Способ консервации сыворотки против сальмонеллеза животных Советский патент 1992 года по МПК A61K39/40 

Описание патента на изобретение SU1777886A1

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к способам консервации сывороток для их последующего использования.

Известны различные способы консервации сывороток и других биопрепаратов, например, способ консервации эритроци- тарных диагностикумов путем добавления 4%-ного раствора формалина в фосфатно- буферном растворе. На каждые 10 мл диаг- ностикума добавляют 1 мл раствора формалина.

Недостатками такого способа являются разбавление препарата консервантом и снижение его активности из-за токсичности формалина, значительная сложность техпроцесса приготовления консерванта.

Известен также и используется в микробиологической промышленности наиболее близкий к предлагаемому способ консервации сыворотки против сальмонеллеза животных, полученной от крови волов-продуцентов, гипериммунизируемых поливалентным сальмонеллезным форма- лантигеном путем добавления к сыворотке 5%-ного раствора фенола из расчета 10 см3

раствора на 90 см сыворотки. Однако и этот способ имеет существенные недостатки: добавление к сыворотке раствора фенола разбавляет ее на 10% и тем самым уменьшает концентрацию в препарате про- тивосальмонеллезных антител, фенол обладает сильным раздражающим действием, высокотоксичен, отрицательно влияет на специфическую активность иммуноглобулинов.

Цель изобретения - повышение активности сыворотки за счет уменьшения ее разбавления, упрощение способа.

В описываемом способе консервации сыворотки против сальмонеллеза животных путем добавления к дефибринированной сыворотке консерванта.

Это достигнуто тем, что в качестве консерванта используют водный раствор димер этиленэмина.

Способ осуществляется следующим образом.

По окончании процесса дефибринации плазмы к сыворотке в дефибринатор при включенной мешалке добавляют 0,4% водVJ VJ

00 00

о

ного раствора димер этиленэмина - 1,2 ами- ноэтил-азиридина - (ДЭИ).

Мешалку оставляют включенной на 5- 7 мин для равномерного распределения вещества в сыворотке. Затем сыворотку перекачивают из дефибринатора в отстойник и подвергают отстою. В дальнейшем полученный препарат подвергают необходимой обработке в соответствии с действующей технологической инструкцией.

Водный раствор димера зтиленэмина (структурная формула) СН2

j ) N-CH2-CH2-NH2. СН2

элементарная формула С4Ню№ по внешнему виду - прозрачная бесцветная жидкость. Массовая доля димерэтиленэмина в растворе не менее 15%, водородный показатель не более 13.

Предлагаемый способ консервации сыворотки ДЭИ прост, доступен, преемлем для биофабричного производства, не требует затрат на приобретение оборудования, высокой квалификации работников, не усложняет технологический процесс производства сыворотки.

Пример1.0т10 волов-продуцентов брали кровь из расчета 16 см на 1 кг массы животного. Кровь от каждого продуцента смешивали в общей емкости и затем путем сепарации от плазмы отделяли форменные элементы. Плазму дефибринировали. Полученную сыворотку разделили на две равные части по 23 л. Одну часть сыворотки законсервировали 5%-ным раствором фенола, добавив его из расчета на 90 см сыворотки 10 см раствора по известному способу-прототипу, а другую часть препарата - 20%-ным водным раствором димерэтиленэмина, добавив 4 см раствора на 99,6 см препарата После двухмесячного отстоя сыворотку подвергли стерилизующей фильтрации.

Затем сыворотку, обработанную фенолом и димерэтиленэмином. в параллельном опыте испытали на стерильность, безвредность и активность методами предусмотренными ТУ 46-2 1-45-74

В результате было установлено, что сыворотка, консервированная предложенным способ, т.е. путем добавления к препарату 0,4% раствора димерэтиленэмина, оказалось стерильной, безвредной, активной, т.е. отвечала требованиям ТУ и не уступала по качеству сыворотке, обработанной фенолом.

