Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы Советский патент 1990 года по МПК A01H1/02 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации.

Цель изобретения - увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок.

Среда по сравнению с известной средой, содержащей сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко- агар и бидистиллированную воду, дополнительно содержит природный стероидный гликозид - цепозид Е-биозид- З-О- сЈ-Ь-рамнопиранозил(1-2)- -Ь-арабино- , пиранозид -(25К)-фурост-5-ен-3,22оЈ, 26-триол-26-0-А-В-глюкопиранозид при следующем соотношении компонентов, мас„%:

Сахароза25,00-30,00

Борная кислота0,01-0,02

0,03-0,06

1,0-1,2 0,00001-0,001

Остальное

Хлористый

кальций

Дифко-агар

Цепозид Е

Бидистиллированная вода

Способ получения цепозида Е заключается в том, что семена лука репчатого (Alium сера L) экстрагируют насыщенным водой бутанолом-1, полученный экстракт упаривают и последовательно хроматографируют на колонках с окисью алюминия и силикагелем, используя в качестве элюента систему хлороформ - метанол - вода (65:30:10). Выделенный целевой продукт контролируют в тонком слое си.шкагеля в этой системе: ,62. Полученное вещество - аморфный порошок белого цвета, т.пло 175-1 77°С, 2г - 7S° (С 10,0{ СН,ОН), мол.вес. 872 .е., Оруттоел

О 00 Од Ј

формула С+4НТ2Оа, Хорошо раствори- ется в воде, метиловом и этиловом спирте, пиридине. Нерастворим в ацетоне, хлороформе, серном эфире. Препарат не гигроскопичен, устойчив при хранении. В ИК-спектре присутствуют полосы поглощения: 900 (широкая полоса, характерная для фуростаноловых гликозидов) , 3400 см (ОН-группа) . JQ

Пример. Среду для проращивания пыльцы линии кукурузы готовят следующим образом. В 0,5 л бидистиллиро- ванной воды растворяют 300 г сахарозы, 200 мг борной кислоты, 600 мг хлористого кальция, 12 г Дифко-агара, 1 мг цепозида Е, затем доводят объем раствора до 1 л бидистиллятом. Полученную питательную среду разогревают до полного растворения компонентов 20 и наносят на предметное стекло. На застывшую питательную среду наносят пыльцу кукурузы, затем предметное стекло помещают в чашку Петри с увлажненной фильтровальной бумагой и выдержи- 25 вают в термостате при 27 С в течение 40 мин. Жизнеспособность определяют по количеству проросших пыльцевых трубок. Число проросших пыльцевых зерен определяют под микроскопом. Дли- J ну пыльцевых трубок измеряют при помощи окуляромикрометра.

Для выявления оптимального состава среды, обеспечивающей наибольший процент прорастания пыльцы кукурузы, были приготовлены и испытаны 3 варианта среды 1-3, отличающиеся содержанием цепозида.

Результаты опыта представлены в таблице. Контролем служила известная д среда (см.таблицу).

Как видно из данных таблицы, предлагаемая среда позволяет увели3

чить процент прорастания пыльцы кукурузы на 25,6%, при этом пыльцевые трубки в 2(5 раза длиннее, чем в конроле.

Среда дает возможность максимально сохранить менее жизнеспособные пальцевые зерна и расширить спектр доступной генетической изменчивости при гибридизации.

Изобретение просто в применении и может быть использовано в селекционной практике с целью получения фор растений, более продуктивных и устойчивых к неблагоприятным факторам среды.

Формула изобретения

Среда для проращивания пыльцы линий кукурузы, содержащая сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и бидистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью увеличения количества проросшей пыльцы и удлинения пыльцевых трубок, питательная среда дополнительно содержит стероидный глико- эид - цепозид Е-Јз-0-о -Ь-рамнопира- нозил(1-2)оЈ-Ъ-арабинопиранозид - (25К)-фурост-5-ен-3 22с6,26-трйол- 26-0- 5-В-гликопиранозид при следующем соотношении компонентов, мас0%:

р

5

I

Сахароза Борная кислота Хлористый кальций

Дифко-агар Указанный цепозид Е Бидистиллирован- ная вода

г- 25-30 0,01-0,02

0,03-0,06 1,0-1,20

0,001-0,00001 Остальное

5 15636416

Сравнительные данные по действию сред на прорастание пыльцы и длину трубок линии кукурузы 0,156 Rf.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к селекции растений, и может быть использовано в практической работе при гибридизации. Цель изобретения - увеличение количества проросшей пыльцы и удлинение пыльцевых трубок. В среду, содержащую сахарозу, борную кислоту, хлористый кальций, Дифко-агар и бидистиллированную воду, вводят стероидный гликозид-цепозид E-[3-0-Α-L-рамнопиранозил(1-2)-α-L-арабинопиранозид]-(25R)-фурост-5-ен-3β, 22α, 26-триол-26-0-β-D-гликопиранозид. Компоненты вводят в питательную среду при следующем соотношении компонентов, мас.%: сахароза 25,00-30,00

борная кислота 0,01-0,02

хлористый кальций 0,03-0,06

Дифко-агар 1,0-1,2

цепозид E 0,001 - 0,00001 и вода бидистиллированная - остальное. 1 табл.

Сахароза 25,00; борная кислота 0,01} хлористый кальций 0,03; Дифко-агар 1,2; цепоэид Е0,001; вода остальное Сахароза 30,00; борная кислота 0,02; хлористый кальций 0,06; Дифко-агар 1,2; цепозид Е 0,0001; вода остальное Сахароза 27,00; борная кислота 0,0; хлористый кальций 0,05; Дифко-агар 1,1; цепозид Е 0,00001; вода остальное Сахароза 30,00; борная кислота 0,02; хлористый кальций 0, Дифко-агар 1,2; вода остальное (контроль)

35 3,540,58 18,7

276 27,6±1,41 37,5

24 2,4±0,48 16,1

20

2,0+0,44 15,0