Способ диагностики гепатита Е Советский патент 1993 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности, к диагностике вирусных гепатитов. Оно может быть использовано для диагностики энтерально-пе ре дающего гепатита ни А ни В (ЭГНАНВ), а также для дифференциации этой формы вирусных гепатитов, от гепатитов А (ГА) и гепатитов В (ГВ). В 1989 г. Bradley с соавторами предложили выделить ЭГНАНВ в отдельную нозологическую форму вирусных гепатитов и обозначить ее как гепатит Е.

Целью изобретения является повышение точности и сокращение сроков диагностики.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного вирусным гепатитом в остром периоде болезни (1-7 день желтушного периода) берут кровь из локтевой вены в количестве 5 мл в стерильную пробирку. По еле полного формирования сгустка аккуратно отбирают сыворотку. В полученной сыворотке определяют количество 1 Е методом иммуноферментного анализа (ИФА) с

помощью коммерческих тест-систем производства Ставропольского НИИ вакцин и сывороток. Исследование проводят согласно инструкции-вкладышу к тест-системам. При отсутствии спектрофотометра Tltertek M ulf tskan MC предусмотренного инструкцией для учета результатов реакции, используют аппарат КАИ-Ц-01 отечественного производства.

Заявляемый способ диагностики ЭГНАНВ и дифференциации его от гепатита А и гепатита В целесообразно использовать в комплексе с клинико-эпидемиологическими и лабораторными методами диагностики, обязательными для каждой инфекционной клиники.

Пример конкретного использования за- являемого способа диагностики ЭГНАНВ.

П рим е р 1. Больная Ш.К., 26 лет. Адрес: Сузакский район, с. Михайловка. Клинические проявления: желтушная средне-тяжелая форма. Постепенное начало болезни, преджелтушный период по диспепсическому (тошнота, плохой аппетит), астеновегетаел

с

со

N3 О

СА) Ю О

тивному (слабость, недомогание), артралгическому (боли в крупных суставах) вариантам. Боли в правом подреберье и эпигастральной области, чувство тяжести. С появлением желтухи самочувствие не улучшилось. Объективно:.резко насыщенная моча, обесцвеченный стул, желтушность склер и кожи. Увеличение печени на 3,5-4,0-4,5 см, край печени болезненный, плотной консистенции. Эпид.анамнез: заболевание возникло во время эпидемической вспышки вирусных гепатитов в Сузакском районе, которая расшифрована сотрудниками организации заявителя и Института вирусологии им. Д.И.Ивановского АМН СССР как водная вспышка ЭГНАНВ. Лабораторно: АСТ-2.47 ммоль (ч.л.), АЛТ - 5,22 ммоль (ч.л.), общий билирубин 159, прямой 106, непрямой 53, сулемовая проба - 2, тимоловая - 7, НВ s - Ад-отрицательно. Ig M анти-НВс-отрицательно, IgM анти-HAV - отрицательно, IgE

- 100 кЕ/л. Заключительный диагноз: Эн- терально передающийся гепатит ни А ни В (гепатит Е).

П р и м е р 2. Брльная.Ю.Н.В., 29 лет. Адрес: г. Фрунзе, ул. Куликовская, 99. Клинические проявления: острое начало болезни, короткий поджелтушный период, протекавший по астеновегетативному (слабость, недомогание), диспепсическому (тошнота, плохой аппетит) и гриппоподоб- ному (повышение температуры, озноб) вариантам. Объективно: иктеричность склер и кожных покровов. Насыщенная моча, обесцвечивается стул. Увеличение печени на 1,5 см. Эпид.анамнез: заболеваемость вирусными гепатитами в городе на обычном уровне, не было парентеральных вмешательств за истекшие 6 месяцев. Лабораторные исследования: ACT - 2,85 ммоль (ч.л.), АЛТ - 5,54 ммоль (ч.л.): общий билирубин - 66,0, прямо - 39,0. непрямой - 25,0; сулемовая проба 1,65, тимоловая проба - 7; желчные пигменты и уробилин положительные в моче: HBs-Ag - отрицательно, IgM анти-НВс

- отрицательно, IgM анти-HAV - положительно, IgE - 10,5 кЕ/л. Заключительный Диагноз: гапатит А.

Пример 3.Больной Ж.Ж. 23 года. Адрес: г.Фрунзе, студент СХИ Клиническое течение: постепенное начало болезни, преджелтушный период по диспепсическому (тошнота, плохой аппетит), астеновегетативному (слабость,, недомогание), артралгическому (боли в крупных суставах обеих нижних конечностей) вариантам. Объективно: желтушность склер и кожных покровов. Увеличение печени на 2,0-2,5 см. Насыщенная моча, обесцвеченный стул. Эпид.данные: заболеваемость вирусных гепатитами в городе на обычном уровне, у больного были парентеральные вмешательства в течение предыдущих б месяцев (трехкратная вакцинация). Лабораторно: в

сыворотке крови: ACT - 2,48 ммоль (ч.л.), АЛТ - 4,68 ммоль (ч.л.); общий билирубин - 141, прямой - 98, непрямой -43; сулемовая проба - 1,9, тимоловая проба - 3: в моче желчные пигменты и уробилин - положительны; в сыворотке крови HBsAg - положительно; IgM анти-НВс - положительно; IgM анти HAV - отрицательно, IgE - 12,5 кЕ/л. Диагноз: гепатит В.

Из представленных примеров видно, что

заявляемый способ позволяет диагностировать ЭГНАНВ и дифференцировать его от гепатита А и гепатита В. Он дополняет эпидемиологические и клинико-биохимиче- ские данные и способствует более достоверной диагностике отдельных нозологических форм вирусных гепатитов, т.к. известно, что клинико-биохимические показатели широко варьируют в каждом индивидуальном случае вирусных гепатитов и, диагноз конкретной

нозологической формы, основывающейся только на них - затруднителен.

