Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений Советский патент 1992 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных осложнений, прогнозирования течения раневого процесса, а также для оценки эффективности лечения ран и раневой инфекции.

Целью изобретения является снижение травматизации больного, при сохранении высокой точности.

Способ осуществляют следующим образом.

Через 24 ч после операции из вены в две пробирки по 2 мл берут кровь и смешивают с гепарином из расчета 1 ед/мл крови. Затем в первую (контрольную) пробирку добавляют 50 мкл инкубационной среды (физиологический раствор с концентрацией глюкозы 5,55 ммоль/л, хлористого кальция

0,9 ммоль/л и хлористого калия 4,5 ммоль/л), а во вторую (опытную пробирку для осуществления бактериальной нагрузки крови добавляют 50 мкл опсонизированных частиц микрококков, приготавливаемых по общепринятой методике.

Далее смесь в контрольной и опытной пробирках перемешивают и инкубируют 30 5 мин при 37°С. Все пробирки центрифугируют 10 мин при 2500 об/мин. Затем в полученных супернатантах определяют удельную активность СОД,в кювету спектрофотометра вносят 0,2 мл супернатанта и добавляют туда 2 мл свежеприготовленной среды, состоящей из 0,5 М Na2 СОз, ЭДТА (рН среды 10,2 и ), а также для инициирования реакции - 50 мкл адреналина (3-10 М). Состав перемешивают и кювету помещают в ячейку спектрофотометра. При

1

iCO

О

N)

;Јь

длине волны 560 нм измеряют изменение скорости 02 - зависимого образования. Сравнивают скорости образования адре- нохрома в присутствии или отсутствии объемов адренохрома в сыворотке. За единицу активности принимают объем исследуемой пробы, вызывающий 50%-ное ингибирова- ние реакции автоокисления адреналина в

двухволновом режиме. -у- 560/650 нм в

течение 1 мин, затем по стандартному графику определяют количество (в мл) суперна- танта (V), вызывающее 50%-ное ингибирование этой реакции.Для подсчета удельной активности СОД дополнительно в плазме исследуемой крови биуретовым методом (5) определяют конструкцию белка следующим образом: 20 мкл плазмы разводят 1:500 фосфатным буфером, далее на 0,5 мл разбавленного раствора добавляют 0,5 мл раствора А, состоящего из 0,5%-ного сульфата меди, 0,1%-ного тетрата винокис- лого натрия, 0,5 М раствора NaOH и 10% Na2COa и в течение 10 мин держат при комнатной температуре. Затем в эту смесь до- бавляют 0,2 мл 0,11 реактива Фолина в разведении 1:9 и в течении 5 мин держат в водяной бане при 55°С. Затем охлаждают во льду в течение 2 мин и измеряют оптическую платность полученных проб на спект- рофотометре при длине волны 650 нм и по калибровочной кривой определяют концентрацию белка (С) в мг/мл. Удельную актив1ность СОД вычисляют по формуле ,

где V - количество супернатанта, которое вызывает 50%-ное ингибирование описанной реакции автоокисления коантиноксида- зы в присутствии СОД исследуемых проб;

С - концентрация белка. Затем рассчи- тывают отношение СОД в первой пробирке к СОД второй пробирки и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения,

П ример 1. Больной К.,28лет, поступил с диагнозом: острый аппендицит с явлениями перитонита, по поводу чего в тот же день был оперирован. Рана зашита послойно, наглухо. Через 24 ч после операции в плаз- ме крови определяли активность суперок- сиддисмутазы до бактериальной нагрузки (СОД1) и после нее(СОД2). которые были 2,2 и 23,2. Соотношение СОД1/СОД2 (2,2/23,2) было меньше единицы (0,1), что свидетель- ствовало об отсутствии в ране признаков

гнойного воспаления. Рана зажила первичным натяжением и больной через 8 дней после операции был выписан.

П р и м е р 2. Больной В., 48 лет, поступил с диагнозом: паховая грыжа, по поводу которой был оперирован. Через 24 ч после операции из вены взята кровь, в плазме которой определена супер оксиддисмутаза до бактериальной нагрузки (СОД-i) и после нее (СОД2). После исследования выяснилось, что .71 эд.акт на 1 мг белка и ,17 ед.акт. на 1 мг белка, то соотношение СОД1/СОД2 4,1, что свидетельствует о наличии гнойно-воспалительного процесса. На этом основании был поставлен диагноз нагноения раны. В то же время по другим клинико-лабораторным данным признаки гнойного воспаления отсутствовали.

Поставленный по нашим данным диагноз нагноения раны в дальнейшем подтвержден: через 5 дней отмечались боли, гиперемия, отечность в области раны, температура тела у больного поеышена до 37,6°С. Через 1 с/т рана была раскрыта по поводу нагноения. Дальнейшее лечение нагноившейся раны проводилось по общеизвестной методике. Рана зажила вторичным натяжением.Больной был выписан через 24 дня после операции.

Предлагаемый способ является менее травматичным и простым при сохранении высокой точности,

В предлагаемом способе отсутствует этап дооперационного внутривенного взятия пробы крови, вся методика осуществляется за 1 ч 25 мин (3 ч 10 мин в прототипе). В то же время способ сохраняет высокую точность, равную 88%.

Формула изобретения

Способ прогнозирования послеоперационных гнойно-3ociдлительных осложнений, включающий определение после операции активнссти супероксиддисмутазы в крови больного, отличающийся тем, что, с целью уменьшения травматизации и упрощения способа при сохранении высокой точности, активность супероксиддисмутазы определяют при добавлении в пробу оксонизированных микрококков, рассчитывают соотношение активности фермента при бактериальной нагрузке и без нее, и при значении показателя более единицы, прогнозируют развитие осложнений.

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургии, и может быть использовано для диагностики гнойно-воспалительных процессов, прогнозирования течения раневого процесса, а также для оценки эффективности проводимого лечения ран и раневой инфекции. Целью изобретения является снижение травматичности и упрощение способа при сохранении высокой точности, Целью достигается за счет того, что через 24 ч после операции в крови определяют удельную активность суперок- сиддисмутазы до и после бактериальной нагрузки крови, рассчитывают отношение первого показателя ко второму и при значении отношения больше единицы диагностируют гнойно-воспалительные осложнения. Основными преимуществами предложенного способа являются упрощение способа (однократное взятие крови), снижение трав- матизации и сокращение времени исследования при сохранении высокой точности, равной 88%. Ё