Способ получения производных пристинамицина П @ или их изомеров и смесей изомеров, или их кислых аддитивных солей Советский патент 1991 года по МПК C07D498/16 

Изобретение относится к способу получения биологически активных суль- фоновых производных пристинамицина ПА

общей формулы

О

(I)

где К

алкиламиноалкил, выбранный из 2-диэт.иламиноэтил, 2-ди- изопропиламиноэтил, 2-дибу- тиламиноэтил, 2-дипропилами- ноэтил, М-этил-Н-изопропил- 2-аминоэтил, 2-(1-пирролиди- нил)-этил, 2-морфолиноэтил, 2-ди метиламиноэтил, N-бутил- Н-метил-2-аминоэтил, 2-пипе- ридиноэтил.

Цель изобретения - создание удобного в препаративном отношении способа получения сульфоновьк производных пристинамшщна П&, обладающих высокой бактериостатической активностью.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Все спектры ЯМР записаны при 250 МГц и дейтерохлороформе; химические сдвиги выражены в р.р.га, относительно сигнала тетраметилсилана. В тексте используются такие сокращения: с синлет, д дублет, т триплет, мт мултиЛшет, м неразрегаенные полосы, дд двойной дублет, дт дублет трипле- тов, ддд тройной дублет, дддд четверт ной дублет.

Для соединения общей формулы (I) все протоны обозначены в соответствии с нумерацией, указанной в следующей формуле,

32

СН3

9 11„ 13

№&

СНз J3 Д27 g Y гГ%

30 V290 %Ne17 CH32R 24f0L0l9

.41ZD

I Различные изомеры классифицированы

произвольно в соответствии с химическими сдвигами, наблюдаемыми в ЯМР.

0

0

5

о

.,

0

5

50

5

Названия изомер AJ и изомер А соединений общей формулы (I), , даны изомерам со следующими характеристиками: приблизительно 1,7 (с, -CHj при 33); приблизительно 3,8 (с, СН2 при 17); 5 (д, -Нгт) итомер А или 5 (д, -Нг7) изомер А,; приблизительно 5,50 (гаир.д, -Н0); приблизительно 6,20 (д, -Н(); приблизительно 6,6 СШ при 8); Ј8 (с, -Нго). Названия изомеров В( и изомеров Ве соединений общей формулы (I), , даны изомерам со следующими характеристиками: приблизительно 1,5 (с, -СН при 33); приблизительно 3,7 и 3,9 (2д, СНг при 17); приблизительно 4,8 (мт, -Н&); 5 (д, -Н27) изомер В или 5 (д, Н27) изомер В,; приблизительно 5,70 (линия раздела АВ, -Ни и -Н-ю); приблизительно 7,7 (NH при 8); приблизительно 7,8 (с, -НдаУ.

Название изомер А соединения общей формулы (II) дано изомеру, характеристиками ЯМР, идентичными для изомеров Af и АЈ соединений общей формулы (I) при условии, что Н при 27 характеризуется следующим: 4,7 (д, Гц).

Название изомер В соединения общей формулы (II) дано изомеру, с характеристиками ЯМР, идентичными для изомеров В и В соединений / формулы (I) при условии, что Н при 27 характеризуется следующим: 4,6 (д, ,5 Гц),

В следуищих примерах термин флеш хроматография дан методике очистки, в которой используется короткая хроматографическая колонка, функционирующая при среднем давлении (50 кПа) с использованием кремнезема с определенным фракционным составом 40-53 мкм.

В указанных примерах все соединения могут быть растворены в 2%-ном гидрохлориде.

Пример 1. К перемешанному раствору 26-(2-диизопропиламиноэтил)- сульфинилпристинамицина Ilg (изомер АЗ) (10 г) в дихлорметане (300 см3) прибавляют раствор метапериодата натрия (8,5 г) в дистиллированной воде (75 см3), рН водной фазы регулируют с 6 на 7 путем прибавления порциями твердого бикарбоната натрия с быстрым перемешиванием смеси. Перемешанную двухфазную систему охлаждают до ,

516

после чего прибавляют дигидрат двуокиси рутения (10 мг) . После перемешивания при 10°С в течение 4 ч темпе ратуру реакционной смеси доводят до комнатной и органическую фазу отделяют, водную фазу регулируют до рН 7,5 путем прибавления твердого бикарбоната натрия, затем экстрагируют дважды дихлорметаном (70 см3). Объединенные органические фазы сушат в присутствии безводного сульфата натрия,

упаривают др сухости при пониженном давлении при 40-45 С и оста

точное желто-коричневое твердое тело (10 г) растворяют в этилацетате (300 см3). Раствор промывают многократно буферным раствором цитрата при рН 4 (10x60 см3) до тех пор, пока не будет незначительного продукта, оставшегося в растворе этилацетата (контролируемого тонкослойной хроматографией и жидкостной хроматографией высокого разрешения). Промывочные воды цитратного буфера регулируют до рН 7,5 путем прибавления порциями твердого бикарбоната натрия с перемешиванием, и раствор экстрагируют дихлорметаном (100 см3, затем четыре партии по 500 см3). Объединенные экстракты сугаат в присутствии безводного сульфата натрия и упаривают при пониженном давлении при 40-45°С, по- лучая желтое твердое тело (6,8 г), которое очищают флега хроматографией (элюент:(этилацетат-метанол 92:8 по объему), собирая 30 см3 фракции. Фракция 14-30 объединяют и концент ферным раствором, рН 4 (2x50 см3). Объединенные буферные растворы промывают обратной струей этилацетата (Зх х25 см3), насыщают твердым кислым углекислым натрием и экстрагируют дирируют до сухости при пониженном давлении при 40-45 Cj получая белое твер-до хпормётаном (.100 см3, затем 2x50 см3), дое тело (3,99 г). Дальнейшую очистку

2,56 г этого вещества осуществляют флеш хроматографией (элюент:хлороформ-метанол 95:5 по объему), собирая 14 см3 фракции. Фракция 32-50 объеди- 45 няют и концентрируют до сухости при пониженном давлении с получением белого твердого вещества (2,24 г), которое растворяют в этилацетате (10 см3). Раствор медленно прибавляют к петролейному эфиру (пределы кипения 40-60°С) (100 см3) и осадок отделяют фильтрацией с получением 26-(2-диизопропиламиноэтил)-сульфонил- пристинамицина П g, (изомер А) в виде 55 белого порошка (2,1 г), плавящегося медленно с разложением свыше 110°С.

