Способ получения диагностического средства для определения дегидрогеназы Советский патент 1991 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии.

Цель изобретения - обеспечение длительного сохранения диагностикума.

Согласно предлагаемому способу применяют носитель, который связывает один окислительно-восстановительный краситель, смесь веществ из субстрата, соответствующего подлежащей обнаружению дегидрогеназе, соединение, передающее водород по меньшей мере одного окислительно-восстановительного красителя, и при известных условиях буферную систему, причем носитель имеет полярные группы и смесь веществ имеет рН менее 5,0. При этом получают диагностическое средство для обнаружения патологически повышенной концентрации дегидрогеназы, которое наряду со способностью к длительному хранению, длительное время, например более двух лет, имеет высокую диагностическую точность.

В качестве носителя применяют тампон, содержащий волокна целлюлозы Изготовленное диагностическое средство пригодно для внутренних исследований тела, например для диагноза рака в половой области у женщин. Диагностическое средство может храниться многие годы, обладает высокой диагностической точностью, несмотря на короткое время нахождения в пациентке, максимум 10 мин, и гарантирует прочную связь, при случае, образованного при диагнозе красителя с волокнами целлюлозы тампона, так что переход красителя на слизистую влагалища исследуемой пациентки не происходит.

Для этого могут быть применены обычные гигиенические тампоны. Последние не должны быть намотанными, а иметь продольный шов. Тампоны из волокон целлюлозы обладают тем преимуществом, что прочно связывают краситель, образовано о чэ

4 О 00

со

ный при применении диагностического средства.

Тампон может состоять также и из других волокон, например из гидрофильных искусственных волокон, которые для увеличения их поверхности и способности абсорбировать могут быть выполнены полыми. Кроме того, могут быть применены тампоны из смеси волокон различного рода, например натуральных и синтетических во- локон, если волокна гидрофильны и обладают полярными группами.

Диагностическое средство, содержащее тамон, пригодно не только для диагнозов внутри тела, но и для диагнозов снаружи Тела. В последнем случае жидкость тела, подлежащая исследованию, приводится в соприкосновение с областью тампона, который содержит упомянутую смесь веществ.

Комбинация из носителя и смеси ве- ществ перед сушкой помещается в упаковочную оболочку. Таким образом, после сушки упаковочная оболочка должна быть только заделана и закрыта. Поскольку заделка продолжается короткое время, то ус- траняется опасность того, что снова влага попадет на носитель и смесь веществ и ухудшит стойкость диагноситического средства к хранению. Согласно специальной форме выполнения упаковочная оболочка, которая содержит носитель и смесь веществ, закрывается еще в сушильном устройстве. Этим обеспечивается низкое влагосодержание, достигнутое путем сушки, сохраняется также и после закрытия упа- ковочной оболочки в ее внутреннем пространстве.

Для применения диагностического средства в форме тампона удобно, когда тампон помещен в аппликатор, при том там- пон может быть введен в полость тела, на- пример во влагалище, без непосредственного прикосновения к нему пальцами и без опасности инфицирования.

При изготовлении предлагаемого диаг- ностического средства тампон помещают во вводимую гильзу аппликатора. При этом предпочтительно тампон поместить в аппликаторе до наложения смеси вещества, по- скольку тогда аппликатор служит держателем для тампона, когда на последний наложена смесь веществ.

Выгодно, когда аппликатор имеет вводимую гильзу с непроницаемой для жидкости внутренней стенкой и тампон так установлен во вводимой гильзе, что внутри вводимой гильзы, перед вводимым концом тампона, образовано свободное пространство. Это пространство может временно принять смесь веществ подлежащую нанесению на тампон, и, таким образом, содействует ускоренному протеканию процесса. Внутренняя стенка, непроницаемая для жидкости вводимой гильзы аппликатора, делает возможной быструю подачу смеси веществ на тампон в жидком виде без впитывания стенкой вводимой гильзы или проникновения сквозь нее.

Раствор смеси веществ может впрыскрг- ваться в упомянутое свободное пространство, например, посредством дозирующего устройства. Это впрыскивание может быть произведено очень быстро, вследствие чего может быть повышена скорость изготовления.

В качестве упаковочной оболочки применяется, предпочтительно, трубочка, открытая с одной стороны, из металла высокой теплопроводности с упругой запорной пробкой. Такая трубочка, например, из алюминия, проста в изготовлении и после постановки запорной пробки, которая может состоять из резиноподобного материала, обеспечивает долговременную защиту диагностического средства от воздуха, влаги, света и механических повреждений.

Кроме того, трубочка может служить держателем диагноситического средства во время нанесения смеси веществ на носитель.

Помимо этого, высокая теплопроводность материала трубочек способствует быстрой транспортировке тепла между отдельными трубочками. Это оказывается благоприятным, когда трубочки после наполнения диагностическим средством при взаимном соприкосновении со своим содержимым подвергаются сушке.

Трубочка наполняется комбинацией из аппликатора и тампона, затем наносится смесь веществ на тампон, вслед за этим трубочка с частично закрытой пробкой и со своим содержимым подвергается сушке. Частичное закрытие трубочки позволяет произвести желаемую сушку и более полное закрытие трубочки, что может быть сделано внутри сушильной установки.

Для достижения длительной устойчивости упакованного диагностического средства носитель и смесь веществ подвергаются сушке в сублимационной сушильной установке и там же упаковочная оболочка закрывается при уменьшенном давлении, которое установлено для процесса сушки в сублимационной сушильной установке.

Сублимационная сушка рекомендуется для предлагаемого способа, поскольку предмет сушки относительно быстро и полно освобождается от растворяющего средства смеси вещества.

