Способ диагностики субклинической остеодистрофии у нетелей Советский патент 1992 года по МПК A61B10/00 

сл

С

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики субклинической формы остеодистрофии. Целью изобретения является повышение точности диагностики. У животных берут кровь, получают сыворотки, выделяют щелочную фос- фатазу, проводят ее разделение на изоферменты. .При показателе активности щелочной фосфатэзы костного происхождения не менее 90 Е/л судят о наличии заболевания. При этом точность диагностики повышается до 100%. 3 табл.

Изобретение относится к ветеринарии. в частности к способам диагностики болезней крупного рогатого скота, связанных с нарушением минерального обмена, и может быть использовано для диагностики субклинической остеодистрофии, преимущественно у нетелей второй половины стельности.

Целью изобретения является повышение точности диагностики.

Пример. Кровь берут из яремной вены в обычные пробирки. Сыворотку крови получают центрифугированием после ретракции кровяного сгустка в течение 15 мин при 3000 об/мин. В сыворотке крови определяют общую активность щелочной фосфатазы по гидролизу р-нитрофенилфосфата оптимилиризованным методом с использованием наборов фирмы Лахема и изоферменты щелочной фосфатазы. Разделение изоферментов проводят в пластинчатом

7%-ном полиакриламидном геле и трис- глициновой буферной системе (рН 8,3) методом электрофореза на аппарате ПЗФА с использованием камеры АВГЭ-1. После окончания электрофореза изоферменты проявляют методом одновременного азо- сочетания. Для этого пластины геля погружают в субстратную смесь следующего состава: 12,5 мг 2-нафтилфосфата растворяют в 14 мл бидистиллированной воды, добавляют 2 мл 0,5 М раствора азотнокислого магния и 10,5 мл 0,2 М раствора трис, затем - 12,5 мг прочного синего РР, взбалтывают до полного растворения всех ингредиентов. Раствор готовят перед употреблением.

Инкубируют в течение 60 мин. После инкубации пластины геля переносят в раствор 5%-ной уксусной кислоты в 70%-ном этаноле на 60 мин и денситометрируют для количественного определения соотношеXI

кэ о о

CJ

VI

ния изоферментов на микрофотометре МФ-2, Исходя из общей активности, соотношения изоферментов пересчитывают в единицы активности - Е/л.

Электрофоретическая подвижность изоферментов (по отношению к альбуминам) ЩФ1 0,50-0.52; ШФ2 0,36-0,38; ЩФз 0,30-0,32.

П р и м е р 2. Определение активности щелочной фосфатазы (ЩФ) и щелочной фос- фатазы костного происхождения (ЩФ2) в зависимости от заболевания остеодистро- фией.

Исследования проводят на нетелях черно-пестрой породы второй половины стель- ности клинически здоровых (группы 1-3) и больных остеодистрофией (группы 4-6) в зимнестойловый период.

Результаты представлены в табл.1.

Данные, приведенные в табл.1, подтверждают специфичность показателя ак- тивности ЩФ2. Так, в группах 4-6 (остеодистрофия) активность ЩФа составляет 90 Е/л и выше, тогда как активность ШФ в группе 3 (клинически здоровые животные) практически не отличается отсоответ- ствующего показателя в группах 4-6 (остеодистрофия).

П р и м е р 3. Заболеваемость о еоди- строфией в зависимости от активности щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФ2)...

Клинически здоровых и больных остеоистрофией нетелей обследуют, как в примере 1. В зависимости от активности ШФ2 распределяют на 5 групп: 1 группа 5,0-30,0 Е/л, 2 группа - 30,0-60,0 Е/л. 3 группа - 60.0 - 90,0 Е/л, 4 группа - 90,0 - 120.0 Е/л, группа - 120,0 Е/л и выше. Результаты представлены в табл.2.

Как видно из табл.2, при активности ЩФ2 выше 90,0 Е/л в 100% случаев диагностируется остеодистрофия.

П р и м е р 4. В табл.3 приведены сравнительные данные выявления субклинической остеодистрофии.

Способ позволяет повысить точность диагностики субклинической остеодистрофии до 100,0% благодаря специфичности показателя активности Щелочной фосфатазы костного происхождения (ЩФ2).

Формула изобретения

Способ диагностики субклинической остеодистрофии у нетелей, включающий взятие крови, получение сыворотки, выделение щелочной фосфатазы, о т л и ч а ю щ и- й с я тем, что, с целью повышения точности диагностики, проводят разделение щелочной фосфатазы на изоферменты и при показателе активности щелочной фосфатазы костного происхождения не менее 90 Е/л судят о наличии заболевания.

Та бл ица 1

Та блица 2

Таблица 3