Найдено, %: С 60,3; Н 7,5; N 7,6.

C36-H N40,S.

50

Объединенные органические экстракты сушат в присутствии безводного сульфата магния и упаривают с получением светло-желтого порошка (4,3 г). Этот порошок растворяют в этилацетате (40 см3), фильтруют для удаления не1 растворимого материала и упаривают с получением 26-(2-диэтиламиноэтил)- сульфонилпристинамицина Пв (изомер А) в качестве светло-желтого порошка (3,7 г), плавящегося медленно с разложением свыше 105 С.

Найдено, %: С 54,1; И 7,5; N 7,9; S 4,6. C 4HSON40,S.

| Вычислено, %: С 59,1; Н 7,3; N 8,1i; S 4,6.

Данные ЯМР подтверждают с груктуру этого соединения.

N

0

Вычислено, %: С 50,1; Н 7,57; 7,79.

Данные ЯМР подверждают структуру этого сульфонил производного. Характеристики спектров ЯМР для всех полученных соединений представлены в таблице.

Пример 2. К энергично перемешанной смеси буферного раствора с рН 8 (350 см3) и дихлорметана (350 см3) прибавляют в одну порцию метапериодат натрия (9,1 г) при температуре окружающей среды с последующим немедлен - ным прибавлением 26-(2-диэткламино- этил)-сулъфикилпристинамицина Пе (изомер Аг) (8,5 г). Через 1 мин прибавляют дигидрат двуокиси рутения (50 мг) также в одну порцию. После

0 энергичного перемешивания в течение 10 мин смесь дсканируют в делительную воронку, промывая реакционную колбу свежим дихлорметаном (175 см3). Слои разделяют1 и органическую фазу

5 промывают водой (200 см3), сушат в присутствии безводного сульфата магния и упаривают с получением светло- коричневого порошка (5,6 г). Этот порошок встряхивают со смесью этил-

0 ацетата (150 см3) и буферного раствора с рН 4 (100 см3). После декантирования из малого количества нерастворимого дегтя слои разделяют и органическую фазу повторно экстрагируют бу5

ферным раствором, рН 4 (2x50 см3). Объединенные буферные растворы промывают обратной струей этилацетата (Зх х25 см3), насыщают твердым кислым углекислым натрием и экстрагируют дио хпормётаном (.100 см3, затем 2x50 см3),

хпормётаном (.100 см3, затем 2x50 см3)

Объединенные органические экстракты сушат в присутствии безводного сульфата магния и упаривают с получением светло-желтого порошка (4,3 г). Этот порошок растворяют в этилацетате (40 см3), фильтруют для удаления не1 растворимого материала и упаривают с получением 26-(2-диэтиламиноэтил)- сульфонилпристинамицина Пв (изомер А) в качестве светло-желтого порошка (3,7 г), плавящегося медленно с разложением свыше 105 С.

Найдено, %: С 54,1; И 7,5; N 7,9; S 4,6. C 4HSON40,S.

| Вычислено, %: С 59,1; Н 7,3; N 8,1i; S 4,6.

Данные ЯМР подтверждают с груктуру этого соединения.

Пример 3. Раствор метапериол; дата натрия (16,2 г) в воде (500 смэ); быстро прибавляют в одну порцию к , энергично перемешанному раствору 26- (2-идиэтиламиноэтил)-тиопристинаГ Ицина Hfc, (изомер А) (10,0 г) в ацетоне (500 см3) при комнатной температуре, с последующим через 15 с прибавлением гидрата двуокиси рутения (50 мг) так- ю же в одну порцию. После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 мин, за время которых образовался белый осадок, прибавляют твердый кислый углекислый натрий (20 г). После J перемешивания в течение 1 мин смесь фильтруют через диатомовую землю, промывая фильтровальную подушку дихлор- метаном (750 см3). Фильтрат тщательно перемешивают, разделяют слои и водный2 ,слой повторно экстрагируют свежим дихлорметаном (250 см3), прибавление твердого хлористого натрия в этот момент способствует разделению двух , слоев. Объединенные дихлорметановые 2 экстракты сушат в присутствий безводт ного сульфата магния и упаривают с получением 7,8 г светло-коричневого порошка. Этот продукт тщательно встряхивают с этилацетатом (150 см3) в те- J чение 5 мин, фильтруют для удаления нерастворимого материала и фильтре- вальную подушку промывают свежим этил- ацетатом (50 см3). Упаривание объединенных фильтратов позволяет получить 26-(2-диэтиламинэтйл)-супьфонилпристи- намицина lg (изомер А) в качестве светло-желтого порошка (6,1 г), плавящийся медленно с разложением при температуре свыще 105° С.

Аналогичным образом, но заменяя 26-(2-диэтиламиноэтил)-тиопристинами цина II в (изомер А) на 26-(2-диизопро- пиламиноэтил)-гиопристинамицина Пв (изомер А), (1 г), получают 26-(2-ди- изопропиламиноэтил)-сульфонилпристин- амиц«на П (изомер А) 0,53 г, т.пл. 110еС (разложение).

