Способ перфузионной фиксации головного мозга у экспериментального животного Советский патент 1991 года по МПК G01N1/28 G09B23/28 

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологическим методам исследования.

Цель изобретения - повышение качества способа за счет лучшей фиксации сосудистой системы.

Способ осуществляют следующим образом.

Животное наркотизируют. Далее вскрывают грудную клетку, каюлируют аорту. В левое предсердие перфузируют 10-12%- ный раствор нейтрального формалина, подогретого до 37-38 С. Перфузию осуществляют через 10-Г5 мин после проведения двухсторонней новокаиновой вагосимпати- ческой блокады. Фиксирующий раствор вводят со скоростью 100 мл в минуту из расчета 1,5-3,0 мл на 100 г массы животного. Перфузию прекращают после остановки сердечной деятельности.

Доза новокаина (0,1 мл/100 г г- 0,25%- го раствора) рассчитана на получение наименьшего токсического действия на центральную нервную систему, а также получение

адекватной инфильтрации тканей без сдав- ления первых окончаний и венозных сосудов. В течение 10-15 мин наступает полный вагосимпатический блок, что позволяет выполнять чрезкожную катетеризацию левого желудочка сердца.

Нагревание фиксирующего раствора до 37-38°С проводят для профилактики «хо- лодового раздражения проводящей системы сердца и синусокартодиодной зоны.

Введение фиксирующего раствора в количестве 1,5-3,0 мл на 100 г массы животного позволяет компенсировать увеличение объема сосудистого русла (за счет дила- тации дисимпатизированных сосудов) в условиях вагосимпатической блокады.

Пример. Экспериментальное животное массой 8,5 кг под общим обезболиванием (10%-ный раствор гексенала из расчета 20 мг/кг внутрь и брюшину введен гепарин (7500 м.е. кг). Выполнена двухсторонняя новокаиновая вагосимпатическая блокада 0,25%-ным раствором новокаина из расчета 0,1 мл/100 г массы животного

о ее

оь |

со

(8,5 мл). Через 15 мин внутри сердечно со скоростью 100 мл/мин введен 10%-ный раствор формалина на фосфатном буфере (рН 7,2-7,4) из расчета 3,0 мл/100 г

(25,5 мл), нагретый до 37-38°С.

Сердечная деятельность не прекращалась до окончания перфузии.

Головной мозг извлекался из черепа, биоптат из области крестообразной борозды взят на исследование, проведена дофикса- ция и изготовление блоков по Н. Н. Бого- лепову.

На электроннограммах видны четко кон- туры оболочек клеток, мембранные комплексы не разрушены, цитоплазматические ор- ганеллы выражены четко.

Особую контрастность приобретают структуры сосудистой системы, что позволяет получать объективные, информативные данные при излучении головного мозга.

Формула изобретения

Способ перфузионной фиксации головного мозга у экспериментального животного, путем внутрисердечного введения фиксирующего раствора, подогретого до 37-38°С, отличающийся тем, что, с целью повышения качества способа за счет улучшения фиксации сосудистой системы, перед фиксацией проводят двухстороннюю вагосимпатичес- кую блокаду, а фиксирующий раствор вводят через 10-15 мин после блокады, при этом раствор вводят в количестве 1,5-3,0 мл на 100 г массы животного.

Изобретение относится к медицине, а именно к гистологическим методам исследования. Целью является повышение качества способа за счет улучшения фиксации сосудистой системы. Цель достигается тем, что перед фиксацией проводят новокаино- вую двухстороннюю вагосимпатическую блокаду, а фиксирующий раствор вводят внут- рисердечно при 37-38°С в количестве 1,5- 3,0 мл на 100 г массы животного. Данная фиксация позволяет исключить артефакты в структуре мозга. Ткань может быть использована для электронно-микроскопических исследований. о