Способ прогнозирования течения ретинобластомы после энуклеации Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмоонкологии и может быть использовано для прогнозирования клинического течения ретинобластомы.

Известны клинико-инструментальные способы клинического прогнозирования ретинобластомы, включающие рентгенографию, диафаноскопию, эхографию, изотопную диагностику. Тем не менее трудно установить дифференциальный диагноз заболеваний, напоминающих ретин областому; и заболеваний, за которыми может скрываться ретинобластома.

Клинический прогноз ретинобластомы данными методами весьма затруднителен.

Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем иссечения ткани опухоли из энук- леированных глаз, приготовление образца химическим путем, а именно сжиганием ткани в атмосфере кислорода воздуха в муфельной печи при температуре 450°С, смешением золы с бромистым калием и исследовании полученной смеси методом ИК-спектроскопии. Согласно данным авторов более неблагоприятному прогнозу ретинобластомы соответствуют образцы, содержащие в своем составе двух- и однозамещенныефосфаты кальция. Однако данные о том, какие именно заместители присутствуют в составе фосфатов авторами не приводятся. Помимо этого, из-за присутствия в анализируемых образцах соли галоида, бромистого калия, на наш взгляд, представляетсязатруднительным идентификацию галогеновых заместителей. Более благоприятному клиническому течению ретинобластомы соответствует присутствие в анализируемых образцах трехзамещенного фосфата кальция.

Из литературных данных известно. что в природе встречаются два вида трехзамещенного кальция - это витлок- тит ft-Саз(Р04)2 и аморфный фосфат кальция Саз(Р04)2. Оба этих минерала являются метастабильными соединенияз

е

vl v| СЛ О

ю

ми даже в обычной среде при РН

-.0,

легко гидролизуются с образованием гидро- ксилапатита . Обнаруживаются данные минералы в магматических породах, т.е. образованных в жестких условиях (высокая температура, давление). Следовательно существование трехзамещенных фосфатов кальция в тканях опухоли при обычных условиях вызывает сомнение. Очевидно зарегистрированные автором трехза- мещенные фосфаты кальция образовались при приготовлении образцов во время озо- ления проб при 450-500°С в атмосфере кислорода воздуха.

ИК-спектроскопия является эффективным методом анализа и определения структуры органических соединений и значительно Менее пригоден в случае соединений фосфбра. Неорганические фосфаты, как правило, не всегда дают хорошие результаты при ИК-спектроскопии.

Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем исследования морфологическим методом, взятый нами за прототип. Основными критериями злокачественности являются форма, размер опухоли и склонность к прорастанию в соседние . В случае смешанной формы ретинобластомы, где могут присутствовать как дифференцированные, так и недифференцированные клетки, визуально определить преобладание одних над другими порой бывает трудно, особенно, когда опухоль находится в начальной стадии развития и еще не проросла в близлежащие ткани. Правильно прогнозировать клиническое течение заболевания патоги- стологу бывает затруднительно.

. Целью предполагаемого изобретения является повышение точности клинического прогноза ретинобластомы,

Поставленная цель достигается путем исследования кристаллической фазы ткани опухоли методом рентгеноструктурного анализа. Методика эксперимента заключается в следующем: свежий нефиксированный опухолевый материал помещается между двумя предметными стеклами, на которые накладывается груз весом 300 гр. Опухолевая ткань равномерно расплющивается и высушивается в термостате до постоянного веса при температуре 37°С. Сухую ткань тщательно растирали в агатовой ступке и в количестве 0,02 г. исследовали на дифрактометре Дроп-2 с медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывали по формуле Вульфа-Брегга.

Исследовались образцы опухолевой ткани ретинобластомы. В результате исследования установлено, что образцы тканей опухоли ретинобластомы содержат минерал фтор-апатит Саб(РО4)зР. Идентификация данного соединения и сравнение проводились по известным методам. Межплоскостные расстояния d и интенсивности I наиболее сильных рефлексов в усл. ед. пред- ставлены в табл. 1.

