Способ прогнозирования осложнений сахарного диабета у детей Советский патент 1991 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности к биохимии, и может быть использовано для определения гликозилирования различных белков, что лежит в основе осложнений у больных сахарным диабетом.

Цель изобретения - повышение точности прогнозирования осложнений сахарного диабета у детей.

Изобретение иллюстрируется примерами.

Пример 1. Для исследования берут по 10 мг следующих аминокислот: аланина, валина, фенилаланина, метионина, триптофана, цистеина,амида глутаминовой и аспарагиновой кислот, тирозина, лизина, аргинина и гистидина.

В каждую пробу добавляют глюкозу в конечной концентрации 2,. Объемы пробы доводят физиологическим раствором до 1,0 мл, смешивают с 1 мл 0,3 н. щавелевой кислоты и выдерживают в кипящей бане Зч. Затем

к пробе добавляют 1 мл 40% ТХУ,пробу центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 15 мин. К 1 мл надосадочной жидкости добавляют 1 мл 0,05 М раствора ТБК и пробу выдерживают на водяной бане в течение 40 мин при 40°С, Полученный раствор спектрофотометри- руют против контроля. Контрольную пробу обрабатывают, как и опытную, но вместо аминокислот берут физиологический раствор. Определение количества гликозилированных аминокислот проводят из расчета того, что 1% гликозилированных аминокислот соответствует оптической плотности стандартного раствора, равной 0,029.

Уровень гликозилирования тирозина, амида аспарагиновой кислоты, гисти- . дина и валина составляет 18-25%,аргинина, амида глутаминовой кислоты, пролина, лизина,цистеина, метионина, триптофана - в пределах от 4 до 8%, аланина и фенилаланинач- 2% от общего количества.

о

42

О

о

СП

ел

316

П р и м е р 2. Гликоэилирование перечисленных выше аминокислот проводят по методу, описанному в примере 1, но одновременно с добавлением глю козы вносят в инкубационную смесь лимонную кислоту в конечной концентрации 5,2 х . Одномоментная инкубация аминокислот с глюкозой и лимонной кислотой изменяет характер гликозилирования аминокислот. Так, гликозилирование цистеина и глута- миновой кислоты в присутствии лимонной кислоты угнетается. Напротив, степень гликозилирования аланина и фенилаланина повышается и составляет 20-23%. Активация гликозилирования наблюдается и у аргинина, лизина, метионина. Уровень гликозилирования этих аминокислот составляет 5-6%.На гликозилирование гистидина лимонная кислота практически не влияет.

В зависимости от условий практически все аминокислоты, следовательно, и все белки подвергаются глико- зилированию. Такие факторы, как повышение сахара в крови, имеющие место у больных сахарным диабетом, а также кетоацидоз (накопление кислых промежуточных продуктов обмена) яв- ляются причиной вторичных изменений многих белков, обусловленных их гли- козилированием. Гликозилирование белков приводит к изменению их свойств и является патогенетической основой осложнений, возникающих у больных сахарным диабетом.

При м е р 3. Ребенок К., 14 лет поступила в клинику с диагнозом сах. диабет III в состоянии декомпенсации Больная с 2-х лет. При поступлении отмечается высокое содержание сахара в крови - 19,45 ммоль/л, сахар в моче 42 г/сут. Определение гликоэили- рованных гемоглобинов показало, что

0

5 0

0

5

их количество также повышено и составляет 11%, т.е. в 3 раза выше нормы.

Установление этого факта коррелирует с наличием таких осложнений, наблюдаемых у больной, как микроангио- патии, ретинопатия, нефропатия.

П р и м е р 4. Больная Г., 12 лет, поступила с диагнозом сах.диабет I. Находится на инсулинотерапии 20-46 ед. Сахар в крови в пределах нормы (ТТГ - 9,45-9,85-4,8-3,1 ммоль/л). Уровень гликозилированных гемоглобинов составляет 2,7% (что соответствует норме), а содержание гликозилированных гемоглобинов повышено - 2,4% (норма 1,9%). На основании клинической картины и содержания гликозилированных белков установлено состояние субкомпенсации и отрегулирована доза инсулина. Количество гликозилированных белков плазмы крови при выписке составило 1,3%, а гликозилированных гемоглобинов - 1,7%.

Использование предлагаемого способа позволяет при повышенном содержании гликозилированных белков (гемоглобина и белков плазмы крови) сделать заключение о гликозилировании других белков, провести коррекцию лечения и предупредить развитие осложнений при сахарном диабете.

Формула изобретения

Способ прогнозирования осложнений сахарного диабета у детей путем биохимического исследования биологических жидкостей, о тличаю- щ и и с я тем, что, с целью повышения точности прогноза, определяют содержание гликозилированных белков плазмы крови и при содержании их более 1,9% прогнозируют осложнения сахарного диабета.

Изобретение относится к медицине, в частности к биохимии, и может быть использовано для определения гликозилирования различных белков, что лежит в основе осложнений у больных сахарным диабетом. Целью изобретения является повышение точности прогнозирования осложнений сахарного диабета у детей. Цель достигается путем определения содержания гликозилированных белков в плазме крови. Содержание их более 1,9% дает основание прогнозировать осложнение сахарного диабета.

Редактор Е.Корина

Составитель Т.Малютина Техред С.Мигунова

Заказ 1264

Тираж 417

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Корректор Л.Бескид

Подписное