Способ моделирования пневмококковой инфекции Советский патент 1993 года по МПК G09B23/28 

Изобретение относится к области медицины, а именно к терапии, пульмонологии и микробиологии.

Цель изобретения - создание модели пневмококковой инфекции у белых крыс, приближенной к клиническому течению : патологического процесса у детей за счет полноты воспроизведения этиопатогенети- ческих факторов, в том числе естественного пути заражения. Выбор в качестве экспериментального животного белых крыс был определен двумя факторами: доступностью проведения больших серий заражения с десятками животных и одновременно возмож- ностью проведения исследования индивидуальных сдвигов метаболизма (что нереально на мышах) в тканях мозга, крови, сопровождающих инфекционный процесс. Однако, чтобы добиться массивированного проникновения возбудителей в органы и ткани, особенно в мозг, необходимо было снизить резистентность крыс и пневмококку.

Для снижения защитных реакций организма применялось комплексное введение

а - и / -адреноблокаторов: фентоламина и обзидана.

Обзидан - является Д-адреноблокато- ром, действующим на и Дг -адреноре- цепторы, ослабляет влияние симпатической импульсации на рецепторы (блокирует эффект катехоламинов)- дозировка 10-20мг4 раза вдень.

В заявляемом способе использовали 50 мг/кг веса животного фентоламина и 1.0 мг/кг веса животного - обзидана. Предварительное введение а - И ft -адренобло- каторов позволяет обеспечить .блокаду всех адренорецепторов, обеспечить улучшение кровоснабжения, в том числе слизистых оболочек носоглотки и бронхов, приводит к увеличению проницаемости стенок кровеносных сосудов, что, по-видимому, позволяет облегчить условия проникновения .пневмококков, введенных интраназально, в -кровяное русло и из него в органы и ткани зараженного организма. К тому же, учитывая значительную роль адренергетических систем в осуществлении защитных функций гемато-энцефалитического барьера (ГЭБ) .

ел

с

со о ч ел

ел

следовало ожидать увеличения проницаемости ГЭБ для пневмококков.

В работе использовали штамм Streptococcus pneumoniae № 92. В сероти па, выделенный из ликвора больных пнев- мококковым менингоэнцефалитом, характеризующийся высокой гйалуронидазг ной активностью (6 усл.ед) и высокой вирулентностью Ig LD 50 1 для белых мышей. Для заражения животных использовали су- точную культуру жизнеспособных клеток пневмококков, смытых с агара 0,85%-ным .раствором NaCl. При определении вирулентности Ig LD 50 рассчитывали по формуле Кербера.

Способ осуществляют следующим образом.

Используют беспородных белых крыс весом 80-100 г. Крысу весом 100 г помеща- ют в закрытый стеклянный сосуд с парами эфира, наркоз наступает через 1-2 мин.

Наркотизированной крысе внутрибрю- шинно вводят 0,5 мл физ.раствора с концен- трацией фентоламина 50 мг/кг и обзидана 1 мг/кг и сразу же интраназаль- но вводят гго 0,1 мл или 5x10 культуры пневмококка №92.

Наблюдение за инфицированными крысами с момента заражения длится 6 суток.

Пример 1.2 крысы весом 100 г помещали в эксикатор с парами эфира. Через 1,5 мин отмечено боковое положение тела, дыхание стало спокойным, отсутствует реакция на болевое раздражение.

Наркотизированным крысам ввели 0,5 .мл смеси фентоламина (50 мг/кг и 1 мг/кг обзидана л сразу интраназально ввели 0,1 мл (5x108) культуры пневмококка №92.

Через 5 мин крысы проснулись, движения вялые, плохая координация движений.

Через 2 ч внешний вид животных как в контрольной группе.

На 2-е сутки: после заражения у крыс :отмёчено покраснение и нагноение слизистых вокруг глаз, вялость, слабость мышц двигательного аппарата.

На 3-й сутки: у крысы гнойные корки вокруг глаз, корочки на взъерошеной шер- сти, тяжелое дыхание, слабость мышц.

4-е сутки: гибель 1-го животного на фоне всех ранее описанных признаков. 2-е животное - остается слабым. При микробиологическом исследовании погибшей крысы выделены пневмококки штамм 92 из крови легких, селезенки, мозга и оболочек мозга,

Патоморфологическй, В легких отмечены застойные явления, очаги ишемических изменений, точечные субплевральные кровоизлияния. Легкие трудно отделились от плевры. В головном мозге выявлено расширение сосудов мягких мозговых оболочек, стаз эритроцитов, очаги кровоизлияний, в веществе мозга отмечен выраженный ги- перхромотоз, контуры ядрышек неразличи-, мы, очертания ядра сливаются с фоном цитоплазмы; имеет место умеренная пролиферация глиальных элементов. Имеет место умеренный периваскулярный отек в верхних слоях коры мозга.

5-е сутки: оставшаяся крыса более подвижна, меньше конъюнктивит, лучше дыхание. . .. ; :.

6-е сутки: состояние подопытной крысы удовлетворительное, поведение нормальное, дыхание, как у здоровых крыс.

В любой из дней болезни крыса могла быть взята для иммунологического, биологического обследования.

Применение способа позволит приблизить модель к течению естественной патологии за счет полного воспроизводства этиопатогенетических факторов пневмококковой инфекции.

Формула изобрете н и я Способ моделирования пневмококковой инфекции, включающий введение культуры пневмококка экспериментальному животному, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что, с целью приближения модели к течению естественной яатологии за счет полного воспроизведения этио-патогенетических факторов, животному вводят внутрибрю- шинно обзид н в дозе 1,0 мг/кг и фентола- м.ин в дозе 50 мг/кг, одновременно с этим интраназально вводят культуру пневмококка.... .

Использование: способ может использоваться в медицине, а именно в терапии, пульмонологии и микробиологии. Сущность изобретения: экспериментальному животному внутрибрюшинно вводят обзидан в дозе 1,0 мг/кг и фентоламин в дозе 50 мг/кг, одновременно с этим интраназально вводят культуру пневмококка. Это позволяет приблизить модель к течению естественной патологии за счет полного воспроизведения этио-патогенетических факторов пневмококковой инфекции.