Штамм вируса инфекционного бронхита кур для приготовления вакцинных препаратов Советский патент 1992 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур.

Для успешной борьбы с инфекционным бронхитом кур первостепенное значение имеет вакцинопрофилактика. Вакцинные штаммы вируса инфекционного бронхита должны иметь слабую реактогенность, быть безвредными, высокоиммуногенными и не обладать реверсибельностью при последовательных пассажах через организм прививаемых птиц.

Известны штаммы, применяемые для изготовления живой вакцины против инфекционного бронхита кур Н-120, Н-52. Необрон-1, Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2. Все перечисленные штаммы относятся к одному серотипу Массачузетс. Штаммы Необрон-1. Необрон-2, Бронховак-1 и Бронховак-2 являются адаптированными штаммами Н-120 и Н-52, депонированными в Чехословакии и Венгрии соответственно.

Штамм Н-52 прошел 52 пассажа на куриных эмбрионах и обладает высокой остаточной вирулентностью.

Штамм Н-120 прошел 120 пассажей на куриных эмбрионах и обладает меньшей патогенностью, однако при интраназальном его применении у 60% привитых SPF-цыплят наблюдают проявление клинических признаков поражения органов дыхания. В отечественной ветеринарной практике нет штамма, пригодного для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Цель изобретения - повышение реактогенности, безвредности и иммуногенности штамма. Получаниый штамм вируса инфекционного бронхита кур - сом. Coronavlrldae род Coronavlrus, вид avian депонирован во ВГНКИ код 65 имеет следующие биологические и физиологические характеристики. У зараженных эмбрионов кур 9-дневной инкубации вакцинный вирус инфекционного бронхита штамма AM вызывает скручивание эмбриона в шар, отставание его в росте вплоть до карликовости, уплотнение амниотической оболочки. Титр вируса в экстраэмбриональной жидкости достигает 10 -1О ЭИД50/0,2 мл. Предлагаемый штамм обладает слабой остаточной вирулентностью и не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-30-дневного возраста при введении интраназально или методом выпаивания в дозе 10 - 10 ЭИДбО в объеме 0,2 мл. При этом указанная доза вируса в 50-100 раз превышает дозу, используемую при вакцинации. Поствакцинальная реакция отмечается у 8-10% привитых цыплят на 3-4 день после вакцинации, длится 7-10 дн и характеризуется слабым ринитом и чиханием. Вирус инфекционного бронхита кур заявляемого штамма AM с титром 10 - 10 ЭИД50/0,2 мл при интраназальном двукратном введении цыплятам 10-18-дневного возраста в разведении 1:25 - 1:1000 создает у цыплят прочный иммунитет, прейохрайяющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур , референтных штаммов серотипа Массачузетс, Коннектикут, Айова-97 и Айова-609, а также штаммов, выделенных в СССР. При двукратном пероральном введении штамма AM, разведенного 1:1000, в обьеме 10 мл на цыпленка с интервалом И дней у цыплят также создается прочный иммунитет, предохраняющий их от зарах ения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур. Пассирование предлагаемого штамма на цыплятах 1-13-дневного возраста на протяжении 13 подледосательных пассажей бег повышения вирулентности указывает на отсутствие у него реверсибельности. Сохранение иммунобиологических свойств на протяжении 20 последовательных пассажей на развивающ ихся куриных эмбрионах 9-10-дневиого возраста свидетельствует о стабильности штамма AM. Для получения штамма вируса инфекционного бронхита с указанными свойствами были выделены в пти,цехозяйствах страны и исследованы полевые штаммы вируса. Из них был отобран йдин наиболее подходящий для дальнейшей работы по получению вакцинного штамма. В результате последовательных пассажей на развивающихся эмбрионах и в культурах клеток был создан штамм вируса инфекционного бронхита кур AM - ceM.Parvovlridae, род Parvovirus, вид avian. Пример. Аттенуированный штамм AM в экспериментальных условиях был сравнен по иммуногенности с тремя вакцинными штаммами подобного типа, полученными из-за рубежа: Штамм Н-120 серотипа Массачузетс, полученнь|й из Франции. Штамм Необрон-1 серотипа Массачузетс, полученный из Чехословакии: Штамм Бронховак-1 серотипа Массачузетс, полученный из Венгрии. В результате проведенных исследоваНИИ было установлено, что наименьшей реактогенностью обладал отечественный штамм AM. Большей реактогенностью обладали штаммы Необрон-1 и Бронховак-. При этом серологические исследования показали, что более высокий титр вируснейтрализующих антител к вирусу инфекционного бронхита кур отмечался в сыворотке крови цыплят, иммунизированных вирусом предлагаемого штамма. При этом они были устойчивы к заражению вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур как штамма Массачузетс, полученного из Канады, так и штаммов Пудость и Чапаевский, выделенных в СССР. Наибольшей иммуногенностью против отечественных штаммов вируса инфекционного бронхита кур обладал аттенуированный штамм AM. Безвредность антигенная активность и иммуногенность указанного штамма в лабораторных условиях была испытана на 2887 цыплятах 10-15-дневного возраста. Испытания вакцинных штаммов Н-120и ДМ вируса инфекционного бронхита кур показали, что 50%-ная иммунизирующая доза штамма Н-120 составила 2630 ЭИД5о/0,2 мл, а штамма AM - 1050 ЭИД50/0,2 мл, т.е. была в 2,5 раза ниже, что свидетельствует о том, что для получения иммунизирующей дозы

517088396

штамма AM требуется в 2.5 раза меньшеФормула изобретения

материальных затрат, чем для полученияШтамм вируса инфекционного брониммунизирующей дозы штамма-прототипахита кур ВГНКЙ № 65 для приготовления

Н-120.вакцинных препаратов.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой штамм вируса инфекционного бронхита кур, используемый для приготовления вакцины против инфекционного бронхита кур. Целью изобретения является повышение реакто-генности, безвредности и иммуногенности штамма. Вакцинный штамм AM получен методом последовательных пассажей на развивающихся куриных эмбрионах и в культуре клеток из эпизоотического штамма депонирован во ВГНКИ под Ms 65. Штамм AM обладает слабой остаточной вирулентностью, не вызывает клинических признаков заболевания инфекционным бронхитом у цыплят 1-30-ден8ного возраста при введении в дозе 10 -10^ ЭИД50/0,2 мл, в 50- 100 раз превышающей вакцинальную. При двукратном введении цыплятам 10-18- дневного возраста в разведении 1:25- 1:100 штамм AM создает прочный иммунитет, предохраняющий их от заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур референтных штаммов серотипов Массачу- зетс, Коннектикут, Айова-97, Айова-609 и штаммов, выделенных в СССР.