Аналогичным образом, но заменяя 26-(2-диэтиламиноэтил)-гиопристинамицина Hg (изомер А) на 26-(2-диэтил- аминоэтил)-тиопристинамицина Tig (изомер В) (3,95 г) и осуществляя реакцию при , получают 26-(2-диэтиламино- ,этил)-сульфонилпристинамицин Пв (изомер В) в качестве желтого аморфного порошка (3,47 г). Очистку этого материала осуществляют флега хроматографией (элюент:хлороформ-метанол 95:5

5

п

.

0

по объему), собирая 30 см3 фракции. Фракции 21-23 объединяют и концентри- , руют до сухости при пониженном давле- нии с получением 1,16 г 26-(2-диэтил- аминоэтил)-сульфонилпристинамицина IL (изомер В) в виде белого порошка, плавящегося медленно от 93°С. Найдено, %: С 56,2; Н 7,0; N 7,3; S 4,55. „

2НА0. Вычислено, %: С 56,2; Н 7,49; N 7,71; S 4,41.

Аналогичным образом, однако заменяя 2б(2-диэтиламиноэтил)-тиопристин- амицина Пв (изомер А) на 26-(2-ди- этиламннозтил) -сульфонилпристинами- цин П„ 38,5 г) (изомер А) и используя 2,8 эквивалента метапериодата натрия, получают 2б-(2-диэтиламино- этил)-сульфонилпристинамитщн Лв(изомер А) 3,7 г, медленно плавящийся от 105°С с разложением.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- этиламиноэтил)тиопристинамицин Л8 (изомер А) на 2б-(2-диэтиламиноэтил)- сульфонилпристинамицин П& (изомер ) (10,12 г) и используя 2,8 эквивалента метапериодата натрия, получают 26-(2-диэтиламиноэтил)-сульфоиил- пристинамицин П (изомер А), 5 Г, медленно плавящийся с разложением от 105°С.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- этиламиноэтил)-тиопристинамицин Пв (изомер А) на 26-(2 диизопропиламино- этил)-сульфонилпристчкамицин И- (изомер .) (Ю500 г) и используя 2,8 эквивалента метапериодата натрия, получают 26-(2 диизопропиламиноэтил)- сульфонилприетинамицин П& (изомер А), 6,5 г, медленно плавящийся с разложением от 110°С.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- этиламиноэтил)тиопристинамицин ng f (изомер А) иа 26-(К-этил-Н-изопропил-2- аминоэтил)-тяопристинамицин П- (изомер А), (3,36 г), предварительно охлаждая раствор метапериодата натрия в воде до 12 С и осуществляя реакцию при 6°С, получают 26-(№-этил-Л-изо- пропил-2-аминоэтил)-сульфонилпристинт амйцнн П& (изомер А) (2,3 г) в виде бледно-желтого порошка. Очистку этого вещества осуществляют флеш хроматографией (элюент: хлороформ-метанол 95;5 по объему), собирая 25 см3 фракции. Фракции 10-13 объединяют и концентрируют до сухости, остаток расту1639429

воряют в этилацетате с последующим упариванием для отвода остаточных следов хлороформа, что позволяет получить 26-(ы-этил-П-изопропил-2-ами- ноэтил)-сульфонилпристинамицин П ь (изомер А) (1,54 гр) в виде бледно- желтого порошка, плавящегося медленно при 103-1100С,

Найдено, %: С 7,6; S 4,4. ,5

58,7; И 7,4;

сн3согснгснэ.

N

Вычислено, %: С 59,3; Н 7,54; 7,48; S 4,28.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- этиламиноэтил)-тиопристинамицин Пв (изомер А) на 26-.(-1-пирролидинил) этшЛ-тиопристинамицин П. (изомер А) (3,28 г), предварительно охлаждая раствор метапериодата натрия в воде до 12 и осуществляя реакцию при получают 26-2Г-(1-пирролидинил)этшЛ- сульфонилпристинамицин II. (изомер А) (0,56 г) в качестве бледно-желтого порошка. Очистку этого вещества осу- ществляют флеш хроматографией (элю- ент:хлороформ-метанол 95:5 по объему) , собирая фракции 25 см3 . &ракдии 23-32 объединяют и концентрируют до сухости, остаток растворяют в этил- ацетате с последующим выпариванием для отвода остаточных следов хлороформа, что позволяет получить (1- пирролидинил)этил -сульфонштристин- амицин П. (изомер А) в качестве бледно-желтого порошка, плавящегося мед

ленно при температуре от 110 до 117 С

Найдено, %: С 59,6; Н 7,2; N 7,7; S 4,6.

C34H48N4-°4S CH3C02 CHtCH3.

Вычислено, %: С 59,0; И 7,10; N 7,65; S 4,38.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- этиламиноэтил)-тиопристинамицин Пв (изомер А) на 26-(2-морфолиноэтил)- т-иопристинамицин Но (изомер А)

лЧ

(3,36 г), предварительно охлаждая раствор метапериодата натрия в воде до 12вС и осуществляя реакцию при 6 С получают 26-(2-морфолиноэтил)-суль- фонилпристинамицин Пв (изомер А) бледно-желтый порошок. Очистку этого вещества осуществляют флеш хроматографией (элюент:хлороформ-метанол 85:5 по объему), собирая фракции 25 см3. Фракции 17-21 объединяют и концентрируют до сухости, остаток растворяют в этилацетате с последующим выпариванием для отвода остаточ

Ю

5

ных следов хлороформа, что позволяет получить 26-(2-морфолиноэтнл)-сульфо- нилпристинамицин П8 (изомер А) 0,74 г в виде белого порошка, плавящегося медленно при температуре свыше 108°С.

Найдено, %: с 57,7; Н 7,0; N 7,6; S 4,2.

C34H4eN 4°tos ° 5 CH,CO CHZCH3.

Вычислено, %: С 57,7; Н 7,0; N 7,48; S 4,23.

