Способ определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам Советский патент 1991 года по МПК C12Q1/04 

w

Ё

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано при определении чувствительности основных возбудителей мастита коров к антибиотикам. Цель изобретения - ускорение способа. К мясопеп- тонному бульону, содержащему, мас.%: глюкозу 1,0, дрожжевой экстракт 0,3 и феноловый красный 0,003 добавляют секрет молочной железы, полученный из пораженной маститом четверти вымени, без дополнительного внесения исследуемой культуры. Соотношение питательной среды и секрета молочной железы (по объему) 2,8-3,1:1. Антибиотики вносят в посевы в виде дисков. По изменению окраски среды в процессе инкубации в течение 2-7 ч определяют чувствительность возбудителей мастита к тому или иному антибиотику.

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано при определении чувствительности основных возбудителей мастита коров к антибиотикам.

Цель изобретения - ускорение способа.

Определение чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам осуществляют следующим образом (у каждой больной коровы).

Стерильный мясопелтонный бульон, держащий, мас.%: глюкоза 1,0; дрожжевой экстракт 0,3; феноловый красный - 0,003, разливают, соблюдая правила стерильности, по 1,5 мл в стерильчые пробирки. Количество пробирок, из расчета на одну больную корову, должно быть на одну больше, чем число антибиотиков, к которым в данном случае определяют чувствительность возбудителей мастита у данного животного.

Затем в каждую пробирку добавляют по 0,5 мл секрета молочной железы, полученного из пораженной маститом четверти вымени.

Антибиотики вносят в виде антибиоти- ковых дисков - по одному диску того или иного антибиотика в каждую пробирку, кроме одной.

Все пробирки выдерживают в термостате или в водяной бане при 37°С в течение 16-18 ч. Первый просматривают через 2 ч, затем через 3, 4, 5, 6, 7 и 16-18 ч. Результаты опыта учитывают тогда, когда цвет смеси в пробирке со средой и материалом станет от желтого до белого. В подавляющем большинстве случаев это происходит в течение первых 7 ч.

Если в засеянном материале имеется микрофлора, то среда в пробирке без антибиотика приобретает цвет от желтого до белого, т.е. становится кислой.

Os

О CJ О

58

Если после выдерживания при 37°С цвет среды в пробирке с тем или иным антибиотиком остается без изменений (оранжево-красный), $то значит, что микроорганизмы, находящиеся в испытуемом материале, высокочувствительны к данному антибиотику. Если цвет среды изменяется (от желтого до белого), то испытуемые микроорганизмы устойчивы к данному антибиотику, причем чем выше кислотность тем устойчивее микроорганизмы.

Из числа испытуемых антибиотиков для лечения следует выбрать тот, в пробирке с которым цвет среды наиболее подходит к первоначальному (оранжево-красному) цвету, т.е. до выдерживания пробирки при 37°С.

Пример. Параллельно определяют чувствительность возбудителей мастита коров к антибиотикам, выращивая их на двух питательных средах: на известной среде (мясопептонный бульон, содержащий глюкозу, дрожжевой экстракт, феноловый красный) и предлагаемой (к известной среде добавляют 24-26 % секрета молочной железы из четвертей вымени, пораженных маститом).

Засев известной среды возбудителем мастита осуществляют путем внесения в нее (в 2 мл среды) 2 капель секрета молочной железы пораженных маститом четвертей вымени.

Засев предлагаемой среды отдельной операцией не проводят, поскольку возбудители мастита в достаточном количестве находятся в секрете молочной железы четвертей вымени, пораженных маститом, используемом в качестве компонента питательной среды, при этом к 1,48; 1,5; 1,52 мл питательной среды добавляют соответственно 0,52; 0,5; 0,48 мл секрета, что соответствует соотношению 2,8-3 ,1:1.

Чувствительность возбудителей мастита с использованием обеих сред проверяют к 7 антибиотикам.

Результаты, полученные с использованием обеих сред, совпадают в 99,07% случаев, но в 85,71% из них чувствительность возбудителей мастита коров к антибиотикам с помощью предлагаемого способа определяется уже в течение 2-7 ч с момента начала опыта, в то время как при использовании известной среды такие результаты во всех случаях можно учесть только через 16- 18ч.

Использование способа позволяет ускорить определение при сохранении точности способа.

Формула изобретения Способ определения чувствительности возбудителей мастита коров к антибиотикам путем посева исследуемых микроорганизмов в мясопептонный бульон с 1,0 мас.% глюкозы, 0,3 мас.% дрожжевого экс- тракта и 0,003 мае. % фенолового красного с последующим инкубированием посевов в присутствии антибиотиков и определением

чувствительности микроорганизмов по изменению цвета среды, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа, иссле- дуемые микроорганизмы вносят в среду непосредственно с секретом молочной

5 железы коровы, полученным из пораженной маститом четверти вымени, при объемном соотношении среды и секрета молочной железы 2,8-3,1:1.