Способ экстракорпоральной очистки лимфы Советский патент 1991 года по МПК A61M1/00 A61K31/727 

Ё

Изобретение относится к области хирургии и касается способов очистки лимфы при лечении больных с аутоиммунными заболеваниями. Целью изобретения является полное удаление лимфоцитов и одновременное осаждение патологических криобелков. Способ осуществляется посредством катетеризации грудного лимфатического протока, сбора лимфы в емкость с антикоагулянтом, добавления гепарина 20-25 тыс. ед./л, инкубации в течение 18-20 ч при температуре 4-6°С и центрифугирования при той же температуре. Способ позволяет одновременно полностью осадить лимфоциты и патологические крио- белки из лимфы больного. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к способам очистки лимфы от лим- фоцитов и патологических белковых комплексов при лечении больных- аутоиммунными заболеваниями, с иммуно- комплексной патологией, с реакциями гиперчувствительности немедленного и замедленного типов, с. криоглобулинемией, с криофибриногенемией, с лимфопролифера- тивными заболеваниями и другими болезнями, протекающими с массивным клеточным распадом, а также иммунными нарушениями ауто- и гетероиммунного характера.

Целью изобретения является полное удаление лимфоцитов и одновременно с этим осаждение патологических криобел- ков. г

Способ экстракорпоральной очистки лимфы осуществляется следующим образом.

Хирургическим путем производят катетеризацию грудного протока и непрерывно

осуществляют наружное дренирование лимфы грудного лимфатического протока: получаемая при этом лимфа собирается в пластикатных контейнерах Гемакон 500 или Гемакон 500/300, содержащих антикоагулянт Глюгицир в количестве 50 мл, в лимфу добавляется гепарин из расчета 20- 25 тыс. ЕД/л, полученную смесь инкубируют на холоде в течение 18-20 ч при , после чего ее центрифугируют на рефрижераторной центрифуге К-70 (ГДР) при той же температуре со скоростью 3200-3500 об/мин втечение 40 мин,затем супернатант переводят в пластикатный контейнер Гемакон 300, Компопласт или любой другой стерильный сосуд при помощи плазмаэкст- рактора, отжиманием, для последующей ре- инфузии.

П р и м е р 1. Операцию наружного дренирования грудного лимфатического протока осуществляют под местным обезболиванием. В левой надключичной области

О 00 00 00 4

Ю

послойно выделяют и катетеризуют грудной лимфатический проток для наружного отведения лимфы. Получаемую при этом лимфу собирают непрерывно в течение всего периода дренирования в пластикатные контейнеры Темакон 500 или Темакон 500/300 (СССР), содержащие антикоагулянт Тлюги- цир в количестве 50 мл. После заполнения контейнера Темакон 500 лимфой полностью его отсоединяют и на его место под- ключают новый контейнер для последующего сбора лимфы. В наполненный лимфой контейнер вводят гепарин из расчета 20000 ЕД/л и обработанную таким образом лимфу помещают в холодильник для ее инкубации, при 4°С в течение 18 ч. Образовавшийся клеточно-белковый криоп- реципитат отделяют от лимфоплазмы центрифугированием на рефрижераторной центрифуге К-70 (ГДР) со скоростью 3200 об/мин при той же температуре в течение 40 мин, Супернатант после осаждения преципитата с использованием плазмаэкстрак- тора в стерильных условиях переводят в пластикатный контейнер Темакон 300 или Компопласт или в другую герметически закрытую стерильную стеклянную аптечную посуду, и после согревания лимфоплазмы до комнатной температуры ее реинфузиру- ют внутривенно капельно со скоростью 40- 60 капель в 1 мин. После каждой реинфузии супернатанта, являющегося лимфоплазмой, в количестве 300-500 мл внутривенно струйно (медленно) вводят раствор глюко- ната кальция 10% -5,0 для предотвращения цитратной интоксикации. В случае отсутствия необходимости непосредственной реинфузии лимфоплазмы в момент ее получения лимфоплазму немедленно замораживают для хранения при -20°С. При необходимости лимфоплазму размораживают, повторно центрифугируют со скоростью 3500 об/мин при 4°С в течение 20 мин для удаления оставшегося количества криобелков, выпавших в результате замораживания лимфоплазмы.

При заборе лимфы осуществляют постоянный контроль за содержанием белков, жиров, углеводов и электролитов в крови. Возмещение потерь электролитов и углеводов при необходимости осуществляют с использованием кристаллоидных растворов. Плазмозаменители и препараты крови не применяются. Возвращается до 80-90% аутолимфоплазмы. Полученный преципитат выбрасывается, Все манипуляции, связанные со сбором и очисткой лимфы, а также с реинфузией лимфоплазмы, осуществляют в асептических условиях. Все контрольные посевы аутолимфоплазмы. полученные при данном способе очистки лимфы, стерильны.

В серии проведенных исследований состава лимфы до и после ее очистки указанным в данном примере способом выявлены изменения уровней отдельных биохимических показателей, которые представлены в табл.1.

Как видно из данных табл. 1, наиболее существенные изменения претерпевают со- держа.ния OL - , /3 - , у -глобулиновых фракций белкового спектра, криоглобулинов, криофибриногена и фибронектина, сопутствующие полной(100%)очистке лимфы отлим- фоцитов и других форменных элементов, Пример 2. У больной В., 34 г., страдающей тяжелой формой системной склеродермии, в развернутой стадии, сопровождающейся синдромом Рейно, в результате лечения селективным удалением из лимфы лимфоцитов и фибронектиновых

комплексов с аутоантителэми и иммунными комплексами достигнут отчетливый положительный терапевтический эффект.