II р и м е р 4. Раствор метапериодата натрия (7,3 г) в воде (90 см3) прибавляют как можно быстрее в одну порцию к энергетично перемешанному раствору 26-(2-диметиламиноэтил)-тио- пристинамицина П6 (изомер А) (4,66 г) в ацетате (90 см3) при 15°С с последующим через 1 мин прибавлением ди- гидрата двуокиси рутения (50 мг) также в одну порцию. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 мин, за время которых образовывается белый осадок, прибавляют кислый углекислый натрий в твердом состоянии (4,6 г). После перемешивания в течение 1 мин смесь фильтруют, фильтрованную подушку промывают ди- хлорметаном (300 см3), после чего фильтрат тщательно перемешивают, слоям позволяют разделиться и водный слой повторно экстрагируют свежим дихлорметаном (2x100 см3). Объединенные дихлорметановые экстракты сушат в присутствии безводного сульфата магния и выпаривают с получением 3,6 г светло-коричневого порошка, который очищает флега хроматографией (элюент: хлороформ-метанол 95:5 по объему), собирая фракции 20 см3, фракции 23-45 объединяют и концентрируют до сухости при пониженном давлении с получением белого твердого тела (1,3 г), которое растворяют в этилацетате (10 см3). Раствор медленно прибавляют к петролейному эфиру (пределы кипения 40-60°С, 300 см3) и осадок отделяют фильтрацией, что позволяет получить моногидрат 26-(2-диметиламино- этил)-сульфонилпристинамнцин П6 (изомера А) в качестве белого порошка (0,7 г), т.пл. 120-122°С.

Найдено, %: С 56,9; Н 6,96; N 8,0; S 4,61.

СЙН46 098.Н20.

Вычислено, %: С 56,5; Н 7,10; N 8,23; S 4,70.

1 16

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди-

нго.

метиламиноэтил)--тиопристинамицин П, (изомер А) на 26-(Н-бутил-Ы-метил- 3-аминоэтил)-тиопристинамицин ГТ (изомер А) (10 г), получают моногид- рат 26(М-бутил К -метил-2-аминоэтил) сульфонилпристинамицина Ц. (изомера ,1 г в виде твердого тела кремового цвета, т.пл. 118-121°С. . Найдено, %: С 58,7; Н 7,20; 7,70; S 4,50. C35H5jN4OfS

Вычислено, У,: С 58,2; Н 7,53; 7,75; S 4,43. Аналогично, но однако (2-диметиламиноэтил)-тиопристинами- цин Н& (изомер А) на 26-(2-пипери- диноэтил)-тиопристинамицин II & (изомер А) 8,1 г, получают полугидрат 26-(2-пиперидиноэтил)-сульфонилприс тинамнцина Пе (изомера А) 1,4 г в виде белого порошка, т.пл. 125-127 С.

Найдено, %: С 59,2; Н 7,20; 7,80; S 4,6.

N

N

заменяя 26

N

C35HFON4° S

«5НгО.

Вычислено, %: С 59,0; Н 7,15; N 7,86; S 4,5.

Аналогично, но заменяя 26-(2-ди- метиламиноэтил)-тиопристинамицин П0 (изомер А) на 26-(2-ди-н-бутиламино- этил)-тиопристинамицин П (изомер А), 10 г, получают 26-(2-ди-1;-бутиламино- этил)-сульфонилпристинамицин (изомер А) 4,4 г в виде светло-желтого порошка, т.пл. свыше 90 С.

Найдено, %: С 60,9; Н 7,9; N 7,0; S 4,2.

Hgg S .

Вычислено, %: С 61,t; Н 7,8;

N 7,5; S 4,3.

П р и м е р 5. Раствор 26-( пропиламиноэтил)-тиопристинамицина ,IIg (изомер А) (20,6 г) в ацетоне (1030 см3) и воде (1030 см3) охлаж- дают до 0°С (внутренняя температура) с перемешиванием. Прибавляют дигидрат двуокиси рутения (0,103 г) с после- дующим прибавлением метапериодата натрия (38,72). После перемешива- ния при от (0) до (-5)°С в течение 1 ч прибавляют твердый бикарбонат натрия (20,6 г), смесь фильтруют, остаток промывают дихлорметаном (1000см3)

«Ьильтрат и промывные воды тщатель- но смегмвают, органическую фазу отделяют и йодную фазу экстрагируют ди- хлорметаном (3x200 см3). Объединенные органические фазы сушат в присутствии

12

0

5

0

5

0

5

д

5 о

безводного сульфата магния и выпаривают при пониженном давлении при 40- 45°С, что позволяет получить твердое тело кремового цвета (16,9). 11,2 г этого вещества нагревают с этилаце- татом (175 см3) и смесь отфильтровывают для удаления нерастворимого материала (1,2 г), затем охлаждают до (0) (-5)°С в течение ночи и опять фильтруют. Фильч-рат концентрируют до объема 70 см3 и раствор медленно прибавляют к петролейному эфиру (пределы кипения 40-60°С) (700 см3). Полученный осадок отделяют фильтрацией с получением (26-(2-ди-н-пропиламино- этил)-сульфонилпристинамицина Лв (изомер А) в виде твердого тела кремового цвета (7,8 г), т.пл. 129- 131°С с разложением.

Найдено, %: С 58,4; Н 7,5; N 7,4.

C36H N4°9S Ha°

Вычислено, %: С 58,7; Н 7,65;

N 7,6.

