1
(21)4099846/28-14
(22)18.07.86
(46) 15.09.89, Бюл. № ЗА (75) О.И.Яхонтова
(53)616.07(088.8)
(56)Масевич Ц.Г., Уголев A.M. и За- белинский Э.К. Методика изучения пристеночного пизцеварени я в клини-:- ческих условиях, - Тер. арх. 1967, № 8, с. 53-57.
(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ. ТРИПСИНА В БИОПСИОНЫОМ МАТЕРИАЛЕ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА
(57)Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии,
и может быть использовано для диагностики нару1иения пищеварения. Цель изобретения - повышение точности способа за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения. Дпя этого биоптат слизистой оболочки тонкой кишки (5-12 иг) помещают в 3 мл охлажденного раствора Рингера и проводят последовательную деЬорб- цию ферментов в 111нз,ттель-аппарате. К 0,5 мл полученного смыва биопсион- ного материала добавляют 1 мп веронал-мед ин ал о во г о буфера с рН 8,6 и 2 мл 40 мг% раствора бензоил-DL-apгинин-п-нитроанилида в буферном растворе (вероналоБОм) с рН 9,2. Эту смесь инкубируют при 37°С в течение 1 ч, после чего добавляют 0,5 мл .0,5 N раствора НС1 для прекращения реакции. С помощью спектрофотометра определяют оптическую плотность на длине волны 410 нм. В качестве контроля вместо смыва берут 0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл 0,5 N НС1 добавляют сразу после раствора субстрата. Далее биоптат гомогенизируют, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях и определяют состояние мембранного пищеварения. Активность трипсина определяют по формуле, приведенной в описании изобретения. Активность трипсина рассчитывают как сумму полученных активностей. Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения активности трипсина в биопсинном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным на 50% за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что, в свою очередь, позволяет улучшить диагностику целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и оценить эффективность лечения.
00 Q1
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГИПЕРФЕРМЕНТЕМИИ ПРИ НАРУШЕНИИ ВНЕШНЕСЕКРЕТОРНОЙ ФУНКЦИИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ | 2001 |
|
RU2216734C2 |
| СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ ПРОБИОТИЧЕСКИХ МИКРООРГАНИЗМОВ В УСЛОВИЯХ IN VITRO, ИМИТИРУЮЩИХ ПРОЦЕСС ПИЩЕВАРЕНИЯ У ЧЕЛОВЕКА | 2011 |
|
RU2468087C1 |
| Способ определения протеолитической активности в тонкой кишке | 1980 |
|
SU906522A1 |
| СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОБОСТРЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА | 1999 |
|
RU2185203C2 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА, РАЗВИВШЕГОСЯ НА ФОНЕ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ | 2002 |
|
RU2249433C2 |
| СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЦЕЛИАКИИ | 2007 |
|
RU2333491C1 |
| Способ диагностики патологии полостного гетерофазного пищеварения | 1989 |
|
SU1681272A1 |
| КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ И СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭТОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ | 1996 |
|
RU2124725C1 |
| ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НАРУШЕНИЙ ВРОЖДЕННОГО ИММУННОГО ОТВЕТА | 2014 |
|
RU2671832C1 |
| Способ моделирования хеликобактериоза | 2018 |
|
RU2690943C1 |
Изобретение относится к медицине , в частности, гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нарушения пищеварения. Цель изобретения - повышение точности способа за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения. Для этого биоптат слизистой оболочки тонкой кишки (5-12 мг) помещают в 3 мл охлажденного раствора Рингера и проводят последовательную десорбцию ферментов в шюттель-аппарате. К 0,5 мл полученного смыва биопсионного материала добавляют 1 мл веронал-мединалового буфера с рН 8,6 и 2 мл 40 мг% раствора бензоил-DL-аргинин-п-нитроанилида в буферном растворе (вероналовом) с рН 9,2. Эту смесь инкубируют при 37°С в течение 1 ч., после чего добавляют 0,5 мл 0,5 N раствора HCL для прекращения реакции. С помощью спектрофотометра определяют оптическую плотность на длине волны 410 нм. В качестве контроля вместо смыва берут 0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл 0,5 N HCL добавляют сразу после раствора субстрата. Далее биоптат гомогенизируют, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях и определяют состояние мембранного пищеварения. Активность трипсина определяют по формуле, приведенной в описании изобретения. Активность трипсина рассчитывают как сумму полученных активностей. Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным на 50% за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что, в свою очередь, позволяет улучшить диагностику целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и оценить эффективность лечения.
