Способ определения эффективности лечения неврологических заболеваний у детей Советский патент 1992 года по МПК A61B10/00 G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, преимущественно к педиатрии, и найдет применение для оценки эффективности лечения неврологических заболеваний у детей, особенно у детей раннего возраста.

Известно, что в структуре детской смертности большое место занимают перинатальные поражения ЦНС. Диагностика поражений ЦНС проводится уже в первые дни жизни ребенка и в зависимости от тяжести и характера заболевания назначается соответствующая терапия. Течение восстановительного периода определяется не только степенью поражения ЦНС, но и своевременностью лечебных мероприятий (Неотложная неврологическая помощь в детском возрасте. М., Медицина, 1988, с. 69-73). При комплексном лечении, проведенном в достаточном объеме, наблюдается значительное восстановление нарушенных функций, Однако у этих детей еще регистрируются очаговые микросимптомы, внутричерепная гипертензия, церебрастенический синдром. Большая часть детей, перенесших перинатальные поражения ЦНС, в возрасте 8-10 месяцев снимаются с учета у невропатолога и наблюдается дальше у участкового педиатра. Отмена терапии проводится не по объективным показателям состояния ЦНС, а по субьективным данным клинического наблюдения (Гипоксия плода и новорожденного. М., Мир, 1984, с. 216; Болезни нервной системы у новорожденных и детей раннего возраста, М., Медицина, 1977, с. 24-38; Ранняя диагностика и диспансеризация в перинатологии. Учебно-методическое пособие, Ставрополь, 1988 и др.) В настоящее время в научно- медицинской и патентной литературе не выявлены объективные критерии для определения эффективности лечения неврологических заболеваний у детей.

Прототипом изобретения избран способ, приведенный в книге Л. О. Бадаляна Детская неврология в главе Перинатальная патология нервной системы (М., Медицина, 1984, с. 306-329).

Сущность способа, выбранного в качестве прототипа, состоит в том, что лечение неврологических заболеваний у детей проводят при наличии клинических признаков, а прекращают его при отсутствии таковых.

00

с

М 10 ifO 00

;ю ю

Однако у детей с поражениями ЦНС может наступить период мнимого благополучия, когда, как правило, детей лечить прекращают, затем этот период сменяется рецидивами заболевания, что значительно усложняет последующее лечение. Таким образом, способ обладает рядом несовершенств - отсутствуют объективные критерии оценки эффективности лечения. Преждевременное прекращение терапии на основании отсутствия признаков заболевания по субъективным показателям приводит к развитию гидроцефалии, формированию детского церебрального паралича и других органических форм поражения центральной нервной системы, Повторное проведение лечения после появления клинических признаков не вызывает значительного улучшения, восстановительный период значительно затягивается, объем требуемой терапии увеличивается, полного выздоровления не наблюдается.

В свою очередь неадекватное продление терапии перинатальных поражений ЦНС приводит к необоснованному увеличению лекарственной нагрузки на организм ребенка, усилению интоксикации, повышению вероятности срыва адаптации.

Все эти недостатки могут быть устранены в предлагаемом решении.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа.

Для этого в сыворотке крови ребенка определяют активность нейроспецифиче- ской энолазы и при величине этого показателя ниже 30 нг/мл лечение прекращают.

Нейроспецифическая энолаза (НСЭ) - у-субъединица энолазы человека, содержится в большой концентрации в нейронах и нейроэндокринных клетках / V. М. Pichel et al., Brain. Res., 1976; 105, 184-187; P. I. Marangos et. al., Y, Neurochem., 1979, 33, 319-329, K,Kato et. a., Brain. Res., 1982, 237, 441-448). Иммунологические различия трех субъединиц энолазы позволили разработать специфический метод измерения у - субъединицы в биологических жидкостях.

Многие исследователи обнаружили повышенную активность НСЭ в сыворотке крови раковых больных (К. Kato et. al., Clin. Chim. Acfa 1983, 127, 353-369, E. H. Cooper ec. al., Brit. J. Cancer., 1985, 52, 333-338; P. H.Zeitzeretal, Cancer, 1986, 57, 1230-1234). Высокий уровень энолазы в сыворотке крови отмечен при коматозном состоянии у детей с острым энцефалитом, острой энцефалопатии (Т. Nora et. al., Amer. J. Sic. Child., 1988, 142: №2, 173-174).

Способ осуществляется следующим образом.

В сыворотке крови ребенка с нарушениями ЦНС определяют активность нейроспецифической энолазы любым известным методом. Мы использовали наборы реактивов для иммуноферментного анализа активности нейроспецифической энолазы СП Диаплюс.

Для осуществления последнего берут 25 мкл сыворотки крови, параллельно ставят контрольные и стандартные пробы, добавляют по 250 мкл анти-НСЭ реагента и шарик, покрытый моноклональными антителами и НСЭ. После инкубации в течение 60 мин при 37°С шарики промывают, добавляют 250 мкл раствора пероксидазы и антител к иммуноглобулинам. После повторной инкубации в тех же условиях в пробирки добавляют 250 мкл раствора

0-фенилендиамина. Инкубируют пробирки

при 18-26° в темноте в течение 30 мин.