Примерб. К перемешанной суспензии 26-(2-диэтиламиноэтил)-тио- пристинамицина П6 (изомер А) (10 г) в ацетонитриле (300 см3) прибавляют воду (300 см3). Почти все твердое тело растворяется и смесь охлаждают до 2 С при добавлении тригидрата трех- хлористого рутения (30 мг) в одну порцию с последующим прибавлением, через одну минуту, метапериодата натрия (16,2 г), а также в одну порцию. Перемешивание продолжают при от 0 до 2°С в течение 5 мин, после чего смесь отфильтровывают и фильтровальную подушку промывают ацетонитрилом (50см3). К объединенным фильтрату и промывным водам прибавляют бикарбонат натрия в твердом состоянии (6 г) с последующим прибавлением дихлорметана (150 см3), а затем хлористого натрия (10,6 г) при перемешивании. Осажденное твердое тело фильтруют и фильтровальную подуику промывают дихлорме- таном (50 см3). Фильтрат тщательно перемешивают и верхнюю органическую фазу отделяют. Низшую водную фазу экстрагируют промывными водами дихлорметана, используемого выше. Объединенные органические фазы промывают насыщенным рассолом (50 см3), сушат в присутствии безводного сульфата магния и фильтруют, промывая фильтровальную подугаку дихлорметаном (50 см3). Полученный таким образом раствор (460 см3) обрабатывают, помешивая, раствором лимонной кислоты в ацетоне (0,2 м) (68 см3) в полученный молочный раствор декантируют из отложенной бурой камеди (2,2 г), затем фильтруют через ди- 5 атомовую землю с получениемпрозрачно- го бледно-желтого фильтрата. Выпаривание при пониженном давлении позволяет получить светло-желтое твердое тело (9,84 г), которое промывают этилаце- JQ татом (100 см3) с получением нитрата 26-(2-диэтнламиноэтил)-сульфонилприс- тинамицина Пв (изомер А) в виде светло-желтого твердого тела (9,6 г) плавится медленно от 130°С с разло- jj жением. Это вещество анализируют на (85%) 26-(2-диэтиламиноэтил)-сульфо- нилпристинамицина пв (изомер А) при помогли аналитической жидкостной хро-г матографии высокого разрешения на ди- 20 оксиде кремния с обращенной фазой.

Светло-желтое твердое тело (9,5 г) растворяют в воде(100 см3) и полученный раствор желтого цвета промывают 1,1, 2,2гчгетрахлорэтаном (3x10 см3), затем 25 дихлорметаном (2x10 см3). Водная фаза является практически бесцветной, прибавляют хлористый натрий (1 г) и смесь экстрагируют шесть раз дихлорметаном (50 см3) .Объединенные экстрак-30 ты сушат в присутствии безводного сульфата магния, концентрируют до объема 50 см3 и прибавляют петролейный эфир (пределы кипения 40-60°С) (100 см3). Полученный осадок фильт- ,i руют, что позволяет получить гемицит- рат 26-(2-диэтиламиноэтил)-сульфонил- пристинамицина Пв (изомер А) в виде белого порошка (3,5 г), плавится медленно с разложением от 120°С. до

Это вещество анализируют на (97,3%) 26-(2-диэтиламиноэтил)- сульфонилпристинамицина Пв (изомер А) посредством жидкостной хроматографии высокого разрешения с обращенной фа- 45

ЗОЙ.

Аналогично получают цитрат 26-3-ди- этиламиноэтил)-сульфонилпристинами- цина П6 (изомер A) (ft,О г) в виде светло-желтого твердого тела, которое eg растворяют в воде (160 см3). / (елтый раствор промывают дихлорметаном (3x40 см3), лимоннокислый натрий в количестве 10,6 г прибавляют к водной фазе, которую затем экстрагируют ди- „ хлорметаном (6x70 см3), Объединенные дихлорметановые экстракты промывают насыщенным водным раствором рассола, сушат в присутствии безводного сульфата магния и концентрируют до сухости, получая 26-(2-диэтиламнноэтил)-сульфо- нилпристинамицин Пр (изомер А) в виде бледно-желтого твердого тела (3,27 г), плавится медленно с разложением от 105°С.

Найдено, : С 59,2; Н 7,3; N 8,2; S 4,6.

C 4ltfoN409S.

Вычислено, %: С 59,1; Н 7,29; N 8,11; S 4,64.

Пример 7. Раствор 26-(2-ди- этиламиноэтил)-тиопристинамицина Пв (изомер А) (5,0 г) в ацетоне (150см3) и воде (150 см3) охлаждают до (внутренняя температура), энергично перемешивал. Прибавляют твердый три- гидрат треххлористого рутения (25 мг) с последующим немедленным прибавлением твердого метапериодата натрия (8,1 г). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч смеси прибавляют твердый кислый углекислый натрий (5,0 г). Через 1 мин смесь фильтруют через диатомовую землю и фильтровальную подушку промывают двихлорметаном (200 см3). Фильтрат тщательно перемешивают и слои разделяют. Водный . слой повторно экстрагируют свежим дихлорметаном (100 см3, затем 50 см3) и объединенные экстракты сугаат в присутствии безводного сульфата магния и выпаривают с получением 26-(2- диэтиламиноэткл)-сульфонилпристин- амицина II g (изомер А) в виде песочного порошка (4,1 г), медленно плавится с разложением от 105°С.