Очистку цельной лимфы, получаемой при наружном дренировании грудного лимфатического протока, осуществляли по примеру 1. В собранную лимфу вводили гепарин из расчета 25 тыс. МЕД/л. Инкубацию полученной смеси проводили в холодильнике при 6°С в течение 20 ч, затем для

удаления фибронектинового клеточно-бел- кового преципитата ее центрифугировали со скоростью 3500 об/мин в течение 40 мин при той же температуре,

За время дренирования грудного лимфатического протока удалено 6,2 л лимфы, а очищено и возвращено 5,7 л лимфоплазмы (т.е. около 92% от объема удаленной лимфы). Плазмозаменители и препараты крови не применялись. Результаты посевов лимфоплазмы после очистки аналогичны примеру 1, осложнений при ее аутотрансфузии не было.

В результате лечения указанным способом у больной исчезли клинические проявле- ния заболевания, практически

нормализовались лабораторные показатели: значительно уменьшились проявления синдрома Рейно, полностью зажили трофические язвы на всех уровнях конечностей, уменьшилось количество телеангиэктазии

на коже лица, туловища и конечностей, уменьшилась контрактура пальцев кистей, значительно возрос микроциркуляторный кровоток поданным бульбарной капилляроскопии и капилляроскопии ногневого ложа.

Данные регрессии клинических проявлений заболевания и изменения лаборатор- ных показателей в процессе лечения представлены в табл. 2.

Предшествующая терапия, включая

преднизолон, плазмасорбцию, гемосорбцию, квантовую гемотерапию, антагонисты

кальция, купренил и другие средства, была

неэффективной,

П р и м е р 3. Лечение иммунной цито- пении у больного В,, 48 лет, с диагнозом: хронический лимфолейкоз, опухолевая форма, характеризующаяся периферическим цитолизом. Аутоиммунная тромбоцитопения, протекающая с тяжелым геморрагическим синдромом. Аутоиммунная гемолитическая анемия.

Катетеризацию грудного лимфатического протока для наружного отведения лимфы, сбор и очистку лимфы осуществляли по примеру 1. После добавления в лимфу гепарина в количестве 20 тыс. МЕД на 1 л лимфы смесь инкубировали при 4°С в течение 18 ч. Образующийся криопреципитат фибронектина с иммунными и опухолевыми лимфоцитами, а также с антителами, патологическими белками и их комплексами отделяли от лимфоплазмы центрифугированием, проводимым со скоростью 3500 об/мин в течение 40 мин при той же температуре. Лимфоплазму реинфузировали внутривенно капельно со скоростью 40-60 капель в 1 мин. Наружное отведение лимфы осуществлялось на протяжении 19 сут. Общее количество собранной лимфы 36,85 л, а объем возвращенной после очистки лимфоплазмы 32,45 л (что соответствует 88,05% от объема полученной при дренировании лимфы).

Результаты, полученные при лечении больного В., 48 лет, селективным лимфацит- плазмаферезом, включающим одновременное очищение лимфы от патологических, лимфоцитов, антител, патологических белков и Их комплектов, представлены в табл. 3.

На фоне проведенного лечения был достигнут выраженный терапевтический эффект: прекратился цитолиз, нормализовались показатели красного и тромбоцитного ростков крови, полностью купирован геморрагический синдром, снизились и нормализовались уровни белков острой фазы воспаления, уменьшилась органомегалия, количество общего белка в крови повысилось до, нормального уровня,

существенно снизилось количество циркулирующих опухолевых клеток в крови. Использование ранее глюкокортикостероидных и различных цитостатических препаратов не приводило к подобным терапевтическим эффектам. Наличие у больного тяжелого цито- пенического синдрома не давало возможности проведения должной полихимиотерапии.

Таким образом, при осуществлении

способа возможно одновременное удаление лимфоцитов и патологических криобел- ков из лимфы и, тем самым, очищение от них организма.

Известный способ позволяет очистить

лимфу лишь от лимфоцитов.

Формула изобретения

Способ экстракорпоральной очистки лимфы, включающий ее забор и осаждение лимфоцитов путем центрифугирования, о т- личающийся тем, что, с целью полного удаления лимфоцитов и одновременного осаждения патологических криобелков, пе- ред центрифугированием в лимфу добавляют гепарин в количестве 20-25 тыс. МЕД на 1 л, полученную смесь инкубируют при 4- 6°С в течение 18-20 ч, а центрифугирование проводят при той же температуре со скоро- стью 3200-3500 об/мин в течение 40 мин.

Таблица 1

ие

- -

Д

Множественные Нет Выраженный Нет

Есть

Нет

Выраженные

412

20

320

2(+)

Резкое обед- Улучшение нение капил- капиллярного лярного русла кровотока

Значительное уменьшение

165

8

Геморрагический синдром, носовые, дес- невые кровотечения, петехии и экхимозы на коже и слизистых

Бледность кожных покровов

Гемоглобин в крови, г/л

Тромбоциты в крови,

Таблиц а 2

Нет

Значительное уменьшение

165

8

Таблица 3