Среда для проращивания пыльцы клевера красного Советский патент 1992 года по МПК A01H1/02 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к селекции растений и может быть использовано в практической работе при отдаленной гибридизации.

Известна питательная среда для определения фертильности пыльцы, представляющая собой 40%-ный раствор сахарозы в смеси с 1 %-ным агар-агаром и добавлением в качестве стимулятора 0.008% р-ра борной кислоты.

Однако на известной среде прорастание пыльцевых зерен происходит медленно, т.е. процесс определения жизнеспособности связан с большими затратами времени. Кроме того, низок процент проросших пыльцевых зерен.

Цель изобретения - ускорение прорастания и увеличение количества проросшей пыльцы.

Поставленная цель достигается тем. что среда для проращивания пыльцы клевера красного содержащая сахарозу агар-агар стимулятор роста и бидистиллированную воду, согласно изобретению, в качестве стимулятора роста содержит парааминобензойную кислоту, при следующем соотношении компонентов, мае %

Агар-агар1,0-2,0

Сахароза30,0-35 б

Парааминобензойная к-та0.005-0 006

Бидистиллированная водаОстальное

Пример 1. Среду для проращивания клевера красного готовят следующим образом: в 50 мл бидистиллированной воды растворяют 30 г сахарозы 1 г агар-агара, 50 мг парааминобензойной кислоты и затем доводят объем раствора до 100 мл. Получается среда со следующим соотношением ингредиентов, мас.%:

сахароза30,0

агар-агар1,0

ПАБК0.005

бидистиллировнная вода Остальное В каплю полученной питательной среды наносят пыльцу клевера красного Покровное стекло переворачивают и накрывают им кольцо камеры Ван-Тигема. Пыльца оказывается внутри влажной камеры Камеры пеСО

с

VI

10 ihO 00

;§

реносят в термостат. Через каждый час пыльцу просматривают под микроскопом, чтобы установить начало ее прорастания. Опыт проводился в 3-кратной повторности. 1-й вариант - 253 пыльцевых зерна; 2-й вариант - 364 пыльцевых зерна; 3-й вариант - 213 пыльцевых зерен.

Для получения сравнительных данных по действию опытной и известных сред на прорастание пыльцы были приготовлены еще три смеси А, В, С ингредиентов, мас.%: А: сахароза30,0

агар-агар1,0

бидистиллированная водаостальное

Вхахароза30,0

агар-агар1,0

борная кислота0,008

бидистиллированная водаостальное

С: сахароза30,0

агар-агар1,0

гиббериллин0,001

бидистиллированная водаостальное

Данные по действию опытной среды и известных (А, В, С) сред приведены в табл. 1.

Пример 2. Проращивание пыльцы клевера красного осуществляли на среде, имеющей следующее соотношение компонентов, мас.%:

сахароза33,0

агар-агар1,5

ПАБК0,001

бидистиллированная вода остальное в 1-м варианте проращивали 331 пыльцевое зерно;

во 2-м варианте проращивали 218 пыльцевых зерен;

в 3-м варианте проращивали 291 пыльцевое зерно.

Результаты опыта приведены в табл. 2. П р-и м е р 3. Проращивание пыльцы клевера красного осуществили на среде, имеющей следующее соотношение ингредиентов, мас.%;

сахароза35,0

агар-агар2,0

ПАБК0,006

бидистиллированная вода остальное в 1-м варианте проращивали 331 пыльцевое зерно;

во 2-м варианте проращивали 264 пыльцевых зерна;

в 3-м варианте проращивали 275 пыльцевых зерен.

Результаты опыта приведены в табл. 3.

Пример 4. Проращивание пыльцы

клевера красного осуществляли на среде,

имеющей следующее соотношение ингредиентов, мас.%:

сахароза35,0

агар-агар 2,0

ПАБК0,008

бидистиллированная вода остальное Количество проращиваемых пыльцевых зерен по вариантам: в 1-м варианте проращивали 280 пыльцевых

зерен;

в 2-м варианте проращивали 269 пыльцевых

зерен;

в 3-м варианте проращивали 270 пыльцевых

зерен.

Результаты опыта приведены в таблице 4.

Данные, приведенные в табл. 1-4, свидетельствуют о том, что низкая концентрация ПАБК (0,001 мас.%) незначительно

стимулирует прорастание пыльцы или находится по показателям на уровне контроля. Повышение концентрации ПАБК в среде более 0,006 мас.% также нецелесообразно, так как это не ведет к дальнейшему улучшению показателей прорастания.

Как видно из табл. 1, 3, содержание па- рааминобензойной кислоты (ПАБК) в среде в количестве 0,005-0,006 мас.% позволяет сократить время проращивания пыльцы

клевера красного по сравнению с известными средами в 2-7 раз, что дает возможность ускорить процесс определения жизнеспособности пыльцы.

Кроме того, увеличивается процесс прорастания пыльцы с 13,3% - в среде В, 55,6% - в среде А до 88,4% в предлагаемой среде. Это дает возможность максимально сохранить менее жизнеспособные рекомбинант- ные пыльцевые зерна и расширить спектр

доступной генетической изменчивости при отдаленной гибридизации.

Введение в среду нового стимулятора (ПАБК) повышает ее качества, что создает лучшие условия для проращивания и позволяет получить более достоверные результаты по определению жизнеспособности пыльцы.

Формула изобретения

Среда для проращивания пыльцы клевера красного, содержащая сахарозу, агар-агар, стимулятор роста и бидистилли- рованную воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения проростания и увеличения количества проросшей пыльцы, в качестве стимулятора роста среда содержит парааминобензойную кислоту, при следующем соотношении компонентов, мас.%: агар-агар1,0-2,0

сахароза30,0-35,0

парааминобезнойная кислота

0,005-0,006:

бидистиллированная вода

остальное

Использование: сельское хозяйство, селекция растений, способы отдаленной гибридизации. Сущность изобретения питательная среда для проращивания пыльцы клевера красного содержит агар-агар, сахарозу парааминобензойную кислоту и бидистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, мас.%: 1,0-2,0; 30,0-35,0, 0,005-0,006, вода остальное. 4 табл.

Культура

Таблица

Р.------.-. ............ „.« о м II п ц d I

Г----.. .......-|-----.................„..........

Ч вари-I опытная среда Iдв с

----1111П:П:а: ЕЗ:::П1±

а - всего пыльцевых зерен;

Ь - проросших пыльцевых зерен;

с - процент проросших пыльцевых зерен;

t - время прорастания пыльцевых зерен

Ъ - проросших пыльцевых зерен;

с - процент проросших пыльцевых зерен;

с - время прорастания пыльцевых зерен

Культура

W варианта

III опытная среда

А (контроль)

i.iJn;:::oiD

Клевер

а -всего проросших зерен;

b -проросших пыльцевых зерен;

с -процент проросших пыльцевых зерен;

t -в-ремя прорастания пыльцевых зерен.

Таблица

I ....«.„-г- - ™--п™™----- -- «-- ч If вари- IV опытная среда 1 д (контролЛ ВГс --r.J.nDi::i :k;;;; i;z

Клевер

Таблица

« о м II п ц d I

Таблица 3

А (контроль)

Таблица

ч с