Реакцию останавливают добавлением 1 мл

серной кислоты и замеряют оптическую

плотность образцов при длине волны 492 нм.

При величине активности нейрсспеци- фической энолазы в сыворотке крови ниже 30 нг/мл лечение ребенка прекращают.

Способ поясняется примерами

П р и м е р 1. Ребрнок Д-в родился 10.10.89 г. у женщины, сградаю лей гипо функцией яичников. Во зремя внутриутроб ного развитая отмечались яв.енир

хронической гипоксии плода. Ребенок ро дился с обвитием пуповины вокруг шеи массой 2350, длиной 48 см с признакам / гипотрофии III степени. Оценен по шкале Апгар 5-7 баллов. С первых суток отмена

лись болезненный крик, акроцианоз, при знаки повышенной нервно-рефлекторное возбудимости.

Активность нефроспецифической эно лазы сыворотки крови от 12 10.89 г. - 9(

нг/мл.

Проведено лечение. Отмечена положи тельная динамика заболевания.

Активность нейроепецифической эно лазы от 25.10.89 г. - 49 нг/мл.

Выписан из родильного дома в удовлет

зорительном состоянии под наблюдени

участкового периэтра и невропатолога ci

схемой проведения последующего лечения

Повторно обследован в возрасте 3 мес

Отмечено ухудшение состояния. Рекомен довано лечение в стационаре.

Клинический диагноз: перинатальна гипоксическая энцефалопатия, гипертензи онный синдром.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 12.01.90г., - 72 нг/мл,

В результате проведенного лечения состояние ребенка улучшилось, однако невро- логическая сиптоматика частично сохранилась.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 09.02.90 г. - 29 нг/мл.

Лечение прекращено.

Повторно обследован через 2 месяца в возрасте 6 месяцев. Неврологическая симптоматика исчезла.

Активность нейроспецифической эно- лазы сыворотки крови от 06.04.90 г. - 22 нг/мл.

Клинический диагноз: здоров.

Таким образом, прекращение лечения при активности нейроспецифической эно- лазы 29 нг/мл несмотря на частично сохранившиеся отклонения в неврологическом статусе было своевременным. Клинические признаки заболевания постепенно исчезли.

П р и м е р 2. Ребенок Д-а родилась 17.01.89 г. у женщины с отягощенным акушерским анамнезом (2 самооборта в 8 и 16 нед.). Во время данной беременности наблюдалась угроза ее прерывания, хроническая внутриутробная гипоксия плода. Масса ребенка при рождении 2900, длина 52 см. Оценка по шкале Апгар 8-8 баллов.

Кожные покровы чистые, акроцианоз. Тоны сердца ритмичные, ясные. Отмечены отклонения в неврологическом статусе: гипертонус, гиперрефлексия, тремор конечностей, положительные патологические рефлексы Бабинского и Моро.

Диагноз: перинатальная гипоксическая энцефалопатия, гипертензионный синдром.

Активность нейроспецифической эно- лазы сыворотки крови от 18.01.89 г. - 92 нг/мл.

Проведено лечение. К 2-х месячному возрасту неврологическая симптоматика исчезла.

Активность нейроспецифической зно- лазы от 21.03.89 г. - 30 нг/мл.

Ребенок выписан из стационара под наблюдение участкового педиатра и невропатолога.

В амбулаторных условиях лечение не проводилось.

Повторно консультирован в РНИИАП в возрасте 7 месяцев. Отмечены отклонения в неврологическом статусе ребенка.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 22.08.89 г. - 33 нг/мл.

Назначено лечение.

Консультирован в поликлинике РНИИАП 19.09.89 г. Неврологическая симптоматика отсутствует.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 19.09.89 г. - 31 нг/мл. Лечение продлено.

Консультирован в поликлинике РНИИ- АП 16.10.89 г. Неврологическая симптоматика отсутствует. Психофизический статус соответствует возрастной норме.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 16.10.89 г. - 28 нг/мл. Лечение прекращено.

Консультирован в поликлинике РНИИАП 23.01.90 в возрасте 1 год. Неврологическая симптоматика отсутствует.

Консультирован в поликлинике РНИИ- АП 10.07.90 г. Неврологическая симптоматика отсутствует.

Таким образом, прекращение терапии при активности нейроспецифической эно- лазы 30 нг/мл несмотря на отсутствие на этом этапе неврологической симптоматики привело к рецидиву заболевания и к необходимости длительного комплексного лечения. Только после снижения активности энолазы ниже 30 нг/мл лечение было пре- кращено с положительным исходом.

П р и м е р 3. Ребенок 3-н родился 09.02.89 г. массой 2500 г, длиной 48 см, с оценкой по шкале Апгар 7-8 баллов у женщины, беременность которой протекала с угрозой ее прерывания. С 1-х суток у ребенка наблюдался акроцианоз, гипертонус, гиперрефлексия, тремор конечностей.

В родильном доме и в отделении патологии новорожденных проведено лечение. Отмечена положительная динамика заболевания.

