Способ осветления гипериммунной сыворотки против сальмонеллеза животных Советский патент 1993 года по МПК A61K39/112 A61K35/16 

Изобретение относится к области микробиологии, в частности к технологии очистки гипериммунных сывороток, например, сыворотки против сальмонеллеза животных и птиц.

Известен способ осветления сыворотки путем добавления к ней 5% порошкообразного полиэтиленгликоля, тщательного перемешивания, отстоя в течение 4-7 суток и последующей фильтрации. Однако этот способ обеспечивает только осаждение балластных белков и не освобождает сыворотку от липидов, кроме того,наблюдается снижение содержания иммуноглобулинов в сыворотке, что значительно снижает ее превентивную активность.

Цель изобретения - улучшение качества сыворотки за счет освобождения ее от липидов.

В предлагаемом способе осветления сыворотки против сальмонеллеза живо,- тных, включающем ее обработку реагентом с последующим перемешиванием, отстаиванием и стериализующей фильтрацией, эта

цель достигнута тем, что в качестве реагента используют препарат Вид А в количестве 0,1-0,2%.

Способ осуществляется следующим образом.

Сыворотку получают из крови волов- продуцентов, гипериммуназируемых поливалентным сальмонеллезовым формолантигеном по известной технологии.

По окончании процесса дефибринации плазмы к сыворотке в дефибринатор при включенной мешалке добавляют препарат Вид А в порошкообразном состоянии в количестве 0,1-0,2%.

Мешалку оставляют работающей 5-7 мин для равномерного распределения и растворения препарата в сыворотке. Затем сыворотку перекачивают из дефибринатора в отстойник и оставляют для отстоя на 2 месяца. В течение этого срока происходит осветление сыворотки вследствие выпадения в осадок нестойких белков и образования слоя всплывающих на поверхность липидов. Осадок и поверхностный слой, отV4 Ю Ы

КЭ

Ы

личающиеся по цвету и консистенции от сыворотки, механически удаляют,

Используемый в описываемом способе препарат Вид А - это моющее средство, содержащее сульфанол, триполифосфат на- трия, жидкое стекло, соду кальцинированную, сульфат натрия.

Препарат применяется для мытья доильных установок, молочного оборудования и тары и т.п.

После удаления липидов и осадка сыворотку, подвергают технологической обработке в соответствии с требованиями действующей инструкции по изготовлению и контролю поливалентной антитоксиче- ской сыворотки против сальмонеллеза телят, поросят, ягнят, .овец и птиц, утвержденной ГУВ МСХ СССР 14.01,91 г.

При м е р 1, После дефибринации плазмы, удаления фибрина и консервации сыворотки (сер. N 226) определили содержание общих липидов, которое составило 2,33 ± 0,04 г/л. Затем при включенной мешалке к сыворотке добавляли 0,1 % Вид А в порошкообразном состоянии. Для полно- го растворения вещества в сыворотке мешалку оставляли работающей 5-7 минут. После растворения Вид А сыворотку перекачивали в отстойник, где препарат отстаивался 15 суток при температуре 2-15°С. Через 15 дней удаляли верхний слой и осадок, определяли содержание липидов в осветленном препарате, подвергали фильтрации, расфасовке, проверке на стерильность, безвредность, активность.

Количество общих липидов после обработки сыворотки Вид А и ее отстоя составило 0,90 ± 0,02 г/л, т.е. снизилось на 1,43 ±0,01 г/л. После фильтрации, в готовом препарате содержалось 0,33 ± 0,01 г/л общих липидов, в то время как содержание их в сыворотке серии № 225 (контроль) не обработанной Вид A j составило 2,12 г/л.

Препарат серии № 226 в результате го- сударственного контроля был признан стерильным, безвредным, активным.

Так, величина 50%-ной иммунизирующей дозы сыворотки серии № 226 для лабораторных животных (голубей, морских свинок) равнялась в среднем 0,019 ±0,02

см , а серии N° 225 (контроль) - 0,24 ± 0,01 см3,

П р и м е р 2. Сыворотка серии № 229 до обработки ее Вид А содержала 3,21 ± 0,03 г/л общих липидов. Эта серия сыворотки была разделена на две равные части (А и В), Одну часть (А) обработали Вид А, а другую (Б) оставляли не обработанной.

Затем сыворотку обеих частей подвергли технологической обработке в соответствии с требованиями действующей инструкции. Сыворотка части А до фильтрации содержала 1,1 ± 0,02 г/л, а части Б - 2,46 г/л.

Сыворотка частей А и Б была подвергнута государственному контролю на безвредность, стерильность, активность. В результате контроля установлено: сыворотка серии № 229 (частей А и В) стерильная, безвредная, активная. Величина 50%-ной иммунизирующей дозы сыворотки с части А для лабораторных животных составила 0,016 ±0,02 см3, а части Б-0,010 ±0,01 см3.

П р и м е р 3, Сыворотку серии № 230 обработали 0,2% порошкообразного Вид А, сыворотку серии № 231 не подвергали воздействию этого вещества. По окончании технологического процесса изготовления сыворотки обоих серий проверили содержание в готовом препарате серий № 230 и 231 общих липидов. В сыворотке серии № 230 содержалось 0,23 ± 0,01 г/л, в препарате серии Ns 231 -2,67 ± 0,02 г/л общих липидов. Сыворотка серий №№ 230 и 231 была подвергнута государственному контролю и признана стерильной, активной, пригодной для практического применения.

Таким образом, в результате применения препарата Вид А содержание общих липидов в сыворотке уменьшается почти в 10 раз, что позволяет значительно улучшить ее качество. Описанный способ прост, технологичен, приемлем для сывороточного производства, не требует затрат на приобретение оборудования, не снижает активности целевого продукта. Необходимо отметить, что способ является универсальным, т.к. обеспечивает не только освобождение сыворотки от липидов, но и почти полное удаление балластных белков.

Использование: микробиология, технология очистки гипериммунных сывороток. Сущность изобретения: очистка достигается обработкой гипериммунной сыворотки реагентом, в качестве которого используется препарат ВИД А в количестве 0,1-0,2%, с последующим перемешиванием, отстаиванием и стерилизующей фильтрацией, осветление сыворотки происходит за счет удаления липидов.