Быстрой сушке благоприятствует юн кое распределение смеси вещества на носителе. Это значит, что смесь веществ после сушки связана с носителем, главным образом, в аморфной форме, а не в форме больших кристаллов. Связь между отдельными частями смеси веществ, в частности между компонентами красителя и носителем, благодаря этому повышается.

Кроме того, при сублимационной сушке из носителя, например волокон целлюлозы тампона, удаляются летучие составные части, например вода, вследствие чего улучшаются пространственные условия для компонентов красителя, чтобы войти в возможно более тесный контакт с молекулами носителя. Результатом этого является большое число ковалентных связей между красителем и носителем, Этим сильно снижается опасность освобождения молекул красителя из носителя под действием жидкостей тела.

Кроме того, благодаря прочной связи между носителем и красителем реакция окрашивания, происходящая при применении диагностического средства, при значении рН ниже 5,0 протекает специфически и потому точность диагноза значительно повышается,

Сильная связь, достигнутая между смесью веществ и носителем путем сублимационной сушки, является также причиной длительной стойкости изготовленного диагностического средства.

Диагностическое средство тогда сушится оптимально, когда сушка производится в первой ступени при меньшем, небольшом вакууме и во второй ступени при большем вакууме. Это оказывает благоприятное действие на отделение, например, молекул воды, которые независимо от нанесенной смеси веществ содержатся в носителе. Меньший вакуум для предварительной сушки составляет 1,33 Па( 10 тор)0ледующая затем ступень последующей сушки устанавливается на больший вакуум - около 0,13 Па (103 тор).

Длительная стойкость диагностического средства получается тогда, когда оно высушивается до влагосодержания внутри упаковочной оболочки менее 1%. В этом случае диагностическое средство может храниться до его применения более 3,5 года без значительного ухудшения его функциональных способностей.

Пример. Отдельные компоненты смеси веществ взвешиваются при исключении света, обладающего большой энергией.

Например, берется смесь оеществ следующего состава, мг:

DZ ллыз мафия57,6

Никотинамидаденин динукпнотд 3,0 Мети/п иэчолимбромил272,5

Триэтаноламин39,8

PMS10,0

Вода бидистиллированнач, f2,0

Компоненты смеси растворяются в воде при красном свею Обычный гигиенический ампон из гиг- 0 роскопической ваты помещают во вводимую гильзу аппликатор тампона, а которую телескопически пставляют аыгалкивзющую гипьзу несколько меньшего диаметра. Обе гильзы изготовлены из картона. Внутренние 5 поверхности гильз покрыты алюминиевой пленкой. С помощью перфорации той области, где гильзы перекрывают одна другую, предотвращают выскэльзьпание выталкивающей гильзы.

0 Тампон вводят через конец воодимой гильзы так далеко в аппликатор, что он прилегает к переднему концу выталкивающей гильзы, при этом перед вводимым концом тампона оставляют свободное пространст- 5 во объемом 3 см . Нить для возврата тампона проходит от заднего конца тампона внутри выталкивающей гильзы и наружу через ее конец.

Систему из аппликигор -.ч он:.- т; 0 мещают в упаковочную трубочку из an.iosut ния так, что вводимый апп.ии :-рч л отверсти-з трубочки направлено вверх.

Посредством дозирующею устройств сверху в открытое пространство внутри вво- 5 димой гильзы, перед вводимым концом тампона, впрыскивают 2 мл заранее приготовленной вышеупомянутой смеси веществ. При этом происходит разбухание тампона внутри гильзы, и он заполняет сво- 0 бодное пространство.

Затем в отверстие упаковочной трубочки вставляется пробка из упругого материала до первого выступа на окружности трубсчки. В этом положении пробки остает- 5 ся открытым, благодаря наличию выемки в пробке, канал между внутренним и внешним пространством трубочки. Трубочка помещается в сублимационную сушилку. Содержимое трубочек замораживают, за- 0 тем ео время первой ступени сушки, сушат при вакууме 1,33 Па.

Через 12 ч содержимое трубочек сушат при вакууме 0,13 Па. Весь процесс сушки занимает 24 ч. В конце процесса сушки ос- 5 таточная влажность внутри упаковочной оболочки составляет менее 1 %. В этом случае диагностическое средство может иметь срок хранения до 3,5 года без ухудшения функциональных свойств. Эта сохранность не зависит от того, состоит ли тампон только

из волокон целлюлозы или из хлопчатобумажных волокон. Носитель может состоять из куска пенополиуретана или любого другого гидрофильного материала. Формула изобретения Способ получения диагностического средства для определения дегидрогеназы путем смачивания гидрофильного тампона смесью окислительно-восстановительного красителя, субстрата для гидрогеназы и соляной кислоты, отличающийся тем, что. с целью длительного сохранения диаг- ностикума, тампон перед нанесением кра- сителя помещают в металлический

аппликатор с заправочной гильзой так, что перед тампоном образуется свободное пространство, краситель вводят в это пространство, сушат при давлении 1,33 Па, затем при давлении 0,13 Па до содержания влаги в

тампоне менее 1%.

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим средствам. Цель - обеспечение длительного сохранения диагностикума. Получают диагностикум для определения дегидрогеназы путем пропитки гидрофильного тампона смесью окислительно-восстановительного красителя, субстрата для дегидрогеназы и соляной кислоты. Согласно изобретению тампон перед нанесением смеси помещают в металлический аппликатор с заправочной гильзой таким образом, что перед тампоном образуется свободное пространство, вводят смесь в это пространство, сушат при давлении 1,33 Па, затем при давлении 0,13 Па до содержания влаги в тампоне менее 1%.