Пример2 Из сырья, предназначенного для изготовления производственной серии препарата, взяли две пробы сыворот0

ки по 1 л каждая. Одну пробу (№1) законсервировали существующим способом-прототипом, а другую пробу (№2) предложенным способом, т.е. к сыворотке добавили 20%ный водный раствор димерэтиленэмина из расчета 0,4%: на 99,6 см3 сыворотки 4 см3 консерванта, Сыворотку обоих проб после двухмесячного отстоя простерилизовали путем фильтрации и проверили на стериль0 ность, безвредность и активность.

Стерильность сыворотки проверяли путем высева на питательные среды: МПА. МПБ, МППБ, среду Сабуро. Среды выдерживали при 37-38°С 10 сут. В течение этого

5 срока в средах не было роста микроорганизмов. Сыворотка проб №№ 1,2 оказалась стерильной.

Для проверки на безвредность сыворотку вводили подкожно, белым мышам массой 16 г в дозе 0,5 см и морским свинкам массой 350 г в дозе 10 см . На каждую пробу сыворотки использовали по 5 мышей и 3 свинки. За подопытными животными вели наблюдение в течение 10 сут. Морские свин5 ки и мыши остались клинически здоровыми и-живыми, т.е. сыворотка проб № 1 и № 2 была безвредной.

Контроль активности сыворотки проводили на голубях и белых мышах. Голубям

0 сыворотку вводили внутримышечно в дозах: 0.5; 0,1; 0,02; 0,004 и 0,0088 см3 Мышам препарат инъецировали подкожно в дозах: 0,1; 0,02; 0,004: 0,0008 и 0,00016 см3. На каждую дозу использовали не менее пяти

5 голубей и мышей.

Спустя 2 ч после введения сыворотки проб №1 и №2 опытных животных заражали минимальной смертельной дозой сальмонелл соответствующего серотипа. Одновре0 менно заражали контрольных животных, которые не получили сыворотки. За опытными животными вели наблюдение в течение 20 сут, учитывая павших и выживших. Затем по методу Кербера в модификации Ашмари5 на рассчитали величину 50%-ной иммунизирующей дозы сыворотки (ИДбо) для лабораторных животных. Было установлено, что ИД50 сыворотки пробы № 1 соответствовала в отношении S.ch.suis 0,022 CMJ,

0 S.dublin 0,023 см3, S.t.murium 0,019 см3, сыворотки пробы № 2 0,014; 0,012; 0.015 и 0.013 см соответственно. Следовательно сыворотка, консервированная раствором димерэтиленэмина (проба №2) активнее,

5 чем сыворотка, консервированная фенолом (проба №1).

ПримерЗ. К2100 л сыворотки добавили в качестве консерванта 0,4% (8,4 л) раствора димерэтиленэмина. Для равномерного распределения консерванта в сыворотке включали механическую мешалку на 5-7 мин. Затем сыворотка отстаивалась при 2-15°С два месяца. После отстоя сыворотку фильтровали и исследовали на стерильность, безвредность, активность методами, предусмотренными ТУ 46-21-45- 74. Было установлено, что сыворотка стерильная, безвредная, активная, отвечает требованиям ТУ, годна к практическому применению.

Таким образом, использование в качестве консерванта димерэтиленэмина по предлагаемому способу позволяет значительно (в 25 раз по сравнению с прототи0

пом) уменьшить разведение сыворотки и повысить ее активность, упростить технологию консервации. Способ обеспечивает надежную консервацию сыворотки. Формула изобретения Способ консервации сыворотки против сальмонеллеза животных путем добавления к дефибринированной сыворотке консерванта при перемешивании, отличающийся тем, что, с целью повышения активности сыворотки за счет уменьшения ее разбавления и упрощения способа, в качестве консерванта используют водный раствор димерэтиленэмина.