Из табл. 1 видно, что наибольшей интенсивностью обладает рефлекс при межплоо

скостном расстоянии d 2,798 А. Он был

взят в качестве основного критерия оценки содержания фтор-апатита в ткани ретинобластомы. Исследованные образцы опухолевой ткани ретинобластомы смешанного тип.а, I, II, III, IV стадий развития.Установлено, что большей степени злокачественности опухоли соответствует большая интенсивность рефлекса при d 2,798 Я фтор-апатита и большая степень совершенства кристаллов минерала (большая информативность

рентгенограммы). Установлена корреляция между клеточным составом ретинобластомы, интенсивностью сильного рефлекса

о фтор-апатита при d 2,798 А и степень злокачественности. Степень злокачественности поданным авторов, не всегда зависит от стадии развития опухоли. В табл. 2 представлена зависимость различного клеточного состава тканей ретинобластомы

смешанного типа от интенсивности рефлеко

са фтор-апатита при d 2,798 А.

В тканях ретинобластомы смешанного типа I-IV стадий развития, содержащих солидные поля и псевдорозетки и

истинные розетки, где преобладают coj лидные поля рефлекс при d 2,798 А % имеет наибольшую интенсивность, а именно 16,25 ±3,7 усл. ед.

В опухолевых тканях ретинобластомы

смешанного типа, где превалируют псевдоо

розетки рефлекс при d 2,798 А снижается

и имеет значение 8,0 ±1,41, В опухолевых

тканях ретинобластомы смешанного типа,

где превалируют истинные розетки интено

сивность рефлекса при d 2,798 А составляет 4,33 ±0,47 усл. ед.

Предлагаемый способ отличается от прототипа тем, что прогноз заболевания ретинобластомы устанавливается путем исследования высушенных до постоянного веса опухолевых тканей на дифрактометре Дрон-2 с медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности равна 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывались по формуле Вульфа-Брегга.

Пример 1. Больной С-в, 1 год 10 месяцев, ист. б-зни 3296 за 1989 г. пр. № 1899-1908. Клинический диагноз: рети- нобластома правого глаза. Энуклеация произведена 10 августа 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, нед 1фференцированный тип с инфильтрацией сосудистой оболочки, внутренних слоев склеры и ствола зрительного нерва не достигая линии отсечения, IV стадия.

Результаты рентгеноструктурного анализа.

Использование: в медицине, в, частности к офтальмологии. Сущность изобретения: проводят исследование тканей опухоли, при этом высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентгеноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней и при его значении 4% и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более 4% - неблагоприятное. Способ позволяет повысить точность прогноза течения рети- нобластомы. 2 табл.

2,798 13

2,769 10

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью силь- ного рефлекса 13 усл. ед. Опухоль очень злокачественная, превалируют солидные поля.

Пример 2. Больной К-р, 3,5 мес.О, Ист. б-зни Ns 3156 за 1989 г. пр № 1884-93. Кли- нический диагноз: ретинобластома левого

2,798 13

2,769 10

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 13 усл. ед. Превалируют солидные поля. Опухоль очень злокаче-30 ственная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.

Пример 3. Больная В-ч, 6 л. Ист. б-зни № 2214 за 1989 г. пр. № 1325-34. Клинический диагноз: ретинобластома 35

2,798

7

2,769 6

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 7 усл. ед. Опухоль злокачественная.

Пример 4. Больной К-а. 5 лет, Ист. 45 б-зни 2415 за 1989 г. пр. № 16-65. Клинический диагноз: ретинобластома правого гла

2,798

7

2,769 6

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью силь- ного рефлекса 7 усл. ед. Опухоль злокачест- 55 венная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.

Пример 5. Больная Н-а, 7 лет, Ист. б-зни № 1538 за 1989 г. Пр № 947-56.

,702

7

3,430

7

3,060 3

1,920 2

1,720 О

глаза. Энуклеация произведена 4 августа 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированный тип, с инфильтрацией диска зрительного нерва, не достигая ламина криброза, I стадия.

Результаты рентгеноструктурного анализа:

.702

7

3,430 6

1,930 2

1,720 2

правого глаза. Энуклеация произведена 2 июня 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированного типа с инфильтрацией ствола зрительного нерва с прорастанием за лэмина криброза, не достигая линии отсечения. Результаты рентгеноструктурного анализа:

,702 4

3,060 2

1,930 1

1J20 1

за. Произведена энуклеация 27 июня 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированного типа, прорастание начальных отделов диска зрительного нерва, I стадия.

