Способ идентификации сортов тургидной пшеницы Советский патент 1992 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к геиетико-се- лекционным исследованиям

Известен способ идентификации сортов мягкой пшеницы по электрофореграм- мам глиадиновых белков зерна, включающий получение гибридоб F2, проведение электрофореза глиадина, анализ злектрофореграмм и заяись генетических форм.

Недостатком этого способа является то, что он применим только для сортов мягких пшениц, так как у них имеются анеуплоид- ные и абберантные линии сорта мягкой пшеницы Чайниз Спринг. По твердым и тем более по тургидным пшеницам таких линий нет.

Цель изобретения - повышение точности идентификации.

Поставленная цель достигается тем, что тургидную пшеницу скрещивают с твердой, а в качестве тестера на аллельность используют сорт твердой пшеницы, имеющий в своем геноме четкие глиадйнойые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы.

Изробретение базируетя на основании филогенетического родства:

T.aestivum L () - А, В, Д

T.durum Dest. () - А, В

T.turgidum L()-A, В

и межвидовых скрещиваний между T.aestivum L. и T.durum Dest. В качестве примера можно привести сорт Черномор, у которого есть аллели глиаДйна, перенесенные в геном твердых от мягких. Известно, что T.durum Dest и T.turgidum L легко скрещиваются между собой без генетической депрессии. Следовательно, если в качестве сорта-тестера взять Черномор или другой сорттвердой пшеницы, несущий аллели глиадина, унаследованные от мягкой пшеницы, то его можно скрещивать с любым сортом тургидной пшеницы и в системе гибридоло01

сл ел

гического анализа проводить идентификацию различий по глиадиновым аллелям.

Способ осуществляется следующим образом,

берут два гомозиготных сорта или биотипа пшеницы. В качестве матери (или отца) используют сорт твердой пшеницы, имеющий четкие злектрофоретические маркеры 1А, 15, 6А V, 6Б хромосом, а именно Глд 1Л1, Глд 1Б2, Глд 6АЗ, Глд 6Б2. В качестве отца (или матери) берут новый сорт или биотип тургидной пшеницы, у которого нужно идентифицировать кластеры (блоки) глиадина. Полученные гибриды F. высевают для получения растений FI, на которых берут зерна F2 - первое расщепляющееся потомство. Проводят электрофорез отдельных зерен по 80-100 штук и по тесту на аллельность (используется критерий хи-квадрат), определяют аллеломорфы блокам Глд 1А1, Глд 1Б2, Глд 6АЗ, Глд 6Б2), Новый идентифицированным аллелям (блоком компонентов присваивают соответствующий номер по аналогии с номенклатурой блоков мягких пшениц, Если в каталоге идентифицированных блоков мягких пшениц нет аналогичного полиалле- ля, то ему присваиваема номер с буквой т (тургидная).

Пример, Нужно идентифицировать аллельные блоки (полиаллели) глиадина у тургидной пшеницы сорта Губице и записать их генетическую формулу,

Среди сортов озимых твердых пшениц имеются сорта, в спектре глиадина которых есть четкие маркеры 1А (Глд 1А1), 1Б (Глд 1Б2), 6А (Глд 6АЗ) и 6Б (Глд 6Б2) хромосом. Из этих сортов в качестве сорта-тестера взяли сорт селекции Черномор. Он унаследовал эти аллели от мягкой пшеницы. Аллели (блоки) глиадина Глд 1А1, Глд 1Б2 были идентифицированы у мягких пшениц впервые у сорта Днепровская-521. На фиг.1 показаны электрофореграммы глиадина сортов мягких, твердых и тургидных пшениц и их маркерные блоки (аллели),

Зерна этих сортов высеяли и провели их гибридизацию (нет принципиальной разницы, кого из них брать в качестве матери или отца). Зерна FI вновь высеяли. Получили растения FI, на них получили зерна F2 первое расщепляющееся потомство. Эти зерна использовали в качестве материала для идентификации различий по электрофо- ретическим спектрам глиадина. Провели

электрофорез отдельных зерен, примерно по 80 штук по прописи Копусь М.М,

Электрофореграммы гибридов F2 сортировали по классам Глд 1А1 (сорт Черномор) и его аллеломорфу от Губице- Глд 1А4, Глд

0 1Б2 (сортЧерномор)и Глд 1Б1т(Губице), Глд 6Б2 (Губице) и Глд 6Б2 (Черномор), фиг.2. По компонентам 6А хромосомы в данной комбинации различий не было, оба сорта в зоне быстроподвижных компонентов, в которой

5 находятся компоненты локуса 6А хромосомы, имели идентичные аллели, представленные блоком Глд 6АЗ.

Осталась не идентифицированной группа минорных компонентов X. Вероятно, это дополнительныелокусы по 1Аили 1Бхромо0 сомам, которые также имеются у мягких пшениц и были идентифицированны.

С помощью хи-квадрата определяли аллельность выделенных групп блоков по каждой хромосоме (многогибридная схема) или

5 по 2 хромосомам (гибридная схема).

Предлагаемый способ позволяет идентифицировать глиадиновые белки тургидных пшениц в системе обычного гибридологического анализа без примене0 ния анеуплоидных и абберантных линий, которые еще не созданы для тургидных пшениц. Это дает возможность изучать генетические различия между сортами тургидных пшениц по данному признаку и влияние

5 этих различий на качество зерна и другие хозяйственно-ценные свойства макаронных пшениц.

Формула изобретения Способ идентификации сортов тургид0 ной пшеницы, включающий гибридизацию, получение гибридных зерен F2, электрофо- ретическое разделение глиадина, анализ полученных электрофореграмм и запись глиадиновых формул, отличающийся

5 тем, что, с целью повышения точности идентификации, гибридизацию проводят с твердой пшеницей, имеющей вч своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы.

Расщепление по блокам компонентов глиадина в F2 при скрещивании сортов твердой пшеницы Черномор и тургидной Губице

Изобретение относится к способам ге- нетико-селекцмонных исследований и м.б. использовано в биотехнологии, сельском хозяйстве, селекции и семеноводстве, биохимической генетике. Согласно предлагаемому способу проводят гибридизацию тургидной пшеницы с твердой пшеницей, имеющей в своем геноме глиадиновые маркеры, унаследованные от мягкой пшеницы, получают гибридные зерна Fa, проводят электро форетическое разделение глиади- нов и по полученным белковым спектрам ведут идентификацию, 4 ил., 1 табл.

Формула глиадина сорта тургидной пшеницы Губице: Глд 1А4, 1Б1 т(Х), 6А3.6Б1. Аналогично проводим идентификацию различий и в других комбинациях гибридов от

скрещивания, например:

Черномор X 321 (2-й биотип) фиг.З

Черномор X № 390 фиг.4

фиг.1

/ill

$

Cpu lt