Способ взятия крови из сердца эмбрионов коров Советский патент 1991 года по МПК A61K35/14 C12N5/00 

{21)4636099/15 (22) t2.01.89 (46) 30.04.91.Бюл N:16 (71) Научно-мсследсвэтельсйий ветеринарный институт

(72} Н.И.Гурьяноа Я.А.Крылов и В.А.Гурьянова

(53} 578.089,822 (088.8) (56) Методические рекомендации по ускоренному получению сыворотки крови животных для культивирования клеток и вирусологических исследований методом центрифугирования. М,, 1985, с. 2 - 5.

{54} СПОСОБ ВЗЯТИЯ КРОВИ ИЗ СЕРДЦА

3iV,DFi/ioi-;oB КОРОВ

(57) Изобретение относится к биотехнологии, Цель изоСрешения - повышение эффективности способа. Способ взятия крови из сердца эмбрионов корос включает извлечение 5 - 9-месячных эмбрионов из матки, подвешивание их вниз головой за задние конечности, проведение кардиопункций в области углубление у краниальной части грудной каста и сбор крови поэтапно: самотеком, с юмощью массажа от конечности к сердцу при подъеме гоповы и шеи выше проекции сердца и массажа головы м шеи в сторону сердца. 2 табл., 2 ил.

Изобоетзние относится к биотехнологии, в частности к способам сбора крови у эмбрионов коров,

Цель изобретения - повышение эффективности способа.

На фиг.1 изображена система для взятия крови у эмбрионов с массой выше 3 кг; на фиг.2 - то же, у эмбрионов с массой меньше 3 кг.

Устройство для взятия крови содержит одну или две иглы 1 ДЛР взятия крови, которые изготовлены из нержавеющей стали с внутренним диаметром 3 мм, длиной 120 - 150 мм, острие иглы имеет косой серповидный срез для предупреждения тромбообра- зованйя, две селиконовые трубки 2 надеты на резиновые пробки 3, которые посредством дтаерстий укреплены на иглах на расстоянии 15-20 мм от концов, противоположных их остриям, а противоположные от- оерстяя селиконовых трубок 2 закрыты реk

зиновыми пробками 4, таким образом достигается изоляция игл от внешней среды, два селиконовых шланга 5 длиной 250 мм, диаметром 4 мм, по которым кровь поступает в стеклянный флакон 6 емкостью 250 - 500 мл; селиконовые шланги 5 соединены с концами игл, противоположными их остриям, резиновую пробку 7, которая укорочена на 10 мм у вершины усеченного конуса ее; резиновая пробка 8 служит для перекрытия флакона для сбора крови и имеет два отверстия, через которые протянуты селиконовые шланги 5 и одно отверстие для трубки 9 из нержавеющей стали, на которую надета се- лнкомсвая трубка ватного фильтра 10, круг из клеенки 1 с тремя отверстиями для селиконовых шлангов 5 и трубки из нержавеющей стаям, он служит для предупреждения загрязнения пробки и горлышка флакона для сборз крови.

Пример 1. Взятие крови у эмбрионов коров по прототипу.

Jb

4

ю о

СП

Готовят к работе закрытые, исключающие контакт крови с внешним воздухом системы: одинарные и типа елочка. В флаконы наливают 2 %-ный раствор NaCI из расчета 4 - 5 мл на 100 мл крови; пробки, герметично вставленные во флаконы, обертывают ватой, а сверху бумагой. Смонтированные системы для взятия крови автокла- вируют при 2 атм. 60 мин. У клинически здоровых коров после убоя (при нутррвке) извлекают эмбрионы и подвешивают за задние конечности на высоте 1,5 м. Делают разрез кожи между 3 - 4-м ребрами с левой стороны эмбрионов. Через проведенный разрез кожи проводят левостороннюю кар- диопункцию иглой от закрытых систем: одинарной у маленьких эмбрионов или типа елочка у больших эмбрионов, и кровь свободно до окончания стекает во флаконы. Флаконы заполняют кровью на 50 - 60% их объема, после чего селиконовые трубки перекрывают кровоостанавливающими зажимами, а ватные фильтры - пружинными зажимами.

По прототипу кровь взята у 28 эмбрионов коров с живой массой 1,0 - 20,5 кг.

8 табл. приведены результаты эффективности обескровливания,

Как видно из табл.1, процент БЗЙТОЙ крови к живой массе по прототипу незначителен (если учесть, что теоретически объем крови составляет 8% от живой массы плода коровы и составляет у эмбрионов с живой массой до 5 кг 3,07 ± 0,23%; 5 - 10 кг 2,87 ± 0.16%; свыше 10 кг 2.33 ± 0,26%, Кроме того, отмечается высокий коэффициент вариация (превышает 27%), что говорит о нестабильности результатов при взятии крови.