ПримерВ. Раствор 26-(2-ди- этиламиноэтил) -тиопристинамицина Hg (изомер А) (5,0 г) в ацетоне (150см3) и воде (150 см3) охлаждают до О °С (внутренняя температура), энергично перемешивая. Прибавляют раствор трис (трифенилфосфин)хлористый рутений (II) (100 мг) в ацетонитриле (10 см3) с последующим немедленным прибавлением твердого метапериодата натрия (8,1 г). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч прибавляют твердый кислый углекислый натрий (5,0 г). После перемешивания в течение еще одной минуты смесь фильтруют через диатомовую землю, фильтровальную подушку, промывают дихлорметаном (200 см3). Фильтрат тщательно смешивают, слои разделяют и водный слой повторно экстрагируют свежим дихлорметаном (100 см3, затем 50 см3). Объединенные экстракты сушат

15

в присутствия безводного сульфата магния и выпаривают с получением 26-(2- диэ тип амин оэ тил)-с ул ьфонилпристинами- цина П (изомер А) в виде светло-коричневого порошка (3,9 г), плавится медленно с разложением от 105 С.„

Пример9. К раствору 26-(2- диэтиламиноэтил)-сульфонилпристинтуры 0°С, после чего в нее прибавляют по каплям раствор метапериодата натрия (0,317 г) в воде (3 см3). Через 4 мин другую порцию метапериодата натрия (0,317 г) в воде (3 см3) прибавляют по каплям, а через 11 мин прибавляют тригидрат треххлористого рутения (0,5 мг) в одну порцию. Через

амицин JIj (изомер ) (1 г) в ди- JQ 6 мин перемешивание прекращают, реак- хлорметане (40 см3) прибавляют воду (20 см3). Смесь быстро перемешивают, охлаждают до 0°С, после чего в нее прибавляют раствор тригидрата треххлористого рутения (2 мг) в воде 15 (1 см3) с последующим прибавлением раствора метапериодата натрия (0,634 г) в воде (6 см3) при отсутствии света. Через 25 мин прибавляют тригидрат треххлористого рутения (1 мг) и мета-20 периодах натрия (0,168 г) и перемешивание продолжают в течение еще

ционную смесь декантируют и прибавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия до тех пор, пока весь избыток метапериодата натрия не разложится. Органическую фазу отделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (10 см3), затем еще раз 10 см3 после насыщения водной фазы кислым углекислым натрием и хлористым натрием). Объединенные органические фазы промывают водным раствором кислого углекислого натрия (10 см3, рИ 7), сушат в присутствии безводного сульфата магния

2

3

4

10 мин, рН реакционной смеси регулируют до 7 путем прибавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют дихлорметаном (2x10 см3). Объединенные экстракты промывают водой (10 см3), затем экстрагируют в разбавленную хлористоводородную кислоту (0,01 н.) (10 мл), 3 плюс вода (20 мл). Органический слой, который медленно отделяется, далее экстрагируют разбавленной хлористоводородной кислотой (0,1 н.) (1 см3). Комбинированные кислотные экстракты обрабатывают этилацетатом (40 см3) с последующим прибавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия с тем, чтобы отрегулировать рН до 7. Органический слой отделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом (30 см3). Объединенные органические экстракты сумат в присутствии безвод- ного сульфата магния и выпаривают при пониженном давлении, высушивая оста- 4 ток в вакууме, что позволяет получить 26-(2-диэтиламиноэтил)-сульфонил- пристинамицин II в (изомер А) в виде бледно-желтого твердого тела (0,252 г), плавится медленно с разло-5 жением от 105°С.

Пример 10. К раствору 26-(2- диэтиламиноэтил).-сульфонилпристинами- Н 8 (изомер Aj+Ag) (1 г) в дихлор- метане (40 см3) прибавляют воду5

(20 см3) с последующим прибавлением раствора тригидрата треххлористого рутения (2 мг) в воде (1 см3). Смесь переменмвают и охлаждают до темпера

42916

туры 0°С, после чего в нее прибавляют по каплям раствор метапериодата натрия (0,317 г) в воде (3 см3). Через 4 мин другую порцию метапериодата натрия (0,317 г) в воде (3 см3) прибавляют по каплям, а через 11 мин прибавляют тригидрат треххлористого рутения (0,5 мг) в одну порцию. Через

6 мин перемешивание прекращают, реак- 0

5

5

0

0 5 0

5

ционную смесь декантируют и прибавляют насыщенный водный раствор тиосульфата натрия до тех пор, пока весь избыток метапериодата натрия не разложится. Органическую фазу отделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (10 см3), затем еще раз 10 см3 после насыщения водной фазы кислым углекислым натрием и хлористым натрием). Объединенные органические фазы промывают водным раствором кислого углекислого натрия (10 см3, рИ 7), сушат в присутствии безводного сульфата магния

и фильтруют. К перемешанному фильтраi

ту прибавляют диатомовую землю

,(0,2 г) с последующим прибавлением по каплям раствора лимонной кислоты (0,311 г) в ацетоне (2 см3). Получен- . ную смесь отфильтровывают и фильтровальную подуику промывают небольшим количеством дихлорметана. К фильтрату прибавляют воду (50 см3), затем разбавленную хлористоводородную кислоту (0,1 н.) с получением водной фазы с рН 2-3, которую отделяют. Органическую фазу экстрагируют водой (10 см3) и разбавленной хлористоводородной кислотой (0,1 н.) с получением водной фазы с рН 2-3, которою отделяют. Органическую фазу экстрагируют водой (10 см3) и разбавленной хлористоводородной кислотой (0,1 н.) (1 см3). Объединенные кислотные экстракты промывают дихлорметаном (Юсм3), обрабатывают газовой сажей и фильтруют через диатомовую землю. Фильтрат обрабатывают дихлорметаном (20 см3) и насыщенным водным раствором кислого углекислого натрия с получением водной фазы с рИ 7. Органическую фазу отделяют и водную фазу экстрагируют дихлорметаном (2x20 см3). Объединенные органические экстракты сушат в присутствии безводного сульфата магния, концентрируют до сухости и остаток сушат в вакууме с получением 26- (2-диэтиламиноэтил)-сульфонилпристин- амицина II в (изомер А) в виде бледно- желтого твердого тела (0,24 г), пла17

1639429

вящееся медленно с разложением от 105 С.