Изобретение относится к медицине, в частности гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нарушений пищеварения. ° Цель изобретения - повьшгение точности способа за счет дополнительной
оценки состояния мембранного пищеварения.
Способ осуществляется следующим образом.
Получают биоптат слизистой оболочки тонкой кишки, последний помещают
315
в охлажденный раствор Рингера (3 мл, Т ) и производят десорбцию ферментов в шготтель-аппарате, К 0,5 мл полученного смьгоа приливают 1 мл веронал-мединалового буфера с рН 8,6 и 2 мл 40 мг% раствора бензо- ил-ВЬ-аргинин-п-нитроанилида в веро- наловом буферном растворе с рН 9,2 и смесь инкубирз т при 37°С в тече- иние часа. После этого в смесь добавляют 0,5 мл 0,5 N раствора НС1 для прекращения реакции и спектрофо- тометрируют при длине волны 410 им н спектрофотометре СФ-4, В качестве контрольной пробы вместо смыва берут 0,5 мл раствора Рингера и 0,5 мл 0,5 N раствора НС1 добавляют сразу после раствора -субстрата. Расчет производят по формуле
Р
(A;:B)2jK
мг-Kg
1000 мед/мг.
где А - оптическая плотность опытного
раствора;
В - оптическая плотность контрольного раствора; 2 - пересчет на 1 мл смыва; К, - коэффициент оптической плотности, равный 0,6; . К коэффициент разведения смыва,
равный 0,16; мг - пересчет на 1 мг ткани биоптата;1000 - пересчет на миллиединицы.
Активность трипсина определяют как сумму полученных активностей.
Пример 1, При определении активности трипсина (вес биоптата 9 мг, коэффициент разведения ,1Ь) получены результаты ,032; ,,01I; ,5 мед.
П р. и м е р 2, При определении активности трипсина: вес биоптата 6 мг; К 0,16; ,003; ,001; ,5 мед.
Для 1 1 здоровых .(добровольцев) и 23 больных с поражением тонкой кишки I
было проведено определение активности трипсина по предлагаемому способу. В результате получены следующие данные: активность трипсина на уровне 12-перстной кишки в норме 4,110,4 и при патологии 3,,3; для проксимального отдела тощей кишки в норме 3,710,3 и при патологии 2,,2.
Использование предлагаемого способа позволяет повысить точность определения активнос-ти трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта по сравнению с известным на 50% за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, что приводит к улучшению диагностики целого ряда гастроэнтерологических заболеваний и дозволяет оценить эффективность проводимого ле чения о
Формула изобретен и я
Способ определения активности трипсина в биопсионном материале желудочно-кишечного тракта, включающий инкубацию биоптата в физиологическом растворе с добавлением бензоил- DL-аргинин-п-нитроанилида, обработку пробы соляной кислотой с последзгющим фотометрированием продуктов реакции при длине волны 410 нм, отличающийся тем, что, с целью пов.ьппе ния точности способа за счет дополнительной оценки состояния мембранного пищеварения, биоптат предварительно обрабатывают для десорбции трипсину, полученный после обработки раствор инкубируют при рН 8,6 в течение 1 ч и определяют в нем активность трипсина, далее биоптат гомогенизи- pjTOT, отделяют супернатант, инкубируют в тех же условиях, определяют состояние мембранного пищеварения, а активность трипсина рассчитывают как сумму полученных активностей.