Результаты рентгеноструктурного анализа

.702 4

2,430 3

3,060 2

1,930 1

1,720 1

Клинический диагноз: ретинобластома Вторичная глаукома

Энуклеация произведена 13 апреля 1989 г.

Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, смешанного типа (истинные и псевдорозетки) превалируют

истинные розетки, прорастания в близлежащие ткани нет, I стадия.

2.798 4

2,769 3

2,702 3

В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит низкой степени совершенства кристаллов с интенсивностью сильного рефлекса 4 усл. ед. Опухоль менее злокачественная.

Чтобы доказать, что наличие в исследуемом образце фтор-апатита присуще

о

d,A ,усл.ед

7,622 6,146 4,037 3,341 3,260 3.140 2.820 1,991 1,627 1,410 1,260 27723331 12323

В состав кристаллической фазы образца 20 не входит фтор-апатит.

Пример 7. Больной Л-в, 5 лет, Ист. б-зни № 682 за 1989 г. Пр № 336.

Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза.25

Энуклеация произведена 23 февраля 1989 г.

Патогистологический диагноз:, эксуда- . тивный ретинит Коатса с частичной отслои- кой сетчатки.30

Результаты рентгеноструктурного анализа

d,A 7.6220 1,усл.ед 3

6,214 6,146 4,2267 3.341 3 4 11 4

2,815 11

2,712 6

2,882 4

В состав кристаллической фазы образца входит минерал подолит, Саю(Р04)бСОз. имеющий следующие межплоскостные расстояния и интенсивность сильных линий; согласно (13) № карт 570

д

3,437 2

1,993 1

Следовательно, при спонтанной регрессии ретинобластомы ионы фтора замещаются на карбонат-ионы.

Пример 9, Больная Н-о, 14 дней. Ист. б-зни № 5024 за 1988 г. Пр. № 2201.

Клинический диагноз: ретинобластома II стадии левого глаза.

Результаты рентгеноструктурного анализа

3.060 2

1,930

1

1,720

1

только ретинобластоме приводим примеры результатов рентгеноструктурного анализа нормальной трупной сетчатки глаза (снято 10 образцов) и других офтальмопатологий.

Пример 6. Нормальная трупная сетчатка глаза

Образец содержит в основном аморфную фазу. На рентгенограмме галообраз- ный (диффузный) максимум0 при межплоскостном расстоянии 4,2267 А с максимумом интенсивности 11 усл. ед. Фтор- апатит отсутствует.

Пример 8, Больная К-ва, 1 год 2 мес., Ист. б-зни 2972 за 1989 г. Пр. № 1833

Клинический диагноз: ретинЬбластома 8 состоянии спонтанной регрессии правого глаза.

Энуклеация произведена 2 августа 1989 г.

Патогистологический диагноз: ретинобластома с явлениями спонтанной регрессии.

Результаты рентгеноструктурного анализа

1,991 2

6,188

4

10,039 2

Произведена энуклеация 18 ноября , 1988 г.

45 | Патогистологический диагноз обшир- ное субретинальное кровоизлияние От- , слойка сетчатки. Катаракта.

Результаты рентгеноструктурного ана- , лиза.

50 На рентгенограмме два галообразных (диффузных) пика с межплоскостным расстоянием 9,302 А, интенсивностью 7 усл. ед. и 4,2267 А, интенсивность 13 усл. ед. Фтор- апатит отсутствует.

55

д

9,302 7

6,146 6

4,227 13

3,341 3,093 33

Преимущества предлагаемого способа

Межплоскостные расстояния и интенсивность рефлексов минерала фтор-апатиат,

CastPCUfcF. № карт. 567

I-IV

Интенсивность рефлекса фтор-апатита при d-2.798 Д в усл. ед.

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют солидные поля) п 6

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют псевдорозетки)

Ретинобластома, смешанный тип (превалируют истинные розетки) п 5

Формула изобретения Способ прогнозирования течения ретинобластомы после энуклеации путем исследования тканей опухоли, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности способа, высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентге- ноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней, и при его значении 4% и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более 4% - неблагоприятное.

Таблица

Таблица 2

Степень злокачественности

16,25±3,7

очень злокачественная

злокачественная

менее злокачественная