Активность нейроспецифической энолазы от 12.03.89 - 39 нг/мл.

Выписан с остаточными явлениями пе- ринатальной гипоксической энцефалопатии со схемой дальнейшего лечения под наблюдением участкового педиатра и невропатолога.

Консультирован в поликлинике РНИИ- АП 03.01.90 г. Матерью отмечены спонтанные подергивания конечностей на стадии засыпания, неадекватная реакция ребенка на внешние раздражители.

Данные из истории развития ребенка: у участкового педиатра ребенок наблюдался с апреля 1989 г. Консультирован невропатологом. Неврологический статус оценен соответствующим возрастной норме. Лечение не проводилось. В возрасте 7 месяцев снят с учета у невропатолога.

Ребенок 09.01,90 г. госпитализирован в отделение патологии новорожденных.

Активность нейроспецифической энолазы от 10.01,90 г. - 36 нг/мл.

Проведено лечение - дегидратацион- ная терапия, назначены препараты, улучшающие мозговой кровоток (кавинтон, цушерезин), витаминотерапия, седативная терапия, электрофорез по Щербаку.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 02.02.90 г. - 32 нг/мл.

Ребенок выписан из стационара со схемой лечения под наблюдением участкового педиатра и невропатолога.

Консультирован в поликлиник РНИИАП 20.06.90 г. Отмечены остаточные явления перинатальной гипоксической энцефалопатии. Задержка психомоторного и речевого развития. Назначено амбулаторное лечение.

Таким образом, отмена лечения на основании субъективных данных привела к рецидиву заболевания и потребовала проведения массивных терапевтических мероприятий, Восстановительный период значительно удлинился, полное выздоровление не наступило.

П р и м е р 4. Ребенок 0-й родился 17.04.89 г у женщины с гипофункцией яичников, беременность у которой протекала с угрозой прерывания. Родился в асфиксии легкой степени, тугим обвитием пуповины вокруг шеи плода, массой 2850 г, длиной 50 см. У ребенка отмечены признаки внутриутробной гипотрофии I степени. Отмечена симптоматика перинатальной гипоксической энцефалопатии, синдрома повышенной нервно-рефлекторной возбудимости.

В течение первого года жизни ребенку проведено три курса лечения.

Активность нейроспецифической эно- лазы от 22.06.89 г. - 76 нг/мл, от 15,11.89 г. - 72 нг/мл, от 13.03.90 г. - 49 нг/мл.

В 1 год диагностирована задержка психомоторного развития, задержка речевого развития.

Лечение продолжено.

Таким образом, приведенный пример указывает на недостаточность проведенного лечения и необходимость его продолжения.

Приведенные примеры показывают, что эффективная терапия приводит к снижению активности энолазы; только при величине активности нейроспецифической энолазы в сыворотке крови ребенка ниже 30 нг/мл целесообразно прекращать лечение.

Предлагаемым способом проведены исследования у 58 новорожденных детей от женщин с различными осложнениями беременности.

Активность нейроспецифической энолазы после лечение у 27 детей была от 3 до 29 нг/мл ( группа).

Из них у 10 детей лечение прекратили несмотря на наличие остаточных явлений перинатальной гипоксической энцефалопатии, у 17 детей лечение прекратили при отсутствии неврологической симптоматики. Рецидивов заболевания у них в течение первого года жизни не обнаружено.

У 31 ребенка активность нейроспецифической энолазы после лечения оставалась

высокой от 30 до 181 нг/мл. (II группа). Из них у 9 детей неврологическая сиптоматика после лечения отсутствовала, однако прекращение лечения привело к рецидиву забо- левания и назначению новых курсов

терапии.

Результаты исследований представлены в таблице. Активность нейроспецифической энолазы (нг/мл) в сыворотке крови. Из таблицы следует, что имеются статические достоверные отличия между показателями в I и II группах. Причем величины активности нейроспецифической энолазы в сопоставляемых группах находится в неперекрещивающихся диагностических интервалах. Точность способа 100%.

Предлагаемый способ позволяет определять эффективность лечения неврологических заболеваний у детей,

Предлагаемый способ обладает рядом

преимуществ перед избранным в качестве прототипа:

1)высокой точностью вследствие своей специфичности.

2)достаточной простотой используемых диагностических тестов.

3)возможностью объективной оценки эффективности лечения неврологических заболеваний у детей,

Формула изобретения

Способ определения эффективности лечения неврологических заболеваний у детей путем биохимического исследования сыворотки крови, отличающ и и с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в сыворотке крови исследуют активность нейроспецифической энолазы (НСЭ), для чего сыворотк крови смешивают с анти-НСЭ-реагентом

добавляют в смесь носитель с моноклональ- ными антителами к НСЭ, инкубируют смес& отмывают носитель и добавляют раствор пе- роксидазы и антител к иммуноглобулинам повторно инкубируют смесь, добавляют к

ней о-фенилендиамин, вновь инкубируют измеряют оптическую плотность образца и при значении полученного показателя ак тивности ниже 30 нг/ мл определяют эф фективность лечения.