СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОСТИМУЛЯТОРА "ПОМ" ИЗ ПЛАЦЕНТЫ КОРОВ Советский патент 1996 года по МПК A61K35/12 

Изобретение относится и ветеринарии, а именно к ветеринарному акушерству.

Известен способ получения биостимулятора амниоцена (ПДС) из оболочки плаценты человека, которая применяется в ветеринарной практике для профилактики и лечения послеродовых заболеваний коров.

Биостимулятор амниоцен из плаценты человека получают путем денатурации хлором и диспергированием.

Недостатком биостимулятора амниоцен является то, что он изготовляется из плаценты человека, что не может удовлетворить ветеринарную практику, выпускается в виде густой суспензии, которая трудно вводится через инъекционную иглу, имеет запах хлора.

Наиболее близким по технологической сущности и достигаемому эффекту к изобретению является способ получения биостимульгина, который готовят из последов, взятых от здоровых коров. Послед помещают в чистую стеклянную емкость, закрывают, обертывают пергаментной бумагой и помещают в холодильник на 6-7 дней. После этого ткань пропускают через мясорубку, взвешивают и заливают физиологическим раствором из расчета 5 л на 1 кг фарша. Полученную массу тщательно перемешивают, выливают в бутыль, плотно укупоривают и помещают в холодильник для экстрагирования. Через сутки массу процеживают, полученный экстракт кипятят в течение 9 мин. Остывшую взвесь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость расфасовывают и стерилизуют.

Недостатком способа получения биостимульгина является то, что ткань подвергают высокой термической обработке под давлением, в результате чего часть биологически активных веществ инактивируется, чем снижается активность и, кроме того, технология приготовления сложная, громоздкая и длительная и с большим отходом плаценты.

Целью изобретения является повышение активности и упрощение процесса получения.

Сущность изобретения состоит в том, что после охлаждения и гомогенизации ткани плаценты смешивают с мочевиной в соотношении 0,4-0,5:1,0, добавляют формалин, причем мольное соотношение между мочевиной и формальдегидом берут равным 4: 2, а экстракцию осуществляют путем нагревания полученной смеси до 100^oС, после чего доводят рН смеси до 8,0-10,0, а температуру до 60-70^oС, затем добавляют дистиллированную воду и отстаивают.

Подготовка плаценты коров для обработки мочевиной и формалином состоит в следующем. Плаценту берут от здоровых коров, с соблюдением санитарных правил. Если плацента загрязнена, удаляют механические примеси, а плаценту промывают в проточной воде, помещают в морозильную камеру на 5-7 суток. После этого плаценту в замороженном виде измельчают в стерильной мясорубке, затем фарш гомогенизируют. Полученная гомогенизированная масса обрабатывается раствором мочевины и формалина, в результате чего извлекаются гормоны, витамины, ферменты, микроэлементы и другие биологически активные вещества. Мелкодисперсные плацентарные ткани консервируются.

П р и м е р 1. Берут 120 г фарша плаценты, 240 г (4 моля) мочевины (соотношение 0,5: 1), вносят 160 мл (2 моля) 37%-ного формалина. Смесь при перемешивании медленно нагревают до 100^oС. Снимают с огня, перемешивают и вносят 2 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия. Оставляют стоять при периодическом перемешивании до снижения температуры 60-70^oС, после чего добавляют дистиллированную воду до 1 л с последующим доведением объема до 1 л после охлаждения. Получают препарат в виде суспензии светло-серого цвета со слабым специфическим запахом. В стерильных условиях разливают во флаконы до 100, 200 и 500 мл, закрывают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками. При хранении препарат расслаивается, но восстанавливается при встряхивании.

Состав препарата, мас.

Плацента обработанная 12,0
Метилолмочевина 18,0
Мочевина 12,0
Вода 58,0
П р и м е р 2. Берут 96 г фарша плаценты, 240 г (4 моля) мочевины (соотношение 0,4: 1), вносят 160 мл (2 моля) 37%-ного формалина, далее по примеру 1.

Состав препарата, мас.

Плацента обработанная 9,6
Метилолмочевина 18,0
Мочевина 12,0
Вода 60,4
П р и м е р 3. Берут 108 г фарша плаценты, 240 г (4 моля) мочевины (соотношение 0,45: 1), вносят 160 мл (2 моля) 37%-ного формалина, далее по примеру 1.

Состав препарата, мас.

Плацента обработанная 60,8
Метилолмочевина 18,0
Мочевина 12,0
Вода 59,2
П р и м е р 4. Берут 115 г фарша плаценты, 240 г (4 моля) мочевины (соотношение 0,48: 1), вносят 160 мл (2 моля) 37%-ного формалина, далее по примеру 1.

Состав препарата, мас.

Плацента обработанная 11,5
Метилолмочевина 18,0
Мочевина 12,0
Вода 58,5
Сводная таблица химического состава биостимулятора ПОМ.

Контроль биостимулятора ПОМ.

Каждую серию биостимулятора ПОМ подвергают контролю визуально, по рН, на стерильность, на безвредность, биологическую активность.