Проведены были сопоставительные исследования по изучению уровня IgE в сыворотках крови больных различными нозологическими формами вирусных гепатитов (гепатит А, гепатит В, ЭГНАНВ) в остром периоде болезни. У этих больных диагноз был предварительно установлен на

основе эпидемиологических данных и кли- нико-биохимических показателей. Например, сыворотки крови больных ЭГНАНВ получены в районе эпидемической вспышки вирусных гепатитов, которая была расшифрована сотрудниками учреждения заявителя и Институт вирусологии им. Ивановского АМН СССР как водная вспышка ЭГНАНВ. Поставленные диагнозы получили лабораторное подтверждение: у всех больных гепатитом А в сыворотках крови обнаружены IgM анти-HAV, у всех больных гепатитом В - HBsAg и IgM анти-НВс - у всех больных ЭГНАНВ в сыворотках крови указанные маркеры отсутствовали.

HBs - Ад и IgM анти-НВс в сыворотках крови определяли с помощью коммерческих диагностикумов. Реакции пров-одили согласно инструкциям-вкладышам. IgM анти - HAV с исполозованием экспериментальных тест-систем согласно соответствующим методическим рекомендациям.

Полученные результаты приведены в таблице.

Примечание.

1. Согласно инструкции-вкладышу содержание 1 Е в пределах 76±9,0 кЕ/л является нормальным (1 кЕ/л 2,4 нг/мл igE).

2. Использованная тест-системз позво- ляет определять содержание 1 Е только до уровня 100 кЕ/л, поэтому количество 1 Е превышающее названную величину приводится как 100 кЕ/л.

Представленная таблица наглядно де- монстрирует, что у больных ЭГНАНВ значительно увеличивается содержание IgE в сыворотках крови. Из 8 обследованных больных, у 7 содержание IgE превышало нормальные значения, причем у 6 из этих 7 больных значения IgE превысили возможности тест-системы ( 100 кЕ/л). Средние значения уровня дЕ у больных ЭГНАНВ составили 87,8±11,1 кЕ/л при норме 7б±9 кЕ/л, что соответствует примерно 200 нг/мл. Значе- ния IgE в сыворотках крови 7 больных гепатитом А колебались в пределах 8.3 до 49,0 кЕ/л; средние значения 30,2 i12,2 кЕ/л и только у одного превысили 100 кЕ/л. Из 8 больных гепатитом В содержание IgE в сыворотке крови не превышало норму у 7 и было несколько ниже чем при гепатите А (в пределах 3.9- 14,2 кЕ/л). Средние значения по группе составили 22,66±12,7 кЕ/л учитывая то, что у 1-го больного уровень IgE превысил 100 кЕ/л.

Статистический анализ полученных результатов с использованием t критерия Стьюдента позволил выявить достоверные отличия в средних значениях содержания 1 Е у больных ЭГНАНВ (группа 3) по сравнению с больными гепатитом А (группа 1) и гепатитом В (группа 2): Рз-1 . 0,01; Рз-2 0.01. Тогда как таких различий между труп- пами 1 и 2 не выявлено: Pi-2 0,05.

Из числа обследованных больных ЭГНАНВ содержание IgE в сыворотке крови превышало норму у 87,5% и было свыше 100 кЕ/л у 75,0%. тогда как при гепатите А и гепатите В превышение отмечено.только в 12,5%.

Таким образом полученные результаты свидетельствуют о том. что определение количества IgE в сыворотках крови больных вирусными гепатитами в остром периоде болезни можно использовать для диагностики ЭГНАНВ и дифференциации его от гепатита А и В.

Следовательно, диагностическим критерием ЭГНАНВ при использовании заявляемого решения является содержание IgE в сыворотке крови равное или превышающее 87.8±11,1 кЕ/л (210.7 нг/мл).

Немаловажным положительным эффектом заявляемого решения является то. что он сокращает сроки диагностики и может заменить на современном этапе (в целях дифференциальной диагностики отдельных типов вирусных гепатитов) недоступные клиническим лабораториям лечебно-профилактических учреждений методы определения специфических маркеров острой инфекции гепатита A(lgM аити-НА) и гепатита В (дМ анти-НВс). Доступный метод определения HBs-Ag не всегда позволяет достоверно диагностировать острый гепатит В. т.к. известно носигельство этого антигена здоровыми лицами и инфекции гепатита А или гепатита ни А ни В может протекать на фоне такого здорового носи- тельства.

Предлагаемый способ сможет вооружить лаборатории лечебнопрофилактиче- ских учреждений достаточно достоверным диагностическим критерием, дополняющим комплекс клинико-лабораторных исследований направленных на диагностику ЭГНАНВ и дифференциации его гепатита А и гепатита В.

Формула изобретения

Способ диагностики гепатита Е путем определения иммуноглобулинов в сыворотке крови, отличающийся тем, что. с целью повышения точности способа и сокращения сроков исследования, в сыворотке определяют JgE и при его значении равному или превышающему 76.7-98.9 кЕ/л диагностируют гепатит Е.

Изобретение относится к медицине, в частности к диагностике вирусного гепатита. Цель - повышение точности и сокращение сроков исследования. Способ осуществляют следующим образом. В сыворотках крови больных острыми вирусными гепатитами определяют количество иммуноглобулина класса Е и при его значениях, равных или превышающих в пределах76,7-98,9 ке/л, диагностируют гепатит Е. Заявленный способ позволяетповыситьточность проведения дифференциальной диагностики гапатитов.