Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим действием Советский патент 1991 года по МПК A61K35/20 A61K38/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской промышленности, и касается способа получения средства, обладающего ранозаживляющим действием.

Цель изобретения - расширение спектра применения за счет проявления антителостимулирующей активности.

Способ осуществляется следующим образом.

Средство приготавливают из молозива, собранного в течение 3 дней после отела коровы. Берут 10 л молозива, добавляют 2 л кипяченой воды, тщательно перемешивают и пропускают через сепаратор, повернув при этом винт, регулирующий жирность сливок на 1,5-2, оборота больше, чем при сепарировании обычного молока. Собранные на 1-2-3 сутки сливки смешивают и сбивают масло. Сбитое масло помещают в водяную баню с температурой 80-90°С и растапливают в течение 1 ч. Растопленный жир профильтровывают через 2-3 слоя марли, а затем помещают в делительную воронку, где отмывают его 5-6 раз дистиллированной водой, пока отмывающая вода не станет прозрачной. После последнего отмывания делительную воронку с полученным маслом погружают в водяную баню при температуре воды 70°С на 2-3 ч для удаления остатка воды. Отмытый жир сливают в темную стеклянную посуду. Получают 500 г препарата, который хранят в холодильнике при 4-5°С. Средство следует получать из молозива, собранного в течение первых 3 дней отела, так как содержание в нем активных веществ резко падает.

Средство представляет собой жировую фракцию, в которой в концентрированной форме содержатся биологически и фармакологически активные вещества. По внешнему виду средство представляет собой однородную массу оранжевого цвета со слабым запахом непрогорклого масла. Средство не является индивидуальным химическим соединением и поэтому не имеет химической формулы.

О 00 СЯ

ГО

ел ел

По химическому составу оно представляет смесь глицеридов (жиров), состоящих в свою очередь из различных жирных кислот - предельных и непредельных, жидких и твердых, летучих и нелетучих, раствори- 5 мых в воде и нерастворимых. По результатам химического анализа, проведенного в лаборатории молекулярных основ ЦНИИ эпидемиологии МЗ СССР, в получаемом средстве содержится 91% триглицеридов, 10 3% - диглицеридов, и следы моноглицери- дов. Свободные жирные кислоты в нем присутствуют в количестве 1,2%, холестерин . 3,4%. эфиры жирных кислот составляют 1,6%, сухой обезжиренный остаток 1,73%, 15 Средство практически свободно от белка, воды содержит не более 1,8%. В растворе указанного средства находится в 4-5 раз больше липовитаминов, в 50-100 раз больше каротина и каротинодов, чем в жире, 20 выделенном из обычного молока.

Ранозаживляющую активность определяли на беспородных белых крысах послз купирования щелочного ожога. После лечения указанным средством кожа опытных 25 животных оказалась неповрежденной, в то время как кожа нелеченных животных почернела от химического ожога, на месте ожога образовался черный струп. На следующий день на спине леченных крыс также 30 не было видно следов ожога. Кожа оставалась белой и эластичной. У иелеченных животных к атому времени струп стал еще более выраженным. 8 небольшом проценте случаев эти животные даже погибали.35

Ранозаживляющее действие также изучали на модели неинфицированных обширных ран у крыс. Лечение начинали со второго дня после операции. Средство наносили на раны один раз в сутки до полного 40 заживления, Средство обладало ярко выраженной лечебной активностью и сравнимо по активности с оливковым и облепиховым маслом.

Указанное средство также обладает вы- 45 сокой регенеративной активностью при заживлении ран при измерении предела прочности на разрыв рубца,

Влиянии полученного средства на про- цесс антитепообразования у кроликов заклю- 50 чается в следующем. Для иммунизации использовали штамп бактерий S. typhirnumum 1950 в 1%-ном нейтральном формалине.

Вначале бактерии высевали на пита- 55 тельную сроду агэр Хоттингера, затем в течение 1 суток инкубировали в термостате при 37°С, после этого бактерии пересевали повторно на агар Хоттингера и через 1 сут отмывали физиологическим раствором. Для

получения убитой культуры в пробирку с бактериями добавляли нейтральный формалин в концентрации 0,5-1.2%. Через 1 сут после обработки бактерий формалином в указанных концентрациях, делали контрольный посев на агар Хоттингера. Рост бактерий наблюдали только в культуре бактерий с 0,5% формалином.

Взвесь бактерий дважды центрифугировали в нормальном физиологическом растворе по 20 мин при 3000 хд. Отмытый от формалина осадок клеток растворили в 2 мл физиологического раствора. Затем, добавляя постепенно в пробирку физраствор и всякий раз замеряя по стандарту взвесь культуры, получали концентрацию 0,5; 1; 1,5; 2,0 млрд, микробных тел в мл.

В опытах использовали группы кроликов по 5 голов в каждой, массой 2-2,5 кг. Кролики, составляющие первую группу, получали взвесь бактерий и средство, кролики второй группы получали препарат сравнения (вещество, выделенное по той же методике, но из обычного молока), кролики третьей группы получали только взвесь бактерий сальмонелл.

Взвесь бактерий нарастающими дозами равными 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 млрд микробных тел вводили в объеме 1 мл внутривенно 4 раза с интервалами между введениями 4-5 дн. Полученное, средство и препарат сравнения в количестве 1 мл вводили перорально, ежедневно на протяжении всего курса иммунизации и взятия крови. Кролики опытной группы за весь курс получали по 23 г средства, а кролики контрольной группы по 23 г препарата сравнения,

Кровь для исследования брали из вены уха на 10, 14 и 21-й день после последней иммунизации. Полученные образцы сыворотки крови титровали на присутствие антител в реакции пассивной гемагглютинэции (РПГА) с эритроцитами, нагруженными саль- монеллезным атигеном (тифимуриум).

Результаты представлены в табл.

Как показали данные этой таблицы, полученное средство оказывает сильное стимулирующее действие на процесс ан- тителообразования у кроликов. Причем повышенный титр антител в крови опытных кроликов наблюдают на всем протяжении иммунизации. Препарат сравнения не оказывал никакого влияния на процесс антите- лообразования. Полученное средство можно вводить перорально, при этом никаких токсических реакций или аллергических- проявлений у кроликов не наблюдалось.

Аналогичный процесс наблюдается у мышей, иммунизированных липополисаха- ридом, выделенным из S. anatum.

Полученное средство хорошо сохраняет свою активность в течение года. Формула изобретения Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим действием, путем обработки сырья водой, отличающий- с я тем, что, с целью расширения спектра

применения за счет проявления антитело- стимулирующей активности, в качестве сырья используют молозиво коров через 1-3 дня после отела, после обработки его водой сепарируют, отделяют сливки, сбивают масло, затем расплавляют, фильтруют, отмывают водой при 70-80°С и сушат.

Способ получения средства, обладающего ранозаживающим i действием. Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской промышленности, и касается способа получения средства, обладающего ранозаживляющей активностью. Цель изобретения - расширение спектра применение за счет проявления антителостимулирующей активности. Способ осуществляется разбавлением молозива коров, взятого через 1-3 дня после отела, отделением слоя сливок. сбиванием из него масла, расплавлением его на водяной бане, фильтрованием, отмыванием водой и сушкой. Способ позволяет получить препарат, обладающий не только ранозаживляющей, но и антителообра ую- щей активностью при пероральном введении. 1 табл.