Биостимулятор ПОМ должен быть стерилен при высеве на обычные питательные среды, безвредным при проверке на мышах и кроликах. Биологическую активность биостимулятора ПОН определяют на инфантильных самках белых мышей, которым вводят подкожно в области спины 0,3 мл биостимулятора ПОМ. Через 48 ч введение повторяют в той же дозе. Мышам контрольной группы биостимулятор ПОМ не вводят. Подопытных и контрольных мышей содержат в одинаковых условиях на полноценном рационе. Через 72 ч мышей усыпляют, вскрывают брюшную стенку, извлекают матку с яйцеводами и яичниками и после удаления имеющейся жировой соединительной ткани взвешивают на торсионных весах. Серию биостимулятора ПОМ считают активной, если средняя масса этих органов у подопытных мышей будет не менее чем на 20% больше массы их у мышей контрольной группы.

Для опыта подобрали 9 инфантильных самок белых мышей, которых разделили на 3 группы по 3 мыши в каждой.

Опытным группам (1 и 2-я) мышам подкожно, в области спины вводили биостимулятор ПОН в разных дозировках. Контрольным мышам биостимулятор ПОН не вводили (см.табл.2).

Проверка биостимулятора ПОМ на безвредность.

Отобрали 5 мышей массой 18-20 г и ввели им биостимулятор ПОМ подкожно в дозе 0,3 мл. в течение 10 сут. все мыши оставались живыми и клинически здоровыми. Опыт повторяли 2 раза с положительным результатом. Каждую мышь в опыте использовали один раз.

Проверка биостимулятора ПОМ на стерильность.

Высев биостимулятора ПОМ проводили в стерильном боксе на обычные питательные среды: МПА, МПБ, МПА с 1% глюкозой и 5% крови, Сабуро, Эндо. После высева чашки Петри и пробирки помещали в термостат. Проверку стерильности сред проводили через 48 72 ч и на 7-е сутки. Рост микрофлоры отсутствовал.

Применение биостимулятора ПОМ.

Биостимулятор ПОМ применяют для профилактики задержаний последов субинволюции матки и эндометритов у коров в ранний послеотельный период, а также для стимулирования стадии возбуждения полового цикла у коров и телок, не проходящих в охоту.

Биостимулятор ПОМ вводят коровам и телкам подкожно в области шеи поочередно с правой и левой стороны. Однократная доза биостимулятора ПОМ 20 мл. Обработку животных проводят по следующей схеме: биостимулятор ПОМ вводят в день отела, а затем на 5 и 10-ый день после отела. При задержании последа: 1-й и 2-й день, затем 5 и 10 дни после отела. Для стимуляции охоты: 3-5 раз через 48 ч.

Профилактическую эффективность биостимулятора ПОМ определяли на 133 отелившихся коровах (67 опытных и 66 контрольных).

Биостимулятор ПОМ коровам вводили в день отела, на 5 и 10 день после отела подкожно в область шеи в дозе 20 мл. Биостимулятор ПОМ перед применением подогревали до температуры тела животного и встряхивали. Если у коровы отмечали задержание последа, то ей на 2-й день после отела повторяли введение ПОМ. Из 67 голов животных, подвергшихся обработке, субинволюция матки отмечена у 14 коров (20,8%), эндометрит только у 4 коров (5,9%), в то время как в контрольной группе соответственно 34 (51,5%) и 36 (54,5%) коров. Из 9-ти отмеченных задержаний последов по опытной группе коров самопроизвольно он отошел у 9 (100%), в то время как по контрольной группе из 12-ти самопроизвольно отошел только у 4 (18,1%) коров. Сервис-период по опытной группе коров составил 46,5 дня, по контрольной 65,7 дня.

Таким образом, биостимулятор ПОМ обладает профилактическим действием на задержание последов, субинволюции матки, эндометриты, сокращает сервиспериод у коров. ТТТ1

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к получению препаратов, предназначенных для профилактики задержания последов, субинволюции матки и эндометритов у коров. Целью изобретения является повышение активности препарата и упрощение процесса его получения. Плаценту коров охлаждают, гомогенизируют и экстрагируют метилолмочевиной при соотношении мочевины и формальдегида 4:2, взяв 40-50% фарша плаценты от веса мочевины. Компоненты смешивают, нагревают до 100^oС, доводят рН до 8,0-10,0, охлаждают до 60-70^oС, добавляют дистиллированную воду до 1 л и отстаивают. При введении препарата коровам профилактируется задержание последа на 66,4% и заболеваемость эндометритом на 48,6% больше, чем в контроле. 2 табл.

Способ получения биостимулятора из плаценты коров, включавший охлаждение, гомогенизацию ткани плаценты и экстракцию, отличающийся тем, что, с целью повышения активности препарата и упрощения процесса получения, после охлаждения и гомогенизации ткани плаценты смешивают с мочевиной в соотношении 0,4-0,5: 1,0, добавляют формалин, причем мольное соотношение между мочевиной и формалином берут равным 4:2, а экстракцию осуществляют путем нагревания полученной смеси до 100^oC, после чего доводят рН смеси до 8,0-10,0, а температуру до 60-70^oС, затем добавляют дистиллированную воду и отстаивают.