Прим ер 11. Раствор 26-(2-ди- этиламиноэтил)-супьфинилпристинамици- на П6 (изомер ) (882 г) в дихлор- метане (15 л) прибавляют к воде (44л). Смесь перемешивают и охлаждают до 1-2°С, после чего прибавляют тригид- рат треххлористого рутения (0,88 г) в jg воде (0,38 л) с последующим прибавлением раствора метапериодата натрия (447 г) в воде (4,4 л), который прибавляют по каплям. Тригидрат треххлористого рутения (0,88 г) в воде15 (0,88 л) вновь прибавляют в смесь с одновременным прибавлением половины раствора метапериодата натрия.

Аналогично для выделения конечного продукта, однако образовывая ацетат, 2 получают 26-(2-диэтиламиноэтил)-суль- фонилпристинамицин Пе(изомер А) (510 г), плавящийся медленно с разложением от 105°С.г7

П р я м е р 12; К 3,7 г 26-{(5)-1-/ диизопропиламино-2-пропшт сульфинш-Г| - пристинамицина Лв (А, и А изомеры) в растворе, содержащем 100 см хлороформа, 200 см3 дистиллированной воды, добавляют 3,9 мг тригидрата тригидро- хлорида рутения. Смесь охлаждают до О С и через 5 мин добавляют 1,6 г метапериодата натрия. После перемешивания в течение 10 мин добавляют 3,9 мг тригидрата трихлорида рутения 3 с последующим добавлением 0,6 г метапериодата натрия. Смесь перемешивают в течение 2 ч пр 0°С и затем фильтруют через Celite1 и промывают 5 см3 дихлорметаном.. Водную фазу деканти- руют, а органическую фазу промывают сначала 50 см3 водного раствора бикарбоната натрия и второй раз 50 см3 дистиллированной воды. Органическую фазу высушивают при пониженном давлении (2,7 кПа) при 30СС. 1,8 г полученной твердой фазы бежевого цвета очищают с помощью флега хроматографии (элюирующий раствор:этилацетат - метанол 90:10 объема). Фракции с 26 5 по 36 концентрируют досуха при пониженном давлении (2,7 кПа) при ЗО С и полученный ярко-желтый твердый продукт тщательно растирают в 20 см3 этилового эфира. В результате последующего фильтрования и высушивания при пониженном давлении получено 0,7 г 26- |(S)-1 диизо-пропиламино-2-пропилД

4

5 0

5

18

сульфонил пристинамицина П & (изомер А) в виде твердой фазы белого цвета, которая плавится при 112°С.

Биологическая активность А изомеров производных пристинамицина Пв известна. Нижеследующие данные сравнительных испытаний показывают, что изомеры А и В производных пристинамицина Пв, в частности, производное 2-дя- этиламиноэтила, обладают подобной активностью.

Бактериостатическая активность ин витро. К серии пластин, содержащих известный объем (20 см3), соответствующий среде культивирования (агар Мюллера - Хинтона), добавили 1/10 этого объема из ряда разбавлений, нарастающих в геометрической прогрессии (отношение равно 2) испытуемого про- дукта. Пластины инокулировали мульти- точечным инокулятором, который наносил пятно, содержащее 10 единиц микроорганизмов, образующих колонию, инокубированных в соевом бульоне с трипсином в течение 18 ч при 37 С и - разбавленных той же средой в соотношении 1 к 100.

После инокуля)уш пластины инкубировали в течение 24 ч при 37°С.

За минимальную ингибирующую ;он- центрацию принимают самую низкие, концентрацию, при которой развитие микроорганизмов угнетено.

Активность против внутрибрюшинных инфекций мышей. Мышам ввели в утри- брюшинно 0,5 см3 соответствующей взболтанной 18-часовой культуры испытуемых микроорганизмов в Brain Heart Infusion среде (Difco) соответственно разбавленной 5%-ным свиным муцином. Эта инокуляция вызывает смерть контрольных животных в течение 24- 48 ч. Испытуемое соединение назначали подкожно дважды в день инокуля - ции с интервалом в 5 ч, первую дозу вводили спустя 1 ч после инокуляции микроорганизмами. Использованы суммарные дозы, содержавпиеся в объеме 50 см3/кг.

50%-ная лечебная доза (CD50) - это доза испытуемого соединения, которая при каждом введении является причиной выживания половины обработанных животных за период испытания (8 дней).

Получены следующие результаты.

и

Активность ин витро

СГ11 S.aureus smith, мг/мп

Один с 27 404 RP

Изомер А 8 0,5

163942920

Активность ин витро

CD jo S.aureus smith, мг/кг с:

Один с 27 404 RP

1208,5

Изобретение касается получения производных пристинамицина П6, в частности соединений общей ф-лы . 1 -он у NH Н3С Н3С Y СН3 | JMttJ« I ) о о°Нз «biu K-S (о). где R - алкиламиноалкил, выбранный из группы: 2-диэтиламиноэтил, 2-ди- изопропиламиноэтил, 2-дибутиламино- этил, 2-дипропиламиноэтил, N-3Tnn-N- изопропил-2-аминоэтил, 2-(1-пирролидинил)-этил, 2-морфолиноэтил, 2-диме- тиламиноэтил, М-бутил-М-метил-2-амино- этил, 2-пиперидиноэтил, (8)-1-диизо- пропиламино-2-пропил, или их изомеров, смесей изомеров, или их кислых аддитивных солей, обладающих бактерио- статической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных веществ указанного класса. Синтез ведут окислением тиогруппы или сульфинильной группы в соответствующем пристинамицине П 6 с помощью соли периодной кислоты и каталитическим количеством соединения рутения (8+); образующегося при окислении соединения рутения с низшей | валентностью при их молярном соотношении (100-1000):1. Лучше использовать молярное соотношение периодата к исходному продукту с тиогруппой от 5:1 до 7:1, а с сульфинильной грутг пой от 1,6:1 до 5:1, причем при окислении в первом случае используют три- гидрат трихлорида рутения и процесс ведут в среде ацетонитрила, а во втором - тригидрат трихлорида рутения в дихлорметане и воде, а сам процесс окисления вести в водной среде в присутствии органического растворителя при температуре от 0°С до температуры окружающей среды в присутствии соединения рутения (8+), полученного in situ окислением тригидрата трихлорида рутения. Эти условия обеспечивают удобное в препаративном отношении получение активных веществ. 6 з.п. ф-лы. 1 табл. (Л о оо со 4 К со см

