции по отношению к дооперационному уровню значительно (,001) увеличилась (до рации 1,8 ед, акт., после операции 3,17 ед.акт). На основании этих данных поставлен диагноз нагноения раны, В то же время по другим клини- ко-лабораторным данным признаки гной20 ного воспаления отсутствовали. Поставленный по определенным данным диагноз йагноения раны в дальнейшем быГт подтвержден: через 48 ч отмечались боли, гиперемия и отечность области

25 раны, особенно вблизи щвов, через 3-4 дня - прорезывание швов, через 5 дней рана была раскрыта по поводу нагноения. Дальнейшее лечение нагноившихся ран проводили по общеизвестной методике. Рана зажила вторичным натяжением, БОЛЬНОЙ был выписан через 18 дней после операции.

Пример 3, БОЛЬНОЙ С,, 51 год, поступил с диагнозом острый аппендицит. Оперирован в этот же день. До и через 24 ч после операции в сыворотке крови больного определяли СОД- активность, Через 24 ч после операции по сравнению с дооперационным уровнем отмечалось повышение в сыворотке СОД-активности (до операции 0,82 ед.акт,, после операции 1,79 ед, акт,), что дало возможность в раннем послеоперационном периоде диагностировать гнойно-воспалительные процессы в ране. Это в дальнейшем подтвердилось клинически: на 3-й день после операции у больного отмечались боли, гиперемия и отечность в области JQ раны, повьш1ение общей температуры, лейкоцитоз, хотя по последующим двум показателям через 24 ч после операции поставить диагноз гнойного воспаления в ране невозможно, а первые показатели отсутствовали. Через 3 дня, после операции рана была вскрыта по поводу развивающегося в ней гнойно- воспалительного процесса, Дальнейщее лечение нагноившейся раны проводи30

35

40

45

55

ли по общеизвестной методике. Рана зажила вторичным натяжением. Больной был выписан через 24 дня после операции.

Предлагаемый способ определения послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений позволяет повысить точность диагностики с 63,3% до «lOOX. Кроме того, способ позволяет на 26 ч раньше известного диагностировать гнойно-воспалительные процессы в ране, так как исследование занимает 1 ч 15 мин.

1490649

Ф о

рмула изобретения

Способ определения послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений путем исследования сьгеоротки крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени исследования, оп- ределяют активность супероксиддисму- тазы до и через 24 ч после операции и при повышении ее уровня относительно исходного значения определяют гнойно-воспалительное осложнение.

Изобретение относится к области медицины, в частности к хирургии, и может быть использовано для определения послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений. Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение времени исследования. Сущность способа заключается в том, что до операции и через 24 ч после нее в сыворотке крови спектрофотометрически определяют скорость автоокисления ксантиноксидазы в присутствии супероксиддисмутазы и в этой же сыворотке определяют биуретовым методом концентрацию белка. Удельную активность супероксиддисмутазы определяют по методу Асада. При повышении уровня активности супероксиддисмутазы в сыворотке относительно дооперационного значения диагностируют гнойно-воспалительные осложнения. Изобретение позволяет с точностью 100% в течение 1 ч 15 мин диагностировать послеоперационные гнойно-воспалительные осложнения.