Похожие патенты SU1777886A1

название год авторы номер документа
Способ осветления гипериммунной сыворотки против сальмонеллеза животных 1991
  • Медведев Александр Петрович
SU1793929A3
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ЦИРКОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ, РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА И ГЕМОФИЛЕЗА СВИНЕЙ 2012
  • Любимов Александр Иванович
  • Крысенко Юрий Гаврилович
  • Трошин Евгений Иванович
  • Капачинских Надежда Анатольевна
RU2494760C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТКИ, АНТИАДГЕЗИВНОЙ И АНТИТОКСИЧЕСКОЙ ПРОТИВ ЭШЕРИХИОЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 1993
  • Малахов Юрий Алексеевич
  • Тугаринов Олег Алексеевич
  • Пирожков Михаил Константинович
  • Солодков Виктор Степанович
RU2043772C1
Способ обработки крови продуцентов при изготовлении гипериммунных сывороток 1957
  • Баранов И.П.
SU113070A1
ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ГИПЕРИММУННАЯ СЫВОРОТКА ПРОТИВ РОТА-, КОРОНА-, ГЕРПЕСВИРУСОВ И E.coli (K 99, A 20) ДЛЯ ЛОКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ И ИММУНОТЕРАПИИ СМЕШАННЫХ ФОРМ ДИАРЕИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ 1999
  • Гаффаров Х.З.
  • Спиридонов Г.Н.
  • Ефимова М.А.
  • Гусев В.В.
RU2145504C1
СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ АССОЦИИРОВАННОЙ ПРОТИВ КОЛИБАКТЕРИОЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И СТРЕПТОКОККОЗА НУТРИЙ 2006
  • Шевченко Людмила Васильевна
  • Шевченко Александр Алексеевич
  • Шевченко Анна Александровна
  • Шевченко Елена Александровна
RU2301077C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ВИРУСНОГО ЭНТЕРИТА НОРОК 1992
  • Кириллов Арнольд Кириллович
RU2049478C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИВАЛЕНТНОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ ПСЕВДОМОНОЗА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ 2008
  • Антипов Валерий Александрович
  • Болоцкий Иван Александрович
  • Пруцаков Сергей Владимирович
  • Васильев Александр Климентьевич
  • Семенцов Владимир Иванович
  • Ярцев Сергей Николаевич
  • Сусский Евгений Владимирович
  • Дубровин Иван Игоревич
RU2376034C1
Поливалентная инактивированная вакцина против стрептококкозов свиней, способ ее получения и применения 2021
  • Алипер Тарас Иванович
  • Капустин Андрей Владимирович
  • Лаишевцев Алексей Иванович
  • Терехов Павел Юрьевич
  • Шемельков Евгений Владимирович
RU2761379C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ АНАЭРОБНОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ И ЭШЕРИХИОЗНОЙ ДИАРЕИ ТЕЛЯТ 2013
  • Иванов Аркадий Васильевич
  • Спиридонов Геннадий Николаевич
  • Иванов Александр Аркадьевич
  • Насертдинов Динар Дамирович
  • Спиридонов Антон Геннадьевич
  • Махмутов Айдар Фаритович
RU2523389C1

Реферат патента 1992 года Способ консервации сыворотки против сальмонеллеза животных

Область использования: ветеринарная микробиология, консервация сывороток, хранение сывороток, гипериммунные сыворотки. Сущность изобретения: способ консервации сыворотки против сальмонеллеза животных основан на добавлении к сыворотке вещества-консерванта. В качестве консерванта используют раствор димерэти- ленэмина, который добавляют к сыворотке по окончании процесса дефибринации плазмы, вводя его в дефибринатор при включенной мешалке.

Формула изобретения SU 1 777 886 A1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1992 года SU1777886A1

Патент США №4058599 кл А61 К39/02, 1977
Инструкция по изготовлению и контролю антитоксической поливалентной сыворотки против сальмонеллеза телят, поросят, ягнят, овец и птиц Утв
ГУВ СССР, 1971

SU 1 777 886 A1

Авторы

Медведев Александр Петрович

Даты

1992-11-30Публикация

1990-07-12Подача