Способ моделирования асептического перитонита Советский патент 1991 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и биофизике, а именно к способам моделирования воспалительных процессов, и может быть использовано для определения функций защитных и транспортных систем организма в брюшной полости.

Цель изобретения - повышение воспроизводимости .

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят водный коллоидный раствор феррита марганца, для чего берут 10,4 г хлорного железа FeCl j и растворяют в 100 мл дистиллированной воды и 6,0 г сернокислого железа FeSO и

сернокислого марганца MnSO. в любой пропорции и также растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Полученные растворы смешивают и эту смесь вводят в раствор щелочи, взятой с избытком (10,0 г NaOH в 100 мл воды). Полученный осадок подогревают до 70-90°С, затем промывают дистиллированной водой до рН 7,5-8,5 и фильтруют через двойную фильтровальную бумагу. Объем осадка доводят до 50 мл, рН - до 5,5- 6,5 добавлением 0,1 н. НС1 и ресус- пендируют ультразвуком или путем растирания осадка. Полученная суспензия содержит высокодисперсные частицы феррита марганца сферической формы

С& Јь

СО

СЛ

СО

сп

размером 12-20 нм, концентрация дисперсной фазы 5.1)(-101Т частиц в 1 мл, что соответствует 75-80 мг/мл.

Берут белых беспородных крыс весом 160-180 г и внутрибрюшинно однократно вводят полученный коллоидный раствор в количестве 0,3-1,5 мл. Затем через 5-10 мин наблюдают скорость свертывания крови у контрольных и эксперимен- тальных животных и при снижении ее в 1,5-2,0 раза констатируют качало воспалительного процесса. Через 45- 60 мин начинают анализ кала магнитометрическим методом (например, мето- дом ферромагнитного резонанса). По появлению и динамике магнитных частиц в кале определяют стадии и характер процесса в реактивной фазе. При стационарной концентрации элиминируемых частиц за промежуток времени, соответствующий практически полному выделению, диагностируют острое развитие процесса, при мультимодальном распределении - хроническую патологию.

Пример 1. Берут белую здоровую крысу линии Вистар массой 160 г и вводят ей однократно внутрибрюшинно 24 мг феррита марганца при рН 5,5 (соответствует 15 кг на 100 г массы), полученного как описано выше. Предварительный анализ показал, что венозная кровь, взятая из глазного синапса свертывается 1,5 мин. Через 7-8 мин после введения высокодисперсного феррита время свертывания крови, взятой из того же глаза, равна 2,5-3,0 мин. Крысу декапитируют и вскрывают брюш- ,ную полость, в которой определяют по- шышенную концентрацию клеток (за исключением макрофагов), характерных для воспалительного процесса. Особенно много тромбоцитов и нейтрофилов, т.е. увеличению длительности свертывания крови соответствует начало раз- вертывания воспалительного процесса в брюшной полости. К моменту декапи- тации часть частиц уже находится в печени и селезенке, что указывает на значимость этих органов в элиминации феррита. В кале частицы в исследуемый период не обнаружены.

Пример 2. Берут белую крысу весом 175 г и вводят ей внутрибрюшинно 70 мг (40 мг на 100 г массы) высокодис- персного феррита марганца при рН 6,0. Через 5 мин наблюдают снижение скорое ти свертывания крови в 1,5 раза

Q 5 0 5

Q с

5

0

0

(2,4 мин) и констатируют начало развертывания патологического процесса (стадия экссудации). Через 30 мин проверяют наличие частиц феррита в кале методом ферромагнитного резонанса. Образцы кала набираются в стандартные капилляры, изготовленные из кварца или стекла, и помещаются в резонатор ЭПР спектрометра. Прибор показывает отсутствие частиц феррита через 30 и 40 мин. На 50-й минуте обнаруживаются)следовые количества феррита марганца в кале. Продолжают наблюдения каждые 10-15 мин. Анализ показал монотонное нарастание концентрации частиц, которая через 1 ч 40 мин достигла стационарного значения. Через 3,6,12 и 24 ч проверялись образцы кала. Прибор показал во всех случаях практически одинаковую концентрацию частиц. Далее измерения проводятся через каждые 12- 18 ч. Через 96 ч после введения начинают наблюдаться отклонения в значениях количества феррита, выводимого с калом. Получаемые величины ни в одном из измерений не превышали первоначально достигнутого стационарного значения концентрации частиц в кале, но при некоторых измерениях определялись только следовые количества магнитных частиц и ряд хаотически расположенных максимумов. Средний выброс кала на протяжении всего периода исследования был одинаков. Можно сделать вывод, что остро развиваемый воспалительный процесс перешел через 4 сут. в хронический. В целом процесс выведения феррита марганца длился около 45 сут. При вскрытии не обнаружено магнитных частиц в мембранах, выстилающих брюшную полость. Следовые количества феррита обнаружены в печени, однако гепатотоксич- ных состояний в ней не отмечено. В брюшной полости обнаружено повышенное количество перитониальных макрофагов, которые все еще находятся в активированном состоянии.

П р и м е р 3. Берут белую крысу линии Вистар весом 180 г и внутрибрюшинно вводят 135 мг высокодисперс- кого феррита марганца (из расчета 75 мг на 100 г массы) при рН 6,5. Через 5 мин наблюдают снижение скорости свертывания крови в 2 раза - 3,5 мин. Следуя примеру 2, наблюдают выведение магнитных частиц из организма. Процесс выведения частиц носит мультимодальный характер. Лан- ная концентрация токсична для животного. При вскрытии, после окончания выбросов феррита с калом, обнаружено инкапсулирование значительного количества магнитных частиц в жировой ткани и патологические изменения в печени и почках.

1 Использование предлагаемого способа моделирования перитонита позволяет по сравнению с существующими повысить точность и воспроизводимость реактивной фазы перитонита, выяснить харак тер клеточного ответа на индуцируемое воспаление и определить транспортные возможности организма по удалению вредных соединений. Исключается необ1649595

ходимость специальной подготовки тканей и клеток для исследования, так как частицы феррита марганца являются стойкой магнитной и электронноплотной меткой.

Формула изобретения

Q Способ моделирования асептического перитонита путем введения в брюшную полость экспериментального животного экзогенных веществ, отличающийся тем, что, с целью повыше5 над воспроизводимости, однократно вкутрибрюшинно вводят высокодисперсные частицы феррита марганца при рН 5,5-6,5 в дозе 15-75 мг на 100 г I массы.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть применено при моделировании перитонита. Цель изобретения - повышение воспроизводимости. В качестве раздражающего вещества животному однократно вводят высокодисперсные частицы феррита марганца при рН 5,5- 6,5 в количестве 15-75 мг на 100 г массы. Затем наблюдают скорость свертывания крови и появление магнитных частиц в кале. Начало р.азвития воспалительного процесса констатируют по снижению скорости свертывания крови в 1,5-2,0 раза. Стадии и характер процесса в реактивной фазе определяют по динамике изменения уровня концентрации ма.гнитных частиц в кале. При стационарной концентрации элиминируемых частиц диагностируют острое развитие процесса, при муль- тимодальном распределении - хрони- ч Ческую патологию. Способ позволяет выделить и исследовать реактивную фазу асептического перитонита. СЛ