Изомер В

0,25Формула изобретения,

он

/ с

н3с. Г™ сн, k,o

H VoV YV

к&ч

(0)

R - алкиламиноалкил, выбранный из группы, содержащей 2-ди- этиламиноэтил, 2-диизопропил- аминоэтил, 2 дибутиламиноэтил,25 2-дипропиламиноэтил, N-этил- Ы-изопропил-2-аминоэтил,i 2-(1 пирролидинил)-этил 2- -морфолиноэтил 2-диметиламино- этил, М-бутил-Н-метил-2-ами- 30 ноэтил, 2-пиперидиноэтил, (S)-1-диизопропиламино-2-про- нял,

их изомеров и смесей изомеров или ислых аддитивных солей, о т л и- 35 ющийся тем, что соединения й Формулы (II)

О

.ОН

40

О

где или 1,

R имеет указанные значения, окисляют солью периодной кислоты и

60

20

каталитическим количеством соединения восьмивалентного рутения, образующегося при окислении соединения рутения низшей степени валентности, при молярном соотношении соль периодной кислоты: соединение восьмивалентного рутения 100-1000:1 в среде растворителя.

Пример, соединение

R-заместитепь

R-заместитель

Таблица 1

Спектр ЯМР

I

2,92 и 3,10 (2 дд С при 15

rN(COt)

3,52 (широкий д-Нг6)

3,82 (с, СН2 при 17)

0,97 (д -СН3 при 30,3

этил-СН3)

1,75 (с, -С1Ц при 33)

СН2- 2,62 (q, -A )

снг3Г00 до 3,4, (мт,

-S02.CH гО1г-NO

3,82 (с, СНе при 17)

5,34 (д, -Н,3)

6,54 (дд, Ш при 8) 8,10 (с, -Нго)

1,07 (т -(С113СН,)2.) 1,56 (с, -СН3 при 33) 2,4-2,8 (мт, -802.СНгСНгК(СП2СН,)г.) 3,14 (мт, -SOACH4-) 4,07 (wr, -H2e) 4,87 (д, )

7,71 (т, широкий - Hg) 7,89 (с, -Н)

0,9-1,1 (дт, -СН3 при -С% при (СН3), СНгСН3)

1,73 (с, -СНз при 33) 2,54 (q, NCHjCH,,) 2,98 (т, -80-СНгСНгЫС) 3,23(т, -80гСН2СНгКСГ)

R-заместитель

R-заместитель

Продолжение таблицы

5,32 (д, -Й1) 5,44 (д, -Н19) 6,16 (д, -Н,,, )

6,58 (т широкий -Hg)

8,03 (с, -На,)

1,73 (с, -СН, при 33

7,82 (мт широкий,

2,60 (мт широкий, т.

снг-сн2

СНз СН2

С т

з.бо (т, -8огсн±снгнс) СН2-СН2

3,33 (т, -80 СН2СНгМГ)

5,38(д, -Игг)

5,45(д, -Н,э)

6,16(д, -Ни)

6,58(т широкий, -Hg)

8,08(с, -Над)

1,77(с, -СН3 при 33)

v /°)

2,57 (м,

съг2,97 (т, -SCy CIkNc:) 3,37 (т, -802СНгСНгМС)

-U

СН х

О)

-Н27)

-Н,9 -Hjf)

ИРОКИЙ -Нд)

-Нго) мт„

НгСНг-Ю -Нг7)

-Н13) -Н,()

широкий, -%)

)

,Ч(СИг)зСН3)

(СНг)гОТгСН3)

NCH2CHZCHZCH3) -СН3 при 33) Ш1)

СНг(СНг)гСЦз) -SO CILjC NC)

-SQ CHzCH O

Продолжение таблицы

R-заместитель

R-заместитель

:г

-Н)

Qh-i.

-)

-G2

н с

-2 ХСН 1

(с, -СН Зпри 33) (мт,/С-

-N ХСН

В0)

Н2

2,94(т, -S02CH2CH2NO

6,60(т широкий, Hg)

8,10(с, -Нго)

0,96(т, -N(CHz)CH,)J

1,2-1,6 (мт, -NfCHtCJiC

1,76(с, -СП при 33)

2,48(т, -NfCH2.(CH2)CH,

3,08(мт, -SO CH2CTleNO

3,14(мт, -50гСНг СНгНС)

5,31(дч, -11г7)

6,16(д, )

6,47(дд широкий, -Н8)

8,10(с, -Н)

1,50 (сикстет, NCHaCHЈ 1,75 (с, -СН3т ри 33)

5,31 (д, -Пгг)

6,47 (т широкий, -Нд) 8,12 (с, -H)

1,04; 1,05 (2д, -СН изопропил) 1,47 (л, -80г-9П-) СЧ з

1,75 (с, -СН3 при 33) 2,13; 2,55 (2 .

2,63; 3,16 (2 дд, М-СН

27163942928

Продолжение таблицы

2,95; 3,10 (2 дд, 15) 3(мт, ЬОСх2) 3,32 (мт

-заместитель3,75 (мт, -М при 26)

3,82 (с, С% при 17) 5,3 (с, -Н при 27) 5,46 (д, -Н при 13) 6,16 (д., -Н при 11) 6,41 GvONH при 8) 6,6 (дд, Н при 5) 8,12 (с, Н при 20)

Примечание.д- дуплет, дд - двойной дуплет,

с - синглет, мт -мультиплет.