Взятие крови у эмбрионов коров с ис- пользов анием описанных устройств осуществлением прокола ткани в области углубления у краниальной части грудной кости (спо- соб1),

Во флаконы систем взятия крови наливают 5%-ный раствор NaCf из расчета 2-3 мл на 100 мл крови. Кровь стекает во флаконы до прекращения из эмбрионов, подвешенных в вертикальном положении, как по прототипу.

По способу 1 кровь взята у 62 эмбрионов коров с живой массой 1,0 - 33,2 кг {табл.1}. Как видно из табл. 1, процент взятой крови к живой массе по способу 1 больше, чем по прототипу и составляет у змбрионов С живой массой до 5 кг 4,77 ±0,11%; 5 - 10 кгЗ,93 ±0,14%; свыше 10 кг 3,31+0,23%, Но существуют существенные различия процента взятой крови в зависимости от

живой массы эмбрионов - чем больше живая масса эмбрионов, тем ниже процент взятой крови.

Взятие крози по предлагаемому способу устройством проводится следующим образом.

Пуповину эмбриона пережимают кровоостанавливающим зажимом перед извлечением эмбриона из матки, эмбрион подаешивают за задние конечности, делают разрез кожи в области углубления около краниальной части грудной кости, место разреза кожи обрабатывают спмртом, флакон 6 системы взйтия крови устанавливают на подставке, с ватного фильтра 10 убирают пружинный зажим, яглой для взятия крови 1 проводят кардиопункцию через углубление около краниальной части грудной кости, убирают зежим с селиконового шланга 5, и

кровь начинает поступать во флакон б, который заполняют коовью до 80% его объема, после чего селиконовый шланг 5 и ватный фильтр 10 перекрывают пружинными зажимами; если кровь от эмбриона не поместилась в один флакон, то берут вторую систему (СВК-1 или СВК-2) и иглой 1 второй системы делают прошл трубки у СВК-1, дальнейшие операции те же, JTC и при заполнении первого флакона, и т.д. после свободного стекзния крови (до прекращения) из эмбриона проводят принудительное удаление крови, заключающееся Б массаже тела, поднятии головы и шеи выше проекции сердца до полного обескровливания.

По предлагаемому способу кровь взята у 32 эмбрионов коров с живой массой ,9 - 29,1 кг.

Процент взятой крови к живой массе по предлагаемому способу составляет у эмбрионов с живой массой до 5 кг5,35 ± 0,23%; 5 - 10 кг5,20 ±0,18%; свыше 10 кг 5,00 ±0,13%, а различия по проценту взятой крови в за- t висимости от живой массы эмбрионов практически отсу гствуют.

Кроме того, при взятии крови по предлагаемому способу у 15 эмбрионов с живой массой 3,0 -21,2 кг объемы крови, забираемой на первом и втором этапах, регистрировались отдельно.

0 В табл,2 приведены результаты эффективное обескровливания по проценту взятой крови к живой мзссе на первом и втором этапах и по предлагаемому способу.

Из табл.2 видно, что процент взятой

5 крови к. живой массе эмбрионов составил 5,14 ± 0,10%, в т.ч. на первом этапе 3,66 - 0,10% и на втором этапе 1,48 + 0,07% или в среднем 1 /3 объема от забираемой у эмбрионов крови.

Формула изобретения

Способ взятия крови из сердца эмбрионов коров, включающий извлечение из матки 5 - 9-месячных эмбрионов, подвешивание их вниз головой зз задние конечности, проведение левосторонней кзрдиопун- кции иглой, подсоединенной к емкости, внутри которой создано отрицательное давление, и сбор крови, о т л и ч г ю щ и и с я

тем, что, с целью повышения эффективности способа, кардиопункцию проводят в области углубления у краниальной части грудной кости, а сбор крови осуществляют поэтапно

в результате следующих операций: поступления крови в сердце самотеком, массажа тела в направлении от задней конечности к сердцу, подъема головы и тела эмбриона выше проекции сердца и массажа головы и

шеи в сторону сердца.

Таблица 5

Способ 1 отличается от прототипа тем, что для взятия крови используют описанные устройства, а хзрдиопункцию проводят через углубление у краниальной части грудной косги.

Таблица 2

Продолжение таблицы 1

Фив.1